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Research Oil progress of fenugreek gum

胡芦巴胶的研究进展



全 文 :·1264· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
胡芦巴胶的研究进展
郭守军,杨永利
(韩山师范学院生物系,广东潮州 521041)
摘要:胡芦巴胶的主要成分是半乳甘露聚糖,是一种良好的增稠剂、稳定剂,应用广泛。由于其具有显著的降血
糖、调血脂和减肥功效,近年来日益受到人们的关注。从胡芦巴植物资源分布,胡芦巴胶的生物学功能,多糖的合成
代谢、积聚与转化,精细结构及其与降血糖等作用的关系、生理学作用、胶的开发利用等方面对其研究进展进行综
述,为胡芦巴胶的进一步研究和开发利用提供科学参考。
关键词:胡芦巴;胡芦巴胶;半乳甘露聚糖
中图分类号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2005)08—1264—04
ResearchOilprogressoffenugreekgum
GUOShou—jun,YANGYong—li
(DepartmentofBiology,HanshanNorm lUniversity,Chaozhou521041,China)
Keywords:Trigonellaf enum—graecumL.;fenugreekgum;galactomannan
胡芦巴Trigonellafoenum—graecumL.为豆科蝶形花亚
科胡芦巴属植物。胡芦巴胶由胡芦巴种子内胚乳部分制成,
主要成分为半乳甘露聚糖。半乳甘露聚糖[13是一种水溶性多
糖,在低质量浓度下能形成高黏度的稳定溶液,可作为增稠
剂、稳定剂、乳化剂、黏合剂等广泛应用于石油开采、食品、医
药、印染浆纱、日用化工、采矿选矿、兵工炸药等行业。本文从
胡芦巴植物资源及其分布,胡芦巴胶的生物学功能,多糖的
合成代谢、积聚与转化、精细结构、性质,胶的开发利用等方
面对胡芦巴胶的研究进展进行了综述。
1胡芦巴植物资源
胡芦巴是一种广泛分布于亚洲、非洲和欧洲的一年生草
本植物,别名胡芦巴、芦巴、芦豆、香草、苦豆、季豆、小木夏、香
豆子等,其种子味苦、性温,有助肾阳、逐寒湿、止痛功能。原产
西非,当地名Fenugreek,后广泛引种到埃及、摩洛哥、印度、
巴基斯坦等地。在印度等国家民间常用其果实作为调味品。该
植物在我国多为栽培,始载于《嘉右本草》,主要分布于新疆、
甘肃、安徽、河南、四川等地,在我国西北、东北、安徽等地大面
积种植。在陕甘一带民间则以种子粉末放入馒头蒸食,可驱
虫、治小儿积食等,植物地上部分干后有特殊香气,可置衣柜
防虫灭虱,其地上部分的精油可用作烟用和化妆品香精。其种
子为中药材,亦作为医药工业的原料。种子含有薯蓣皂苷元和
雅姆皂苷元、卵磷脂、胆碱、胡芦巴碱等。胡芦巴既是传统的药
用、食用植物,又是新开发的优良工业原料植物。
2胡芦巴胶的生物学功能、合成代谢及积聚与转化
2.1 胡芦巴胶的生物学功能:胡芦巴胶是从胡芦巴种子的
内胚乳中提取出的一种多糖,主要成分是半乳甘露聚糖。半
乳甘露聚糖是植物的储备性多糖,是作为碳源的底物储存的
一类多糖,沉积在原生质的外侧,其潜在功能不仅是饲养原
生质体(Protoplast),而且有防护作用。半乳甘露聚糖的吸
水、保水能力均很强,在种子萌发过程中起着“水库”的作用,
维持适于种子萌发的小环境,抵御干旱环境。同时,半乳甘露
聚糖被完全降解为单糖时为早期萌发过程中的幼胚提供营
养物质和能量。
2.2胡芦巴胶的合成代谢:半乳甘露聚糖胶自发现以来,有
关它在植物体内的合成、积累和转化就受到许多科学家的注
意和研究。Heiderson等人(1958)曾提出一个半乳甘露聚糖
合成的可能途径,它是通过D一半乳糖基的转移来合成的。
棉子糖+甘露聚糖兮半乳甘露聚糖+蔗糖
半乳甘露聚糖的生物合成是由转化酶、变位酶、糖基转
移酶等多种类型的酶组成的多酶体系完成的口]。Singh等提
出了瓜尔豆种子发育过程中蔗糖转化为半乳甘露聚糖和棉
子糖的模型。蔗糖在转化酶的作用下生成果糖和葡萄糖,葡
萄糖磷酸化后与核苷酸作用生成尿核苷二磷酸葡萄糖
(UDP—Glu),再异构形成UDP—Gal,参与半乳甘露聚糖的合
成[2]。Reid和Edwards等经过多年的努力,以胡芦巴、瓜尔
豆等为材料研究了2种糖基转移酶及水解酶的活力变化、作
用特点,提出了一种合成模型[3“],认为在半乳甘露聚糖的合
成过程中,新合成的甘露糖基是否被取代与大分子中其邻
位、次邻位残基的取代情况有关。合成系统中酶的专一性及
活力、底物的量等因素共同决定了甘露聚糖残基被取代的概
率。不同植物中概率不同,合成的多糖分子中半乳糖和甘露
糖值不同。在有些植物中,种子发育一定时期a一半乳糖苷酶
活力较高,可部分移去分子中的半乳糖基,从而降低甘露糖
被取代程度[3“]。
收稿日期:2004—10-29
作者简介:郭守军(1965一),男,博士,韩山师范学院生物系副教授,主要从事天然产物的研究及开发。
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1265·
2.3胡芦巴胶的积聚与转化:1890年,Nudelmann就观察
到胡芦巴的胚乳细胞壁次生增稠物质的积累就是半乳甘露
聚糖,并认为液泡是它所在的部位。近年来的研究表明,胡芦
巴种子半乳甘露聚糖约在开花后30d开始聚集,即在胚乳
细胞出现的时候。每粒种子半乳甘露聚糖的量约在开花后
55d达到最高值,而后则略微下降。在整个积累过程中,半乳
糖和甘露糖的比值保持不变。Reid等使用光学显微镜和电
子显微镜对胡芦巴种子半乳甘露聚糖积聚的形态学研究指
出,半乳甘露聚糖是以细胞壁加厚物质的形式在胚乳细胞中
不断积累,除糊粉层(胚乳最外一层细胞,它含有大量蛋白
质)之外,直到所有胚乳细胞全被占据或只剩下细胞质残物
为止。这时包括细胞核在内的细胞器也消失。半乳甘露聚糖
在胚乳中不是均匀积聚的,靠近胚的内层胚乳细胞优先得到
积聚,而后向外扩展,直到靠糊粉层的外缘细胞。这与种子萌
发时半乳甘露聚糖的分解次序恰好相反[5]。
对于种子中半乳甘露聚糖的降解,Nadelmann(1890)最
早观察到胡芦巴的胚乳“黏质”在种子萌发后溶解,并且伴随
着子叶中细胞淀粉的形成。Reid指出胡芦巴种子胚乳只有
最外层细胞——糊粉层是由活性细胞构成的。当种子萌动后
有一个13h的停滞期,即半乳甘露聚糖不发生分解(但棉子
水苏糖系列的低聚糖发生分解)。随后的24h内,胚乳中半
乳甘露聚糖的量可能降到零。同时,子叶中过度性淀粉和胚
轴中可溶性糖增加,胚干重增加。其分解的最终产物是半乳
糖和甘露糖。胡芦巴种子半乳甘露聚糖的代谢与大麦胚乳淀
粉相似。它们的糊粉层活性细胞都负责多糖降解酶的合成与
分泌。然而大麦糊粉层是受来自胚的赤霉素的刺激产生a一淀
粉酶的,胡芦巴胚乳则没有确证表明接受来自胚的激素信
号。将胚乳从干种子取出,置于萌发条件下,半乳甘露聚糖跟
胡芦巴完整种子一样,经过相同过程后发生分解,分解的最
终产物也一样。同时胚乳本身存在与半乳甘露聚糖水解有关
的酶。这些酶是a一半乳糖苷酶、内切一a一甘露聚糖酶和a一甘露
糖苷酶。以分离的胚乳作试验,半乳甘露聚糖降解的代谢抑
制剂也抑制这些酶的活性。光学显微镜检验发现胚乳半乳甘
露聚糖的降解是从糊粉层开始向内扩展到胚的[6]。
3胡芦巴胶的应用
3.1 在食品和石油工业上的应用:胡芦巴胶具有良好的性
能,在冷水和热水中均能完全溶解,黏度较高,是一种很好的
增稠剂。胡芦巴胶因其品质优良、价格低廉在石油工业引起
广泛的重视。国内耳前有3家工厂(吉林、西安、新宜)生产胡
芦巴胶(香豆胶),主要在石油工业中用作胶凝剂。还可以用
于焙烤食品及乳制品、饮料的增稠剂等[1]。功能性实验表明,
胡芦巴胶与其他增稠剂具有同样的增稠效果,1999年北京
矿冶研究总院对胡芦巴胶的提取工艺及设备进行了研究,确
定了一种加工胡芦巴胚乳片的新工艺和设备。1999年6月
胡芦巴胶通过了全国食品添加剂标准化技术委员会卫生组
第二十六次会议的初评,1999年10月全国食品添加剂标准
化技术委员会第二十次年会的新品种评审,正式成为一种新
型的食品增稠剂[7]。
3.2在医药方面的应用:胡芦巴胶除了应用于食品外,由于
其具有一些重要的生理功能,如显著的降血糖和降血脂作
用,越来越引起了医学研究工作者的关注。
3.2.1降m糖作用:1939年就有临床研究表明,胡芦巴胶
具有降血糖的作用,近年来的研究也进一步证实了胡芦巴胶
确实具有治疗糖尿病的潜在的价值。临床将糖尿病分为两
型:I型糖尿病(胰岛素依赖型)是由于胰岛口细胞损害引起
胰岛素分泌水平极低而致高血糖,约占糖尿病人的10%。其
治疗只能依赖于外源性给予胰岛素。Ⅱ型糖尿病(非胰岛素
依赖型),是胰岛素分泌的相对不足及胰岛素作用环节不健
全而致血糖水平升高。
无锡轻工业大学的Khatir和丁霄霖等对胡芦巴进行了
降血糖疗效的研究,结果表明,胡芦巴胶是一种新型的膳食
纤维,对糖尿病有潜在的血糖控制作用。服用剂量越大,效果
越显著凹]。Sharma等的临床试验表明,I型糖尿病人,每天
po1 0g脱脂胡芦巴种子粉,连续服用10d,空腹血糖降低
30%,对葡萄糖的耐受性得到了改善,24h的尿糖排泄降低
了54%,但相应的胰岛素水平未见升高;对Ⅱ型糖尿病患
者,每天声o25g脱脂胡芦巴种子粉,连续服用3个星期,患
者葡萄糖的耐受性得到了明显改善,膳后的血糖降低,24h
的尿糖排泄显著降低,一些患者对胰岛素的需求从每天的
56单位降到20单位[9]。有学者报道,对于I型和1I型糖尿
病患者,声。胡芦巴胶粉后,其脘满、尿频的症状均得到缓解。
糖尿病的症状如烦渴、尿频都得到了显著的改善D⋯。
早期的研究认为,胡芦巴的降血糖作用的有效成分为胡
芦巴碱,但后来的研究表明,糖尿病患者口服胡芦巴碱后并
未见血糖浓度的下降,从而排除了胡芦巴碱具有降血糖作用
的结论[1“。为了进一步追踪胡芦巴的活性成分,有学者将种
子分为去脂和脂类两部分,去脂部分对正常和糖尿病狗显示
降血糖和降胆固醇作用,提示活性成分主要在去脂部分中。
去脂部分主要由a和b两部分组成,a部分主要含纤维和种
子胶,b部分主要含蛋白质和皂苷等,对两部分的进一步研
究结果显示降血糖的活性成分主要存在于a部分。进一步的
研究发现,去种子胶后的胡芦巴未显示降血糖作用,因为胡
芦巴种子胶的主要成分为半乳甘露聚糖,从而证实了半乳甘
露聚糖胶是胡芦巴降血糖的主要活性成分[9]。
胡芦巴的降血糖作用被认为是这种半乳甘露聚糖纤维
使细胞对胰岛素更敏感,细胞膜上胰岛素受点增多,刺激细
胞耗糖能力。其降血糖的作用可能是通过几种途径实现,一
是高黏度的半乳甘露聚糖胶能阻碍葡萄糖向肠液扩散,抑制
小肠对葡萄糖的吸收,明显降低膳后平均血糖水平;二是通
过延迟胃排空来调节血清葡萄糖浓度;三是胡芦巴胶能通过
抑制a一淀粉酶与底物的接触,延长酶作用于淀粉的时间,减
少淀粉的消化和葡萄糖的吸收[9““。
3.2.2降血清胆固醇的作用:心血管疾病与血清胆固醇浓
度的升高密切相关。糖尿病患者通常有明显的高脂血症,而
且心血管发病率和死亡率是非糖尿病患者的2~3倍,因此
降低升高的血清胆固醇浓度对预防冠心病(CHD)十分有益。
万方数据
·1266· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
Prasanna的研究表明,高血脂症的患者,每天芦o50g
去脂胡芦巴种子粉,连续10~20d,其血清总胆固醇低密度
脂蛋白(LDL)、甘油三酯和极低密度脂蛋白(VLDL)的浓度
明显降低,而对高密度脂蛋白(HDL)的影响不大[1“。Sharma
在对Ⅱ型糖尿病患者的半年的研究中发现,患者每天声o25
g胡芦巴种子粉,24周后血清总胆固醇、LDL、VLDL和甘油
三酯的浓度均明显降低[9]。此外,胡芦巴种子粉选择性地降
低总胆固醇的LDL和VLDL部分,对预防动脉粥样硬化十
分有益。
胡芦巴种子粉降血脂的机制被认为是胡芦巴半乳甘露
聚糖胶增加了消化液的黏度,从而降低了血清总胆固醇。这
种作用机制是通过抑制小肠对胆固醇的吸收和抑制末端回
肠对胆汁酸的再吸收而实现的。如果胆汁酸被排泄,肝脏的
生物平衡就倾向于由胆固醇合成胆汁酸,因而使血清胆固醇
降低。也有学者研究表明,胡芦巴半乳甘露聚糖胶显示了对
胃肠激素分泌的影响,在糖和脂代谢中,使许多关键酶的活
性增强,从而使血清胆固醇降低[9““。
3.2.3减肥功效:胡芦巴胶——新一代的膳食纤维,不仅具
有促肠蠕动的功能,从而导泻通便,同时使粪便中的有害物
质特别是致癌物质及时排出体外,大大减少肠道癌症和痔疮
等的发病几率。在许多有关胡芦巴胶降血脂和降血糖的临床
研究中,都观察到受试者体重降低或减肥现象。此外由于胡
芦巴胶具有强烈的吸水功能,能在胃肠中形成高黏度的溶胶
式凝胶,占据了胃的空间,减少胃的排空,易于产生饱腹感抑
制进食量,所以长期服用胡芦巴胶(与各种食物混合后食用)
对肥胖症有较好的减肥功能[9““。
3.2.4胡芦巴胶的安全性:短期喂养小鼠研究表明,一天喂
养小鼠100g胡芦巴胶粉,没有任何不良反应。长期喂养患
1I型糖尿病小鼠研究表明,每日服用25g胡芦巴种子粉,连
续服用24周,未产生任何心血管系统的不良反应。因为胡芦
巴胶消耗较低的血液中的葡萄糖,所以,可以和其他糖尿病
药物同时使用[j“。
4胡芦巴胶半乳甘露聚糖的化学结构与其降血糖和降血脂
作用的关系
国外,半乳甘露聚糖主要有3种来源:长角豆胶、瓜尔胶
和胡芦巴胶。不同来源的半乳甘露聚糖半乳糖和甘露糖的比
值不同[1“。胡芦巴胶中半乳糖和甘露糖分子的比值约为1:
1。长角豆胶、瓜尔豆胶和胡芦巴胶都具有降胆固醇和降血糖
功效,而胡芦巴胶在此方面的功效又大于前两者,这种功能
取决于半乳甘露聚糖中半乳糖在甘露糖主链上的分布情况。
半乳甘露聚糖具有相同的基本结构,分子是由线形的1—4
连接的pD一甘露糖残基为主链和以1—6连接的a—D一半乳
糖基为支链的结构,这种结构已被大家所公认。1—6连接的
a—D一半乳糖支链群在1—4连接的D一甘露糖主链上的分布
称为半乳甘露聚糖的精细结构(finestructure)。不同来源的
半乳甘露聚糖其精细结构不同[1“。
Evans等人的研究表明,胡芦巴胶有着独特的分子结
构,其半乳甘露聚糖是独一无二的[1“,主链上的甘露糖基全
部被半乳糖基取代,且均匀地分布在主链的两侧。这种高取
代增加了胃系统葡萄糖吸收的抑制作用[1“。
有学者对胡芦巴胶、瓜尔胶(guargum,Gal:Man一1:
2)和长角豆胶(10custbeangum,Gal:Man一1:4)半乳甘
露聚糖的降血糖和降血脂作用进行比较,令人感兴趣的结果
是,半乳糖基的比例越高,其降血糖和降血脂的作用就愈强。
也有学者对胡芦巴种子粗粉和实验室提取的纯胶粉降血糖、
降血脂作用进行了比较,临床试验结果表明,纯胶粉较相应
胡芦巴种子粗粉表现出更强的功效,5g胡芦巴的纯胶粉和
100g胡芦巴种子粗粉的作用相当[9““。
5结语
半乳甘露聚糖可作为增稠剂、凝胶剂、稳定剂等广泛用
于食品、石油、钻井、医药、纺织、造纸等工业;又因为半乳甘
露聚糖具有较强的吸水、保水能力,在土壤保湿、可降解的食
品保鲜和化妆品中得到应用;而近斯的研究表明,由于半乳
甘露聚糖具有显著的降血糖、降低胆固醇、抑制肝对胆固醇
的生物合成和抗凝血等的生理活性,所以近年来半乳甘露聚
糖胶的研究和开发引起了众多国外学者和药物公司的关注,
而胡芦巴胶由于它在降血糖、降血脂、减肥等方面的特殊功
效,在西方一些国家已被应用到药品、减肥保健品和功能食
品中‘1“。
胡芦巴胶的性能与进口瓜尔胶相比,冷水不溶物及水溶
性能、残渣等指标均优于瓜尔胶。我国目前每年需植物胶8
000t,其中大部分依赖国外进口,而我国年产高质量的植物
胶不足1000t,所以胡芦巴胶的市场看好[1]。我国胡芦巴资
源丰富,但胡芦巴胶尚未被应用到药品、减肥保健品和功能
食品中。因此,进一步进行胡芦巴胶的研究及开发具有广阔
的应用前景。
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银杏叶提取物制剂研究概况
谢燕,张钧寿。
(中国药科大学药学院药剂学教研室,江苏南京210009)
银杏叶提取物(Ginkgobil baL.extract,GbE)是从银
杏科银杏属植物银杏的干燥叶中提取纯化而成的一种淡黄
色粉状物质,具有改善心脑血管循环、保护肝脏、改善记忆、
抗炎、抗过敏、提高机体免疫功能等作用,由于其疗效显著、
副作用低,现已成为欧美及世界各地治疗老年疾病的畅销产
品。而我国拥有全世界70%的银杏资源,对于开发利用银杏
叶提取物的各种制剂具有得天独厚的优势。本文对银杏叶提
取物的活性成分、制剂研究、体内药动学研究状况作一综述。
1 GbE的活性成分
银杏叶提取物的化学成分较为复杂,已发现有160多种
化学成分,但黄酮类化合物、萜类内酯、聚异戊烯醇类被认为
是主要活性成分,银杏酚酸(简称银杏酸)为主要毒性成分。
其中黄酮类化合物主要以黄酮苷的形式存在,具有清除自由
基的作用;萜类化合物为强效血小板活化因子(PAF)拮抗
剂,两者是银杏叶提取物中的重要有效成分。GbE中银杏黄
酮和银杏内酯的量受银杏树成长环境、树龄、采集时间[13等
因素的影响较大,目前尚无统一的质量标准,国际上公认的
银杏叶制剂质控标准是Swache公司1991年的专利[2J
EGb761标准,即总黄酮>24%,总内酯>6%(其中银杏内
酯2.5%~4.5%,白果内酯2.0%~4.0%),同时限定银杏
酸水平在5ptg/mL以下。
2 GbE的制剂研究
随着制剂新技术与中药现代化的相互渗透,银杏叶制剂
已从传统的口服液、颗粒剂,经历了片剂、胶囊剂、注射剂等
普通制剂的发展历程,目前已进入了缓控释、靶向制剂的新
阶段。
2.1 GbE普通制剂:GbE的普通制剂种类繁多,由于生产
工艺简单,成本低廉,深受广大患者欢迎,但在生产、贮存过
程中仍出现很多问题,因此,有学者在剂型设计和工艺改进
方面做了大量工作,并取得一定进展。
王鑫波对银杏叶口服液的提取工艺进行了优化,制得口
服液澄明度较好嘲。钱学群叫研究了银杏叶经提取、浓缩、干
燥、填充等制备胶囊的工艺和质量方法,所得胶囊口服后在
胃内溶解快,一般3~10min即能释放药物,易吸收、奏效
快,且可掩盖药物的苦味。还有报道[51将银杏叶提取物溶解
在聚乙二醇400中制成软胶囊,具有崩解后有效成分迅速溶
出,起效快等特点。
危华玲口垮F对银杏叶片所存在的崩解问题,在处方中引
入适量的高效崩解剂低取代羟丙基纤维素(L—HPC),并在此
基础上优化处方组成,改善了银杏叶片的崩解和成型,同时
易于包衣。由于银杏叶提取物易受潮吸湿,通常将素片包糖
衣,但在储存过程中发现其糖衣片仍然具有强吸湿性,并且
容易裂片,产生色斑。刘振涛[71通过崩解、耐温湿试验,比较
薄膜包衣及糖衣对银杏叶片理化性质的影响,结果肯定了采
用薄膜包衣的优点,并用正交试验确定了薄膜包衣的最佳工
艺。Oschmann[81研制GbE泡腾片时,减少处方中酸的用量,
并加入生理可接受的表面活性剂,得到的水溶液澄清且pH
为6~8,克服了银杏叶提取物在水溶液中的稳定性问题。
GbE注射剂产品主要有金纳多注射液(德国)、舒血宁
注射液(北京第四制药厂)等,刘洁等[9]自制的GbE注射剂
与金纳多注射液相比,均能明显改善急性脑梗塞患者肢体运
动功能(P<0.05),显著降低血浆血栓素B:水平(P<
0.05),明显提高6一K一前列腺素F,。水平(P<0.05),可见两
者疗效相仿。为提高中药注射剂的安全性和有效性,巴卫松
等[10]将银杏叶提取物再提取制备高纯度ObE注射液,可定
量成分达到国家医药管理局对中药注射剂的要求(>50%),
与金纳多注射液相比,所含银杏黄酮成倍提高,萜内酯的量
也有所提高,并通过动物实验表明,高纯度银杏黄酮注射液
和“金纳多”均能提高记忆力,改善家兔血液流变学,保护缺
血再灌注组织,且同剂量下该注射液作用优于“金纳多”。游
松等[11]以芦丁为内标,采用HPLC法分析银杏黄酮苷,建立
了银杏叶药材、中间体及注射剂中间体的指纹图谱,为银杏
叶提取物注射剂的质量控制奠定了基础。
2.2 GbE新型制剂:近年来,为了提高病人服药顺应性,降
低不良反应,适应不同患者的需要,出现了许多银杏叶提取
物的新型制剂,主要有缓释片、缓释胶囊、舌下片、口腔崩解
收稿日期:2005—02—18
作者简介:谢燕(1978一),女,中国药科大学在读硕士研究生,研究方向为药物薪制剂与新剂型。
Tel:(025)85339694E—mail:rosexie一1996@hotmail.corn
*通讯作者张钧寿
万方数据
胡芦巴胶的研究进展
作者: 郭守军, 杨永利, GUO Shou-jun, YANG Yong-li
作者单位: 韩山师范学院,生物系,广东,潮州,521041
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(8)
被引用次数: 1次

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引证文献(1条)
1.王文苹.隋宏.马妍妮.韩欣.吴艳娇 胡芦巴胶作为微丸缓释材料的初步研究[期刊论文]-宁夏医科大学学报
2012(11)


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