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Experimental study on anti-inflammatory and anti-allergic effects of magnolin

木兰脂素抗炎、抗过敏作用的实验研究



全 文 :木兰脂素抗炎、抗过敏作用的实验研究
李小莉 ,张永忠
(湖北省中医药研究院中药所 药理室 ,湖北 武汉  430074)
摘 要: 目的 研究辛夷提取物—— 木兰脂素抗炎、抗过敏作用。方法 采用卵白蛋白 ( O A)引起的致敏豚鼠离体
回肠实验和大鼠肥大细胞脱颗粒实验研究木兰脂素的抗过敏作用 ,醋酸致小鼠毛细血管通透性增加实验和角叉菜
胶致小鼠足跖肿胀以及炎症组织中 PGE2含量测定实验研究木兰脂素的抗炎作用。 结果 木兰脂素能显著抑制致
敏豚鼠离体回肠的过敏性收缩 ,明显阻止大鼠肥大细胞脱颗粒。 对小鼠毛细血管通透性增加和小鼠足跖肿胀均有
显著的抑制作用 ,并能降低炎症组织中 PGE2的含量。 结论 木兰脂素具有较强的抗过敏、抗炎作用。
关键词: 木兰脂素 ;抗过敏 ;抗炎 ;炎症介质
中图分类号: R286. 1   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2002) 11 1014 02
Experimental study on anti-inflammatory and anti-allergic effects of magnolin
LI Xiao-li, ZHANG Yong-zhong
( Depar tment of Pha rmacolog y , Institute o f Chinese Materia Medica, Hubei Academy of TCM , Wuhan 430074, China)
Key words: magnolin; anti-allerg y; anti-inf lamma tion; inf lammatory media to r
  木兰脂素 ( magnolin)是从中药辛夷 (即木兰科
植物望春花 Magnol ia biondii Pamp,玉兰 M. de-
nudata Desr或武当玉兰 M . Sprengeri Pamp. 的
干燥花蕾 )中提取的一种木脂素。辛夷主要成分为挥
发油、木脂素、生物碱等 [1 ]。 近年来药理研究证实辛
夷具有降压、抑菌、抗炎、抗过敏作用 [1~ 3 ]。有关辛夷
总提物如挥发油、水提物、醇提物以及二氯甲烷提取
物等的药理作用已有研究和报道 ,而对单体方面的
药理作用迄今所知甚少 ,本实验在对辛夷二氯甲烷提
取物药理作用研究的基础上 ,首次对从中药辛夷中提
取分离的木兰脂素进行了抗炎、抗过敏作用研究。
1 材料
1. 1 药品与试剂: 木兰脂素 ( magnolin) 由本所仪
分室提供 ,为白色结晶体 ,纯度> 90% ,理化及波谱
常数与《中华人民共和国药典》相符 ,临用前用
2. 5% 阿拉伯胶生理盐水助溶配成所需浓度 ;卵白
蛋白 ( O A) ,美国 Sigma公司提供 ;色甘酸钠 ,武汉
武警制药厂提供 ;伊文思蓝 ,上海化学试剂采购供应
站分装厂提供 ;氢化可的松 ,天津生物化学制药厂提
供 ;角叉菜胶 ,辽宁药物研究所提供。
1. 2 动物:豚鼠 ,体重 150~ 200 g ,雌雄兼用 ,动物
合格证号: 医动字第 19-010号 ; Wistar大鼠 ,体重
250~ 300 g,雌雄兼用 ;昆明种小鼠 ,体重 ( 20± 2) g ,
雌雄各半 ,动物合格证号:医动字第 19-082号 ,均由
湖北省医学科学研究院实验动物中心提供。
1. 3 仪器: LM S-2B型二道生理记录仪 ;超级恒温
器 ; 7520分光光度计 (上海分析仪器厂 )。
2 方法与结果
2. 1 对致敏豚鼠回肠的作用 [4 ]:取体重 150~ 200 g
的健康豚鼠 ,用 OA致敏 , 30 d后取致敏豚鼠制备
肠段 ,置于盛有 10 mL台氏液的麦氏浴槽内 ,充氧 ,
负荷 1 g , 37℃ 保温 ,平衡 50 min后 ,描记致敏回
肠正常收缩曲线 ,然后按随机顺序分别给予空白溶
媒 ,木兰脂素高、低剂量组。 均于给药后 5 min加
1 mg /mL O A进行攻击 ,分别记录回肠收缩幅度 ,以
加入空白溶媒的回肠 OA攻击后引起的收缩幅度为
100% ,计算不同剂量木兰脂素对回肠收缩的抑制率。
各组回肠收缩幅度采用 t检验进行组间比较 ,结果见
表 1。实验表明 ,木兰脂素 17和 8. 5μg /m L对豚鼠
离体回肠过敏性收缩均有显著抑制作用。
2. 2 对大鼠肥大细胞的保护作用 [ 5]:取体重 18~
22 g大鼠 ,以 OA致敏 30 d后 ,股动脉放血处死 ,剪
开腹部皮肤 , ip台氏液 ,轻揉 ,收集腹腔液于冰浴试
管中 ,离心 ,弃去上清液 ,将沉淀物轻轻混悬在 3mL
台氏液中 ,放冰浴内备用。取致敏大鼠肥大细胞悬液
分装于数管中 ,于给药管分别加入色甘酸钠 ,木兰脂
·1014· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2002年第 33卷第 11期
收稿日期: 2001-10-10基金项目: “九五”国家攻关项目:中药材质量标准规范化研究 ( 96-903-02-04)作者简介:李小莉 ( 1960-)女 ,湖北武汉人 ,副研究员 , 1982年毕业于湖北中医学院中药学专业 ,学士学位 ,主要从事中药提取物抗炎、免疫方面的药理学研究。
表 1 木兰脂素对致敏豚鼠离体回肠
过敏性收缩的影响 ( x± s, n= 6)
组 别 剂量 (μg /mL) 收缩幅度 ( mm) 抑制率 (% )
空白对照 -   12. 14± 25. 53
木兰脂素 17 6. 66± 22. 28* * 45. 16
8. 5 7. 23± 27. 97* 40. 48
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
素高、低剂量组 ,摇匀 ,放置 5 min,与空白对照管同
时加入 OA攻击 ,摇匀 , 37℃ ,水浴 5 min,取出放置
数分钟 ,用滴管吸取试管底部的肥大细胞液 ,取 1
滴于涂有染色液的载玻片上 ,轻摇 ,使液体与染料充
分混合 ,置于 37℃ 温箱放 3 min,显微镜下计数 40
个肥大细胞中明显脱颗粒的细胞数 ,结果见表 2。实
验表明 ,木兰脂素 1. 7和 0. 17 mg /m L对大鼠肥大
细胞均有显著的保护作用 ( P < 0. 01) ,且木兰脂素
1. 7 mg /mL与色甘酸纳小剂量组作用相近。
表 2 木兰脂素对大鼠肥大细胞的保护作用 (x± s, n= 4)
组 别  剂 量
( mg /m L)
净脱颗粒细胞数 对肥大细胞的保护率 (% )
空白对照    -   29. 75± 3. 30
木兰脂素    1. 700 16. 25± 4. 11* * 45. 38
0. 170 19. 50± 4. 12* * 34. 45
色甘酸钠 0. 010 10. 75± 2. 25* * 63. 87
0. 001 15. 50± 3. 41* * 47. 90
  与空白对照组相比: * * P < 0. 01
2. 3 对 HAc致小鼠毛细血管通透性增加的影响:
取小鼠 54只 ,雌雄各半 ,随机分为 4组 ,即木兰脂
素高、低剂量组 ,空白溶媒对照组和氢化可的松组 ,
各组均按表 3所示剂量 sc给药或空白溶媒 ,每天 1
次 ,连续 3 d (氢化可地松组隔日给药 1次 ,共 2
次 ) ,末次给药 30 min后 ,尾 iv 1% 伊文思蓝生理
盐水溶液 10 mL /kg ,随即 ip 0. 6% HAc溶液 10
m L /kg , 20 min后 ,脱颈椎处死动物 , ip 8 mL生理
盐水 ,轻揉腹部 ,收集腹腔洗液 ,离心 ,取上清液在
590 nm处测吸光度 ( A )值 ,结果见表 3。实验显示 ,
木兰脂素 10 mg /kg对 HAc所致小鼠毛细血管通
透性增高有明显的抑制作用 ( P < 0. 05)。
2. 4 对角叉菜胶引起足肿胀及炎症组织中 PGE2
的影响 [6 ]:取小鼠 40只 ,雌雄各半 ,随机分为 4组 ,
每组 10只 ,各组分别 ip给药或空白溶媒 ,给药剂
量、次数及天数均同 2. 3,末次给药 30 min,于每只
小鼠左后肢足跖注射 1% 角叉菜胶 50μL, 3 h后颈
椎脱臼处死小鼠 ,于裸关节处剪下左右后肢 ,称重 ,
以左右后肢重量之差作为炎症肿胀程度。 将以上剪
下的致炎足剥皮 ,剪碎放入 3 mL生理盐水中浸泡 ,
24h后 ,将足浸出液离心 ,取上清液用生理盐水稀
表 3 对 HAc致小鼠毛细血管通透性增加的影响 (x± s)
组 别  动物数 (n ) 剂量 ( mg /kg ) A值
空白对照 14   0. 59± 0. 18
木兰脂素 14 20 0. 55± 0. 13
12 10 0. 43± 0. 17*
氢化可的松 14 25 0. 44± 0. 11*
  与空白对照组相比: * P < 0. 05
释 4倍后 ,于 278 nm波长处测定其 A值 ,以每克炎
性组织相当的 A值表示 PGE2的含量 ,结果见表 4。
与空白对照组比较 ,木兰脂素 20和 10 mg /kg均能
显著抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀 ( P < 0. 01) ,并
能显著降低小鼠足跖炎症组织中 PGE2的含量。
表 4 对角叉菜胶致小鼠足肿胀及炎症
组织中 PGE2的影响 ( x± s , n= 10)
组 别 剂量 ( mg /kg) 足肿胀值 ( mg) PGE2含量 ( A值 )
空白对照 136. 70± 13. 93   6. 39± 0. 72
木兰脂素 20 101. 56± 21. 34* * 5. 65± 0. 75*
10 95. 35± 19. 71* * 5. 45± 0. 48* *
氢化可的松 25 73. 20± 18. 31* * * 5. 10± 0. 52* * *
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001
3 讨论
  木兰脂素高、低剂量组对 OA引起的致敏豚鼠
离体回肠平滑肌过敏性收缩均有显著的抑制作用 ,
其抑制率分别为 45. 61% 和 40. 48% ,能明显阻止
大鼠肥大细胞脱颗粒 ,其对肥大细胞的保护率分别
为 45. 38% 和 34. 45% ,对组胺和乙酰胆碱引起的
豚鼠离体回肠平滑肌收缩无明显影响 (表未列出 ) ,
提示木兰脂素抗过敏作用可能与抑制组胺、慢反应
物质等的释放有关。 木兰脂素低剂量组能显著抑制
HAc所致小鼠毛细血管通透性的增加 ,明显对抗角
叉菜胶引起的小鼠足肿胀 ,并显著降低小鼠足跖炎
症组织中的 PGE2含量 ,目前认为角叉菜胶致炎作
用主要与增加局部 PG合成有关 [ 5] ,提示木兰脂素
的抗炎作用可能与其抑制 PG合成有关。
以上实验表明 ,木兰脂素不仅具有较强的抗过
敏作用 ,而且对炎症早期有明显的抑制作用。现代药
理研究表明辛夷具有抗炎、抗过敏作用 ,因此 ,木兰脂
素可以作为辛夷抗炎、抗过敏作用的活性成分之一。
有关木兰脂素其它药理作用 ,尚有待于进一步研究。
参考文献:
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