全 文 ：品应蔽光、冷藏。
2. 9　重现性试验;取同一批号样品 5 份,分别制备
供试品溶液, 各吸取 10
L 进行测定,阿魏酸含量
的 RSD= 0. 45%。
2. 10　加样回收率试验:精密称取已知阿魏酸含量
的样品 5 份,分别加入一定量的阿魏酸对照品, 依
法测定,结果平均回收率为 98. 3% , RSD = 0. 90%。
2. 11　样品的测定: 按上述测定法, 对 10 批样品进
行了阿魏酸的含量测定,结果见表 2。
表 2　生化软胶囊中阿魏酸含量测定结果 ( n= 3)
Table 2　Content of f erulic acid in 10 batch
of Shenghua Sof t Capsule ( n= 3)
批号 阿魏酸含量/ (m g·粒- 1)
001016 0. 202 1
001108 0. 200 3
001109 0. 180 0
001113 0. 184 1
001219 0. 179 6
001220 0. 187 7
001225 0. 156 6
001226 0. 181 0
001227 0. 205 2
001228 0. 181 0
3　讨论
3. 1　流动相的选择: 曾参考有关文献 [ 1～3]采用甲
醇-水 ( 4%醋酸) 及乙腈-水乙酸 ( 25∶75∶1) 作为
流动相。实验证明,以本实验所采用流动相分离效果
最好。
3. 2　提取方法的选择:曾参考文献[ 1, 4]采用超声提
取法、萃取法等方法, 经加样回收率试验证明, 以本
实验中所用提取方法最好。
3. 3　经稳定性试验证明,虽然样品溶液在室温光照
和加热的情况下不稳定, 但是样品溶液配制好后, 避
光、冷藏, 8 h 内进行测定基本不受影响。因此,本方
法可以作为控制生化软胶囊的质量标准。
References:
[1] 　Zhang L K, Chen X W, Zou A Q. Determination of ferul ic
acid and ligus t razh ine in com pound for mula preparation s by
HPLC [ J] . Chin T radi t H erb Drug s (中草药) , 1996, 27( 4) :
213-214.
[2] 　Wang H J, S hen X, Yang J , et al. Determinat ion of ferul ic
acid in Dan ggui Buxue Decoction by HPLC [ J] . Ch in J Exp
T radi t Med F orm (中国实验方剂学杂志) , 1998, 4 ( 5) : 9-10.
[ 3] 　Yang N L, Yang W Y, Yan g Z H . Determinat ion of ferul ic
acid in S henghuatang Oral Liqu id by HPLC [ J] . C hin J H osp
Pharm (中国医院药学杂志) , 1999, 19( 2) : 88-89.
[4] 　Yu J , Jiang Y Y, Zhan g X. Determin at ion of ferul ic acid in
Danggu i Inject ion by H PLC [ J ] . J A nhui Coll Tr adit Chin
Med (安徽中医学院学报) , 1999, 18( 5) : 67-68.
HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中 20 ( S) -人参皂苷 Rg3的含量
孟　勤1 ,尹建元1,赵俊艳2,梁　迪1

( 1. 吉林大学药学院,吉林 长春　130021; 2. 吉林大学制药厂,吉林 长春　130021)
　　西洋参 Panax quinquef ol ium L.为五加科人参
属植物,根部入药。1998年尹建元等从野山参茎叶
皂苷中首次分离得到人参皂苷 Rg 3[ 1]。2002年孟勤
等从西洋参叶中首次分离得到人参皂苷 Rg 3[ 2]。人
参皂苷Rg3具有明显抑制乙酰胆碱刺激牛肾上腺素
嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的作用[ 3] , 并且人参皂苷
Rg 3毒性小,生物活性强,是很具有开发价值的天然
活性成分,但人参皂苷 Rg 3在自然界存在甚少。为了
获得大量人参皂苷 Rg3 ,我们采用西洋参茎叶提纯
总皂苷并制备二醇组皂苷[ 4] ,再将二醇组皂苷进行
降解制备人参皂苷 Rg3。本实验采用 HPLC 法测定
了西洋参降解物中 20( S ) -人参皂苷 Rg3的含量。
1　仪器与试药
美国Water s 600E 双泵头柱塞往复泵, W aters
2478双波长紫外检测器, chromstat ion数据处理系
统; 20 ( S ) -人参皂苷 Rg3 对照品由本室自制, 经高
效液相色谱归一化法测定其含量为 98%以上。甲醇
为色谱纯,水为双蒸水,其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　总皂苷降解物的制备: 二醇组皂苷在 150 ℃,
pH 值为 12的条件下, 水解 3 h后,得西洋参茎叶皂
苷降解物。按以上条件制备 3批西洋参茎叶皂苷降
解物,批号分别为 010429, 010608, 010715。
2. 2　色谱条件: 色谱柱为惠普产 Zor bax ODS 柱
( 4. 6 mm×250 mm , 5
m) ;流动相: 甲醇-水( 84∶
16) ;流速: 1. 0 mL/ min; 柱温: 40 ℃;检测波长: 203
nm。在此条件下 20 ( S ) -人参皂苷 Rg3与其它峰分
开(图 1)。
·525·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 6 期 2003年 6月

收稿日期: 2002-04-24
* -20 ( S ) -人参皂苷 Rg3
* -20 ( S ) -gins enos ide Rg3
图 1　溶剂峰(A)、20 ( S) -人参皂苷 Rg3( B)和西洋参总皂苷降解物( C)的色谱图
Fig. 1　HPLC chromatograms of solvent peak (A) , 20 ( S) -ginsenoside Rg3(B) and degradation
products of ginsenoside in P . quinquefolium(C)
2. 3　测定波长的选择: 取 20 ( S ) -人参皂苷 Rg 3对
照品适量,在紫外分光光度计 190～300 nm 波长下
扫描。结果 20 ( S ) -人参皂苷 Rg 3在 203 nm 波长处
有最大吸收, 故选择 203 nm 作为测定波长。
2. 4　线性关系的考察: 精密称取 20 ( S ) -人参皂苷
Rg 3 3. 0 mg 置于 10 mL 的量瓶中, 以甲醇配制成
0. 3 mg / mL 的溶液, 放入超声波清洗器中超声 10
min。精密吸取对照品溶液 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12
L 注
入液相色谱仪中, 按上述色谱条件测定,以进样量为
横坐标,峰面积积分值为纵坐标,计算得回归方程为
Y= 126 545X- 33 263, r= 0. 999 9, 线性范围为
0. 3～3. 6
g。
2. 5　稳定性试验: 精密吸取同一样品溶液 5
L,每
间隔 1 h 进样一次, 共进样 6次, 测得 20 ( S ) -人参
皂苷Rg3 峰面积的结果表明样品溶液在 5 h 内基本
稳定。
2. 6　精密度试验: 精密吸取同一样品溶液 5
L,重
复进样 6 次, 测得 20 ( S ) -人参皂苷 Rg3 峰面积的
RSD 为 0. 97%。
2. 7　重现性试验: 精密吸取同一批样品溶液 5份,
依次平行测定6次,结果 20 ( S) -人参皂苷 Rg 3峰面
积 RSD 为 1. 82%。
2. 8　回收率试验:精密称取已测得含量的同一批样
品 10 mg ,分别加入对照品适量, 依法测定,计算回
收率。其平均回收率为 99. 58%, RSD= 0. 49%。
2. 9　样品测定:精密称取降解物 20 mg , 置 10 mL
量瓶中, 用甲醇溶解, 放入超声波清洗器中超声 10
min 后稀释至刻度, 摇匀, 用针筒式微孔过滤器过
滤,取续滤液为供试品。吸取 5
L 注入高效液相色
谱仪中进行分析,结果 3批样品中 20 ( S ) -人参皂苷
Rg3 的含量分别为 16. 28% , 16. 43% , 16. 35%( n=
5)。
3　讨论
3. 1　本实验试用过的流动相有: 甲醇-水-磷酸
( 87∶13∶0. 2) , 甲醇-水-磷酸( 85∶15∶0. 2) , 甲醇
-水( 84∶16) ,最终选用以甲醇-水( 84∶16)为流动
相,结果 20 ( S ) -人参皂苷 Rg 3峰与其他峰完全达到
基线分离,定量结果准确。
3. 2　在降解制备20 ( S ) -人参皂苷 Rg 3的过程中发
现, 制备条件(如压力、温度及 pH 值)的变化对 20
( S ) -人参皂苷 Rg 3在其降解物中含量有较大的影
响, 故只有在制备条件一致情况下,方能制得相同
20 ( S) -人参皂苷 Rg 3含量的西洋参皂苷降解物。
3. 3　由于 20 ( S) -人参皂苷Rg3在甲醇中的溶解度
相对较小,对照品及样品在加入少量甲醇后, 须经超
声波清洗器超声 10 min, 使其充分溶解, 然后用甲
醇定溶,以免影响含量测定的准确度。
References:
[1]　Yin J Y, L i J , Wei Y D. Isolat ion an d ident if icat ion of
s aponin s in stems and leaves of w ild P anax G inseng [ J] . Chin
T rad it H er b Drug s (中草药) , 1998, 29( 11) : 731-732.
[2]　M eng Q, Yin J Y, Zh ao J Y, et al. Is olat ion and ident if icat ion
of t rit enp enoids saponins in stems and leaves of Panax quin-
quef olium L. [ J] . Chin Phar m J (中国药学杂志) , 2002, 37
( 3) : 175-177.
[3]　T achik aw a E, Kudo K, Nunokaw a M, et al . Characteriza-
t ion of gins enoside Rg3 inhib it ion of catecholamine s ecret ion in
bovine adrenal chromaf fin cells [ J] . B iochem P harmacol ,
2001, 62( 7) : 943-951.
[4]　Chen Y P, Meng Q, S on g C C, et al . Preparat ion of 20 ( S ) -
protopanax adiol s aponin s and 20 ( S ) -ginsenoside Rh 2 f rom 20
( S ) -protopanaxadiol saponins [ J ] . Chin Phar m J (中国药学
杂志) , 1997, 32( 5) : 273-275.
·526· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 6 期 2003年 6月