全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月·1385‘
了地方用药的需求。丹参不同产地的样本差异小，最
先聚在一起，其次为其白花变种，再次为与其亲缘最
近的南丹参。华鼠尾在经典分类中为Ser．Japoni—
cae，在陕西将根作丹参药用，与同为丹参组的云南
鼠尾草聚为一支，置信度为97的一支可认为是地
方用药中作丹参药用的一支。荔枝草为全草入药，民
间用于治疗跌打损伤、无名肿毒、流感等，不作丹参
药用，但荔枝草组与丹参组同属荔枝草亚属，聚为一
支。甘西鼠尾根入药，四川作秦艽用，云南丽江作丹
参用，呈圆柱锥形，数个根茎合着呈辫子状或扭曲
状，质松脆，与别种性状差异较大。三叶鼠尾草根茎
短，约1em，生须状根，形态、形状与别种差异较大，
也作丹参药用，蔓茎丹参根部性状与三叶鼠尾草相
近，但不作丹参药用，这3种单独为一支。NJ系统树
的分类基本兼顾了经典分类与地方用药的需要，具
有一定的系统学意义。但由于唇形科是一个高度进
化的类群，ITS序列分析仅仅反映了鼠尾草属植物
遗传背景的一个方面，因此仅根据ITS序列研究鼠
尾草属种系关系是不够全面的，还需结合其他
DNA分析手段作出更准确的结论。
致谢：江西省高安市药品监督管理局简洋辉、云
南省大理州药品检验所许华提供本实验所需样本。
References：
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不同产地毛脉酸模药材HPLC指纹图谱研究
王振月1，左月明1，康毅华1，李瑞明2，崔红花3
(1．黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨 150040；2．天津天士力制药股份有限公司，天津300,{02；
3．广州中医药大学中药学院，广东广州 510405)
摘 要：目的采用RP—HPLC(DAD)对不同产地毛脉酸模药材进行指纹图谱比较。方法用PlanetsilC18分析
柱，甲醇一0．1％磷酸水线性梯度洗脱，检测波长254nm，洗脱时间50min，体积流量1．0mI。／min，柱温35C，测定
了12个不同产地的毛脉酸模药材的HPI。C指纹图谱。结果方法学考察表明，本研究建立的分析方法有较好的重
现性；不同产地毛脉酸模药材共有峰面积的比值有一定的差异。结论本方法可用作毛脉酸模药材的具有专属性
的指纹图谱的建立。
关键词：毛脉酸模；指纹图谱；高效液相色谱；梯度洗脱法
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)09—1385—04
HPLCfingerprintofRumexgmelinifromdifferenthabitats
WANGZhen—yuel。ZUOYue—min91，KANGYi—hual，LIRui—min92，CUIHong—hua
3
(1．CollegeofPharmacy，HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine，Harbin150040，China；2．Tianjin
TaslyPharmaceuticalCo．，Ltd．，Tianjin300402，China；3．CollegeofChineseMateriaMedica，Guangzhou
UniversityofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou510405，China)
Abstract：ObjectiveTocomparetheHPI。CfingerprintofRumexgmelinifromdifferenthabitatsby
RP—HPLC(DAD)．MethodsInthispaper，12differentsamplesw restudied．Separationw sperformed
onanPlanetsiIC18column，withmobilephaseconsistingofmethanoland0．1％phosphoricacid-waterand
withgradientelutionattheflowrateof1．0mI。／min．TheUVdetectionwavelengthwas254nm，column
temperaturewas35‘C，andtheanalysistimewas50min．ResultsTheresultsshowedthatthismethod
hasagoodrepeatabilityandtheratioofcommonpeaks
7
areaofdifferentsampleshadomedifference．Con—
clusionThismethodcanbeusedtoestablishthechromatographicfingerprintofR．gmeliniwithhigh
specificity．
Keywords：RumexgmeliniTurcz．；fingerprint；HPI。C；gradientelution
收稿日期：2004—12-09
荛妻磊界：皇蒺胄答凳差考乌雾譬蔡曩爻j警罐i5硕6)士生导师，主要从事中药资源开发与生物技术研究。作者简介 王振月(1956一)，男，哈尔滨人，教授，硕士生导师，主要从事中药资源开发与生物技术研究。
Tel：(0451)82196254，82195025E—mail：wangzhenyue@163．com
万方数据
·1386· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月
毛脉酸模RumexgmeliniTurcz．为蓼科酸模
属多年生宿根草本植物，广泛分布于黑龙江省大、小
兴安岭及张广才岭等地区，是黑龙江省、吉林长白山
地区的重要药用植物资源，在民间常以根入药，对淋
病、上呼吸道感染、癣病和疮毒有确切疗效[1~3]。毛
脉酸模根中主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类和
酸模素等化合物，现已从毛脉酸模根中分离得到大
黄素、大黄酚、大黄素甲醚、白藜芦醇、白藜芦醇苷和
酸模素等多种成分[4~5]。按指纹图谱的目的即对原
料药材进行质控，要求对药材应固定品种、固定适宜
的药材采收地。故本实验主要对12个野生毛脉酸
模样品(采自黑龙江省各林区)进行指纹图谱的分
析和比较，可区分不同产地毛脉酸模药材质量的异
同，为毛脉酸模的鉴别和药材指纹图谱研究奠定
基础。
1仪器、试剂与试药
1．1仪器：美国Waters高效液相色谱仪(Waters
2695型泵，2996型二极管阵列检测器，Empower色
谱工作站)；色谱柱PlanetsilC，。分析柱(200mm×
4．6mm，5弘m)；Dikma微孔滤膜(o．45肛m)；瑞士
MettlerAE240电子天平。
1．2 试剂：甲醇为色谱纯(美国Dikma公司)；磷
酸为分析纯；水为重蒸水(自制)，并经0．45弘m水
系滤膜滤过。
1．3 对照品：白藜芦醇苷、白藜芦醇(Sigma公
司)，大黄素、大黄酚、大黄素甲醚(中国药品生物制
品检定所)，酸模素、大黄酚一1—0一口一D一葡萄糖苷从毛
脉酸模根中分离得到，经波谱分析鉴定结构，归一化
法计算其质量分数为98％以上。
1．4 药材：12个产地野生毛脉酸模样品(采自黑
龙江省各林区)，经笔者鉴定为蓼科酸模属植物毛脉
酸模RumexgmeliniTurcz．的干燥根及根茎。将上
述药材样品经低温干燥后，粉碎成粗粉(过80目
筛)，备用。药材具体来源见表1。
表1毛脉酸模的来源
Table1 SourceofR．gmelini
编号 样品 采收时问 编号 样品 采收时问
1 大兴安岭新林 2001—09 7 绥棱义气松 2002—09
2 大兴安岭加格达奇200109 8 尚志市帽儿山 2002—09
3 大兴安岭塔河 2001—09 9 伊春市翠峦 2003—09
4 桃山跃进 2002—09lo 伊春市红星区 2003—09
5 桃山神树 2002—0911 伊春市上甘岭 2003—09
6 绥棱北股流 2002—0912 伊春市新青桦林 2003—09
2实验方法
2．1 色谱条件的选择：分别以甲醇一水、乙腈一水、甲
醇一水一磷酸的不同比例及不同梯度进行试验，记录
不同波长(220、254、290、310、330nm)的色谱图。
样品2h图谱显示，50min后无特征峰出现。结果
表明，用甲醇一0．1％磷酸水线性梯度洗脱，检测波
长254nm，洗脱时间50rain，体积流量1．0mE／
min，柱温35vC为佳。
2．2供试品溶液的制备：称取不同产地毛脉酸模药
材样品各0．25g，置索氏提取器内加95％乙醇65
mL提取4h，滤过，蒸干。残渣用25mL甲醇溶解
并定容至刻度，此溶液再过0．45肚m的微孔滤膜，
弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。
2．3对照品溶液的制备：分别精密称取白藜芦醇苷、
白藜芦醇、酸模素、大黄酚苷、大黄素、大黄酚和大黄
素甲醚对照品适量，用甲醇溶解制成对照品溶液。
2．4方法学考察：为了考察分析方法的可靠性，以
2号(采自大兴安岭加格达奇)药材为例，对仪器精
密度、方法重现性以及稳定性作了相应考察。
2．4．1精密度试验：取同一供试品溶液，连续进样
5次，其相对保留时间RSD小于3％，主要共有峰
面积的RSD不超过5％。
2．4．2重现性试验：取同一产地供试品5份，分别
按供试品溶液的制备方法制备并测定，其相对保留
时间RSD小于3％，主要共有峰面积的RSD不超
过5％。
2．4．3稳定性试验：取同一供试品溶液，分别在0、
3、6、9、12h检测，其相对保留时间RSD小于3％，
主要共有峰面积的RSD不超过5％，说明供试品溶
液至少在12h内稳定。
2．5指纹图谱的建立
2．5．1指纹图谱的制备：分别精密吸取对照品和供
试品溶液各20弘L注入液相色谱仪，进样，测定，记
录50min色谱图，即得。
2．5．2共有峰的确定：测定了12个不同产地毛脉
酸模药材样品，比较其色谱图，确定共有峰为30
个。以10号峰(18．21rain)为内参比峰，以其各色
谱峰对内参比峰的相对保留时间和相对峰面积定
性，测定各峰相对保留时间RSD<3％，共有指纹峰
的峰面积之和大于95％。典型色谱图见图1一A。
2．5．3共有峰的归属：取对照品溶液各20肛L注
入液相色谱仪，在上述色谱条件下分别进样，对比各
色谱峰的紫外吸收光谱和相对保留时间可知，指纹
谱中5号峰为白藜芦醇苷(8．11rain)，7号峰为白
藜芦醇(12．80rain)，15号峰为大黄酚苷(22．56
min)，26号峰为酸模素(29．42min)，28号峰为大
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月·1387·
黄素(38．91min)，29号峰为大黄酚(41．15min)，
30号峰为大黄素甲醚(44．43min)。
2．6 系统聚类分析：系统聚类分析是一种无管理、
无指导的模式识别方法。依据所测样品的色谱指纹
图谱特征，对样品进行分类。本研究应用SPSS软
件，采用组间距离法，以向量余弦相似性作为样品的
测度。12个样品大致分为两类，第1类为1、4、8号
样品，第2类为其余样品。聚类谱系图见图2。
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A～大兴安岭塔河B大兴安岭新林C桃山跃进D一尚志市帽儿山
A—Daxing’anling—TaheB—Daxing’anling—XinlinC Taoshan—YuejinDSha gzhi—Mao’ershan
图1不同产地毛脉酸模HPLC指纹图谱
Fig．1HPLCfingerprintofR．gemlinifromdifferenthabitats
图2毛脉酸模聚类树状图
Fig．2DendrogramofR．g eliniclusteringanalysis
2．7相似度分析：根据聚类分析结果，以第2类毛
脉酸模(2、3、5、6、7、9、10、11、12号)药材的9批样
品的色谱指纹图谱为基础，建立共有模式。通过中药
色谱指纹图谱相似度评价系统软件(国家药典委员
会)，计算各样品与共有模式问的相似度，见表2、3，
组成共有模式的色谱叠加图见图3。而第1类1、4、
8号样品的色谱图(见图1)，与共有模式的指纹图谱
比较，各共有峰基本都存在，但各色谱峰之间的相对
峰面积不同，由此可以看出它们之间的内在质量存
在一定的差异。所以，指纹图谱正是通过这种内在的
差异，达到控制不同批次、不同产地的药材。
表2建立共有模式毛脉酸模样品相似度数据
Table2 SimilarityofR．gmelinisamplesinmutualmode
编号 相似度 编号 相似度
2 0．92 9 0．96
3 0．97 10 0．96
5 0．98 11 0．95
6 0．99 12 0．99
7 0．99
表3与共有模式比较的毛脉酸模样品的相似度数据
Table3 SimilarityofR．gmelinisamplescompared
withmutualmode
编号 相似度
3讨论
3．I 通过对一系列提取方法(超声、索氏、回流提
取)、不同的提取溶液和提取时间的考察以及结合有
关文献确定了以上供试品溶液的制备方法。
3．2采用二级管阵列检测器对指纹图谱的检测波
长进行了选择，从190～400nm内先选出220、254、
290、310、330rlrll分离度较好的波长，分析比较各波
c
如L捞．．．。。。。。。。。。。处丝●L
万方数据
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0．00，034 |6 7 25．ul j3 4 4160 50 2
s1一大兴安岭加格达奇S2一大兴安岭塔河 S3一桃山神树S4一
绥棱北股流s5一绥棱义气松s6一伊春市翠峦 s7一伊春市红
星s8一伊春市上甘岭s9一伊春市新青桦林
S1一Daxing’anling—JiagedaqiS2一Daxing’anling-Tahe
S3一Taoshan—Shenshu4一Suileng—Beiguliu
S5Suileng—YiqisongS6一Yiehun—Cuiluan
S7一YichunHo gxingS8YichunShangganling
S9一Yichun—Xinqinghualin
图3毛脉酸模样品HPLC指纹图谱共有模式图
Fig．3ChromatogramofmutualodeofHPLC
fingerprintofR．gmelinisamples
长下指纹图谱，发现检测波长为254nm时色谱图
所包含的信息量最大，且各色谱峰分离较好。
3．3 采用HPI。C梯度洗脱法对毛脉酸模药材进行
了指纹图谱的研究，实验证明，该方法可操作性强、重
现性好，可作为毛脉酸模药材指纹图谱研究的基础。
3．4 按本方法建立的由9批药材构成的共有模式
图和1、4、8号样品色谱图相比较，构成共有模式9
批样品的相似度较高，均在90％以上，而1、4、8号
样品的相似度均低于90％。从图1可以看出，两类
毛脉酸模样品差异主要集中在10、15、26、28、29号
峰的峰形及其相对高度上，构成共有模式样品的色
谱指纹图谱中10、15号峰明显较高，经研究是蒽醌
苷类成分。在第1类的4号(桃山跃进)、8号(尚志
市帽儿山)样品中15、26、28、29号峰较高，其中28
号峰(大黄素)、29号峰(大黄酚)为蒽醌苷元类成
分；在l号(大兴安岭新林)样品中26、28、29号峰
的峰位高，其中26号峰(酸模素)的相对高度较其
他样品均高，可能与1号样品采于水湿洼地有关，
故怀疑酸模素的积累可能受水分的影响较大，具体
影响过程有待进一步研究。
3．5本实验先对所有样品进行聚类分析，然后选择
好的一类样品来建立共有模式，并将整个色谱图导人
中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，生成共有模
式，计算相似度。结果表明，相似度分析结果与系统聚
类结果一致，两种方法得到了相互验证。对于待测样
品，只需测得该样品的色谱指纹图谱，计算样品相似
度，即可评价其质量。本研究仅收集了12个产地的毛
脉酸模药材，如能收集更多，采用分析方法获取更多
化学信息，并以代表临床药效的药理实验进行验证，
则对毛脉酸模的质量评价会更加完善和科学。
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不同树龄邳州银杏叶在不同采收期指纹图谱比较
鞠建明1，段金廒1，钱大玮1，朱玲英1，张绍君2，郭巧生3
(1．江苏省中医药研究院江苏省现代中药制剂工程技术中心，江苏南京210028；
2．江苏银杏生化集团股份有限公司，江苏邳州 221300；3．南京农业大学，江苏南京210095)
摘要：目的 比较江苏道地药材邳州银杏叶在不同采收期的指纹图谱。方法采用HPLC—DAD方法。色谱条件
为：色谱柱：AlhimaC18柱(250Film×4．6nlm，5t』rn)；流动相：乙腈(A)一0．5％磷酸水(B)进行梯度洗脱，15％～
27％A(o～40rain)，27％～15％A(40～60min)，15％A(60～75rain)；体积流量：1mL／min；柱温：20C；检测
波长：36011113．。并应用计算机辅助相似性评价系统对银杏叶指纹图谱进行了相似度分析。结果同一树龄不同采
收期的银杏叶中，二至四年生银杏叶分别在不同采收期指纹图谱相似度较高(>o．90)；五年生和六年生银杏时分
收稿日期：2004—11—12
基金项目：国家科技部“中药现代化研究与产业化开发”资助项目(99—92901—01AE99206)
作者简介：鞠建明(1972一)，男，江苏泰兴人，硕士，助理研究员，主要从事中药质量标准研究及制剂工艺研究。
Tel：(025)85639640E—mail：jjm405@sina．corn
万方数据
不同产地毛脉酸模药材HPLC指纹图谱研究
作者： 王振月， 左月明， 康毅华， 李瑞明， 崔红花， WANG Zhen-yue， ZUO Yue-ming，
KANG Yi-hua， LI Rui-ming， CUI Hong-hua
作者单位： 王振月,左月明,康毅华,WANG Zhen-yue,ZUO Yue-ming,KANG Yi-hua(黑龙江中医药大学药学
院,黑龙江,哈尔滨,150040)， 李瑞明,LI Rui-ming(天津天士力制药股份有限公司,天津
,300402)， 崔红花,CUI Hong-hua(广州中医药大学,中药学院,广东,广州,510405)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(9)
被引用次数： 1次

参考文献(5条)
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