全 文 ：RP-HPLC 法测定大蓟中柳穿鱼叶苷的含量
符　玲1, 龚千锋13 , 吕武清2, 杨武亮1, 赖学文1, 曹　君1Ξ
(11 江西中医学院, 江西 南昌　330006; 21 江西省中药研究所, 江西 南昌　330077)
　　大蓟为菊科植物蓟 C irsium jap on icum DC. 干
燥地上部分或根, 具有凉血止血、祛瘀消痈的功
能[1 ]。大蓟中含有多种化学成分: 柳穿鱼叶苷、蒙花
苷、绿原酸、菊糖、Β2谷甾醇等[2 ] , 其中的黄酮类化合
物柳穿鱼叶苷为其中的主要止血活性成分[3 ] , 大蓟
各地用药品种非常复杂, 市面上的混用品多为飞廉、
小蓟等。曾有报道[4 ]用聚酰胺薄层扫描的方法测定
大蓟中柳穿鱼叶苷的含量, 以此控制该药材的质量,
本实验首次用R P2H PL C 法测定大蓟中柳穿鱼叶苷
的含量。
1　仪器、试剂和样品
W aters 510 高效液相色谱仪, 二极管阵列检测
器,W aters 510 色谱工作站; A gilien t 1100 液相色
谱仪, 紫外—可见检测器、A gilien t 1100 色谱工作
站: M ET T ER A E240 电子天平; 乙腈 (色谱纯) , 双
蒸水 (自制) , 其余试剂为分析纯; 柳穿鱼叶苷对照品
(自制, 纯度达 99% 以上) ; 大蓟药材分别购自江西、
江苏、浙江, 经本院药用植物教研室赖学文副教授鉴
定为大蓟C irsium jap on icum DC1
2　方法与结果
211　色谱条件: H ypersil C 18色谱柱 (200 mm ×4. 6
mm , 5 Λm ) ; 流动相为乙腈20. 1% 磷酸 (21∶79) ; 体
积流量: 1. 0 mL öm in; 柱温: 30 ℃; 检测波长: 330
nm。理论塔板数按柳穿鱼叶苷峰计算不低于 5 000, 分
离度大于 1. 5, 其对照品与样品的H PL C 图见图 1。
图 1　柳穿鱼叶苷 (A)和大蓟样品 (B)的 HPLC 图谱
F ig. 1　HPLC chromatogram s of pectol inar in (A)
and C1 j ap on icum sample (B)
212　供试品溶液的制备: 取大蓟药材粉末(40 目) 0. 5
g, 精密称定, 置 100 mL 圆底烧瓶中, 精密加入 70%
乙醇溶液 100 mL , 称定质量, 回流提取 1 h 后, 用
70% 乙醇补足减失的质量, 滤过, 即得供试品溶液。
213　标准曲线制备: 精密称取柳穿鱼叶苷对照品
7. 19 m g, 置于 100 mL 量瓶中, 加入 70% 乙醇溶解
并稀释至刻度, 再精密吸取此溶液 1、3、5、7、9 mL
置于 10 mL 量瓶中, 用 70% 乙醇稀释至刻度, 分别
吸取各对照品 10 ΛL , 注入液相色谱仪, 以峰面积 Y
为纵坐标, 对照品溶液质量浓度 X 为横坐标, 进行
线性回归, 得回归方程为: Y = 2 497. 304 X + 1. 589
(r= 0. 999 5) , 线性范围为 7. 19～ 71. 9 ΛgömL。
214　精密度试验: 取对照品溶液 ( 0. 0719 m gö
mL ) , 重复进样 5 次, 测得其峰面积的 R SD 为
0. 71% ; 按照 2. 2 项下方法制备大蓟供试品溶液, 重
复进样 5 次, 测得其峰面积值的R SD 为 0. 72%。
215　稳定性试验: 按照 2. 2 项下方法制备大蓟供试
液, 每隔 1 h 测定一次柳穿鱼叶苷峰面积, 连续考察
4 h, 结果供试品溶液在 4 h 内稳定, 其 R SD 为
0. 54%。
216　重现性实验: 精密称取同一批大蓟样品各
0. 5 g, 6 份, 按照 2. 2 项下方法制备大蓟供试液, 精
密吸取各供试品溶液 10 ΛL , 注入液相色谱仪, 测得
R SD 为 2. 19%。
217　加样回收率试验: 分别精密称取大蓟样品
0. 15 g, 5 份, 加入一定量的对照品, 按 2. 2 项下方
法制备并测定含量, 计算回收率。柳穿鱼叶苷的平均
回收率为 100. 42% , R SD 为 2. 86% (n= 5)。
218　样品制备及测定: 取大蓟样品 0. 5 g, 6 份, 精
密称定, 按 2. 2 项下方法操作, 即得各供试品溶液,
精密吸取各供试品溶液 10 ΛL , 注入液相色谱仪, 测
定结果见表 1。
3　讨论
311　柳穿鱼叶苷的分子中连有两个糖, 用一般的溶
剂如甲醇、乙醇以及甲酰胺溶解, 均不理想, 考虑黄
酮类成分的溶解性, 故最后选定用 70% 乙醇溶解,
·6031· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004204225
基金项目: 国家“十五”科技攻关课题 (30 味中药饮片炮制规范化研究, 编号: 2001BA 701A 11)3 通讯作者　T el: (0791) 7118852　E2m ail: Gongqf2002@ 163. com
表 1　样品的含量测定结果 (n= 2)
Table 1　Results of samples (n= 2)
购买地 柳穿鱼叶苷ö(m g·mL - 1)
樟树 8. 49
江苏 4. 44
浙江 1. 59
效果较好。
312　提取方法选择: 采用水浴回流、超声提取、索氏
提取 3 种提取方法测得柳穿鱼叶苷的质量分数分别
为 1. 77%、1. 37%、1. 19% , 结果表明回流提取的效
果最好, 故提取方法定为回流提取。
313　提取溶剂的选择: 70% 乙醇、纯甲醇、70% 甲醇
3 种提取溶剂提取的柳穿鱼叶苷的质量分数分别为
1. 44%、1. 29%、1. 34% , 结果以 70% 乙醇溶液提取
效果最好, 故提取溶剂定为 70% 乙醇溶液。
314　提取时间的选择: 用 70% 乙醇提取样品, 分别测
定了 0. 5、1、1. 5 h 3 种供试液中柳穿鱼叶苷质量分数
分别为 1. 69%、2. 01%、2. 17% , 结果表明提取 1 h 和
提取 1. 5 h 的结果相差不大, 故提取时间定为 1 h。
315　提取溶剂用量的选择: 用 70% 乙醇 70、100、
120 mL 提取样品得 3 种供试液的质量分数分别为
2. 22%、2. 43%、2. 49% , 结果表明提取溶剂的用量
为 100 和 120 mL 没有显著性差异, 故提取溶剂用
量定为 100 mL。
316　最初采用石油醚先对大蓟进行脱脂处理, 再用
70% 乙醇提取, 以减少其他成分的干扰和把被测成
分提取完全, 但是从实验结果看大蓟中的脂溶性成
分对测定结果影响很小, 预先未脱脂处理的和脱脂
处理过的样品液结果相比, 其成分和含量都相同。因
此, 省去石油醚脱脂这一步, 直接采用 70% 乙醇为
溶剂进行回流提取, 以简便操作。
317　从几个购买地大蓟中的柳穿鱼叶苷的含量来
看, 不同购买地的药材差别很大。考虑可能的因素有
产地、加工、采用季节、贮存时间和方式有关。
References:
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by TL C scann ing [J ]1 Ch in J P harm A na l (药物分析杂志) ,
1994, 14 (6) : 392401
南葶苈子薄层色谱鉴别法的建立
王爱芹, 王秀坤3 , 崔翔宇, 赵海誉Ξ
(北京中医药大学中药学院 中药鉴定教研室, 北京　100102)
　　葶苈子为常用中药, 具有泻肺平喘、利水消肿之
功效。主要用于痰涎壅盛、喘咳不得平卧、水肿、悬饮、
胸腹积水、小便不利等。《中华人民共和国药典》2000
年版[1 ]记载葶苈子来源于十字花科植物独行菜L ep 2
id ium ap eta lum W illd1 和播娘蒿D escu ra in ia sop h ia
(L 1) W ebb ex P ran t l 的干燥成熟种子, 前者称为
“北葶苈子”、后者称为“南葶苈子”, 但葶苈子的鉴别
仅记载了葶苈子的性状鉴别、显微鉴别和膨胀度的测
定。文献报道有葶苈子的TL C 鉴别[2 ] , 但是无指标成
分作对照, 根据南葶苈子的临床疗效而设计的哮喘呼
吸道重要炎症介质2血小板激活因子 (PA F ) 药理筛选
实验表明, 南葶苈子总黄酮成分为其有效部位。经系
统的化学研究发现, 南葶苈子黄酮成分是以槲皮素、
山柰酚及异鼠李素为基本苷元的系列黄酮苷类成分,
其中以槲皮素232O 2Β2D 2葡萄糖272O 2Β2D 2龙胆双糖
苷的含量最高, 特征性强, 槲皮素抑制 PA F 诱发的家
兔血小板聚集及多形核粒细胞聚集及释放、为 PA F
受体竞争性拮抗剂已有报道[3 ]。临床及药理实验证
明: 该类成分具有祛痰、止咳、平喘作用, 并具有舒张
支气管平滑肌、促进气管纤毛运动、降低毛细血管通
透性和脆性、扩张冠状动脉、抗炎、抗过敏、抗癌等多
种药理作用[3, 4 ] , 故可以认为槲皮素232O 2Β2D 2葡萄糖2
72O 2Β2D 2龙胆双糖苷可以部分代表南葶苈子的药
效。为此, 本研究以自制槲皮素232O 2Β2D 2葡萄糖272
O 2Β2D 2龙胆双糖苷为对照品, 建立了南葶苈子的薄
层色谱鉴别法, 方法具有简便、准确、可靠等优点。
·7031·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004202219
基金项目: 国家重点科技项目 (公关)计划 (992929201229) ; 国家自然科学基金资助课题 (30371776)
作者简介: 王爱芹 (1963—) , 女, 山东莱芜市人, 医学硕士, 主要从事中药专业的教学及天然药物的研究工作, 现工作于北京中医药学校
中药教研组。　T el: (010) 63581925- 8014　E2m ail: w angaiqin lw @yhoo. com. cn3 通讯作者　北京中医药大学中药学院中药鉴定教研室