全 文 ：秦皮化学成分的研究
刘丽梅 1 ,王瑞海 1 ,陈　琳 1 ,吴　萍 1 ,王　丽 2
( 1. 中国中医研究院基础理论研究所 ,北京　 100700;　 2. 哈尔滨制药三厂 ,黑龙江 哈尔滨　 150070)
　　在前报 [ 1]中 ,作者从苦枥白蜡树树皮中分离到 2
个化合物 ,秦皮乙素 (Ⅰ )和秦皮素 (Ⅱ ) ,现又从该树
皮中分到 3个化合物 , 6, 7-二甲氧基-8-羟基香豆素
(Ⅲ ) ,秦皮苷 (Ⅳ )和秦皮甲素 (Ⅴ )。化合物Ⅲ为首次
从《中华人民共和国药典》 ( 2000年版 )收载的 4种秦
皮中分得 ,并首次对化合物Ⅲ的 13C-NMR谱数据进
行了归属 ,化合物Ⅳ为首次从苦枥白蜡树树皮中分
得 ,并首次对Ⅳ的13 C-NMR谱数据进行了归属。
1　仪器与材料
熔点用 X T4A型显微熔点测定仪测定 (温度计未
校正 ) ,核磁共振谱用 Varian INOVA-600型核磁共
振仪测定 , TM S为内标 ,甲醇为溶剂 ,质谱用 Zab-
spec To fspec Pla tfo rm- ESI型质谱仪测定 ,色谱用
聚酰胺为浙江省台洲市四青生化材料厂生产。
实验用秦皮采自黑龙江省五常县 ,由中国中医
研究院中药研究所谢宗万研究员鉴定为苦枥白蜡树
Fraxinus rhynchophylla Hance的树皮。
2　提取与分离
取苦枥白蜡树的干燥树皮 6. 5 kg ,粉碎 , 95%
乙醇回流提取 3次 ,每次 4 h,滤过 ,合并滤液 ,浓缩
至稠膏状 (约 0. 65 kg )。
2. 1　取 0. 4 kg稠膏 ,加 5%硫酸水溶液 1 500 mL,水
解 4 h,放凉 ,滤过 ,用等体积乙醚萃取滤液 4次 ,回收
乙醚萃取液至少量 ,析出固体 (约 5 g)。取固体 3 g ,上
聚酰胺柱 ,用乙醇洗脱 ,每份 200 mL,收集9～ 14份合
并 ,回收溶剂至少量 ,放置冰箱析晶 ,抽滤 ,得浅黄棕色
晶体 ,甲醇-水重结晶 ,得浅黄色针状晶体Ⅲ。
2. 2　取 0. 25 kg稠膏 ,用 1 500 mL水热溶 ,趁热抽
滤 ,放置滤液至凉。用醋酸乙酯萃取滤液 4次 ,合并
萃取液 ,减压回收萃取液得干膏 A。继续用正丁醇萃
取水溶液 4次 ,合并萃取液 ,减压回收萃取液得干膏
B 144. 9 g。取 5 g干膏 B上聚酰胺柱 ,用稀醇洗脱 ,
每份 200 mL,收集 6～ 8份 , 10～ 12份 ,分别回收溶
剂至少量 ,放置冰箱析晶。 从 6～ 8份得黄色针状结
晶Ⅳ ,从 9～ 10份得白色针状结晶Ⅴ。
3　结构鉴定
晶Ⅲ : 浅黄色针状结晶 , mp 172℃～ 174℃。
FAB-M S显示其相对分子质量为 222 ( M+ - H) ,
13
C-NM R谱显示该化合物有 11个碳 (δ163. 9,
154. 5, 149. 6, 144. 1, 140. 9, 137. 3, 112. 8, 108. 6,
96. 0, 61. 8, 57. 0) ,δ163. 9是羰基碳信号 , 61. 8,
57. 0是两个甲氧基碳信号。 1H-NMR谱显示该化合
物母核上有 3个氢 (δ8. 03, d, 1H, J= 9. 60 Hz;
6. 74, s, 1H; 6. 20, d,J= 9. 60 Hz) ,两个甲氧基上有
6个氢 (δ3. 95, 3. 93)。根据 HSQC谱可知 ,δ96. 0的
碳和 δ6. 74的氢相连 ,δ112. 8的碳和δ6. 20的氢相
连 ,δ140. 9的碳和 δ8. 03的氢相连 ,δ57. 0的碳和
δ3. 93的氢相连 ,δ61. 8的碳和δ3. 95的氢相连。
由于晶Ⅲ和秦皮素 13 C-NMR和 1H-NMR谱近
似 ,其结构也应该近似 ,故根据秦皮素碳氢信号的归
属 [1 ]和晶Ⅲ的光谱数据 ,可以初步归属晶Ⅲ的碳氢
信号。为了进一步确证晶Ⅲ的结构和碳氢信号的归
属 ,做了 HMBC谱。在 HMBC谱中 , C4-H(δ8. 03)和
C2 (δ163. 9) , C6 (δ149. 6) , C8 (δ144. 0) , C10 (δ108. 5) ,
C5 (δ96. 0)相关 ; C3-H (δ6. 20)和 C2 (δ163. 9) , C9
(δ137. 3 ) , C10 (δ108. 5) , C5 (δ96. 0 )相关 , C5-H
(δ6. 74)和 C7 (δ154. 5) , C6 (δ149. 6) , C9 (δ137. 3) ,
C10 (δ108. 5)相关。另外 , C5 (δ96. 0)和δ3. 93的甲氧
基氢相关 ,故相邻 ; C8 (δ144. )和δ3. 95的甲氧基氢
相关 ,故相邻 ; C7 (δ154. 5)和 δ3. 93的甲氧基氢相
关 ,故相邻。根据光谱解析经验可知 ,当两个甲氧基
和一个羟基在苯环上相邻排列时 ,处于中间位置上
甲氧基的碳和氢应位于低场 ,处于边位上甲氧基的
碳和氢应位于高场。综上所述 ,最后确定该化合物为
6, 7-二甲氧基-8-羟基香豆素。
晶Ⅳ: 黄色针状结晶 , mp 205℃～ 206℃。
FAB-M S显示其相对分子质量峰。 13 C-NMR谱显示
该化合物苷元为 370( M+ - H) , 208是去掉一个葡
·889·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
收稿日期: 2003-01-18基金项目:国家重点科技攻关项目 ( 99-929-01-24-8)作者简介:刘丽梅 ( 1963- ) ,女 ,哈尔滨人 ,副研究员 , 1988年毕业于黑龙江中医药大学药学院 ,获学士学位 ,主要从事中草药化学成分及制剂工艺研究。
萄糖的苷元部分有 10个碳 (δ163. 6, 147. 5, 146. 4,
145. 8, 144. 3, 133. 2, 113. 0, 112. 2, 106. 1, 56. 9) ,
δ163. 6是羰基碳信号 ;δ56. 9是甲氧基碳信号。糖部
分有 6个碳 (δ106. 1, 78. 4, 77. 8, 75. 5, 70. 9, 62. 2) ,
δ106. 1是端基碳信号。 1H-NM R谱显示该化合物苷
元部分有 3个氢 (δ7. 86, d, 1H, J= 9. 52 Hz; 6. 97,
s, 1H; 6. 23, d, 1H, J= 9. 34 Hz) ,糖部分端基氢为
δ4. 97, d, 1H, J= 7. 69 Hz。 苷元部分 1H-NM R,
13
C-NM R谱数据和秦皮素的 1H-NM R, 13 C-NM R谱
数据 [1 ]近似 ,晶Ⅳ的酸水解液中检出有秦皮素和葡
萄糖 ,可以确定晶Ⅳ是秦皮苷。晶Ⅳ的 1H-NM R,
13
C-NM R光谱数据见表 1。
表 1　晶Ⅲ ～ Ⅴ 的 1H-NMR , 13C-NMR数据 (CD3OD)
Table 1　 1H-NMR, 13C-NMR data of crystalⅢ - Ⅴ (CD3OD)
碳位 晶Ⅲ
13C-NM R 1H-NM R
晶Ⅳ苷元部分
13C-NM R 1H-NM R
晶Ⅳ糖部分
13C-NM R 1H-NM R
晶Ⅴ苷元部分
13C-NM R 1H-NM R
晶Ⅴ糖部分
13C-NM R 1H-NM R
1 　 　 　 　 　 106. 1 4. 97( d) 　 　 　 104. 3 4. 83( d)
2 　 163. 9 　 163. 6 75. 5 　 163. 6 74. 8
3 112. 8 6. 20( d) 113. 0 6. 23( d) 78. 4 113. 1 6. 20( d) 78. 5
4 140. 9 8. 03( d) 146. 4 7. 86( d) 70. 9 146. 0 7. 82( d) 71. 4
5 96. 0 6. 74( s) 106. 1 6. 97( s) 77. 8 116. 7 6. 80( s) 77. 5
6 149. 6 145. 8 62. 2 144. 4 62. 5
7 154. 5 147. 5 153. 2
8 144. 1 144. 3 104. 5
9 137. 3 133. 2 152. 5 7. 42( s)
10 108. 6 112. 2 112. 8
OCH3 61. 8 3. 95
57. 0 3. 93
　　晶Ⅴ : 白色针状结晶 , mp 204℃～ 206℃。
FAB-M S显示其相对分子质量为 340( M+ - H) ,
179是去掉一个葡萄糖苷元峰 ,硅胶薄层色谱显示
该化合物和秦皮甲素的 Rf值一致。 13 C-NM R谱显
示该化合物苷元部分有 9个碳 (δ163. 6, 153. 2,
152. 5, 146. 0, 144. 4, 116. 7, 113. 1, 112. 8, 104. 5) ,
δ163. 6是羰基碳信号 ;糖部分有 6个碳 (δ104. 3,
78. 5, 77. 5, 74. 8, 71. 4, 62. 5) ,δ104. 3是端基碳信
号。 1 H-NMR谱显示该化合物苷元部分有 4个氢
(δ7. 82, d, 1H, J= 9. 52 Hz; 7. 42, s, 1H; 6. 80, s,
1H; 6. 20, d, 1H, J= 9. 34 Hz) ,糖部分端基氢为
δ4. 83, d, 1H, J= 8. 97 Hz。以上数据和文献 [2 ]报道
的秦皮甲素的数据相同 ,故晶Ⅴ为秦皮甲素。晶Ⅴ的
1
H-NMR,
13
C-NMR光谱数据见表 1。
4　酸水解试验
4. 1　水解方法: 取晶Ⅳ 10 mg ,加 5%硫酸水溶液 5
mL,于沸水浴中加热 4 h,冷却 ,放置。
4. 2　苷元鉴定:酸水解液和秦皮素标准品点于同一
硅胶 -G薄层板上 ,用氯仿-甲醇 -甲酸 ( 6∶ 1∶ 0. 5)
展开 ,三氯化铁 -铁氰化钾显色 ,确定苷元为秦皮素。
4. 3　糖的鉴定:用径向纸色谱 ,酸水解液和葡萄糖
( Glu)及半乳糖 ( Gal)标准品点样 ,正丁醇 -苯 -吡啶-
水 ( 5∶ 1∶ 3∶ 3)展开 ,草酸 -苯胺显色 ,确定为葡
萄糖。
　　致谢: 军事医学科学院仪器测试中心代测核磁
共振光谱和质谱。
References:
[1 ]　 Liu L M , Chen L, Wang R H, et al . S tudies on ch emical
consti tuen ts of Qinpi [ J] . Chin Trad it Herb Drugs (中草
药 ) , 2001, 32( 12): 1073-1074.
[2 ]　 Chen D C. Handbook of Chem ical S tanda rd Substance in Chi-
nese Herbs (中药化学对照品工作手册 ) [M ]. Bei jing: China
M edico-Pharmaceutical Science and Tech nology Pub li shing
House, 1999.
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