全 文 ：第 6卷 第 4 期
1 9 79年
上海第一医学院学报
A CT A A CA DEM 工A EM C I E D工N A EP R工M A E
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6
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4
1 9 9 7
掌叶半夏抗子宫颈癌成分的研究
( I)胡芦巴碱的分离和鉴定
刘 星 增 林 云 福
(上海第一医学院药学系天然药化教研组 )
徐 亚 铭
(上海第一医学院妇产科医院 )
丁 声 项
(上海第一 医学院基础医学部化学教研组 )
190 7年我院妇产科在浙江农村调查中发 掘 掌叶半夏 (尸咖昭琳。 尸召己a 杯s e c协 oSho 七t )
(原名天南星 )〔1 的抗癌作用以后 , 为了提高疗效并消除其副作用 , 改进剂型制出宫颈栓
剂 , 经临床多年来的使用证实掌叶半夏确有抗子宫颈癌疗效即 , 其稀醇或水浸出液对动物
实验肿瘤 ( S一18 0 、 H C A 及 U 1 4 各瘤株 )和 eH la 细胞都具有明显的抑制作用 。
掌叶半夏含有多种生物碱 、 总生物碱在临床实践观察中已知具有抗子宫颈 癌 疗 效 。
最近我们从掌叶半夏水溶部位分得一季胺发物碱 , 熔点 2 1 o8 C (分解 ) , 经衍生物的制备 , 用
该碱的氯化物测定的核磁共振谱与标准光谱对照 , 又按 S ar et at , 方法合成胡芦巴碱氯化
物与样品的氯化物经红外光谱对照证明该碱为胡芦巴碱 , 即犷c查:
在动物实验中已知该碱毒性低 , S h an i 4[J 等也报道胡芦巴碱对小鼠 50 毫克 /公斤 , 经
二十一天给药后 , 均未见毒性反应 , 并求出其 口服急性毒性 L D 。 。 为 5 克 /公斤 。 A ga r w al 51[
曾报告该碱对 SP 系瘤株有抗癌活性 , 但未见临床应用的报告 。 我们发现该碱对小 鼠肝癌
(H OA )有明显的抑瘤作用 , 抑制率为 47 多 , 目前我们正对该碱作进一步临床治疗子宫颈
癌的观察 。 今将掌叶半夏中胡芦 巴碱的分离与鉴定工作报道如下 :
实 验 部 分
胡芦 巴碱的提取分离叭
分离流程图如下 :
本工作中抗肿瘤实验是本院病理生理教研组孙聆善同志所做 。 红外、 紫外和元素分析分别由药学系仪器分析中
心实验室戌大妹 、 莫国强 、 王家权同志测定 。 药学系 78 届 2 班同学骆日新 、 张翎参加提取分离工作 , 均此致谢 。
耀攀宁
2经 上 海 第 一 医 学 院 学 报 6卷
掌叶半夏的乙醇浸膏 1 0 6克
加 1 %盐酸溶液 50毫升使溶
离心
沉淀 溶液
l用氯仿抽提
氯仿溶解部分 杏酸性水溶液
加浓氨水调节至声 9
用氯仿抽提尽
杏 杏
氯仿溶液 碱性水溶液
(总生物碱 )
取上述 (分离流程图中 )碱性水溶液部分 , 通过阳离子交换树脂柱 ( 732 R + 型 ) 1 0 毫
升 , 至流出液对碘化秘钾试剂呈阴性反应为止 , 用 2多氨水洗脱 , 收集洗脱液减压浓缩至
糖浆状 , 溶于 0 . 2万 醋酸按 (p H S . 7 )缓冲液中 , 溶液通过 73 2 阳离子交换树脂柱 [树脂先
用 0 . 2万 醋酸按 (p H S . 7) 处理过〕, 收集流出液 , 再通过 7 11 阴离子交换树脂柱 (O H 一 型 ) ,
流出液减压浓缩 , 溶于 o 多甲醇中 , 过滤 , 滤液浓缩 , 进行氧化铝 (中性 )柱层析 , 用 9 0外
甲醇洗脱 , 分别收集各流份 , 以板层析控制 (硅胶 G 、 溶剂 : 氯仿 : 甲醇 : 醋酸一 112 . 丘
n Z
.
5 : 7
.
6
, 改良的碘化秘钾试剂显色 ) 。 合并 lR 值为 0 . 38 的组份 , 减压浓缩得固体 , 乙
醇重结晶 , 得无色菱晶 , 熔点 2 1 o8 C (分解 ) (文献值熔点 21 o8 C[ 玛 。 元素分析 : C 7 H 7 N仇 计
算值 (多) C 6 1 . 3 1 H石. 1 5 ; 实验值 (多) 0 6 1 . 3 9 H 5 . 2 3 。
胡芦巴碱的鉴定 :
1
. 衍 生物的制备: (1) 氯化物 : 取上述结晶少许 , 溶于乙醇中 , 加适当量的浓盐酸 , 减
压浓缩至干 , o 多 乙醇重结晶 , 得无色针晶 , 熔点 2 57一 so C (文献值熔点 258 ℃ 3[] , 248 一
50
o
C )
〔8 , 。 元素分 析 : C 77H O , N · H C I 计算值 (界 ) C 4 8 . 4 2 H 4 . 6 4 C I 2 0 . 4 2 实验值 (界 )
C48
.
73 H S
.
0 5 C l 20
.
3 9
。
( 2 )苦味酸盐 : 取上述菱晶少许 , 溶于乙醇中 , 滴加苦味酸的乙醇
溶液 , 浓缩至干 , 乙醚多次洗涤至乙醚液无色为止 , 稀乙醇重结晶 , 熔点 20 4o C (文献值熔
点 2 0 5” Z0 0 C 〔7 , ) 。
2
. 紫外光谱的浏定 分别以样品的氯化物和合成的胡芦 巴碱的氯化物 9[ a] , 重蒸馏
水为溶剂 , 进行紫外光谱测定 , 结果如图 1 和图 2o
3
. 核磁共振谱的浏定 : 采用氯化物的样品 , 重水为溶剂 , 4 , 4 二甲基一 硅代戊磺酸
钠为内标准 , o 兆周核磁共振仪上测定 ,所得结果如图 3 。
从图 3 中对各信号的解析与文献【g b」中化学位移数据列表如下 :
化 学 位 移 a b 心 d
占( p P力 l )
测 定 值 住 . 6 3 8 . 3 3 9 . 1 2 、9 51
文献值 [5 、 6 ] 连. 6 9 8 . 3 6 9 . 1 2 9 . 5 1
4期 掌叶半夏抗子宫颈癌成分的研究
2 30 2 4 0 2 5 0 2 60 2 70
波长 ( n m )
2 30 2 4 0 2 50 2 60 27 0
波长 ( n m、
图 1样品氯化物 图 2胡芦巴碱氯化物 (合成 )
、一、一 .
一 ,
10 9 8 7 6 5 4 3 2
化学位移创 P Pm )
图 3 结晶氯化物的核磁共振谱
4
. 红外光谱鉴定: 结晶氯化物与用下法合成得到的胡芦巴碱氯化物 c9[ , , 用 K B r 压
片法分别进行红外光谱测定 (见图 4 、 图 5) 证明二者一致。
缨黔要
上 海 第 一 医 学 院 学 报 / 6卷
0 00 3 45 00 30 0 025 02 0 0 080 0 0 1
图 4
16 00 0 140 12 00 10 0 08 0 0 6 00
波数 (c m一 1)
结晶氯化物的红外光谱
400 0 35 0 0 3 020 05 0 02 0 0 0 18 0 0 60 0 140 02 0 10 100 08 0 0 6 0 0 0 40
波数 (c m一 1)
图 6胡芦巴碱氯化物的红外光谱 (合成品)
胡芦巴碱的合成 :
将烟酸 0 1克 ( 1/ 2 1克分子) 、 碘甲烷 (新鲜 、 蒸馏) 0 1克 ( 1/ 2 1克分子 )和无水甲醇 场
毫升 , 放入 3 0 毫升高压釜中 , 搅拌加热至 1 50 0 , 压力约为 16 公斤 /厘米 2 , 在巧 0 0 反
应三小时 , 冷却反应液至室温 , 加水 1印 毫升使全溶 , 溶液呈淡黄色 , 用过量的氧化银 (湿 )
处理 , 过滤 , 滤液加 7 毫升浓盐酸 ( 1 / 12 克分子 ) , 减压浓缩至干 , 用 150 毫升 90 界 乙醇重
结晶 , 冰箱放过夜 , 滤取结晶 , 用冷 乙醇和 乙醚分别洗涤三次 , 得 7 克胡芦巴碱氯化物 , 再
经 乙醇重结晶一次熔点 2 57一 2 580 0 。
怪期 掌叶半夏抗子宫颈癌成分的研究 2 47
七 .
参 考 文 献
【 1〕 上海第一医学院药学系生药教研组 :天南星的原植物调查与鉴定。 中草药通讯 ( 2) : 34, 1 978 。
〔2 〕 上海第一医学院妇产科医院等 : 掌叶半夏治疗子宫颈癌的研究 。 王9 78 年上海市肿瘤年会论文摘要 。
〔3 〕 sa r e t t P , e t al : s y 刀场丽 s 即 d 欧c r e t j on o f t r i g o n el l i ne . J B 幻 1 Ch已叽 1 3 5 : 48 3 , 1 9 4 0 .
【4 〕 hS 二 J , et :al 场砰 g ly ca e m ie e 。 ’eC t of T ir go n e l la foe nu m G ar ec u m a nd uL iP nus etr m is a nd ht ie r 功 aj or
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[ 5 〕 A争 r耐 J s , e t 缸 : e 助m i ca z e xa m i na t io n o f wa ~etr s ol 曲 ze f ar e t ion o f M a p pi a oer t i血 M i e r s . 了记乞雌 J
C h e仍 1 3 : 7 5 8 , 1 9 7 5 .
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[ 7 〕 cS h ul ez E : T五e p r e aP r a t io n 吐 e h o l i加月犯 t a in e a nd t r i g o n e l l i ne f r o m 户 n切 a nd t h e qua n it t at ive se 砰art io n
o f 伍翎 b a se s . 2 尸h梦初Z hC娜 60 : 1 5 5 ~ 17 9 , 1 9 0 9 .
[ 8 1 hG oas l S
: A l k a 1iO ds o f A b功 s rP呱ot r i u s . 尸h夕枷h泞m ” t了刀 10 : 1 9 5 , 1 9 7 1 ·
[ 9 〕 s a d t l e r S t a n ar dr S p 犯 t ar ( a) U V 8 6 7 1 , ( b ) N M R 8 8 0 9M , (c) I B G 4 8 0() K , 1 9 7 2 .
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