全 文 ：·1506· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第lo期2005年10月
·药理与临床·
淫羊藿提取物抗抑郁作用研究
钟海波，潘额，孔令东。
(南京大学生命科学院国家重点医药生物技术实验室，江苏南京210093)
摘要：目的研究淫羊藿提取物的抗抑郁作用。方法采用行为绝望模型悬尾试验(TST)和强迫游泳试验
(FST)研究淫羊藿提取物对小鼠行为、脑内单胺氧化酶A(MAO—A)、单胺氧化酶B(MAO—B)活性与肝脏中
MAO—A和MAO—B活性及丙二醛(MDA)水平的影响}采用利血平拮抗模型探讨淫羊藿提取物可能存在的抗抑
郁作用途径。结果淫羊藿提取物(25、50、100、200mg／kg)能显著缩短TST和FST小鼠悬尾和游泳不动时问，
显著抑制TST小鼠脑和肝组织MAo—A和MAO—B活性．逆转肝组织MDA水平的升高。淫羊藿提取物对利血平
所致小鼠体温的下降无明显改善作用。结论淫羊藿提取物具有一定抗抻部作用。
关键调：淫羊藿提取物{抗抑郁}悬尾试验；强迫游泳试验；利血平拮抗模型
中圈分类号tR286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)10—1506—05
AntidepressantelfectofEpimediumbrevicornumextracts
ZHONGHai_bo．PANYing．KONGLing—dong
(StateK yLaboratoryofPharmaceuticalBioteehnology，SchoolofLileS iences，
NanjingU iversitytNanjing210093·China)
Abstract：ObjectiveTos udyantldepressanteffectsofEpimediumbrevicornumextracts．Methods
Behavioraldespairmodelsofmalemice，tailssuspensiontest(TST)，andforcedswimmingtest(FST)
wereusedtoevaluatetheffectsofE．brevicornumextractsonbehavioral，monoamineoxid s(MA()一A)
andmonoamineoxidaseB(MAo—B)activitiesinbraina d1ivertissue。andMDA】evelinlivertissueof
mouse．Reserpineantagonisticmodelwasalsousedtoinvestigatepossibleantidepressantmechanismsof
E．brevicornumextracts．ResultsThex ractsofE．brevicornum(25，50，100，and20mg／kg)signifi—
cantlyreducedtheurationofmurineimmobilityinTSTandFST．inhibitedMAO—AandMAO—Bactivi—
tiesinbraina diiverofmice，andreversedthelevatedliverMDAjevelinmiceinTST．Therewasno
significantameliorationin hedecreases0fbodytemperatureinmicofReserpineantagonisticmodel．Con—
clusionE．brevicornuz，_lextractspo sessesthdefiniteantideDres8antproperties．
Keywords：extractsofEpimediumbrevicornumMaxi ．；antidepressantffect；tailsuspensiontest
(TST)；forcedswimmingtest(FST)；Reserpineantagonisticmodel
抑郁症指情感性精神障碍综合征，属中医郁证
范畴。郁证病变以情志不舒、气机郁滞为其主因。郁
之所起总不离肝、心、脾、肺、肾，“七情内伤”。从脾肾
亏虚论治，若脾健血旺，则心神自安，肾阳充实，心主
血藏则神正。从药性看，传统温补肾期药具有补肾定
心之功效。淫羊藿EpimediumbrevicornumMaxi ．
为温肾壮阳常用中药，l艋床报道用其治疗中风后的
抑郁症o]。现代研究表明淫羊藿总黄酮和其主要成
分淫羊藿苷具有多种与抗抑郁有关的生物活性，如
改善失眠、舒缓压力和疲劳03等。本研究采用经典动
物行为绝望模型悬尾试验(TST)和强迫游泳试验
(FST)观察淫羊藿提取物对小鼠行为及体内生化指
标的影响。采用利血平拮抗模型探讨其抗抑郁可能
作用途径。为淫羊藿治疗抑郁症提供科学依据。
l材料
1．1药品与试剂；淫羊藿提取物，棕色干粉，购自宁
波双林公司，批号2002031，经HPLC方法测定，其
中含淫羊藿苷54．56％。盐酸氟西汀片。批号
KD8157和KD8078，常州四药制药有限公司生产，
临用前分别用生理盐水配制成混悬液。其余试剂均
望鍪最智：眢鉴省菰强学基金资助项目(30371755)；扛苏省自然科学基金资助项目(BK2003070)尊翥景箨≯絮桨76，-。)，；翻黼镏鬻轰禽麟院嚣；嚣蹴毒盖盟紫抗抑郁作用的研究
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月· 507·
为分析纯。
1．2动物：昆明种小鼠，体重(23士2)g，购自南京
军区南京总医院，合格证号SCXK(苏)2003—0004。
在实验前，小鼠适应环境一周。
2方法与结果
2．1统计学方法：所有数据均用r士s表示。采用
ANOVA分析法进行统计学检验。同时采用Bon—
ferronialpha修正方法防止假阳性结果。
2。2对小鼠悬尾不动时阉的影响：采用TST方
法03评价淫羊藿提取物对小鼠悬尾不动时间的影
响。取雄性小鼠60只，随机分成6组，每组10只。
按表1所列。每天13：oo时分别ig给药，每天1次。
氟西汀组剂量为26mg／kg，淫羊藿提取物组剂量分
别为25、50、100和200mg／kg，模型组给予同体积
生理盐水。分别在第1、3、7，H天给药1h后进行
TST，共6rain，其中前2min不作记录，记录后4
rain内动物悬尾不动时间。结果见表1。与模型组比
较，第1天给药后，淫羊藿提取物(50和100mg／
kg)可显著缩短小鼠悬尾不动时同，25和200mg／
kg剂重组具有缩短动物不动时间的趋势，但无显著
性差异。第3天给药后，除200mg／kg剂量组外，淫
羊藿提取物各组均显著缩短小鼠悬尾不动时间，并
随着给药时间的延长作用有增强的趋势，200mg／
妇剂量组在给药7d后具有显著缩短动物不动时
间的作用。并发现淫羊藿提取物在给药第l天和第
3天的量效关系呈倒“u”型，其中50mg／kg剂量组
作用较强。氟西汀组在上述给药时间点均具有显著
缩短动物不动时间的作用。在此实验条件下，给药第
3天的淫羊藿提取物50mg／kg荆量组作用基本上
与氟西汀组相当。
裹1淫革藿摄取物在TST中对小鼠不动时间的影响“土。，n—10)
TableI EffectofE．brevieornumextractsondurationofmurineimmobilityinTST(；士s，n—10)
与模型组比较：”，
法啪评价淫羊藿提取物对小鼠游泳不动时间的影
响。实验分组、给药剂量和给药时间等与2．2项一
致。分别在第i、3、7．14天给药1h后进行FST实
验，共6min，其中前2min不作记录，记录后4min
内动物游泳不动时间。结果见表2。与模型组比较，
第1天给药后，淫羊藿提取物呈鞍明显的倒“U”型
量效关系，仅50mg／kg剂量组可显著缩短小鼠游
泳不动时问。第3天给药后，淫羊藿提取物25和50
mg／kg剂量组均显著缩短动物游泳不动时间，在一
定程度上随着给药时间的延长该作用有增强的趋
势，其中以第7天给药后作用较强。各次给药后淫羊
藿提取物100和200mg／kg剂量组对小鼠游泳不
动时间均无显著影响。氟西汀组在上述给药时间内
均具有显著缩短小鼠游泳不动时间作用。在此实验
条件下，淫羊藿提取物50mg／kg剂量组作用与氟
衰2淫羊t提取物在FST中对小鼠不动时间的影响G士s，n—10)
Table2 EffectofE．brevicornumextractsoffdurationofmurineImmobilityinFST(i土j．口一10)
与模型组比较{‘P
万方数据
·i508· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
西汀组相当。
2．4对小鼠开场行为实验：参照Archer方法”]。实
验分组和给药同2．2项。在上述给药条件下各组对
小鼠开场行为无显著影响(数据略)。表明淫羊藿提
取物和氟西汀缩短小鼠悬尾和游泳不动时间所具有
的抗抑郁作用与中枢神经系统兴奋性无关。
2．5 对TST中小鼠全脑和肝脏组织中单胺氧化
酶A(MAO—A)和单胺氧化酶B(MAo—B)活性
的影响：选择TsT模型评价淫羊藿提取物对小鼠
肝脏和全脑MAO—A和MAO—B活性的影响。实验
方法除增加一个正常组外，其余均同2．2项。在第
14天给药后1h，除正常组外，各组动物经悬尾6
盐水清洗，～80C下保存供测定用。参考文献方
法“1分别测定MAO—A和MAo—B活性。结果见表3
和4。与正常组比较，模型组动物脑和肝组织中
MAO—A和MAo—B活性显著提高，淫羊藿提取物和
氟西汀均可抑制MAP—A和MAO—B活性。在脑组
织中，淫羊藿提取物具有倒“U”型量效关系，但50
mg／kg剂量组抑制作用不及其他剂量组。另外，淫羊
藿提取物50和100mg／kg剂量组及氟西汀组抑制
脑组织MAo—A和MAo—B活性无明显差异性，面
25和200mg／kg剂量组抑制MA0一B活性能力略
强于MAP—A。在肝组织中，淫羊藿提取物随着剂量
的增加作用较强，同时也观察到各和量组及氟西汀抑
min后，在冰台上迅速取小鼠全脑和肝脏，冰冻生理 制MAP—B活性的能力强于抑制MAP—A活性。
寰3淫羊蕾提取相对TST小鼠全脑坦织MAO，A和MAO-B活性的影响G土s，n一10)
Table3 EffectofE．brevicornumextractsonwhalebrainMAO，AandMAO—BactivitiesofmiceinTST(x=Ls，n=lO)
与模型组比较：。P
Table4 EffectofE．brevlcornuraextractsOnliverMAO—AandMAO—itacttvItlesofmiceinTST(；士s．n一10)
与梗型组比较r。P
2．6淫羊霍提取物对TST小鼠肝脏MDA水平的
影响：采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA水平o]。
实验方法、分组和给药与2．5项相同。结果见表5。
TST可显著升高小鼠肝脏MDA水乎，给予淫羊藿
提取物和氟西汀均可逆转其MDA水平的升高，但淫
羊藿提取物无明显量效关系。除25mg／kg剂量组
外，其他各组均可将升高的MDA水平恢复至正常。
2．7淫羊藿提取物对利血平所致小鼠体温下降的
影响：参照文献方法o]。取小鼠70×2只，雌雄各半，
将其随机分戒7×2组，每组10只。待小鼠适应环
境几天后，按表6分别ig给予淫羊藿提取物和氟西
汀，每天lo：oo给药1次，连续l周。除正常组外，
其他各组在末次给药同时ip利血平2．0mg／kg，分
别在给药后l、3、5h将体温计探头插入小鼠肛门
1．5～2．0cm处以测量肛温。观察淫羊藿提取物对
利血平所致小鼠体温下降的影响。结果见表6。与正
常组比较，利血平可显著地降低各时间点雌、雄小鼠
体温，氟西汀可以逆转利血平所致雌、雄动物体温的
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷笫10期2005年10月· 509·
下降，而淫羊藿提取物对利血平所致动物体温下降
无明显逆转作用。
3讨论
抑郁症是严重危害人类身心健康的常见病、多
发病，而目前高效低毒的治疗抑郁症药物较为贫乏，
因此抑郁症的防治和抗抑郁新药的研制已成为当今
国际医药界前沿热点研究课题之一。本研究证实淫
羊藿提取物可显著缩短TST和FST小鼠悬尾和
游泳不动时间，抑制TST小鼠肝和脑组织MAo—A
和MAO—B活性，逆转小鼠肝组织MDA水平的升
高，表明淫羊藿具有～定的抗抑郁作用。
本研究发现淫羊藿提取物对动物行为的影响具
寰5淫羊着提取物对TST小鼠肝组织MDA水平
的影响(；土f，n—10)
Table5 EffectofE．brevicornumextractsonliver
MDAlevelofmiceInTST(j±s，n一10)
与模型对照组比较：+P
Table6 EffectofE．bmvicornumextractSonbobytemperaturedecreaseinmiceinducedbyReserpineG+s．n=10)
与樱型组比较t。尸
有一定的量效和时效关系。在TST中，淫羊蘩提取
物在给药第1天和第3天具有倒“u”型量效关系，
其中以50mg／kg剂量组抗抑郁作用最强，与氟西
汀作用相当。给药7d和14d淫羊藿提取物50
mg／kg剂量组作用与25mg／kg剂量组一致，但随
着剂量的增加作用减弱。在FST中，基本上也观察
到上述现象，但其100和200mg／kg剂量组在此实
验条件下，在给药3d后一定程度上有缩短动物不
动时间趋势，但无显著性差异。另一方面，淫羊藿提
取物并不影响动物开场行为，表明其抗抑郁作用与
中枢神经系统兴奋性无关。
单胺氧化酶(MAO)是单胺神经递质重要的代
谢酶，抑制MAO—A和MAO—B活性有助于抑郁症
和帕金森病的治疗。淫羊藿提取物可显著抑制小鼠
脑和肝组织MAO—A和MAO—B活性。提示淫羊藿
提取物有可能通过抑制MAO活性，减少单胺类神
经递质代谢，提高脑组织神经递质水平达到抗抑郁
目的。研究还发现淫羊藿提取物抑制脑和肝组织
MAO活性具有一定的差异性，这可能与其在组织
中吸收和代谢有关。
‘ MDA为脂质过氧化产物，广泛作为自由基损
伤标志之一，在临床上也常观察到抑郁症患者体内
MDA水平过高，而经过一些抗抑郁药物治疗后可
显著减低其MDA水平o]。淫羊藿提取物可逆转抑
郁动物模型中MDA水平的升高．表明淫羊藿提取
物有可能因减弱自由基对神经组织损伤程度而改善
抑郁绝望行为。
利血平可耗竭中枢单胺类神经递质引起抑郁。
一部分抗抑郁药如单胺氧化酶抑制剂和三环类抗抑
郁药等均对利血平所引起的耗竭具有抗抑郁作用。
本研究发现淫羊藿提取物在利血平拮抗模型下，未
能逆转利血平所致小鼠体温的下降，推测其对小鼠
绝望行为的改善并非突触前单胺神经递质摄取抑制
的急性药理效应。本研究还观察到淫羊藿提取物抑
制脑组织中MAO活性呈倒“u”型量效关系，与其
行为实验结果不同的是其50mg／kg剂量组的抑制
作用较小，提示淫羊蓑提取物有可能存在另一作用
途径，即通过调节突触后单胺类神经递质受体敏感
性而达到抗抑郁的目的，后续的相关研究正在进
行中。
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牛建昭，张东伟，付敏，王继峰+，金焕，马梦茵
(zil：京中医药大学细脾生物让学实验室。北京100029)
摘要：目的研究复方鳖甲软肝方防治肺纤维化大鼠自由基损伤的作用和机制。方法SD雄性大鼠随机分为正
常组、假手术组、模型组、强的松(o．56ms／ks)组、复方鳖甲软肝方高、中、低剂量(】．4，0．7、0．35g／kg)组．每组
lO只。除正常组、假手术组外．其余各组大鼠气管滴注盐酸博菜霉素制备太鼠肺纤维亿模型。造模后第2天，各组
分别培给药．连续给药4周。测定各组大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(s0D)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)，诱
导型一氧化氮台酶“NOS)活性和丙二醛(MDA)水平；采用Westernblot ing实验研究肺组织蛋白中核因子KB
(NF一*B)和校因子tB抑制剂(IxBa)的表达。垴果复方鳖甲软肝方能提高肺纤维化大鼠体内的GSP—Px和SOD
活性，降低MDA水平和iNOS活性t减弱肺纤维化大鼠肺组织核蛋白中NF一邱表达，增强胞浆置白中I椐a的表
达。结论复方鳖甲软肝方能调节肺纤维化大鼠体内自由基水平+减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤．调节肺组
织蛋白bcBa的表达-进而抑制NF—KB表达，是该方防治肺纤维化的作用机制。
关键词：复方鳖甲软肝方I肺纤维化I自由基f校因子出(NF．xB)}核因子KB抑制剂(hBa)
中圈分类号；R286．4 文献标识码：A 文章缡号：0：t53—2670(2005)t0—1510—05
EffectofCompoundBiejiaRuanganPrescriptiononpreventinginjury
offreeradicalinpulmonaryfib osisrats
NIUJian—zhao，ZHANGDong-wei，FUMin，WANGJi—feng，JINHuan，MAMeng—yin
(LaboratoryofCellandBiochemistryofBeijingU iversityofTraditionalChineseMedicine．Beijing100029．China)
Abstract：ObjectiveTos udyeffectandmechanismofCompoundBiejiaRuanganPrescription
(CBRP)onpreventinginjuryoffreeradiealinpulmonaryfib osisrats．MethodsSDmaleratswereran～
domlydividedintosevengroups(tenra sineachgroup)asnormalgroup，Shamgroup，modelgroup，
prednisonegroup，andCBRP(1．4，0．7，0．35g／kg)groups．RatswereinjectedwithbleomyeinA5by
tracheatoestablishpulmonaryfib osisratmodelandratsweregivendrugsbyiginallgroups．Activities
ofSOD，GSH—Px，andiNOS．andMDAlevelinpulmonarytissuesofdifferentgroupswerem asured．Ex—
pressionofNF—KBandIxBainproteinofpulmonarytissueswastudiedbymeansofWesternblottingalso．
ResultsCBRPcanraiseactivitiesofGSH—PxandSODandlessenMDA1evelandiNOSactivity．Itcana1．
sodownregulatethexpressionofNF一时jandupregulatethexpressionofIK＆．ConclusionCBRPcan
regulatethel veloffreeradicalinpulmonaryfib osisratsandlessentheoxidativeinjuryofpulmonarytis—
suescausedbyfreeradicalinpulmonaryfib osisrats．ThemechanismsofCBRPonpulmonaryfib osis1ie
收稿日期，2005—02一17
基金项目-国家自然科学基金项Ig(30540420032}30130220)|教育部首批非舆科技攻关项目(15)I教育部长扛学者和创新团队发展
计划资助项目(1RT0413)
作者筒介：牛建昭(1945--)，女·山西太原市人，博士生导师t研究方向为中药抗器官钎维化。
Tel：(010)64287538E—mail{niujjzz@263．net．
*通讯作者王继峰Tel：(010)64286995Email；wangjifeng@126．com
万方数据
淫羊藿提取物抗抑郁作用研究
作者： 钟海波， 潘颖， 孔令东， ZHONG Hai-bo， PAN Ying， KONG Ling-dong
作者单位： 南京大学生命科学院,国家重点医药生物技术实验室,江苏,南京,210093
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
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