全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 819·
中总黄酮提取率(总黄酮提取率一总黄酮质量／金莲
花质量×100％)。
2．4正交试验结果及方差分析：结果见表2，方差
分析见表3。
裹2正交试验结果
Table2 Resultsoforthogonaltest
衰3方差分析结果
Table3 ResuttsofYarIslllLeanalysis
方差来源离均差平方和 自由度 均方 ，值 显著性
A 1 24 2 0．62 1771
B 11．35 2 5．68 162．14P
D(误差) O．07 2 0—035
，o。5(2，2)一19．0FooL(2，2)一99．0
从直观分析可知，极差最大的为B因素，其次
为c因素和A因素。说明B因素即温度的改变对金
莲花总黄酮的提取影响最大，其次为提取时间和加
水量。由于金莲花为花类药材，其体积较大，相对用
水量较大才能浸泡完全。根据正交试验结果，提取工
艺最佳组合条件为A。B。C。，即提取溶剂为金莲花药
材的30倍量，提取温度为i00℃，提取时间为30
min。
2。5验证试验；按优选的最佳提取工艺制备4批样
品，测定样品中总黄酮，结果提取出的总黄酮吸光度
最高，药材中总黄酮提取率平均高达6．49％。
3讨论
金莲花除主要含有黄酮类化合物以外，还含有
挥发油成分，长时间加热包括提取和浓缩时的加热，
将不利于这些成分的稳定“]。试验也证明，即100℃
提取时间为60min时的总黄酮提取率比提取30
min低11．03％。
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板蓝根水提物的HPLC指纹图谱
赵艳玲“2，曾琳“3，王伽伯“3，金城1，肖小河”
(1．解放军第三。二医院，北京100039}2．军事医学科学院．北京100850f3．成都中医药大学，四川成都610075)
板蓝根来源于十字花科植物菘蓝Isatis
indigoticaFort．的干燥根，是常用中药，具有清热
解毒、凉血利咽的功效，广泛应用于流行性腮腺炎、
流行性乙型脑炎、流行性感冒、乙肝等病毒性疾病的
防治。现代药理研究表明板蓝根具有抗菌、抗病毒、
抗内毒素、调节免疫等作用[1]。板蓝根中有效成分有
靛蓝、靛玉红：“、喹唑酮⋯、水杨酸⋯、氨基酸⋯等，
但这些成分或不溶于水、或量太低、或无特异性作
用，作为板蓝根质量控制指标均不合适，本实验建立
板蓝根水提物的指纹图谱条件，旨在为板蓝根的质
量控制提供依据和方法。
1仪器和材料
Agilent1100型高效液相色谱仪，包括四元泵、
在线脱气机、手动进样器、DAD检测器；旋转蒸发
ll；iiill嚣1辑96学5--考龛誊器凳星瘩艾j苗至翟募蠢骂蓦毳薹罂羁毳鑫}；}；器旦窑蠡箬篙舅；药化学与中药药理作者筒介：赵艳玲( )，女，河北饶用人．副主任药师，军事医学科学院在读博士，研究方向为中药化学与中药药理
*通讯作者 肖／b#ilTet{(010)66933322Emall；pharma。y302@s。hu．CDm·c”
万方数据
·1820· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
仪。乙腈为色谱纯，水为高纯水，甲醇、磷酸为分析
纯。板蓝根药材由解放军三。二医院药物研究中心
肖小河研究员鉴定。药材来源见表1。
衰l板蓝根的来源
Table1 SourcesofRadixlsatis
2方法与结果
2．1 流动相及梯度洗脱条件的选择：比较了甲醇一
水、乙腈水系统，发现乙腈一水系统分离效果更好，
且柱压较甲醇一水系统低，可以通过提高体积流量的
方法缩短分析时间；另外，板蓝根提取物中有部分酸
性成分，在流动相中加入磷酸可以有效改善图谱中
极性较大成分的分离度。因此，最后确定用乙腈一
0．01％磷酸水溶液作为流动相。板蓝根水提取物非
常复杂，定比例流动相很难在较短的时间内实现主
要化合物的分离，采用梯度洗脱可以兼顾强极性和
相对弱极性成分的分析，得到的信息量较丰富，各成
分峰形尖锐且分离度较好。
2．2检测波长的选择：以DAD检测器进行全波长
扫描，比较板蓝根水提物在200～400nm的吸收谱
图，发现板蓝根水提物在222nm处得到的色谱峰
信息最多，且各峰分离良好。
2．3色谱条件：色谱柱为KromasilC，。分析柱(250
mm×4．6mm，5pm)；检测波长：22211132；体积流
量：1．5mL／min；柱温：室温；流动相：A相为0．1％
磷酸水溶液，B相为乙腈，线性梯度洗脱，O～10min
A～B(95：5)，lo～20min线性至A～B(90：10)，
20～55min线性至AB(50：50)，55～60min保持
A-B(50：50)，60～65min线性至A—B(95：5)。
2．4供试品溶液的制备：板蓝根药材粗粉，水煎煮
2次，合并煎煮液，减压浓缩制得干膏，备用。临测前
称取干膏500mg加水溶解，定容至100mL，过
0．45m滤膜，取续滤液，即得。
2．5数据处理方法：使用中药色谱指纹图谱相似度
评价系统2004版(国家药典委员会)进行数据处理，
从各样本图谱中综合比较生成对照模式色谱图，并
计算每个色谱图与对照模式色谱图的相似度。本实
验采用相关系数(均值)进行评价。
2．6精密度试验：取同一批样品，制备供试品溶液，
连续进样5次，检测指纹图谱，以“中药色谱指纹图
谱相似度评价系统”评价，结果相似度都在0．98以
上，表明仪器的精密度良好。
2．7稳定性试验：取同一批样品，制备供试品溶液，
分别在0、2、4、8、16、24h进样，检测指纹图谱，以“中
药色谱指纹图谱相似度评价系统”评价，结果相似度
都在0．98以上，表明供试品溶液的稳定性良好。
2．8重现性试验：取同一批供试品5份，分别精密
称定，制备供试品溶液，分别进样，检测指纹图谱，以
“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”评价，结果相
似度都在0．98以上，表明样品的重现性良好。
2．9样品分析：精密吸取供试品溶液10pL，注入
液相色谱仪，采集65min的图谱，其主要色谱峰的
保留时间见表2，不同来源的板蓝根指纹图谱见图
】。以“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行数据
处理，结果见表3。
寝2板蓝根ItPLC指纹图谱特征峰的保留时间
Table2 Retentionmeofcharacteristicpeak
inHPLCfingerprintofRadixlsatis
峰号 保留时间／rain 峰号 保留时间／min
1 Z．7 16 34．9
2 3．7 】7 36．3
3 12．2 18 37．8
4 14-1 19 39．2
5 172 30 40．8
6 18-1 21 42．5
7 196 22 446
8 203 23 46．1
9 21．5 24 47．5
10 25．6 25 49．5
】1 26．9 26 51．4
12 28．4 27 52．4
13 31．2 28 539
14 32、8 Z9 55．9
15 33．9 30 59．5
裹3不同来源板蓝根的相似度评价结果
Table3 SimilaritiesofRadixIsatisfromdifferentsources
样品号 相似度 样品号 相似度
1 0．94 6 0．90
2 0．93 7 0 87
3 0．94 8 o．84
4 0．92 9 O．79
5 0，93 10 0 75
3讨论
3．1样品1～6为同一来源样品的不同批次，7～10
分别来源于不同产地，由相似度可见，同一来源样品
的不同批次问差别较小，不同来源的样品间相似度
相差较大。
3．2板蓝根水提物的色谱峰非常复杂，但DAD扫
描表明其中很大一部分峰在各波长下均很小，色谱
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 821·
至1．5mL／min，分析时间可大大缩短至65min；若
以甲醇一水系统分析，则柱压过高而无法在较高体积
流量下分析。
Refeterices：
[1]XiaosS，JinY，SunYQ．Recentprogressinthestudiesof
一．一一—一—一7 P1一一⋯一0 20 30 40 50 60 707／⋯
[2]
围1不同来源的板蓝根指纹田谱
Fig．1FingerprintofRadixIsatis
fromdifferentsources [33
相似度分析亦显示这部分峰对相似度影响不大，按
本实验条件，主要的色谱峰得到良好的分离，可作为
与药理药效试验相关分析的分离方法。板蓝根不同
极性萃取物的指纹图谱与药理药效学试验相关分析
结果另文报道。
3．3以体积流量1mL／min分析时间过长，考虑到
乙腈一水流动相系统的压力较小，故将体积流量提高
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正交设计法研究通脉颗粒中p一环糊精包合物的制备工艺
赵慧萍1，王浩2
(1．天津中医学院第一附属医院制剂室，天津300193}2．天津药物研究院，天津300193)
通脉颗粒是我院研制的中药新药第6类复方制
剂，主要由当归、片姜黄、降香等药味组成，具有活血
化瘀、养血通脉的作用，用于治疗小儿病毒性心肌
炎。方中当归、片姜黄、降香均含挥发油，具有一定的
药理活性。为减少挥发油成分的损失，故将其制成p一
环糊精包合物。本实验采用超声法正交试验优选，以
油利用率为优选指标，并采用薄层色谱法和差示扫
描量热法对包合前后挥发油的质量进行研究。
1材料
当归、片姜黄、降香购于天津市津祁药材供应
站。肛环糊精(p—CD，质量分数≥98％)，陕西省佳县
生物化学工业公司产品。以上原辅料均按《中国药
典》2000年版规定由本实验室自行检测，所用对照
品均购自中国药品生物制品检定所。将当归、片姜
黄、降香混合，用挥发油提取器按照《中国药典》2000
年版一部附录挥发油测定法提取挥发油。
2预试验
收稿日期：2005—01—10
2．1饱和水溶液法：取适量pCD置于具塞三角瓶
中，加入适量纯化水，振摇制成pcD饱和液，加入适
量挥发油搅拌混合30rain，滤过、低温干燥，即得。
2．2超声法：取适量pCD置于具塞三角瓶中，加
入适量纯化水，振摇制成口～CD饱和溶液，加入适量
挥发油超声处理30min，将制得的包合物冷藏，滤
过，低温干燥，即得。
2．3研磨法：取适量13-cD置于具塞三角瓶中，加
入适量纯化水研匀，加人适量挥发油，充分研磨至糊
状，低温干燥，即得。
以上3种方法经实验结果表明超声法最佳，因
此采用超声法进行包合。
3包合物的制备方法
称取适量s-CD置于具塞三角瓶中，加入适量
纯化水，振摇制成8-CD饱和溶液。量取适量挥发
油，加入上述饱和溶液中，混合后用超声波清洗机按
试验方案进行超声处理。
鏊
万方数据
板蓝根水提物的HPLC指纹图谱
作者： 赵艳玲， 曹琳， 王伽伯， 金城， 肖小河
作者单位： 赵艳玲(解放军第三○二医院,北京,100039;军事医学科学院,北京,100850)， 曹琳,王伽伯
(解放军第三○二医院,北京,100039;成都中医药大学,四川,成都,610075)， 金城,肖小河
(解放军第三○二医院,北京,100039)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 5次
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200512025.aspx