全 文 ：中草药 第 卷第 期 年 月 ·
青龙衣不同提取部位的抗肿瘤作用研究
季宇彬 , 马宏 图 , 杨 波 , 汲晨锋
哈尔滨商业大学药物研究所 博士后科研工作站 , 黑龙江 哈尔滨
摘 要 目的 观察青龙衣不同提取部位的抗肿瘤作用 。 方法 制备 。和 荷瘤小鼠模型 , 青龙衣不同提取部
位 给药 , 观察其对 , 小鼠的抑瘤作用及对胸腺
、
脾脏器官指数的影响 , 对 。和 荷瘤小 鼠癌细胞膜和红细
胞膜表面唾液酸 含量的影响 。 结果 青龙衣冷 、热醇提取部位对 荷瘤小 鼠均有明显的抑瘤作用 , 并呈 良
好的剂量 一效应关系 对 荷瘤小 鼠可延长生存期 冷
、 热醇提取部位能显著降低 。和 小鼠肿瘤细胞膜表面
含量 , 同时显著提高荷瘤小 鼠红细胞膜表面 含量
。 结论 青龙衣冷
、
热醇提取部位具有抗肿瘤作用 。
关健词 青龙衣不同提取部位 唾液酸 抗肿瘤作用
中圈分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
一 , 一 , , 一
, , , ,
。一 一 , 。。
, ,
。一 一
一 。一 ,
一
青龙衣 为胡桃科植物胡 桃 揪
比 和胡桃 故 的未成熟
外果皮 , 性味苦 、 涩 、 平 , 现代研究表明其抗肿瘤作用
明显川 。 为进一步探讨青龙衣抗肿瘤作用 的有效成
分 , 本实验观察了青龙衣两个不同提取部位的抑瘤作
用及对荷瘤小 鼠细胞膜唾液酸 含量的影响 。
材料
动物 昆明种小 鼠 , 体重 , 雌雄兼用 ,
由黑龙江中医药大学动物室提供 。
药物与试剂 青龙衣冷醇提取部位 含胡桃醒
及 青 龙 衣 热 醇 提 取 部 位 含 胡 桃 醒
均 由哈尔滨商业大学药物研究所博士后科
研工作站 自制 , 应用 时以生理盐水配制 。 环磷酞胺
上海旭东海普药业有限公司 , 批号 。 测
定试剂盒 南京建成生 物公 司 , 蛋 白定量试剂盒
南京建成生物公司 。
瘤株 小 鼠肝癌 、 肉瘤 瘤株均 由黑龙江
肿瘤研究所提供 , 本所移植传代 。
仪器 一 紫外可见分光光度计
公司 , 低速离心机 北京离心机厂 , 低温高速离
心机 。
方法
对 小 鼠瘤重及免疫器官指数的影响 小 鼠
随 机 分组 , 雌 雄 各半 。 分别 为 冷 醇 高 、 中 、 低 剂 量
· 、 · 、 · 组 , 热醇高
、 中 、低剂
量 、 、 组 , 环磷酞胺
组 , 生理盐水组 。 冷 、 热醇提取部位的给药
剂量均为半数致死量 的 、 、 。
。
各组小
鼠于右前腋皮下常规接种 。瘤细胞悬 液
约 一 个细胞 , 接种后各组 给药 ,
连续 。 末次给药后处死小 鼠 , 称体重 , 称瘤块 、胸
腺及脾脏质量 , 计算抑瘤率 、 胸腺指数和脾指数 。
收稿 日期 一 一
基金项 目 黑龙江省 自然科学基金项 目 一
作者简介 季宇彬 一 , 男 , 博士 , 教授 , 博士生导师 , 研究方向为中药药理学及肿瘤药理学
。
· 中草药 第 卷第 期 年 月
对 小 鼠生命延 长 率 的影 响 分组 同 离心 , 弃上清液 。
项
。
小 鼠腹腔接种 瘤细胞悬液 约 洗 涤 次 同样转速 , 吸取 白色沉淀物 , 将其悬浮
‘一 个细胞 , 给药方法 同 项 , 每天观察 在 、 溶 液
并记录小 鼠死亡情况 。 , 中 , 蛋白定量及 测定同 项 。
对荷瘤小 鼠细胞膜表面 含量的影响 结果
肿瘤细胞膜 含量测定 分组 与给药 同 对 小 鼠瘤重及免疫器官指数的影响 结果
项 。 给 药 结 束后 抽 取 小 鼠腹 水 。
,
, 见表 。 青龙衣冷醇 、 热醇提取部位与生理盐水组 比
离心 , 弃上清液 。 加人 较均有显著的抑瘤作用 , 。冷醇低剂
除去红细胞 , 适量 洗涤 次 , 蒸馏水破膜 。 量和热醇低 、 中剂量降低小 鼠的胸腺指数 , 但比环酞
离心 , 弃上清液 , 将沉淀悬浮在 磷胺组有所提高 , 差异不显著 尸 冷 、 热醇
适量 液 中 。 蛋 白定量采用考马斯亮蓝法阁 , 膜 提取部位升高荷瘤小 鼠的脾指数 , 与环磷酞胺组 比
蛋 白质量浓度为 , 含量测定按试剂 较差异显著 , 而与生理盐水组 比较差异
盒说明书操作 , 含量以吸光度 值表示 。 不显著 , 这与相关报道是相符的闭 。 提示青龙衣冷 、
红细胞膜 含量测定 分组与给药同 热醇提取部位可能具有 同环磷酞胺相 同的副作用 ,
项 , 给药结束后取 全血 , 生 理盐水 离 抗肿瘤的同时使荷瘤小 鼠体重减轻 。
心 , 生理盐水 洗 涤 次 , 悬 浮在 生理盐水 对 小 鼠的生命延长作用 结果见表 。 青龙
中 。 加人 , 同时 衣不 同提取部位均可延长 小 鼠生命 , 与生理盐
加入 蛋 白酶抑制 剂 , 溶血 , 水组 比较差异显著 。
表 青龙衣不 同提取部位对 小鼠瘤重及免疫器官指数的影响 士 , , 碑 一
一 士 ,
组 别
剂 量 动物数 只 体重 瘤块质量
· 一 ‘ 始 末 始 末
抑瘤率 脾指数
,︸︺夕曰︺六乃孟几
⋯
只︸﹃月了门﹃乃座月左﹁︵拟︺八乃廿以计,工,‘八曰口乙曰心自翻目一了︵朽遗尹口甘一峨上尸乃心
⋯
,以斗邝乙户勺曰冷醉提取部位
热醇提取部位
环磷酞胺
生理盐水
士
士
士
士
士
士
士
士
士
士 “
士
士
士
士 “
士 书
士
士 朴 苍
士 补 苍
士 普
士 苦
士 “ 肠
士 开 甘
士 件 苍
士
胸腺指数
· 一 ’
士
士
士 ▲
士
士 ▲
士 ‘
士 圣
士
· 一 ’
士 ‘
士 ‘
士 ▲
士 ▲
士 ▲
士 ▲
士 专
士
与生理盐水组 比较 ‘ 尸 “ 尸 。 与环磷酞胺组 比较 ‘ 尸
怜 份 香 刀 ▲
对荷瘤小 鼠细胞膜表面 含量的影响
对 。小 鼠瘤 细胞膜和 红细胞膜表 面
含量的影响 结果见表 。
表 青龙衣不 同提取部位对 小鼠
生存期的影响 ‘士 , 一
一 士 , 一
组 别 剂量 · 一‘ 生存期 生命延长率
对 小 鼠瘤 细胞 膜 和 红 细胞膜表 面
表 青龙衣不 同提取部位对 小鼠摘细胞膜和
红细胞膜 含且的影响 ‘士 ,
一 士 , 井
组 别 剂量 · 一 ‘ 瘤细胞膜 红细胞膜
生理盐水 一 士 士
环磷酞胺 士 · 士
冷醇提取部位 士 , 士 。
, ·
,
士 士 奋
士 士
热醇提取部位 士 , 士 ,
士 食 士 闷
士 士
与生理盐水组比较 书 尸
书
︸’
热醇提取部位
环磷酞胺
生理盐水
士
士
士
士
士
士
士
士
八乃件︸几尸一了︺认位部取提醇冷
与生理盐水组 比较 ‘ 尸
树
中草药 第 卷第 期 年 月 ·
含量的影响 结果见表 。
表 , 龙衣不 同提取部位对 。小鼠摘细胞膜和
红细胞膜 含 的影响 ‘ 士 , 一
一 士 , 碑一
组 别 剂量 · 一 ‘ 瘤细胞膜 红细胞膜
生理盐水 一 士 士
环磷酞胺 士 士
冷醇提取部位 士 ‘ 士 ‘
士 铃 士 “
士 ‘ 士
热醇提取部位 士 , 士 ,
士 甘 士 赞
士
,
士 苍
与生理盐水组 比较 · 尸 。
丹
表 和 结果表明 , 青龙衣两个提取部位均能
明显降低癌细胞膜表面 含量 , 与生理盐水 比较
差异显著 尸 , 并能显著升高红细胞膜表面
的 含量 , 与生理盐水 比较差异显著 尸 ,
表明青龙衣两个提取部位抗肿瘤作用机制很可能是
通过影响细胞膜来实现的 。
讨论
通过生物膜研究疾病 , 是 目前探讨疾病发病机
制的重要途径之一 。 参与许多生物学现象的调
控 , 包括激素的作用 、 酶的催化 、 细胞间的识别和薪
着 、 免疫反应 、物质转运 、 突触的传递 、 神经的再生及
神经 中枢的高级神经活动等圈 。 研究表明 , 肿瘤细胞
膜表面 含量与正常细胞表面的含量相 比有显著
增加 。 肿瘤细胞膜上 的异常增加与肿瘤恶性程
度有关困 。 本实验结果表明青龙衣冷 、 热醇提取部位
均能显著降低荷瘤小 鼠癌细胞表面 含量 , 说明
其具有一定抗肿瘤转移能力比“ 〕, 其作用是抑制了正
常细胞转变为肿瘤细胞 。 本实验结果还表明青龙衣
不 同提取部位均能显著增加 红 细胞膜表面 含
量 。 提示青龙衣抗肿瘤的机制可能是抑制 了肿瘤的
血行转移 , 即抑制了 从红细胞膜表面的脱落 , 从
而延缓正常的红细胞的免疫功能低下的过程 。
青龙衣两个提取部位中主要含有胡桃酿 、 昔类
和少量多糖类物质 , 抗肿瘤作用明显 。 由本实验看 ,
青龙衣两个提取部位能延长荷瘤小 鼠生命 , 对小 鼠
肉瘤生长也有明显 的抑制作用 。 从免疫器官的影响
来看 , 具有降低免疫器官指数的趋势 , 因此可 以推测
是其毒性作用的表现 。但与环磷酞胺 比较 , 作用又较
小 尸 , 推测与其含有多糖类物质有关 。
」
〕 八 七 , , 一
·
〔 〕 腼 人。己 卿 尸人 护 药理
实 验 方 法 学 〕 氏 ,
,
」 , , ,
〔〕 动 咭
中国生物制品杂志 , , 一
·
〔 〕
〕
己 七 中国 中医 基础 医 学杂志 ,
, 一
〕 , ,
月 材七己 , 二 哈
尔滨医科大学学报 , ,
·
〕 , 一 , 一
。 。 〕 ‘ ,
, 一
〔 〕
〕 药学进展 , ,
·
仁 」 , 邓 , , 儿
〕 尺 , ,
复方 对人肝星状细胞 价平滑肌肌动蛋 白 表达的调节作用
王 琳‘ , , 王 宝恩 , , 青培根“ , 汪 建‘ , 乔延江‘ , 谈学海
北京 中医药大学中药学院 , 北京 北京友谊医 院 肝病研究中心 , 北京 。 中国医学科学院
中国协和医科大学药用植物研究所 , 北京 北京华大基因研究 中心 , 北京
摘 要 目的 研究复方 对人肝星状细胞 一 中 一平滑肌肌动蛋白 一 基因表达的调节作用 。 方法
应用基于 一 的实时定量荧光 方法 , 研究复方 分别作用 、 、 后 , 一 细胞中 一
收稿 日期 一 一
荃金项 目 中国科学院创新工程项 目 一 一
年毕业于北京中医药大学 , 而后在北京中医药大学任教 , 并从事证作者简介 王 琳 一 , 女 , 山 四太原人 , 助教 , 傅士研究生 , , 仕
候学的研究工作 , 年考取北京中医药大学与北京华大基因研究中心联合培养的博士 , 导师为 肖培根院士和王宝恩教授
研究方向为中药基因组学
。