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麻黄汤及单味麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱在小鼠组织中的药动学研究
魏凤环, 罗佳波Ξ , 沈　群, 陈飞龙
(第一军医大学 中药药剂重点实验室, 广东 广州　510515)
摘　要: 目的　分析麻黄汤 (H ED ) 和单味麻黄 (H E) 中麻黄碱 (ephedrine, E)、伪麻黄碱 (p seudoephedrine, PE)
在小鼠脑、肺、心、肝、肾的动态变化, 探讨 H ED 配伍的意义。方法　用 GC2M SöS IM 法, H P25 弹性石英毛细管
(25 m ×0. 2 mm ) , 载气 H e, 无分流进样, 柱初温 120 ℃, 1 m in 后以 10 ℃öm in 升至 185 ℃, 再以 30 ℃öm in 升至
245 ℃, 保持 5 m in, 选择离子 (S IM ,m öz = 154, 265) , 进样量 1 ΛL。结果　建立了组织中 E、PE 的测定方法。H ED
及 H E 中 E、PE 在各组织中的动力学变化不一致, 且 H ED、H E 中 E 或 PE 在同一组织中的动力学参数亦不同。其
中 E 在脑、肺、肾的分布量是 H E> H ED。结论　本法稳定、可靠, 适于 E、PE 在组织中的含量测定。H ED 中桂枝、
杏仁、甘草影响了 E、PE 在小鼠组织的动力学过程。
关键词: 麻黄碱; 伪麻黄碱; 配伍; GC2M SöS IM ; 药动学
中图分类号: R 285161　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 07 0781 04
Pharmacok inetics of ephedr ine and pseudoephedr ine from H erba Ep hed rae
D ecoction and H erba Ep hed rae in m ice tissues
W E I Feng2huan, LUO J ia2bo, SH EN Q un, CH EN Fei2long
(Key L abo rato ry of Pharm aceu tical R easearch of T radit ional Ch inese M edicine,
F irst M ilitary M edical U niversity, Guangzhou 510515, Ch ina)
Abstract: Object　To analyze the pharm acok inet ics change of ephedrine (E ) and p seudoephedrine
(PE) in H erba Ep hed rae D ecoct ion (H ED ) and H erba Ep hed rae (H E ) in the b ra in, lung, heart, liver,
and k idney of m ice to discu ss the m ean ing of compat ib ility of the p rescrip t ion. M ethods　Gas ch rom atog2
raphy2m ass spectrom etry w ith selected ion mon ito ring (GC2M SöS IM ) w as u sed. GC2M S condit ion s w ere:
cap illa ry co lum n H P25 (25 m ×0. 2 mm ) , H elium as carrier gas, non2sp lit in ject ion, co lum n temperatu re
120 ℃ (1 m in) 10 ℃öm in 185 ℃ 30 ℃öm in 245 ℃ (5 m in) , w ith 1. 0 mL öm in runoff, S IM (m öz = 154,
·187·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003210215
基金项目: 国家自然科学基金重点资助项目 (N o 30030150)
作者简介: 魏凤环 (1976—) , 女, 山东省人, 博士研究生, 研究方向为方剂配伍规律及中药新药的研究开发。3 通讯作者　T el: (020) 61648266　E2m ail: ljb@fimm u. com
265) and in ject ion vo lum e (1 ΛL ). Results　A m ethod fo r the determ inat ion of E and PE in m ice t issues
w as developed. T he pharm acok inet ic behavio r of E and PE in H ED and H E in m ice t issues w as no t iden t i2
cal. T he pharm acok inet ic param eters of E o r PE in the sam e t issue in H ED and H E w ere differen t. T he
A U C value of E in the b ra in, lung, and k idney in H E w as mo re than that in H ED. Conclusion 　T h is
m ethod is p recise and reliab le to determ ine E and PE in m ice t issues. R am u lus C innam om i, S em en A rm en i2
acae A m a rum , and R ad ix G ly cy rrh iz ae affect the k inet ic p rocess of E and PE in m ice t issues.
Key words: ephedrine (E) ; p seudoephedrine (PE) ; compat ib ility; GC2M SöS IM ; pharm acok inet ics
　　麻黄 (H erba Ep hed rae, H E) 为发汗解表之首
选药, 具有平喘、兴奋中枢和兴奋交感神经等作用。
中医使用 H E 时均为复方, 如医圣张仲景的名方麻
黄汤 (H erba Ep hed rae D ecoct ion, H ED ) 是 H E 配
伍桂枝、杏仁、炙甘草所组成, 具发汗解表、宣肺平喘
之功效, 现主要用于上呼吸道感染、支气管哮喘等。
研究证明, H E 中麻黄碱 (ephedrine, E)、伪麻黄碱
(p seudoephedrine, PE) 可作为 H E 药效的代表性
成分。本实验以 E、PE 为指标成分, 选取脑、心、肝、
肺、肾等脏器为考察组织, 观察两者在小鼠体内不同
组织中的动态变化, 分析 H ED 与 H E 的不同之处,
从药动学角度探讨中药配伍的意义。
1　材料
111 　药品与试剂: H E 为麻黄科植物草麻黄
Ep hed ra sin ica Stap f 的干燥草质茎, 桂枝为樟科植
物肉桂 C innam om um cassia P resl 的干燥嫩枝, 苦杏
仁为蔷薇科植物山杏 P runus a rm en iaca L. var.
ansu M ax im. 的干燥成熟种子, 甘草为豆科植物甘
草 G ly cy rrh iz a u ra lensis F isch. 的干燥根及根茎。
饮片购自广东省药材公司中药饮片厂, 经本校中药
鉴定学教研室鉴定。盐酸麻黄碱 (中国药品生物制
品检定所, 批号 12412200001) ; 盐酸伪麻黄碱 (国家
麻醉品实验室, 批号 123729601) ; 三氟醋酐 (美国
A CRO S 公司, T FAA )、二苯胺 ( IS)、氯化钠、盐酸、
环己烷、二氯甲烷、醋酸乙酯, 均为分析纯。
112　样品液的制备: H ED (麻黄 9 g+ 桂枝 6 g+
杏仁 6 g+ 甘草 3 g)×5= 120 g, H E 9 g×5= 45 g,
各加 10 倍量水, H E 先煎 20 m in, 再和余药共煎 30
m in, 棉花滤过去渣, 旋转蒸发浓缩至 90 mL , 以生
药麻黄计, 得 015 gömL H ED 和 H E。
113　动物: 昆明种小鼠, 雌雄兼用, 体重 20～ 24 g,
第一军医大学动物实验中心提供。
114 　主要仪器: 气相色谱2质谱仪 (H P6980—
M S5973, 美国安捷伦) , H P25 弹性石英毛细管 (25
m ×0. 2 mm ) ; 定量移液器 (Eppendo rf, 德国)。
2　方法
211　对照品溶液的制备: 分别精密称取盐酸麻黄
碱、盐酸伪麻黄碱 10、5 m g, 置 10 mL 量瓶中, 加
011 mo löL 稀盐酸稀释至刻度、摇匀, 即得混合标准
储备液。精密称取 IS 2 m g 置 100 mL 量瓶中, 醋酸
乙酯稀释至刻度, 摇匀, 即得 IS 储备液 (2010 Λgö
mL )。
212　色谱ö质谱条件: 色谱柱: H P25 弹性石英毛细
管 (25 m ×0. 2 mm ) ; 进样量 1 ΛL , 无分流进样, 进
样口温度 220 ℃; 载气 H e, 恒流模式; 柱流量 110
mL öm in。柱初温 120 ℃, 1 m in 后以 10 ℃öm in 升
至 185 ℃, 再以 30 ℃öm in 升至 245 ℃, 保持 5
m in, 接口 280 ℃, 离子源 E I, 电离电压 70 eV , 倍增
电压 1 635 V , 选择离子检测 ( S IM , m öz = 154,
265) [1 ]。
213　动物处理: 小鼠 80 只, 雌雄各半, 随机分为 20
组, 每组 4 只, 实验前 12 h 开始禁食不禁水。其中 10
组分别 ig H ED , 另 10 组 ig H E, 每只 015 mL (相当
于麻黄 0125 g) , 分别于给药后 10、20、30、45、60、
90、120、240、480、720 m in 各处死 1 组小鼠, 迅速取
出脑、心、肺、肝、肾等脏器组织, 洗去表面的血液, 称
质量。保鲜膜包裹, 立即置于 - 20 ℃ 冰箱保存。
214　样品处理及分析: 按照组织质量 (g) 与生理
盐水 (mL ) 1∶4 (心脏为 1∶8) 的比例匀浆, 3 000
röm in 离心 20 m in。取匀浆液各 015 mL , 分别置于
10 mL 尖底玻璃试管中, 再各加 011 g N aC l, 200ΛL 5 mo löL N aOH , 30 ΛL IS 储备液, 215 mL 萃取
液 [环己烷2二氯甲烷 (3∶1) ], 漩涡混合器振荡 5
m in, 3 000 röm in 离心 10 m in, 取上清液 2 mL 于
Eppendo rf 管中, 氮气流吹干, 加 50 ΛL T FAA 与
100 ΛL 醋酸乙酯, 漩涡混合, 70 ℃ 衍生化 30
m in [2, 3 ] , 氮气流吹干, 加 100 ΛL 醋酸乙酯溶解, 进
样 110 ΛL , 用峰面积与内标物峰面积的比值进行定
量分析。
3　结果
311　色谱行为: 样品处理后, 采用 GC2M SöS IM 进
行测定, 专属性强, 响应值较高, 各种组织匀浆液中
杂质均不干扰样品的测定。E、PE 及 IS 的保留时间
·287· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
分别为: ( 6150± 0105)、( 7135 ± 0105)、( 9178 ± 0105) m in, 色谱图见图 1。
图 1　样品和对照品的 GC-M SöSIM 色谱图
F ig. 1　GC-M SöSIM chromatogram s of samples and reference substances
312　E、PE 在空白肝匀浆中的标准曲线: 经预实
验, 不同组织的提取回收率相近 (P > 0105) , 因此在
方法学考察项目中, 进行了肝空白组织的考察, 在样
品含量测定中做了随行标准曲线。取肝空白匀浆液
各 015 mL 于 10 mL 尖底玻璃试管中, 各加入 011
mL 不同浓度的盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品
溶液, 配成含盐酸麻黄碱 01050、015、210、1010、
2510 ΛgömL , 含盐酸伪麻黄碱 01025、0125、110、
510、1215 ΛgömL 标准组织样品, 余下处理方法同
214 项“再各加 011 g N aC l, ⋯⋯”。经 GC2M SöS IM
测定结果: 盐酸麻黄碱: Y = 0. 663 6 X + 0. 046 5,
r= 0. 999 4, 线性范围为 01050～ 25100 ΛgömL。盐
酸伪麻黄碱: Y = 11326 7 X - 01034 5, r= 0. 999 7,
线性范围为 01025～ 12150 ΛgömL。最低检测质量
浓度分别为 01025、01010 ΛgömL (S öN = 3)。
313　精密度试验: 取给药后不同时间组织样品混合
成高、中、低 3 种药物浓度, 每种分别取样 4 次, 在
同日内用同一条标准曲线进行处理、分析, 得日内精
密度; 在一周内不同日用不同的标准曲线测定得日
间精密度。结果表明 E 的日内和日间精密度分别是
R SD < 4177% 和 R SD < 6115% ; PE 的日内和日间
精密度分别是 R SD < 5176% 和 R SD < 7138%。说
明本试验方法符合生物样品精确度要求[4 ]。
314　加样回收率试验: 取已准确测定含量的混合组
织样品 12 份, 分为 3 组, 每一组分别加入含盐酸麻
黄碱 215、10、25 ΛgömL 及含盐酸伪麻黄碱 1125、
510、1215 ΛgömL 的对照品溶液 011 mL , 按 214 项
方法处理、分析。结果测得盐酸麻黄碱的回收率为
85167%～ 88180% , R SD = 1. 86% (n= 12) ; 盐酸伪
麻黄碱的回收率为 85133%～ 89172% , R SD =
2. 63% (n= 12)。说明本试验方法符合生物样品准
确度要求[4 ]。
315　稳定性试验: 分别取脑、肺、心、肝、肾样品匀浆
液各 4 份, 放于 - 20 ℃ 冰箱保存, 在 7 d 内不同的
时间按样品处理方法处理、测定, 同组织样品用同一
条标准曲线进行分析计算, 结果见表 1。
表 1　E 和 PE 在小鼠组织匀浆液中的稳定性 (x ±s, n = 4)
Table 1　Stabil ity of E and PE in m ice tissues
homogenate (x ±s, n = 4)
组织
E
含量ö(Λg·mL - 1) RSD ö% PE含量ö(Λg·mL - 1) RSD ö%
脑 　　4146±0124 5138 　　1189±0113 6188
肺 5188±0131 5127 2118±0112 5151
心 6156±0123 3151 2154±0115 5191
肝 5197±0123 3185 2124±01089 3197
肾 10148±0155 5123 4119±0136 8159
316　H ED 和 H E 中 E 及 PE 在小鼠脏器组织中的
主要动力学参数: 将各组织按 214 项方法处理、分
析, 数据采用国际标准 PKöPD 软件W inN on lin 中
的非房室模型法进行计算, 其中 A U C 采用梯形面
积法, Cm ax、T m ax采用三点抛物线法拟合。主要动力学
参数见表 2 和 3。
4　讨论
411　H ED 中 E、PE 在各组织中主要动力学参数的
分析: 结果表明 H ED 中 A U C E的分布趋势是: 肺>
肾脏> 脑、心脏> 肝脏,A U C PE是: 肺> 肝脏> 肾脏、
脑> 心脏; E 被组织的摄取速度 (T m ax) 是: 肺最快,
表 2　E 在小鼠脑、心脏、肺脏、肝脏、肾脏的主要动力学参数 (x ±s, n = 4)
Table 2　M a in pharmacok inetic parameters of E in m ice bra in , heart, lung, l iver, and k idney (x±s, n= 4)
参数　　单　位
　　　 　脑　　 　　
HED　　　　HE
　　　 　心　脏　 　　
HED　　　　HE
　　　 　肺　脏　 　　　
HED　　　　HE
　　　 　肝　脏　 　　　
HED　　　　HE
　　　 　肾　脏　 　　　
HED　　　　HE
A UC (Λg·g- 1)·h 18193±0195 39183±2139 18155±1130 8132±0150 27168±0183 41118±2188 9183±0143 21149±1118 25160±1166 42180±2178
T max　　　　h 0165±0104 2172±0109 0134±0102 1147±0110 0132±0101 0173±0105 0136±0103 1113±0105 0138±0103 0117±0101
Cmax　　　Λg·g- 1 5148±0132 17196±1138 9158±0163 12154±0190 11192±0187 13118±0184 8111±0155 6107±0139 12134±0195 9174±0144
t1ö2　　 　　h 3110±0114 1195±0109 4141±0125 2163±0120 3126±0111 2150±0114 8122±0149 2159±0114 2152±0112 3153±0121
CL 　　　　g·h - 1 38114±1179 25113±1123 34160±1166 35109±2114 26175±1152 23117±1109 55111±3197 43139±2143 29179±1176 20138±1110
M R T 　　 　h 3140±0118 3133±0115 2151±0111 2154±0112 3115±0120 3143±0116 3148±0117 3145±0118 2118±0110 4102±0123
·387·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
表 3　PE 在小鼠脑、心脏、肺脏、肝脏、肾脏的主要动力学参数 (x ±s, n = 4)
Table 3　M a in pharmacok inetic parameters of PE in m ice bra in , heart, lung, l iver, and k idney (x ±s, n = 4)
参数　　单　位
　　　 　脑　　 　　
HED　　　　HE
　　　 　心　脏　 　　
HED　　　　HE
　　　 　肺　脏　 　　　
HED　　　　HE
　　　 　肝　脏　 　　　
HED　　　　HE
　　　 　肾　脏　 　　　
HED　　　　HE
A UC (Λg·g- 1)·h 8111±0145 16102±0178 7149±0143 4112±0123 13144±0163 11179±0160 9107±0143 7199±0142 8171±0145 18131±0197
T max　　　　h 0156±0103 2171±0113 0132±0102 1144±0109 1104±0105 0171±0104 0129±0102 1107±0106 0136±0102 0117±0101
Cmax　　　Λg·g- 1 2148±0111 8127±0141 3169±0118 5106±0125 7150±0138 4115±0122 4196±0128 3124±0114 5138±0130 5167±0133
t1ö2　　 　　h 3195±0116 1186±0186 4140±0125 3107±0116 3144±0118 2133±0113 3153±0120 2148±0116 3175±0117 2176±0115
CL 　　　　g·h - 1 36198±2103 30117±1178 46102±2185 39166±2122 24150±1147 38151±2143 39105±2119 49113±3134 37145±2158 23172±1100
M R T 　　 　h 3157±0116 3111±0120 2119±0110 2194±0111 2169±0113 3112±0120 2188±0118 2190±0119 2108±0110 3157±0117
其次是心脏和肝脏, 再次是肾脏, 最慢是脑; PE 被
组织的摄取速度 (T m ax) 是: 肝脏最快, 其次是心脏
和肾脏, 再次是脑, 最慢是肺脏; E 的最大摄取浓度
(Cm ax ) 是: 肾脏> 肺> 心脏> 肝脏> 脑, PE 的 Cm ax
是: 肺> 肾脏> 肝脏> 心脏> 脑; 平均驻留时间
M R T E是: 肝脏、脑、肺> 心脏、肾,M R T PE是: 脑> 肝
脏、肺> 心、肾脏。
412　H E 中 E、PE 在组织中主要动力学参数的分
析: 结果显示 H E 中 A U C E趋势是: 肾脏、肺> 脑>
肝脏> 心脏,A U C PE是: 肾脏、脑> 肺> 肝脏> 心脏;
E、PE 的 T m ax是: 肾脏> 肺> 肝脏> 心脏> 脑; E 的
最大摄取浓度 Cm ax: 脑> 肺> 心脏> 肾脏> 肝脏,
PE 的最大摄取浓度 Cm ax: 脑> 肾脏> 心脏> 肺> 肝
脏;M R T E是: 肾脏> 肝脏、肺、脑> 心脏,M R T PE是:
肾脏> 肺、脑肝、脏> 心脏。
413　H ED 和 H E 中 E、PE 的药动学参数基本与麻
黄归“肺经”并主要经肾脏从尿液以原形排泄的报道
相一致。在脑组织中的累积分布量, 证明两者均能透
过小鼠血脑屏障。E 和 PE 在各组织动力学参数的
不一致, 说明可能是构象的差异影响了其与组织分
子或受体的亲和力所致。
414　H ED 和 H E 中 E、PE 在组织中主要动力学参 数的比较分析: E 在脑、肺、肝、肾脏的分布量是H E> H ED; 而 PE 在脑、肾脏的分布量是 H E >H ED , 在肺脏的分布量相近。提示 H ED 中桂枝、苦杏仁、甘草三者影响 E、PE 在某些组织的累积分布量, 其机制有待进一步研究。E 是 H E 兴奋中枢的主要成分, H ED 相对于 H E 而言其 E 在脑组织分布量降低, 表明 H ED 具降低单味药 H E 兴奋中枢所导致的失眠、不安等不良反应的可能, 而又不失其药效。H E 中 E、PE 在脑、心、肺、肝组织的 t1ö2均小于H ED , 为什么 H E 中 E、PE 代谢速度大于 H ED , 及配伍是否减慢了 E、PE 的代谢, 有待进一步研究。References:[ 1 ]　Yang L L , T u X D 1 D eterm ination of p seudoephedrine in hu2m an p lasm a by gas ch rom atography w ith a m ass selective de2tecto r (GC2M SD ) [J ]1 A cta P harm S in (药学学报) , 1993,28 (9) : 70927131[ 2 ]　M ai E D , W ang J H , Yan F Z, et a l. D eterm ination of p seu2doephedrine in rabb it serum by H PL C [J ]1 Ch in J P harmA na l (药物分析杂志) , 1994, 14 (4) : 272291[ 3 ]　V alen tine J L , M iddleton R 1 GC2M S iden tification of sympa2thom inetic am ine drugs in urine: rap id m ethodo logy app lica2b le fo r em ergency clin ical tox ico logy [J ]1 J A na l T ox icol,2000, 24 (3) : 21122121[ 4 ]　Zeng J Z1 A na ly sis of B iology M ed icine (生物药物分析)[M ]1 2nd ed. Beijing: A ssociated Pub lish ing House of Bei2jing M edical U niversity and Pek ing U nion M edical Co llege,19981
麝香抗栓丸对大鼠实验性脑缺血的保护作用
赵红梅, 于晓风, 曲绍春, 徐华丽, 睢大　Ξ
(吉林大学药学院 药理教研室, 吉林 长春　130021)
摘　要: 目的　观察麝香抗栓丸 (SA T P) 对大鼠实验性脑缺血的保护作用。方法　采用大鼠结扎双侧颈总动脉伴
低血压模型, 探讨 SA T P 对实验性脑缺血大鼠脑含水量、脑组织病理、超氧化物歧化酶 (SOD )、丙二醛 (M DA )、钙
离子 (Ca2+ ) 及乳酸 (LA ) 等指标的影响。结果　SA T P 能明显降低实验性脑缺血大鼠的脑含水量, 改善脑组织病
理变化, 提高脑组织 SOD 活性, 降低M DA、Ca2+ 及LA 含量, 水丸的作用效果强于蜜丸。结论　SA T P 对大鼠实验
·487· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003209203
作者简介: 赵红梅 (1975—) , 女, 河北文安人, 吉林大学药学院药理教研室心脑血管药理专业硕士研究生, 主要从事心脑血管药物研究。3 通讯作者　T el: (0431) 5619660　E2m ail: dayuansu i@ 163. com