全 文 ：炮附子对关木通减毒作用的初步研究
马红梅 ,郭俊华 ,戚爱棣 ,雒明池 ,张伯礼
(天津中医学院 ,天津　 300193)
　　现已公认关木通有毒 ,但关木通中毒的防治尚
无良策。 2000年版《中华人民共和国药典》关木通项
下注明:有毒 ,肾功能不全及孕妇忌服。但关木通临
床广泛应用 ,误用或潜在中毒的危险在所难免 ,解决
这个问题的根本在于选择适当方法对关木通进行减
毒增效。我们从有关文献 [1, 2 ]中受到启发 ,根据中药
配伍炮制增效减毒的基本理论和实践经验 ,首次提
出并初步证实用炮附子对关木通减毒的研究思路。
1　仪器与材料
高效液相色谱仪 ,包括 SP8-100泵 , Spectra 200
紫外检测器。
马兜铃酸Ⅰ 、Ⅱ ( aristo lochic acid Ⅰ 、Ⅱ ,简称
AAⅠ 、 AAⅡ )、马兜铃内酰胺Ⅰ ( ari stolo-lactamⅠ ,
简称 ALⅠ )对照品由北京医科大学生药研究室提供。
关木通系马兜铃科马兜铃属东北马兜铃 Aris-
tolochia manshuriensis Kom. 的木质茎 ;炮附子系毛
茛科乌头属乌头 Aconitum carm ichaeli Debx. 的子
根 ,按 1995年版《中华人民共和国药典》一部附子项
下炮制。 1998年 4月购自天津中药集团公司第二批
发部。
2　方法与结果
2. 1　关木通制剂:关木通生药加 5倍量水浸泡 1 h
后 ,煮沸 30 min,过滤为Ⅰ 液 ;药渣加 2倍量水再煮
沸 20 min,过滤为Ⅱ液 ;混合Ⅰ 、Ⅱ液 ,冷却 ,加入等
量 95%乙醇 ,放入 4℃冰箱静置 48 h, 4层纱布过
滤 , 75℃水浴浓缩至所需浓度 ,装瓶密封 , 4℃保存
备用。
2. 2　关木通配伍附子制剂:关木通和炮附子生药按
6∶ 1配伍 ,分别加 5倍量水浸泡 1 h后 ,先煎附子 ,
煮沸 30 min,再加关木通共煮沸 30 min,其它同 2. 1
项下方法。
2. 3　附子制剂: 炮附子生药加 5倍量水浸泡 1 h
后 ,煮沸 1 h,其它同 2. 1项下方法。
2. 4　阴性对照制剂:按 2. 1项下方法制备等量蒸馏
水制剂备用。
2. 5　色谱条件:色谱柱 Kromsil-100 C18 ( 200 mm×
4. 6 mm , 5μm) ,流动相: 甲醇 -水 -乙酸 ( 70∶ 30∶
0. 5) ,检测波长: 260 nm。
2. 6　标准曲线的制备: 精密称取一定量的 AAⅠ 、
AAⅡ、 ALⅠ ,配制一系列浓度溶液 ,进样测定 ,以溶
液浓度 Y 对峰面积 X 作图 ,得回归方程 , AAⅠ :
Y= 1. 60× 10- 5 X+ 0. 456, r= 0. 999 8,线性范围
0. 5～ 0. 95 μg /mL; AAⅡ : Y= 2. 57× 10- 5 X +
0. 380, r= 0. 999 9,线性范围 0. 5～ 0. 98μg /mL;
ALⅠ : Y= 1. 82× 10- 5X+ 0. 456, r= 0. 999 9,线性
范围: 0. 5～ 0. 90μg /mL。见图 1。
2. 7　方法学考察: 精密度试验中 AAⅠ 、 AAⅡ 、
ALⅠ 的 RSD分别为 1. 71%、 1. 36% 、 2. 03% (n=
3 ) ;加样回收率实验中 AAⅠ 的平均回收率为
104. 5% , RSD= 1. 84% (n= 3)。说明方法可靠。
a-AAⅡ　 b-AAⅠ 　 c-ALⅠ
A-供试品　 B-混标对照品
图 1　 HPLC图谱
2. 8　含量测定: 关木通配伍附子炮制前后的 AA
Ⅰ 、 AAⅡ 、 ALⅠ的含量变化见表 1。
　　可见关木通、炮附子 ( 6∶ 1)共煎后 AAⅠ 、 AA
Ⅱ和 ALⅠ 的含量比关木通单煎降低了 35% 、 32%
和 37% 。
3　讨论
3. 1　炮附子对关木通减毒研究的理论依据: 关木通
·319·　中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　 2002年第 33卷第 4期
收稿日期: 2001-05-10基金项目:天津市高校科技发展基金项目 ( 20010902)
性味苦寒 ,误用易伤阳气 ,阻碍气化 ,临床出现一系
列阳虚阴盛征象 [3 ];附子性味辛甘大热 ,功善回阳救
逆、补火助阳、散热除湿 ,主治一切阳虚阴盛之证。选
用附子救治预防误用关木通所致的中毒病证 ,深合
其苦寒伤阳 ,阻碍气化 ,阳衰阴盛之病机。
表 1　关木通配伍炮附子前后成分含量变化 (μg /mL)
　　方　法 AAⅠ AAⅡ ALⅠ
关木通水煎醇沉 414. 6 203. 6 2. 66
关木通、炮附子 ( 6∶ 1) 269. 0 137. 6 1. 67
共煎醇沉
炮附子单煎醇沉 0 0 0 　
3. 2　炮附子对关木通减毒研究的实践:关木通为马
兜铃科马兜铃属植物中药材 ,目前认为其主要毒性
成分是马兜铃酸和 /或 ALⅠ 。 本实验结果表明:关
木通、炮附子 ( 6∶ 1)共煎后 AAⅠ 、 AAⅡ和 ALI的
含量分别比关木通单煎降低了 35% 、 32%和 37% ,
故炮附子可制约关木通的毒性。 另一方面 ,附子有
毒。为此 ,我们在实验中选用炮附子先煮久煎并选择
较小的关附配伍比例 6∶ 1以减毒。 相关实验证
实 [3 ]:附子与关木通按 3∶ 1比例共煮时 ,溶液中乌
头碱含量减为原来的 42%。 提示: 关木通和炮附子
在一定的配伍比例范围内 ,可相互减毒 ,但其确切机
制尚不清楚。
参考文献:
[ 1 ]　潘青海 . 谈附子用量和配伍的运用体会 [ J ] . 中医药研究 ,
1986, ( 6): 15-16.
[ 2 ]　丁国明 ,唐迎雪 .木通对附子解毒作用的初步观察 [ J] . 中国
中药杂志 , 1992, 17( 5): 310-312,封 4.
[3 ]　马红梅 ,张伯礼 . 关木通肾毒害及其防治 [ J ]. 中草药 2001, 32
( 4): 369-370.
分光光度法测定桃红四物汤中总黄酮含量
郭春燕 ,李振良* ,张　力
(张家口医学院 ,河北 张家口　 075000)
　　桃红四物汤出自《医宗金鉴》 ,由桃仁、红花、当
归、赤芍、生地、川芎组成 ,是活血化瘀的代表方之
一。功能活血调经 ,主治血瘀所致的月经不调、痛经、
闭经、崩漏以及眼底出血之暴盲 [1 ]。为控制其内在质
量 ,本实验首次对该方中的总黄酮进行了测定。
1　仪器与试剂
756MC紫外-可见分光光度计 (上海分析仪器
厂 ) ,芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所 ) ,实验
中所用试剂均为分析纯 ,该方中 6味中药药材均符
合《中华人民共和国药典》 2000年版标准。
2　实验方法与结果
2. 1　对照品及供试品溶液的制备: 对照品溶液的制
备: 精密称取芦丁对照品 20 mg ( 120℃干燥至恒重 )
置 100 mL容量瓶中 ,加甲醇适量 ,水浴加热溶解 ,放
冷 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀。取 25 mL用蒸馏水稀
释到 50 m L配制成 0. 1 mg /mL的对照品溶液。
供试品溶液的制备:参照文献 [2 ]的方法 ,精密称
取 3. 0 g桃红四物汤药物粉末 ,置索氏提取器中 ,加
甲醇适量回流提取 12 h,溶液转移至 50 m L容量瓶
中 ,甲醇稀释至刻度 ,滤纸过滤 ,取滤液 1 mL置 10
mL容量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,作为供试
品溶液。
2. 2　测定波长的选择:对照品溶液及供试品溶液在
200～ 700 nm进行扫描 ,发现均在 500 nm处有最大
吸收峰 ,故选择 500 nm作为检测波长。
2. 3　线性关系考察: 精密吸取上述对照品溶液
0. 0, 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0 mL,分别置于 10 mL容
量瓶中 ,各加入 50%甲醇使至 5 mL,先加 5%
NaNO2溶液 0. 3 mL,摇匀 ,放置 6 min,再加入 10%
Al( NO3 ) 3溶液 0. 3 m L,摇匀 ,再放 6 min,加 4%
NaOH溶液 4 mL,各加水稀释到 10mL,在 500 nm
处测吸光度。用最小二乘法以吸光度对浓度进行线
性回归 ,回归方程为 A= 12. 50C+ 0. 011 8, r =
0. 999 1(n= 5) ,结果表明 ,芦丁对照品在所试浓度
0. 01～ 0. 05 mg /mL范围内呈良好的线性关系。
2. 4　精密度试验:取一定浓度的供试品溶液 ,测定吸
光度 , RSD为 0. 93% (n= 5)。表明本法精密度良好。
2. 5　重现性考察:取同一批药材样品 ,按样品制备
方法平行制备 5份 ,依法测定 ,平均含量为 2. 64% ,
RSD值为 2. 0% ,表明重现性良好。
·320· 　中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　 2002年第 33卷第 4期
收稿日期: 2001-08-06基金项目:河北省教育厅科研基金资助项目 ( No. 2000237)
* 通讯联系人　张家口医学院科研处