全 文 ：3. 2　化合物Ⅳ ;黄色针状结晶 , mp 182℃～ 183℃
(醋酸乙酯重结晶 ) ,分子式为 C18 H12O5 ,相对分子质
量为 308。不饱和度为 13。 UV λmax nm: 308. 4,
251. 2, 208. 6。 IRνKBrmax cm- 1: 1 640, 1 606(> C= O) ,
1 570, 1 513 ( -Ar ) , 1 453, 1 413, 1 375, 1 249,
1 209, 1 051 ( benzofuran) , 3 400～ 2 900 cm- 1 ( -
O H)。 MS m /z (% ): 307( M+ - H, 100) , 308( M+ ,
95) , 266( M
+
+ H, CH3-CO, 15) , 279( M
+
- H- CO,
23) , 160 ( M
+
- HO phC≡ OCH3 , RDA, 55) , 132
( 160- CO, 25) , 121, 116, 105, 76, 44。 1 H-NMRδH:
8. 20 ( 1H, d, J 5, 6= 9 Hz, H-5) , 7. 54( 1H, d, J 5, 6= 9
Hz, H-6) , 7. 73 ( 1H, d, J 2″, 3″= 2 Hz, H-2″) , 7. 17
( 1H, dd, J 2″, 3″= 2 Hz, J 3″, 6″= 1. 5 Hz, H-3″) , 7. 85
( 1H, t , J 2′, 6″= 5 Hz, J 2′, 4″= 2 Hz, H-2′) , 7. 65( 1H,
d, J 5′, 6′= 8 Hz, H-6′) , 7. 43( 1H, t , J 5′, 6′= J 5′, 4′= 8
Hz, H-5′) , 7. 10( 1H, dd, J 4′, 5′= 8 Hz, J 4′, 6′= J 4′, 2′=
2. 5 Hz, H-4′) , 3. 89( 3H, s, 3-OCH3 ) , 3. 81( 1H, s,
3′-OH)。 13 C-NMR( CDCl3 )δC: 155. 3( C-2) , 141. 8
( C-3) , 175. 6 ( C-4 ) , 121. 8 ( C-5) , 110. 2 ( C-6 ) ,
158. 3( C-7) , 117. 0 ( C-8) , 150. 1( C-9) , 120. 2 ( C-
10 ) , 145. 8 ( C-2″) , 104. 3 ( C-3″) , 131. 9 ( C-1′) ,
129. 9( C-2′) , 118. 4( C-6′) , 156. 1( C-3′) , 119. 4( C-
5′) , 115. 7 ( C-4′) , 60. 3( C3 -OCH3 , C3′-OH)。 结合
HMBC和 HMQC谱确定了化合物的结构。
3. 3　化合物Ⅴ : 淡黄色方晶 , mp 182℃～ 183℃ ,
EI-M S,
1
H-NMR,
13
C-NMR确 定 其 分 子 式 为
C18H12O4 ,相对分子质量为 292,不饱和度为 13。 碳
谱与氢谱数据与文献 [4, 5 ]报道的水黄皮根素一致。
致谢:中国医学科学院药物研究所国家药物及
代谢产物分析中心测定 MS, NM R波谱。
References:
[1 ]　 Zhou Z, Wei Z Q, Li Z Q, et al . Stud y on the ext ract of
Sh uiluos an ( Fordia caul if lora ) to influence learning memory
[ J] . Guangx i J Tra dit Ch in Med (广西中医药 ) , 2003, 26
( 2): 47-48.
[2 ]　 Dai B, Qin C C, Dai X D, et a l. Ch emical componen ts of
d ried root Sh ui luosan ( Ford ia caul if lora ) Ⅰ [ J] . Chin Tra-
d it Herb Drug s (中草药 ) , 2003, 3( 1): 21-22.
[3 ]　 Dai X D, Yang D A, Dai B, et al . Ch emical compon ents of
Sh uiluos an ( Ford ia caul if lora ) Ⅱ [ J] . Ch in Trad it Herb
Drugs (中草药 ) , 2003, 34( 5): 401-402.
[4 ]　 Talapat ra S K, Mai llik A K, Talapat ra B. Carbon-13-NM R
spect ra of ang ular and lin ear fu ranof lav on es [ J] . J Ind ian
Chem Soc, 1982, 8: 534-535.
[5 ]　 Talapat ra S K, Mallik A K, Talapat ra B. Is opongag labol
and 6-methox yisopongaglabol, two new h ydrofuranof lavones
f rom Pongam ia glabra [ J] . Phytochem istry , 1982, 21: 761-
766.
大豆胚芽中新异黄酮化合物的研究
徐德平 1 ,肖　凯 2 ,谷文英 1 ,丁霄霖 1
( 1. 江南大学食品学院 ,江苏 无锡　 214036;　 2. 第二军医大学 海医系 ,上海　 200433)
摘　要: 目的　分离鉴定大豆胚芽中异黄酮的组成。 方法　利用柱色谱技术从大豆胚芽中分离异黄酮 ,利用 MS,
1 H-NM R, 13C-NM R鉴定得到的异黄酮化合物的结构。结果　分离到两个新异黄酮化合物 ,这 2个异黄酮化合物互
为同分异构体 ,相对分子质量为 564,经鉴定为 6″-β -D-阿拉伯糖 -染料木素葡萄糖苷 (Ⅰ ) , 6″-β-D -木糖 -染料木素葡
萄糖苷 (Ⅱ )。 结论　这两个化合物在大豆中为首次分离到 ,也是两个新化合物。
关键词: 大豆胚芽 ;异黄酮 ;结构鉴定
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 12 1065 03
Isolation of a new isoflavone from soybean germ
XU De-ping
1 , XIAO Kai
2 , GU Wen-ying
1 , DIN G Xiao-lin
1
( 1. Schoo l o f Food Science and Techno log y, Southern Yang t ze Univ ersity, Wuxi 214036, China; 2. Depa rtment
of Navy Medicine, Second M ilitar y Medical Univ er sity , Shanghai 200433, China )
Abstract: Object　 To separate and characterize the chemical consti tuents of so ybean germ. Methods
Column ch romatog ram, M S spect roscopy, and nuclear magnetic resonance spect roscopy w ere emplo yed.
·1065·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
收稿日期: 2003-03-24作者简介:徐德平 ( 1965- ) ,男 ,安徽宣城人 ,博士后 ,从事天然产物化学研究。
Results　 Tw o new iso flavones w ere isolated f rom soybean germ. They w ere isomer and relativ e mo lecula r
w eight was 564. CompoundⅠ was 6″-β -D-arabinose-genistin, compound Ⅱ was 6″-β -D-xy lose-genistin.
Conclusion　 The tw o new isof lav ones are fi rst discovered in soybean.
Key words: soybean germ; iso flavone; structural identification
　　目前普遍认为大豆中有 12种异黄酮 ,分别是黄
豆黄素、大豆苷元、染料木素、黄豆素葡萄糖苷、大豆
苷元葡萄糖苷、染料木素葡萄糖苷和相应的 6″-乙酰
化和丙酰化的葡萄糖苷 [1 ]。 近年来不断有从大豆中
发现新异黄酮的报道 [ 2] , 1999年 Hosny等 [ 3]报道从
大豆乳清中分离出 3种新异黄酮 ,但大多数研究者
认为这不是大豆中天然存在的而是加工过程中产生
的衍生物。 2000年谷利伟利用 HPLC-M S发现了 3
个新丙二酰异黄酮 ,它们的丙二酰基不是连在 6″-位
而是连在 2″, 3″, 4″-位中的某一位点。由于未能分离
到这 3种化合物没有核磁共振数据 ,其结果有待进
一步证实。本研究在对大豆胚芽异黄酮的分离过程
中得到了 2个未曾在大豆中报道过的新异黄酮化合
物 ,经鉴定为 6″-β -D-阿拉伯糖-染料木素葡萄糖苷
(Ⅰ ) , 6″-β -D-木糖 -染料木素葡萄糖苷 (Ⅱ )。
1　材料与方法
1. 1　试验材料:大豆胚芽: 由维维集团提供。试剂:
甲醇、石油醚 ( 30℃～ 60℃ )、二甲基亚砜 ( DM SO)、
正丁醇皆为 AR级 ,上海化学试剂采购供应站出品 ;
GF254硅胶板由山东烟台芝罘化工厂生产 ;层析柱:
聚酰胺 ( 60目 )浙江台州化工厂生产 , Sephadex LH-
20, HW-40为进口分装。 仪器: HPLC-M S Micro-
mass limited, UK,核磁共振仪 ( 500 M Hz) Bruker
Avance- 500。
1. 2　试验方法
1. 2. 1　异黄酮提取: 将 2. 5 kg大豆胚芽 ,放入 10 L
玻璃瓶中 ,加入甲醇至满 ,不定期搅拌 ,浸提 72 h
后 ,将甲醇滤出 ,回收甲醇。 将回收甲醇后的浓缩液
加入玻璃瓶中 ,并补充新甲醇至满 ,不时搅拌 ,浸提
72 h滤出甲醇 ,反复 3次 ,合并甲醇提取物 ,蒸发温
度≤ 40℃。
1. 2. 2　甲醇提取物处理:将甲醇提取物用石油醚萃
取脱脂 ,直至石油醚层无色时止。将脱脂后的物质用
3倍体积的醋酸乙酯萃取 ,反复多次 ,直至醋酸乙酯
相无色时止。 将醋酸乙酯提取后的剩余物用水饱和
正丁醇提取多次 ,直至正丁醇相无色时止。合并正丁
醇相 ,蒸发正丁醇 ,得正丁醇提取物。
1. 2. 3　异黄酮分离: 将正丁醇提取物用 DM SO溶
解 ,抽滤 ,滤液上聚酰胺柱 ( 60 mm× 600 mm) ,先用
去离子水洗脱 ,再用甲醇梯度洗脱 ( 20% , 40% ,
60% ) ,分步收集。40%甲醇溶液洗脱得馏份Ⅰ , 60%
甲醇溶液洗脱得馏份Ⅱ ,将馏份Ⅰ 蒸干后再溶解 ,上
Sephedex L H-20柱 ( 35 mm× 500 mm) ,先用去离
子水洗脱 ,再用甲醇梯度洗脱 , 15 mL收集一管 ,可
得到 4个组份 ,分别为 A～ D,将 C组份用 DM SO
溶解 ,反复上 HW-40柱 ( 35 mm× 500 mm) ,并用甲
醇梯度洗脱 ,可得 2个较纯化合物 ,再将这两个化合
物分别上硅胶柱 ( 15 mm× 250 mm)得 2个纯化
合物。
1. 2. 4　异黄酮的结构鉴定:将所得 2个化合物进行
MS, 1H-NM R和 13 C-NM R等分析。
2　结果与分析
化合物Ⅰ : 紫红色粉末 ,易溶于甲醇、乙醇 ,可溶
于水。 LC-M S见图 1,m /z: 587[M+ Na ] , 565 [M+
1]
+
, 433( [M - 132+ 1 ]
+
, genistin) , 271(基峰 , [M
- 132- 162+ 1 ]
+
, g enistein) ,从 MS结果可见化合
物Ⅰ 可能为 genistin上连接一个五碳糖 [M= 132 ]。
1
H-NMR( DM SO-d6 , 400 MHz)δ: 8. 37 ( 1H, s, H-
2) , 7. 38( 1H, d,J= 7. 87 Hz, H-2′, 6′) , 6. 85( 2H, d,
J= 7. 82 Hz, H-3′, 5′) , 6. 68( 1H, s, H-8) , 6. 42( 1H,
s, H-6) , 5. 0( 1H, d, J= 6. 78 Hz, H-1″) , 4. 82( 1H,
d,J= 6. 21 Hz, H-1 ) , 3. 61～ 3. 15为糖上氢。从氢
谱数据可知化合物Ⅰ 的芳香质子信号与染料木素一
致 ,δ5. 0( 1H, d,J= 6. 78)为葡萄糖端基质子 ,δ4. 82
( 1H, d, J= 6. 21)为另一糖的端基质子。由于两个端
基质子的偶合常数值都大于 4. 8,因此两个糖都是
β-连接。 13 C-NM R( DM SO-d6 , 100 M Hz)δ: 180. 5( s,
C-4) , 162. 9( s, C-7) , 161. 6( s, C-5) , 57. 5( s, C-4′) ,
157. 3( s, C-8a) , 154. 5( s, C-2) , 130. 2( d, C-2′, 6′) ,
122. 2( s, C-3) , 121. 0( s, C-1′) , 115. 1( d, C-3′, 5′) ,
109. 4 ( s, C-4a ) , 106. 2( d, C-1″) , 100. 1( d, C-1 ) ,
99. 7( d, C-6) , 94. 6( d, C-8) , 78. 7(d, C-3″) , 76. 3( s,
C-5″) , 75. 6 ( d, C-2″) , 69. 6 ( C-4″) , 69. 8 ( d, C-2 ,
3 , 4 , 6″) , 63. 2( C-5 )。 从碳谱数据可知化合物Ⅰ
共 26个碳 ,其中芳香区 15个碳信号与染料木素的
一致 ,δ106. 2为葡萄糖端基碳 ( C-1″) ,δ100. 1为另
一糖端基碳 ( C-1 ) ,剩余信号分别与葡萄糖和阿拉
伯糖相吻合。而葡萄糖的 6″-碳向低场偏移 , 5″-碳向
·1066· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
高场偏移 ,因此判定阿拉伯糖连接在葡萄糖的 6″-
位。根据以上数据推断并参照文献 [4～ 9 ]确定化合物
Ⅰ为 6″-阿拉伯糖 -染料木素葡萄糖苷。 结构式见
图 2。
图 1　化合物Ⅰ 的 LC-MS质谱图
Fig. 1　 LC-MS spectrum of compoundⅠ
图 2　化合物Ⅰ 的结构式
Fig. 2　 Structure of compoundⅠ
化合物Ⅱ :红色粉末 ,易溶于甲醇、乙醇 ,可溶于
水。 LC-M S见图 3。 m /z: 587 [M+ Na ] , 565 [ M+
1]
+
, 433( [M- 132+ 1 ]
+
, g enistin) , 271(基峰 , [M
- 132- 162+ 1 ]+ , g enistein)从 MS结果可见化合
物Ⅱ也可能为 genistin上连接一个五碳糖 [ M=
132 ]。 1 H-NM R( DM SO-d6 , 400 MHz)δ: 8. 37( 1H,
s, H-2) , 7. 38( 2H, d, J= 7. 87 Hz, H-2′, 6′) , 6. 85
( 2H, d, J= 7. 82 Hz, H-3′, 5′) , 6. 68( 1H, s, H-8) ,
6. 42( 1H, s, H-6) , 5. 31( 1H, d, J= 6. 27 Hz, H-1″) ,
5. 0( 1H, d, J= 6. 78 Hz, H-1″) , 3. 61～ 3. 15为糖上
氢。从氢谱数据可知化合物Ⅱ的芳香质子信号与染
料木素一致 ,δ5. 0( 1H, d,J= 6. 78)为葡萄糖端基质
子 ,δ5. 31( 1H, d, J= 6. 27)为另一糖的端基质子。由
于两个端基质子的偶合常数值都大于 4. 8,因此两
个糖都是 β -连接。 13 C-NM R( DM SO-d6 , 100 MHz)
δ: 180. 5 ( s, C-4) , 162. 9( s, C-7) , 161. 6 ( s, C-5) ,
157. 5 ( s, C-4′) , 157. 3 ( s, C-8a ) , 154. 5 ( s, C-2) ,
130. 2( d, C-2′, 6′) , 122. 6( s, C-3) , 121. 0( s, C-1′) ,
115. 1( d, C-3′, 5′) , 109. 4( s, C-4a ) , 106. 2( d, C-1″) ,
99. 8( d, C-1 ) , 99. 7( d, C-6) , 94. 6 ( d, C-8) , 78. 7
( d, C-3″) , 76. 3( s, C-5″) , 75. 6( d, C-2″) , 73. 3( d, C-
3 ) , 72. 9( d, C-4″) , 72. 2( d, C-2 ) , 69. 8( d, C-6″) ,
69. 6 (d, C-4 ) , 60. 2( C-5 )。 从碳谱数据可知化合
物Ⅱ共 26个碳 ,其中芳香区 15个碳信号与染料木
素的一致 ,δ106. 2为葡萄糖端基碳 ( C-1″) ,δ99. 8为
另一糖端基碳 ( C-1 ) ,剩余信号分别与葡萄糖和阿
拉伯糖相吻合。而葡萄糖的 6″-碳向低场偏移 , 5″-碳
向高场偏移 ,因此判定木糖连接在葡萄糖的 6″-位。
根据以上数据推断并参照文献 [4～ 9 ]确定化合物Ⅱ为
6″-木糖-染料木素葡萄糖苷。结构式见图 4。
图 3　化合物Ⅱ LC-MS分析的质谱图
Fig. 3　 LC-MS spectrum of compoundⅡ
图 4　化合物Ⅱ的结构式
Fig. 4　 Structure of compoundⅡ
3　结论
本研究从大豆胚芽中分离的 6″-阿拉伯糖-染料
木素葡萄糖苷和 6″-木糖 -染料木素葡萄糖苷两个异
黄酮化合物 ,在大豆中为首次分离到 ,也是两个新化
合物。
References:
[1 ]　 Wang H J, Murph y P A. Isof lavone conten t in commercial
s oyb ean food s [ J ]. J Ag r Food Chem , 1994, 42: 1666-
1673.
[2 ]　 Gu L W . Studies of i sof lav ones and soyaas aponin s in soy-
bean r [D ]. Dissertation of Doctor Degree of W uxi Univer sity
of Ligh t Ind ustry , 2000.
[3 ]　 Hosny M H, Rosazza P N. Novel is of lavone, cinnamic acid
and t ri t erpenoid g lycosid es in soyb en molass es [ J ]. J N at
Prod , 1999, 62: 853-858.
[4 ]　 Xu D P. Isolation and determination of i sof lavones f rom
Tem ph [ J ]. Food Ferment In d , 2001, 27( 3): 1-3.
[5 ]　 Shigemi tsu K, Mak oto S, Tak ashi I, et al . A new is oflavone
glycoside in s oybean seed g lyci tein 7-O-β-D ( 6″-O -acety ) -
glucopyranoside [ J] . Ag r Biol Chem , 1991, 55 ( 3): 859-
860.
[6 ]　 Mabry P J, Markh am K R, Thomas M B. The Systemat ic
Identi f ica tion of Flavonoid s [M ]. New York: Spring er-Ver-
lay, 1970.
[7 ]　 Farmak alidi s E, Pat ricia A M. Isolat ion of 6″-O-acety-
genist in and 6″-O-acetydaidzin f rom toasted defat ted soyfi-
akes [ J ]. J Agr Food Chem , 1985, 33: 385-389.
[8 ]　 Pawan K A. Review article n umber 70-NM R spect ros copy in
the s t ructural elucidation of oligosaccharides and glycosides
[ J] . Phytoch emistr y, 1992, 31( 10): 3307-3330.
[9 ]　 Hem C J, Fri tz Z. Carbon-13 ch emical shi f t assignments of
ch romones and isof lavones [ J] . Can J Chem , 1980, 58:
1211-1219.
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