全 文 ：·J052· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7,El
龙葵碱对S。80小鼠红细胞膜唾液酸和封闭度的影响
季宇彬，万梅绪，高世勇，邹翔
(哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站，黑龙江哈尔滨 150076)
摘 要：目的 观察龙葵碱对s。。。小鼠红细胞膜唾液酸(SA)水平和红细胞膜封闭度的影响。方法采用比色法测
定S-so荷瘤小鼠的红细胞膜表面的SA水平和封闭度。结果龙葵碱能显著升高s。。小鼠红细胞膜表面的SA水平
和增加红细胞膜的封闭度，差异显著(P<0．05)。结论龙葵碱可能是通过增加红细胞膜表面的SA水平和增加
封闭度来达到抗肿瘤作用的。
关键词：龙葵碱；S。。。小鼠；红细胞膜唾液酸；红细胞膜封闭度
中图分类号：R286．91 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1052一02
EffectofSolanumigrumtotal kaloidOilsialicacidandblockingdegree
oferythrocytemembraneinS180mice
JIYu—bin，WANMei—XU，GAOShi—yong，ZOUXiang
(PostdoctoralPr gramme，InstituteofMateriaMedica，HarbinUniversityofCommerce，Harbin150076，China)
Abstract：ObjectiveTos udytheffectofSolanumigrumtotallkaloid(SNTA)onsialica id
(SA)andblockingde reeof rythrocytemembraneinS180tumor—bearingmice．MethodsUsingchro—
matometrytodeterminetherythrocytemembranesialica idanderythrocytemembraneblockingdegree．
ResultsSNTAcouldincreaseerythrocytemembranesialica idlevelandheightenerythrocytemembrane
blockingdegreeinS180tumor—bearingmicesignificantly(P<0．05)．ConclusionInhibitiontumorf
SNTAcanbeaccomplishedthroughimprovingerythrocytemembranesialica idanderythrocytemembrane
blockingdegree．
Keywords：SolanumnigrumL．totala kaloid(SNTA)；S180tumor—bearingmice；erythrocytemem—
branesialica id；erythrocytemembraneblockingdegree
龙葵碱是从茄科茄属植物龙葵Solanurn超Z
grumL．中提取出来的一种生物碱。前期研究结果
表明龙葵碱能显著延长H。：荷瘤小鼠的生存时间，
并能显著降低H。。荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性及膜
蛋白水平[1]，明显降低H。。荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾
液酸和封闭度[2]，还可通过影响荷瘤小鼠肿瘤细胞
DNA和RNA水平来实现抗肿瘤作用[3]。在前期实
验的基础上发现，龙葵碱能明显降低红细胞免疫黏
附肿瘤细胞的花环率[4]，从而增强红细胞的免疫黏
附能力。因此，本实验从红细胞的免疫角度进一步观
察龙葵碱对红细胞膜上唾液酸(SA)和封闭度的影
响，并探讨其可能的作用机制。
1材料
1．1 动物与瘤株：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～
22g，由哈尔滨医科大学动物中心提供，许可证号
001010006。瘤株由哈尔滨肿瘤医院肿瘤研究所提供。
1．2药品及试剂：龙葵碱(由黑龙江省药品检验所
提供，质量分数>99．9％)；5一氟尿嘧啶(上海忠骅
化工有限公司，批号05一06—33)；DPH(Sigma公司
提供)；考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒、SA试剂盒(南
京建成生物工程研究所)；皂素(上海化学试剂采购
供应站，批号86—12—22)。
1．3仪器：752可见分光光度计，上海光谱仪器有
限公司制造；水平高速离心机，北京医用离心机厂制
造；恒温水浴箱，厦门医疗电子仪器厂制造；低温高
速离心机，美国Beckman公司制造；超净工作台，苏
州净化设备厂制造。
2 方法
2．1分组：昆明种小鼠，雌雄各半，随机分为5组，
每组lo只，为对照组、5一氟尿嘧啶(30mg／kg)组、
收稿日期：2005—12—10
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30400591)；黑龙江省自然科学基金资助项目(D2004—13)；哈尔滨市青年科学基金资助项目
(2004AFQxJ035)
作者简介：季宇彬(1956一)，男，博士，教授，博士生导师，多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理及分子药理学研究。
Tel：(0451)84866001Fax：( 451)84866001Email：syga02002@162．com
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1053·
龙葵碱低、中、高剂量(1．1、2．2、4．4mg／kg)组。
2．2模型建立及给药：无菌条件下，取接种生长良
好的S。。。荷瘤小鼠瘤株，在超净工作台上抽取腹水，
在冰浴条件下，以生理盐水1：4稀释、混匀制成肿
瘤细胞悬液(5×106／mL，肿瘤细胞混悬液应为乳
白色半透明状态，若有血性腹水不可使用)。按每只
0．2mL接种于各组小鼠右侧前肢下。接瘤24h后，
各组ip给药，对照组按相同体积ip生理盐水，无菌
条件下连续给药7d。次日处死动物测定各项指标。
2．3 SA水平的测定：按试剂盒方法进行膜蛋白定
量后，按试剂盒方法测定SA。
2．4红细胞影泡的制备
2．4．1不封闭影泡的制备：给药7d后次日小鼠眼
球取血，肝素抗凝，在水平高速离心机下3000r／
min离心10min，以生理盐水(1：3)洗涤2次，
1：1悬浮在生理盐水中，得到红细胞悬液，按1：30
加入预冷的双蒸水或5P8．4的等渗磷酸缓冲液
(PBS)，4‘C下溶血，过夜，制成红细胞溶血液。4‘C
下以2000×g离心40min，弃上清液，用5P8．4
PBS洗涤3次，最后悬浮在一定量PBS中。即制成
影泡悬浮液。
2．4．2封闭影泡的制备：影泡悬浮液在37℃下水
浴1h，可获得封闭影泡。
2．5封闭度的测定及计算：按Zamudio法[51进行，
具体操作及计算方法参考文献方法[2]。
2．6数据处理：用SPSS11．0软件处理，各组数据
以(z±s)表示，样本比较采用方差检验。
3 结果
3．1 龙葵碱对红细胞膜SA水平的影响：结果见
表1。与对照组比较，龙葵碱低、中、高剂量组S，。。小
鼠红细胞膜表面的SA水平均提高，差异显著(P<
0．05)；阳性对照5一氟尿嘧啶组红细胞膜表面SA
也有提高。
3．2龙葵碱对红细胞膜封闭度的影响：结果见表
1。与对照组比较，龙葵碱低、中、高剂量组均能显著
提高S，。。小鼠红细胞膜表面的封闭度(尸<0．05)，
且随着剂量的增加，封闭度也明显升高。阳性对照
5一氟尿嘧啶也有明显升高封闭度的作用。
4讨论
红细胞膜SA的减少，导致红细胞免疫活性的
降低。同时，SA的减少促进红细胞的老化，使红细
胞凝集性、胞膜的脆性增加，细胞崩解破裂、数量减
少，从而影响红细胞的正常生理生化功能，可能导致
表1 龙葵碱对$180小鼠红细胞膜SA水平和封闭度的
影响(工±S，万一10)
Table1 EffectofSNTAonSAlevelandblockingdegree
ofRBCmembraneinS180mice(J±S，n=10)
组别剂量／(rag·kg一1)SA／(mmol·L_1)封闭度／％
与对照组比较：。P<0．05
’P<0．05UScontrolgroup
肿瘤病人常伴有贫血的发生。由于SA的减少，使其
不能有效地清除循环免疫复合物(CIC)，致使大量
CIC沉积血管基，最终激活补体造成免疫损伤[6~8]。
本实验证明龙葵碱升高了红细胞膜表面的SA，这
可能是龙葵碱抗肿瘤的作用机制之一。
红细胞封闭度是测定红细胞重新封闭能力的指
标，红细胞封闭度的改变即可体现出红细胞膜功能的
改变。本实验结果表明龙葵碱对红细胞膜的封闭度具
有升高作用，说明龙葵碱可增加荷瘤小鼠红细胞膜的
重新封闭能力，增加红细胞膜的稳定性，改善红细胞
膜的结构和功能，从而提高红细胞的免疫能力。
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万方数据
龙葵碱对S180小鼠红细胞膜唾液酸和封闭度的影响
作者： 季宇彬， 万梅绪， 高世勇， 邹翔， JI Yu-bin， WAN Mei-xu， GAO Shi-yong， ZOU
Xiang
作者单位： 哈尔滨商业大学药物研究所,博士后科研工作站,黑龙江,哈尔滨,150076
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 8次
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8.汲晨锋.肖凤 青龙衣多糖对S180小鼠红细胞膜组分的影响[期刊论文]-哈尔滨商业大学学报（自然科学版）
2008(4)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200607038.aspx