全 文 ：表 3　染料木素原料药对小鼠睾丸精母细胞染色体畸变率的影响
Table 3　 Effect of genistein on spermatogonial chromosomal aberrat ion test in mice
组　别 剂量 / ( mg· kg- 1) 动物数 观察细胞数 /个 染色体畸变细胞数 /个 畸变率 /%
蒸馏水 　 - 5 500 9 　　 1. 80± 0. 84
染料木素 2 500 5 500 14 2. 80± 0. 84
原料药 1 250 5 500 14 2. 80± 0. 84
　 625 5 500 12 2. 40± 0. 55
CY 　 40 5 500 93 18. 6± 2. 07*
　　　　与溶剂对照组比较: * P < 0. 01
　　　　* P < 0. 01 vs cont rol group
4　讨论
　　本研究所选的 3项试验从基因和染色体水平反
映遗传物质受损伤情况 ,是国内外进行外来化合物
遗传毒理学方面安全性评价的常做实验。 每种体外
短期检测系统均会受到实验条件 (如有限的体外代
谢活化系统 )、实验设计、不同化合物的特殊性等因
素影响 ,使试验结果存在一定比例的假阴性或假阳
性的可能 ,任何一项遗传毒性试验中的阳性 /阴性结
果不能完全说明受试物是否具有致突变性 ,需结合
遗传毒性方面的多项检测试验结果全面考虑 ,以提
高对受试物是否具有诱变性及潜在致癌性评价的可
靠性 [8 ]。 因此 ,我们选择 Ames试验、小鼠骨髓嗜多
染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变
试验 3个测试系统来研究染料木素原料药的致突
变性。 染料木素原料药经处理不完全溶于水及常用
溶剂等特殊理化性质 ,影响体外培养细胞染色体畸
变试验结果的稳定性和可靠性 ,因此 ,本研究依据
《中药新药研究指南》 [9 ]要求选用哺乳动物生殖细胞
染色体畸变试验以保证评价结果的相对可靠。
上述研究覆盖体内与体外两种试验方法 ,并以微
生物和哺乳动物作为实验材料 ,从基因和染色体两种
水平所获得的结果均表明: 在本试验条件下 ,染料木
素原料药无致突变作用。为染料木素原料药进一步开
发和利用提供遗传毒理方面的安全性实验资料。
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山豆根碱抗炎作用的研究
谢世荣 ,黄彩云 ,黄胜英
(大连大学医学院 药理教研室 ,辽宁 大连　 116622)
摘　要: 目的　山豆根碱 ( dauricine, DRC)的抗炎作用研究。方法　采用组胺、醋酸对毛细血管通透性增高和二甲
苯引起小鼠的炎性水肿 ;棉球植入大鼠皮下组织致肉芽组织增生和角叉菜胶致大鼠后爪水肿 ,肾上腺内抗坏血酸
含量测定方法。结果　 DRC 50, 100 mg /kg对上述炎症模型与氢化可的松相似 ,均具有显著的抑制作用。肾上腺切
除的大鼠 ,也具有同样的抗炎作用。相同剂量的 DRC对正常大鼠的抗炎作用强于切除肾上腺大鼠。 DRC也降低肾
上腺内抗坏血酸含量。 结论　提示 DRC既有直接抗炎作用 ,又有兴奋垂体 -肾上腺皮质系统的间接抗炎作用。
·355·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
收稿日期: 2002-06-27作者简介:谢世荣 ( 1952— ) ,女 ,副教授 ,大连市药学会理事。
关键词: 山豆根碱 ;水肿 ;抗炎作用 ;毛细血管通透性
中图分类号: R286. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 04 0355 03
Anti-inflammatory effect of dauricine
XIE Shi-rong , HU ANG Cai-yun, HU ANG Sheng-ying
( Depa rtment o f Pharmacolog y, Medica l Co llege o f Dalian Univ ersity, Da lian 116622, China )
Key words: dauricine ( DRC) ; edema; anti-inflammato ry ef fect; capi llary permeabi li ty
　　北山豆根为防己科植物蝙蝠葛 Menispermum
dauricum DC. 干燥根茎 ,含有多种生物碱 ,从蝙蝠
葛中提得的活性成分为蝙蝠葛碱 (即山豆根碱 ) ,未
发现有关山豆根碱抗炎作用的文献报道 ,因此对山
豆根碱的抗炎作用进行了实验研究。
1　材料
1. 1　动物: SD大鼠 108只 ,体重 ( 212. 0± 21. 1)
g ,昆明种小鼠 120只 ,体重 ( 20. 5± 2. 3) g , ♀兼
用 ,由我校实验动物中心提供。
1. 2　药品: DRC为本室制得 ,纯度 94. 5% ,为淡黄
色粉末 ,水溶。氢化可的松 (cor tiso l)为上海信谊药
厂产品 ,磷酸组胺为上海第十制药厂产品 ,二甲磷酸
组胺为上海第十制药厂产品 ,二甲苯为北京化工厂
生产 ,伊文思蓝为上海新中化工厂产品 ,三氯醋酸
( AcCl3 )为广州化学试剂厂产品 ,角叉菜胶 ( car-
raseenin) 为英国 BDH公司产品。
2　方法与结果
2. 1　 DRC对血管通透性增高的影响
2. 1. 1　 DRC对皮肤毛细血管通透性增高的影
响 [1 ]:将 40只小鼠随机分成 4组 ,分别 sc DRC 50,
100 mg /kg, sc co rtisol 62. 5 mg /kg , sc等容量 N S
(生理盐水 ) , 30 min后 iv 0. 5% 伊文思蓝溶液 10
m L /kg , 1 min后腹部皮内注射 0. 1% 磷酸组胺 0. 1
m L, 20 min后处死 ,取腹部呈蓝色的皮肤 ,剪碎用
7∶ 3丙酮与 N S溶液 4 mL分 2次浸泡 ,每次 2 h,
合并浸液加适量丙酮与 NS溶液至 5 mL, 1 500 r /
min离心 10 min,取上清液于 590 nm比色 ,测定每
鼠皮肤浸液中染料量 ,结果见表 1。
2. 1. 2　 DRC对腹腔毛细血管通透性增高的影
响 [2 ]:将 40只小鼠随机分成 4组 ,分组及用药剂量
同 2. 1. 1项。1 h后 ,各组小鼠 iv 0. 5% 伊文思蓝生
理盐水溶液 10 mL /kg , ip 0. 6% AcCl3 0. 2 mL /只 ,
20 min后处死 ,剪开腹部皮肤肌肉 ,用 6 mL N S数
次冲洗腹腔 ,然后测定每鼠腹腔冲洗液染料量 ,结果
见表 1。DRC组与 N S组相比 ,对小鼠皮肤和腹腔毛
细血管通透性增高均具有非常显著的抑制作用 ,剂
量越大 ,作用越强。 DRC 100 mg /kg 与 co rtisol
62. 5 mg /kg效应相当。
表 1　 DRC对小鼠毛细血管通透性的影响 (x± s )
Table 1　 Ef fect of DRC on capillary
permeability in mice (x± s )
组别　 剂量
/ (mg· kg- 1)动物数
伊文思蓝 / (μg· kg- 1 )
皮肤　 腹腔　
NS - 10 1. 62± 0. 12 7. 02± 0. 5
DRC 50 10 1. 20± 0. 20* 5. 42± 0. 51*
100 10 0. 98± 0. 10* * 4. 88± 0. 40* * *
corti sol 62. 5 10 0. 69± 0. 41* * * 4. 02± 0. 32* * *
　　与 NS组相比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001 vs NS group
2. 2　 DRC对二甲苯所致小鼠耳壳炎症的影响: 将
40只小鼠随机分成 4组 ,分别 sc DRC 50, 100 mg /
kg , sc co rtisol 62. 5 mg /kg, sc等容量 N S, 30 min
后 ,参照二甲苯致炎法 [ 3] ,给小鼠右耳先滴 0. 03 m L
二甲苯 , 15 min后处死 ,用内径 8 mm打孔器从耳
壳取片。以右耳片重减去左耳片重 ,为右耳肿胀重
量 ,分别计算肿胀抑制率 ,结果见表 2。 DRC 50, 100
mg /kg对二甲苯诱发的小鼠耳壳炎症与 cor tiso l相
似 ,具有显著的抑制作用。
表 2　 DRC对二甲苯所致小鼠耳壳炎症的影响 (x± s )
Table 2　 Effect of DRC on ear inf lammat ion induced
by dimethylbenzene in mice (x± s)
组别 剂量 / ( mg· kg- 1 ) 动物数 抑制率 /%
NS 　　 - 10 　　　 -
DRC 　　　 50 10 　 30. 0± 3. 0*
100 10 55. 0± 5. 0* *
corti sol 62. 5 10 56. 1± 5. 1* *
　　与 NS组相比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs N S g rou p
2. 3　 DRC对大鼠足爪肿胀的影响
2. 3. 1　 DRC对正常大鼠足爪肿胀的影响:将 32只
大鼠随机均分为 4组 ,分别 ip DRC 50, 100 mg /
kg , sc cor ti so l 62. 5mg /kg , ip等容量 N S,测定每鼠
左后肢正常足爪容积 ,做好标记 , 30 min后左后足
爪 sc 0. 1% 角叉菜胶 0. 1 mL,致炎后每 1 h测定
左后足爪排出灌流液体积 1次 ,共测 5次。 以致炎
后足爪体积减去致炎前足爪体积 ,计算肿胀度 ,结果
见图 1-Ⅰ 。DRC和 N S对照组相比分别从给药后第
·356· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
2小时即有显著性抑制大鼠足爪肿胀作用。
2. 3. 2　正常和去肾上腺大鼠足爪肿胀作用的比较:
将 24只大鼠随机平均分成 3组 ,第 1、 2组摘除双
侧肾上腺 ,饲以 N S、糖水并自由取食 ,手术 5 d后 ,
第 1组 ip N S,第 2组 ip DRC 100 mg /kg,第 3组
为正常大鼠 , ip同样剂量的 DRC。给药 30 min后 ,
方法同前 2. 3. 1,结果见图 1-Ⅱ。正常大鼠、去肾上
腺大鼠与 NS对照组相比从第 2小时起均有非常显
著的抗炎作用 ,同样剂量 DRC正常大鼠的抗炎作
用显著强于去肾上腺大鼠。
时间 t /h
与生理盐水组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs N S g roup
A-生理盐水　 B-山豆根碱 50 mg /kg　 C-氢化可的松 62. 5 mg /
kg　 D-山豆根碱 100 mg /kg　 E-切除肾上腺大鼠给 NS　 F-切
除肾上腺大鼠给山豆根碱 100 mg /kg　 G-山豆根碱 100 mg /kg
A-N S　 B-50 mg /kg DRC　 C-62. 5 mg /kg Cortis ol　 D-100
mg /kg DRC　 E-ad renalectomized rat t reated w ith NS　 F-a-
drenalectomized rat t reated wi th 100 mg /kg DRC　 G-100 mg /
kg DRC
图 1　 DRC对大鼠足爪肿胀的影响
Fig. 1　 Ef fect of DRC on paw edema of rat
2. 4　 DRC对大鼠棉球肉芽增生的影响:将 40只大
鼠随机平均分成 4组 ,大鼠背部去毛消毒 ,沿中线
切开背部皮肤 ,左右两侧各埋入一个 30 mg重的灭
菌脱脂棉球 ,术后 2 h,分别 sc DRC 50, 100 mg /
kg , sc co rtisol 62. 5 mg /kg , sc等容量 N S为对照 ,
连续给药 7 d处死动物 ,剥出周围已包裹肉芽组织
的棉球 , 60℃ 烘干秤重 ,减去原棉球重量 ,即为肉
芽肿净重 ,结果见表 3。 DRC 100 mg /kg与 co rtisol
62. 5 mg /kg作用近似 ,与 N S对照组相比均对大鼠
炎性增生有显著抑制作用。
2. 5　 DRC对大鼠肾上腺内抗坏血酸含量的影响:
将 20只大鼠随机平均分为 4组 ,分别 ip DRC 50,
100 mg /kg , ip co rtisol 62. 5 mg /kg , ip等容量 N S,
给药后 2 h断头 ,取双侧肾上腺 ,制成匀浆测定抗坏
血酸含量。 50, 100 mg /kg DRC组与 N S对照组每
100 g 肾上腺内抗坏血酸含量分别为 ( 296. 1±
20. 3 ) , ( 287. 8± 14. 2) 与 ( 413. 3± 10. 94) mg,
DRC组肾上腺中抗坏血酸含量明显低于 N S对照
组 ( P < 0. 01)。
表 3　 DRC对大鼠棉球肉芽增生的影响 (x± s)
Table 3　 Ef fect of DRC on prolif eration of granuloma
induced by cotton ball ( x± s )
组别 剂量 / ( mg· kg- 1 ) 动物数 肉芽肿重 /mg
NS 　　　 - 10 　 243. 2± 23. 4
DRC 　　　 50 10 200. 8± 19. 9
100 10 162. 0± 16. 0*
Cortis ol 62. 5 10 166. 1± 16. 5*
　　与 NS组相比: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs N S group
3　讨论
　　本研究采用多种炎症模型研究 DRC的抗炎作
用 ,实验表明 DRC不仅对急性炎症的毛细血管通
透性增高、炎性渗出和组织水肿有抑制作用 ,而且对
炎症后期肉芽组织的增生也有抑制作用。实验还表
明使用 DRC后 ,大鼠肾上腺内抗坏血酸含量显著
降低 ,摘除大鼠双侧肾上腺仍具有抗炎作用 ,但使用
相同剂量 DRC抑制正常大鼠角叉菜胶性炎症显著
强于摘除双侧肾上腺大鼠。 提示 DRC既具有直接
抗炎作用 ,也具有通过兴奋垂体 -肾上腺皮质系统间
接发挥抗炎作用。
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