全 文 ：的条件下 ,混合溶剂 A作为夹带剂 ,经超临界 CO2
萃取后其有害成分——银杏酚酸可完全被脱除 ,而
活性成分银杏黄酮、内酯却几乎没有损失。此工艺步
骤少 ,易操作 ,生产周期短 ,成品可以用于生产药品
和保健食品 ,有很大的市场前景。
References:
[1 ]　 Lu D Q, Ch en J. Pharmacological studies on ginkg olide [ J] .
J Jiang su Univ S ci Tech— Na tural Sci (江苏理工大学学报·
自然科学版 ) , 2001, 22( 2): 5-9.
[2 ]　 Yang Y F, Wu G Y. Su rvey of pharmacological s tudies on
Ginkgobiloba leaves (Ⅰ ) [ J ]. Chin J Mod App l Pharm (中国
现代应用药学 ) , 1995, 12( 5): 12-15.
[3 ]　 Yang Y F, Wu G Y. Survey of pharmacological studies on
Ginkgo biloba l eav es (Ⅱ ) [ J] . Ch in J Mod Appl Pharm (中国
现代应用药学 ) , 1995, 12( 6): 5-8.
[4 ]　 Zhang D Q, He Z F. Chemical S tud ies on Resources of Ginkgo
biloba Leaves (银杏叶资源化学研究 ) [ M ] . Bei jing: China
Ligh t Indus t ry Press , 1999.
[5 ]　 Yao W X, Yang C, Tian Y. Rapid determination of
gink golides and bi lobalide in leav es of Ginkgo biloba Lour and
it s ext ract s by HPLC [ J ]. Chin J Pha rm Anal (药物分析杂
志 ) , 1999, 19( 1): 38-41.
[6 ]　 Han J Y, Li H J, Zhu Q W . Progres s in th e research of
gink golides f rom Ginkgo biloba [ J ]. Prog Chem Ind Eng (化
工进展 ) , 2000, ( 2): 23-25.
刺五加提取物中五加苷 B、 E含量的 RP-HPLC测定方法的改进
惠玉虎
(西安天诚医药生物工程有限公司 ,陕西 西安　 710075)
　　刺五加提取物是从五加科植物刺五加 Acan-
thopanax sent icosus ( Rupr. et M axim. ) Harms的
干燥根及根茎中提取的有效成分经喷雾干燥而得 ,
其中主要含有各种苷类如五加苷 B, E(又分别称为
丁香苷和紫丁香树脂苷 )及多种木脂素类、异秦皮啶
和黄酮类成分 [1 ]。 关于五加苷 B的测定已有文献报
道 [1～ 3 ] ,笔者也曾采用 RP-HPLC法对五加苷 B, E
的含量进行了测定 ,但有些样品中五加苷 B存在分
离不完全的情况 [4 ]。为了准确地测定刺五加提取物
中五加苷 B、 E的含量 ,我们对该方法进行了改进和
研究 ,采用梯度方法对五加苷 B、 E的含量进行了测
定。结果该方法准确、可靠可用于刺五加提取物的质
量控制。
1　仪器与试药
美国 Waters600型高效液相色谱仪 , Wa-
ters717型自动进样器 , Wa ters486型紫外检测器 ,
北京精瑞计算机技术公司色谱工作站 ( GS2010
型 ) , KQ-250型超声波清洗器。
五加苷 B、 E对照品 (含量 99% )均由美国 Al-
pha实验室提供 ,刺五加提取物为西安天诚医药生
物工程有限公司生产。 甲醇 ,乙腈为分析纯 ,水为二
次重蒸馏水。
2　色谱条件
　　色谱柱: Zorbax SB-C18 ( 4. 6 mm× 150 mm , 5
μm) ;流动相: 乙腈-水 ;流速: 1. 0 mL /min;检测波
长: 220 nm;灵敏度: 0. 01 AUFS;柱温: 25℃。梯度
洗脱条件见表 1。
表 1　流动相的梯度洗脱
Table 1　 Gradient elution of mobile phase
时间 A相:乙腈 -水 ( 8∶ 92) B相:乙腈 -水 ( 20∶ 80)
0 100% 　 0%
30 　 0% 100%
　　在上述色谱条件下 ,五加苷 B, E与杂质完全分
离 ,五加苷 B、 E保留时间分别约 11, 25 min(图 1)。
1-五加苷 B　 2-五加苷 E
1-syringin　 2-eleu th erosid e E
图 1　五加苷 B, E对照品 ( A)和刺五加提取物 ( B)的
HPLC图谱
Fig. 1　 Chromatograms of syr ingin, eleutheroside E
reference stubstance (A) and extraction (B)
3　方法及结果
3. 1　对照品溶液的制备: 精密称取五加苷 B、 E对
照品各约 1. 50 mg ,于 25 mL容量瓶中 ,加 80%甲
醇溶解并定容至刻度 ,即得对照品溶液。
3. 2　供试样品溶液的制备:精密称取刺五加提取物
样品适量于 25 mL容量瓶中 ,加入 80%甲醇约 20
·39·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 1期 2003年 1月
收稿日期: 2002-07-02
m L,超声振荡 30 min后 ,静置至室温 ,定容。用 0. 45
μm的微孔滤膜过滤 ,即得供试样品溶液。
3. 3　线性关系考察: 分别精密称取五加苷 B、 E对
照品各 5 mg ,用 80%甲醇溶解 ,定容至 25 mL,分别
吸取 1. 5, 2. 5, 4. 0, 5. 0, 7. 5, 10. 0 m L于 10. 0 mL
容量瓶中 ,用 80%甲醇定容。 进样 10μL,在上述色
谱条件下测定峰面积 ,以峰面积为纵坐标 ,进样量为
横坐标 ,绘制标准曲线 ,由标准曲线可知: 五加苷 B、
E在 0. 3～ 2. 0μg具有良好的线性关系 ,线性回归
方程: 五加苷 B为 Y= 1. 391 3X - 0. 000 9, r=
0. 999 9;五加苷 E为 Y= 0. 547 9X - 0. 003 2, r=
0. 999 9。
3. 4　精密度试验: 精密吸取五加苷 B、 E对照品溶
液分别连续进样 5次 ,每次进样 10μL,测定峰面
积。五加苷 B峰面积 RSD为 0. 44% (n= 5) ,五加苷
E峰面积 RSD为 0. 60% (n= 5)。
3. 5　重现性试验:精密称取同一批号刺五加提取物
样品 (批号为 020406)适量 ,按供试样品处理方法测
定 5份 ,结果五加苷 B平均含量为 0. 31% , RSD为
0. 67% (n= 5) ;五加苷 E平均含量为 0. 51% , RSD
为 0. 73% (n= 5)。
3. 6　稳定性试验: 精密吸取刺五加供试品溶液 ,每
隔 2 h进样测定 1次 ,进样量 10μL,测定峰面积 ,五
加苷 B的 RSD为 0. 55% (n= 6) ,五加苷 E的 RSD
为 0. 68% (n= 6)。结果表明供试品溶液在 12 h内基
本稳定。
3. 7　回收率试验:精密称取已知含量的刺五加提取
物样品 ,分别添加一定量的五加苷 B、 E对照品 ,按
供试样品处理方法测定。五加苷 B平均回收率为
99. 3% , RSD为 0. 42% (n= 4) ;五加苷 E平均回收
率为 99. 0% ,RSD为 0. 78% (n= 4)。
3. 8　样品测定:精密称取刺五加提取物样品 10批 ,
按供试样品处理方法 ,测定结果见表 2。
表 2　刺五加提取物中五加苷 B, E的含量测定结果 (n= 3)
　　 Table 2　 Results of determination of syringin and
eleutheroside E in extraction (n= 3)
批　号 五加苷 B /% 五加苷 E /% 总含量 /%
020406 0. 31 0. 51 0. 82
020407 0. 32 0. 52 0. 84
020501 0. 30 0. 52 0. 82
020512 0. 31 0. 51 0. 82
020701 0. 33 0. 50 0. 83
020703 0. 32 0. 52 0. 84
020704 0. 31 0. 51 0. 82
020705 0. 30 0. 52 0. 82
020706 0. 32 0. 50 0. 82
020710 0. 32 0. 51 0. 83
4　讨论
4. 1　检测波长的选择:经紫外扫描 ,五加苷 B、 E对
照品的 80%甲醇溶液在 190～ 700 nm波长内 ,最大
吸收波长为 220 nm ,故选择 220 nm作为最大检测
波长。
4. 2　波动相比例的确定: 在上述色谱条件下 ,本实
验对流动相 A相、 B相分别选择了不同比例的甲醇 -
水、乙腈 -水和多种梯度条件进行试验。结果证明: 流
动相选择乙腈 -水进行梯度洗脱 ,五加苷 B、 E与杂
质分离效果最好。
4. 3　该方法灵敏、准确可靠 ,可以作为刺五加提取
物中五加苷 B、 E含量测定方法。
References:
[1 ]　 Chen F K. Determinat ion of Active Constituents in Common
Ch inese Herbal Med icine (常用中草药有效成分含量测定 )
[M ] . Bei jing: People s M edical Publi shing House, 1997.
[2 ]　 Zhang S W , Zhao Y L, Lu X Z. Determination of sy ringin in
ext raction of Rad ix et Caulis Acanthopanacis Sen ticosi by
HPLC [ J] . Chin Tra di t Herb Drugs (中草药 ) , 1999, 30( 9):
660-661.
[3 ]　 Chen G Y, Lu C Q, Ma S C. Determination of syringin in Ci-
w ujia Tablet by RP-HPLC [ J] . China J Ch in Mater Med (中
国中药杂志 ) , 1999, 24( 8): 472-473.
[4 ]　 Liu Y, Hui Y H. Determination of s yringin and eleu theroside
E in ext raction of Radix et Caul is Acanthopancis Sent icosi [ J].
Ch in Tra dit Herb Drugs (中草药 ) , 2000, 31( 8): 587-588 .
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为了加快中药现代化的进程 ,交流中药指纹图谱研究的经验 ,讨论入世后我国中药产业面临的挑战和对策 ,本刊在 2002
年 10月底出版以“中药现代化”和“中药指纹图谱”为主要内容的增刊。欢迎广大读者直接向《中草药》杂志编辑部订阅。定价:
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