全 文 ：T PPS4 in scavenging oxygen free radicals and hydrogen perox2
ide [J ]1 A cta U n iv M ed T ongj i (同济医科大学学报) , 1997,
26 (5) : 34423471
[ 5 ]　L iang F Z, D u M , Ren J C, et a l. Syn thesis and catalytic ac2
t ivity of m im etic enzym e of salicylaldelye222am ino2phenyl2 th i2
azo le and its comp lexes [J ]1 Ch in J Inorg Chem (无机化学学 报) , 1999, 5 (3) : 39323961[ 6 ]　M a X Y, W u Y H , D ing L , et a l. SeGPX activity of o rgano se2len ium 2con tain ing cyclodex trins and their scavenging effects on·OH [J ]1 Chem J Ch in U n iv (高等学校化学学报) , 1999, 20(8) : 1163211671
RP-HPLC 法测定酸枣仁汤中棘苷和阿魏酸的含量
李玉娟, 毕开顺Ξ
(沈阳药科大学药学院, 辽宁 沈阳　110016)
摘　要: 目的　建立测定酸枣仁汤中棘苷和阿魏酸含量的 R P2H PL C 分析方法。方法　色谱柱: H ypersil C18 (200
mm ×416 mm , 5 Λm ) , 棘苷流动相为乙腈21% 冰醋酸水溶液 (17∶83) , 检测波长 334 nm ; 阿魏酸流动相为乙腈21%
冰醋酸水溶液 (16∶84) , 检测波长 320 nm , 内标物为对羟基苯甲醛。结果　棘苷和阿魏酸分别在 01960～ 13144 Λgö
mL (r= 01999 8) 和 2104～ 2712 ΛgömL ( r= 01999 7) 与峰面积线性关系良好。平均回收率分别为 9814% 和
9818% , R SD 分别为 215% 和 218%。结论　本法操作简便、快速、准确, 可用于酸枣仁汤中棘苷和阿魏酸的含量测定。
关键词: 酸枣仁汤; 棘苷; 阿魏酸; 高效液相色谱
中图分类号: R 286106　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 07 0754 03
D eterm ina tion of sp inosin and ferul ic ac id in Suanzaoren D ecoction by RP-HPLC
L I Yu2juan, B I Kai2shun
(Schoo l of Pharm acy, Shenyang Pharm aceu tical U niversity, Shenyang 110016, Ch ina)
Abstract: Object　To develop an R P2H PL C m ethod fo r determ inat ion of sp ino sin and feru lic acid in
Suanzao ren D ecoct ion (SZRD ). M ethods　H ypersil C18 co lum n w as u sed. T he mob ile phase con sisted of
aceton it rile2w ater w ith 1% glacia l acet ic acid (17∶83) fo r sp ino sin and (16∶84) fo r feru lic acid. D etec2
t ion w avelength s w ere set a t 334 and 320 nm , respect ively. T he in ternal standard w as p 2hydroxyben2
zaldehyde fo r feru lic acid. Results　T he linear ranges fo r sp ino sin and feru lic acid w ere 01960—13144 Λgö
mL ( r = 01999 8) and 2104—2712 ΛgömL ( r = 01999 7) , respect ively. T he recoveries fo r them w ere
9814% and 9818% , respect ively. T he R SD w ere 215% and 218% , respect ively. Conclusion 　T h is
m ethod is simp le, rap ids and accu ra te, and can be u sed fo r the determ inat ion of sp ino sin and feru lic acid in
SZRD.
Key words: Suanzao ren D ecoct ion (SZRD ) ; sp ino sin; feru lic acid; H PL C
　　酸枣仁汤出自《金匮要略》, 由炒酸枣仁 18 g、茯
苓 10 g、川芎 5 g、知母 10 g、甘草 3 g 组成。方中酸
枣仁养肝血、安心神, 为君药; 川芎调血养肝、茯苓宁
心安神, 为臣药; 知母滋阴降火、清热除烦, 为佐药;
甘草和中缓肝, 为使药。本方临床主治肝血不足, 虚
火内扰心神所致的心烦失眠等症[1 ]。已有研究表明
酸枣仁的君药酸枣仁中棘苷和臣药川芎中阿魏酸为
该复方重要镇静、催眠的有效成分[2 ]。本实验采用
R P2H PL C 法对酸枣仁汤中棘苷和阿魏酸含量进行
测定, 以期为客观、全面评价酸枣仁汤质量和完善该
复方中药的质量标准提供实验依据。
1　仪器与药品
L C—10A 高效液相色谱仪 (日本岛津公司) ;
SPD—10A 紫 外 检 测 器 ( 日 本 岛 津 公 司 ) ;
Ckch rom —ch rom atography 数据采集系统; ZFQ —
85A 型旋转蒸发仪 (上海医械专机厂)。
乙腈、甲醇 (色谱纯) , 水为重蒸水, 其他试剂均
为分析纯; 棘苷对照品由本教研室提供 (纯度>
98% ) ; 阿魏酸对照品购自中国药品生物制品检定
所。炒枣仁、茯苓、川芎、知母与甘草购自沈阳天益堂
药店, 经沈阳药科大学生药鉴定研究室许春泉高级
工程师鉴定, 粉碎, 过 60 目筛, 备用。
·457· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003210215
作者简介: 李玉娟 (1975—) , 女, 山东泰安市人, 药学博士, 主要从事复方中药药效物质基础和质量控制方法研究。
2　方法与结果
211　色谱条件
21111　棘苷色谱条件: 色谱柱: H ypersil C18 (200
mm ×416 mm , 5 Λm , 大连依利特公司) ; 流动相: 乙
腈21% 冰醋酸水溶液 (17∶83) , 检测波长: 334 nm ;
体积流量: 018 mL öm in; 柱温: 室温; 进样体积: 20ΛL。
21112　阿魏酸色谱条件: 色谱柱: H ypersil C 18 (200
mm ×416 mm , 5 Λm , 大连依利特公司) ; 流动相: 乙
腈21% 冰醋酸水溶液 (16∶84) ; 检测波长: 320 nm ;
体积流量: 018 mL öm in; 内标物: 对羟基苯甲醛; 柱
温: 室温; 进样体积: 20 ΛL。
212　系统适用性试验: 理论塔板数按棘苷计算不低
于 5 400, 该峰与其相邻色谱峰的分离度大于 114,
对称因子小于 0193。理论塔板数按阿魏酸计算不低
于 5 000, 该峰与其相邻色谱峰的分离度大于 115,
对称因子小于 0198。同条件下分析阴性供试液, 发
现其他药味成分不干扰棘苷和阿魏酸的测定。色谱
图见图 1, 2。
12棘苷
12sp ino sin
图 1　棘苷对照品 (A)、缺酸枣仁的阴性对照 (B)
和酸枣仁汤 (C)的 HPLC 图谱
F ig. 1　HPLC of sp inosin reference substance (A ) ,
negative sample (B) , and SZRD (C)
12对羟基苯甲醛　22阿魏酸
12p 2hydroxybenzaldehyde　22feru lic acid
图 2　阿魏酸对照品 (A)、缺川芎阴性对照 (B)
和酸枣仁汤 (C) HPLC 图谱
F ig. 2　HPLC of ferul ic ac id reference substance
(A) , negative sample (B) , and SZRD (C)
213　标准曲线的绘制
21311　棘苷标准曲线的绘制: 取棘苷对照品约 12
m g, 精密称定, 置 25 mL 量瓶中, 用甲醇溶液并加至
刻度, 摇匀。精密吸取该溶液 2 mL , 置于 10 mL 量
瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 摇匀。精密吸取 011、012、
014、018、112、114 mL 置 10 mL 量瓶中, 用甲醇稀
释至刻度, 摇匀, 微孔滤膜滤过, 精密取续滤液 20ΛL 注入高效液相色谱仪, 记录色谱图。以峰面积为
纵坐标 (Y ) , 质量浓度为横坐标 (X ) , 绘制标准曲线,
棘苷在 01960～ 13144 ΛgömL , Y 与 X 呈良好线性
关系。所得标准曲线方程为 Y = 11648×1010 X -
11742×103, r= 01999 8。
21312　阿魏酸标准曲线的绘制: 取内标物对羟基苯
甲醛约 36 m g, 精密称定, 置 25 mL 量瓶中, 用甲醇
溶解并加至刻度, 作为内标溶液。取阿魏酸对照品约
8 m g, 精密称定, 置 10 mL 量瓶中, 用甲醇溶解并加
至刻度, 摇匀。精密吸取该溶液 215 mL , 置 25 mL
量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 摇匀。精密吸取此溶液
013、015、110、210、310、410 mL 置 10 mL 量瓶中,
精密加入 110 mL 内标溶液, 用甲醇稀释至刻度, 摇
匀, 微孔滤膜滤过, 精密吸取续滤液 20 ΛL 注入高效
液相色谱仪, 记录色谱图。以阿魏酸峰面积与内标峰
面积之比为纵坐标 (Y ) , 阿魏酸质量浓度为横坐标
(X ) , 绘制标准曲线。阿魏酸在 2104～ 2712 ΛgömL
Y 与X 呈良好线性关系。所得标准曲线方程为 Y =
01082 5 X - 01018 7, r= 01999 7。
214　供试品溶液的制备
21411　棘苷供试品溶液的制备: 精密称取处方量
1ö10 的药材以 95% 乙醇水浴回流提取。第一煎加入
10 倍量溶剂, 回流提取 1 h, 滤过; 滤渣再加入 8 倍
量溶剂, 继续回流提取 1 h, 滤过。合并两次煎液, 挥
干溶剂, 残渣用 30 mL 水溶解, 定量转移至 125 mL
分液漏斗中, 加入石油醚萃取 3 次, 每次 10 mL , 弃
去醚层, 水层再加入水饱和正丁醇萃取 3 次, 每次
30 mL , 收集正丁醇层, 挥干正丁醇, 残渣用甲醇溶
解, 定量转移至 25 mL 量瓶中。精密吸取该溶液 110
mL 置 5 mL 量瓶中, 加甲醇至刻度, 摇匀, 微孔滤膜
滤过, 取续滤液即得。精密称取除酸枣仁外其余 4 味
药材, 同法制备缺酸枣仁阴性对照溶液。
21412　阿魏酸供试液的制备: 煎煮方法及石油醚萃
取同 21411。弃去醚层后, 再加入氯仿萃取 3 次, 每
次 30 mL , 收集氯仿层, 挥干, 残渣用甲醇溶解, 定量
转移至 10 mL 量瓶中, 加甲醇至刻度, 摇匀, 微孔滤
膜滤过, 取续滤液备用。精密取除川芎其余 4 味药
材, 同法制备, 得缺川芎阴性对照溶液。
·557·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
215　精密度试验: 精密吸取同一份供试品溶液 20ΛL , 重复进样 6 次, 测定峰面积, 计算, 结果棘苷和
阿魏酸峰面积R SD 分别为 018% 和 016%。
216　重现性试验: 精密称取样品 6 份, 按供试品溶
液制备项下方法平行制备, 进样分析, 测定棘苷和阿
魏酸的质量浓度, 计算得 R SD 分别为 214% 和
212%。
217　回收率试验: 精密称取处方量药材的 1ö20 (含
棘苷 01360 0 m g) , 精密加入棘苷对照品01192 0、
01384 0、01576 0 m g, 按 21411 项下方法处理, 进样
测定, 计算得平均回收率为 9814% , R SD 为 215%
(n= 6)。取处方量药材的 1ö20 (含阿魏酸 01121 5
m g) , 精密加入阿魏酸对照品 01068 0、01136 0、
01204 0 m g, 按 21412 项下方法测定, 结果平均回收
率为 9818% , R SD 为 218% (n= 6)。
218　含量测定: 精密吸取样品溶液 20 ΛL , 按上述
色谱条件测定, 结果酸枣仁汤中棘苷和阿魏酸含量
分别为 01400、01243 m gög (n= 6)。
3　讨论
311　本实验选择酸枣仁汤中君药酸枣仁和臣药川
芎中的有效成分棘苷、阿魏酸为定量指标, 建立了测
定其含量的 R P2H PL C 方法, 为制订酸枣仁汤的质
量控制标准提供定量依据。
312　酸枣仁汤由 5 味中药组成, 成分极其复杂, 检
测易受到干扰。本实验采用有机溶剂萃取的方法, 取
得了很好的分离效果, 且重现性良好。
313　采用内标法定量阿魏酸, 可避免由于进样误差
等对测定的影响, 使方法更准确、可靠。本实验在测
定棘苷时曾尝试选用过多种内标物, 但均不能满足
分析要求, 故最终采用外标法定量。
References:
[ 1 ]　Yuan C L , W ang Z B, J iao Y, et a l. Study on the effect ingre2
dien ts of sedation and hypho sis in Suanzao ren D ecoction [J ]1
Ch ina J Ch in M ater M ed (中国中药杂志) , 1987, 12 (9) : 342
361
[ 2 ]　L i Y J. Study on the therapeu tic basis of tradit ional Ch inese
m edicinal p reparation Suanzao ren D ecoction [A ]1 D isserta tion
of D octor D eg ree of S heny ang P harm aceu tica l U n iversity (沈
阳药科大学博士学位论文) [D ]1 Shenyang: Shenyang Phar2
m aceu tical U niversity, 2003.
HPLC 法测定桃红四物汤中芍药苷和梓醇的含量
郭春燕, 张万明, 王治宝, 付煜荣, 张　力3 , 王德宝, 白雪梅Ξ
(张家口医学院, 河北 张家口　075000)
　　桃红四物汤出自《医宗金鉴》, 由桃仁、红花、当
归、赤芍、生地、川芎组成, 活血调经, 主治血瘀所致
的月经不调、痛经、闭经、崩漏以及眼底出血之暴盲
者。是活血化瘀的代表方之一。为控制其内在质量,
本实验对其主要有效成分芍药苷、梓醇进行了测定,
结果表明本法准确、精密、重现性好。
1　仪器与试剂
高效液相色谱仪 (美国 H P1100) , T G—332A
精密天平 (十万分之一天平, 上海) , KQ —500B 超声
波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)。
芍药苷、梓醇对照品 (中国药品生物制品检定
所)。所用试剂均为分析纯。所用 6 味药材均符合
《中华人民共和国药典》2000 年版标准。
2　方法与结果
211　色谱条件
21111　芍药苷色谱条件[1 ]: 色谱柱: YW G C18 (250
mm ×416 mm ) ; 流动相: 甲醇2磷酸二氢钾溶液
(40∶60) ; 体积流量: 1 mL öm in; 检测波长: 230 nm ;
柱温: 25 ℃; 进样体积: 10 ΛL。
21112 　梓醇色谱条件 [2 ]: 色谱柱: YW G C 18 (250
mm ×416 mm ) ; 流动相: 水2乙腈 (9914∶016) ; 体积
流量: 1 mL öm in; 检测波长: 210 nm ; 柱温: 25 ℃; 进
样体积: 10 ΛL。
212　对照品溶液的制备: 精密称取芍药苷对照品
10100 m g (120 ℃干燥至恒重)置 10 mL 量瓶中, 加
流动相溶解并稀释至刻度, 摇匀, 即得芍药苷对照品
溶液。
　　精密称取梓醇对照品 2618 m g (120 ℃干燥至
·657· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003208205
基金项目: 河北省科技厅攻关项目指导计划 (012761154) ; 张家口医学院青年基金资助项目 (Q 200103)
作者简介: 郭春燕, 女, 硕士, 副教授, 1989 年毕业于河北大学, 主要从事天然药物的研究和分析。
T el: (0313) 8041654　E2m ail: chy2guo@ sohu. com3 通讯作者　T el: (0313) 8041688