全 文 ：·1718· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
能直接影响到愈伤组织的分化。
Refetenetsl
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杯鞘石斛组培苗接种菌根真菌和细菌肥的研究
陈瑞蘸1，施亚琴1，林先贵”，张宁2，汤卫国2
(1．中国科学院南京土壤研究所，江苏南京210008}2．云南金陵植物药业股份有限公司t云南思茅665000)
石斛属DendrobiumSw．中的许多种是名贵的
中药材，以新鲜和干燥的茎人药，具有强阴益精、平
胃气、长肌肉、益智除惊、健身延年的功效，被誉为
“中华九仙草”之首。由于长期采挖，近年来石斛自然
资源接近枯竭，因此被国家列为重点保护的野生药
材品种o]。许多研究者已经意识到了这个问题，纷纷
开展了石斛组培及集约化栽培技术的研究。但是采
用组培方法繁殖，试管苗出瓶后存活率低，在栽培条
件下生长缓慢o]，难以满足市场的需求。
石斛属兰科植物，与兰科菌根真菌形成典型的
共生关系“，真菌菌丝可以侵人到根系细胞内，将获
得的碳水化含物和氮磷等营养物质，提供给石斛，促
进其生长。鉴于石斛与兰科菌根真菌的特殊关系，开
展了石斛组培苗接种菌根真菌和细菌菌肥的研究。
先从野生石斛根系中分离、纯化，获得菌根真菌和根
际有益细菌，再尝试对杯鞘石斛组培苗进行接种，通
过盆栽试验和田间小区试验组培苗生长情况的观
察，寻找合适的菌根真菌和菌肥，希望能够改善石斛
组培苗的根际环境，促进组培苗的生长，提高产量。
1材料与方法
1．1盆栽试验
1．1．1材料：杯鞘石斛D．gratiosissimumRehb．
f．，由中国科学院昆明植物研究所刘劳嫒研究员鉴
定。杯鞘石斛组培苗，由云南金陵植物药业股份有限
公司组培中心提供。组培苗出瓶后炼苗6个月．然后
从云南思茅空运到南京，栽培一个月后按株型大小，
均匀搭配，留待接种。
1．1．2试验设计：盆栽试验共设7种处理，分别是
不接种(cK)}接种混合菌肥1号(由固氮菌N01，磷
细菌P22，钾细菌K25组成)f混合菌肥2号(由
N06，P22，K25组成)；混合菌肥3号(由N02，P05，
K02组成)；接种兰科菌根真菌Dt5、Dr6和Dt8，每
一处理重复3次，共21杯。
1．1．3试验方法：液体振荡培养，分别获得N01、
N02、N06、K02、KZ5、，P05、P22，Dt5，Dr6和Dt8的
菌悬液。固氮菌、磷细菌和钾细菌的菌液稀释1倍
后，按3：lt2的比例混合制成混合菌肥。挖开根系
周围的基质，将混合菌肥或真菌苗液直接接到根系
收藕日期l2005—02—17
幕喜嚣霁：藤嘉墓葛骞妻冀愁篓鑫蒹蓄景冀?望誓茁；酱根方面研究。Tel；(025)86881345z—i-：。n。。@．ss。。．。。。。
t通讯作者韩先贵Telt(025)86881589E—mail：xglin@issas．ac．en
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 719·
上，每杯5mL。对照接人等量自来水。每10天浇旌
0．1％的兰科营养液一次。在接种当天和接种60、90
d分别测定记录杯鞘石斛苗的株高和叶数。
1．2小区试验
1．2．1材料：杯鞘石斛组培苗，出瓶后炼苗110d，
然后挑选太小整齐的苗，小区面积0．75mxl．50
m，每小区6行，每行10丛，栽种10d后接种。
1．2．2试验设计：在盆栽试验的基础上，选择菌肥
2号和兰科菌根真菌Dt5、Dt8，共设4种处理，分别
是不接种(cK)，接种细菌菌肥2号，接种菌根真菌
Dt5和Dt8，每一处理重复3次。
1．2．3试验方法：培养好的菌液用灭菌泥炭吸附，
制成固体菌剂。接种方法同盆栽试验，对照接入等量
的灭菌泥炭。每月浇旅0．1％的兰科营养浚一次。水
分及病虫害等管理按常规方法进行。每小区选定3
个考察点，试验开始、接种1个月、2个月、3个月时
分别测定考察点苗丛的株高、叶片数和茎粗。试验布
置1年后，测定小区内所有组培苗的总鲜质量和地
上部分鲜质量，并折算成100丛苗的产量。
采用Duncan法(P<0．05)对实验数据进行
统计。
2结果与分析
2．1杯鞘石斛组培苗接种菌肥和菌根真菌的盆栽
试验：表1是不同处理的组培苗在接种后60、90d
的株高以及新增叶片的百分数。从株高可以看出：接
种兰科菌根真菌Dt5的处理明显高于对照，60和90
d时株高分别为4．73和6。35C1TI，是对照的2．28倍
和2．13倍；其次为接种Dt8。而接种混合菌肥对株
高的促进作用不明显，其中混合菌肥2号的作用好
于1号和3号。由于叶片数目的个体差异较大，不同
处理的新增叶片百分数差异不显著，但从平均值来
看接种Dt5的最高，分别为61．11％和116．67％，其
次为Dr8。同样混合菌肥2号的效果好于其他两种
混合菌肥。
根据盆栽试验的结果，从3种混合茵肥和3株
菌根真菌中挑选出混合菌肥2号以及Dt5、Dt8，进
行田间小区试验。
2．2杯鞘石斛组培苗接种菌肥和菌根真菌的田闻小
区试验：按照1．2的试验处理和方法，在石斛原产地
云南思茅地区。进行了杯鞘石斛组培苗接种菌肥和茵
根的田间小区试验。以30、60和90d的叶片数、株高
(茎高)和茎粗与接种当天相比的增加量作为指标，反
映石斛的生长情况，结果如表2～4所示。与CK相
比，不同接种处理对组培苗叶片的增加没有显著影
响，但从平均值来看，接种Dr5的处理在30、60和90
d时都高于对照和其他处理。接种Dt5能促进茎的生
长，其中对茎粗的作用更明显，90d的增加量达到
218．75％，是CK的1．48倍；而Dt8的接种效果不显
著。说明Dt5是杯鞘石斛的有益共生菌，能够与根系
形成良性关系，促进组培苗的生长；而Dr8的增殖可
能会导致与根系竞争养分和生活空间等，从而对组培
苗的生长造成负效应。从表4还能发现：施用细菌菌
肥对茎租有明显作用，30、60、90d时茎粗分别增加
了75．00％、157．93％和222．22％。
为了观测接种对石斛组培苗的长期效应，在小
区试验进行一年后，测定了每一小区全部组培苗的
整株鲜质量和地上部分鲜质量，结果如图l所示。可
以看出，接种Dt5后，生物量明显高于其他处理，其
裹1盆栽试验中接种处理对组培苗株矗和
新增叶片百分数的影响
TaMeI EffectsofInoculationsOilheightof est—tabe
plantlelsandpercentageofnewly—multiplied
]esYe$inpotest
*不同小写字母表示差异显著(P
(P<0．05)；Tables2—4&resame
裹2小区试验中不同接种处理对组墙苗叶片的影响
Table2 Efleetofinocula“oⅡsonleaves
oftest-tubeplantletsinplottest
寰3小区试验中不同接种处理对组培苗株高的影响
Table3Effectofinoculationsonheight
oftest-tubeplantletsinplottest
万方数据
-1720· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第1l期2005年11月
裹4小区试验中不同接种处理对组墙苗茎粗的影响
Table4 EffectofInoculationsORdJameter
oftest-tubeplantlersinplottest
1000
750
M
5。0
；250
蓥 o
-250
500
—750
口地上都分●地下部分
b
旦 a a
r] r]
-_l ■ab 曲 a
圈l小区试验中不同接种处理对组培酋生物■的影响
(不同小写字母衰示部分生物量差异显薯P
plantleLsinplottest(differentlett rsmean
significantdifference，P
加32．78％；地下部分鲜质量达到496．67g／100丛，
比对照增加49．30％，而接种Dt8、接种细菌菌肥对
生物量都没有显著影响。
从小区试验来看：菌根真菌Dr5是杯鞘石斛组
培苗的有益共生菌，接种效果在整个试验阶段都明
显，能与根系形成共生关系而持续发挥作用，增加根
际范围，促进石斛对基质养分的吸收。细菌菌肥在施
用后一段较短的时间内，对鲤培苗茎的生长有促进
作用，但由于没有追施，在根际的特殊效应不能持
续，付开聪等‘“也有相似的看法。随着土著微生物种
群的恢复和发展，菌肥的接种效应会被逐渐削弱，因
而试验进行一年后细菌菌肥对石斛生物量的作用并
不显著。
3小绪
通过杯鞘石斛组培苗接种细菌菌肥和菌根真菌
的盆栽和小区试验，可以发现兰科菌根真菌Dr5的
接种效果最好，对入药部分茎的生长有显著促进作
用，年产量明显高于对照和其他接种处理。另外，施
用细菌菌肥的短期效果比较明显，能在一定程度上
增加石斛组培苗的株高和茎粗。
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徐希科，李慧梁，柳润辉，苏娟，张川，周 耘，张卫东+
(第二军医大学药学院，上海200433)
黄芪为常用补气药，是我国重要的传统药材。
《中国药典》规定，药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪
Astragalusmembranaceus(Fisch．)Bungevar．
nongholicus(Bunge)Hsiao及膜荚黄芪A．mem—
branaceus(Fisch．)Bunge的干燥根。黄芪中含有多
种化学成分，如皂苷类、黄酮类、术脂素类、氨基酸
类、多糖类及多种微量元素等“]。研究表明黄芪甲昔
具有降血压、镇静、镇痛及抗氧化等作用o“]，是黄
芪的主要活性成分，因此黄芪甲昔常作为指标性成
分应用于 药材的质量监控。我国黄芪药用资源
丰富，在华北大部分省区均有大面积种植。本实验采
用HPLC—ELSD法对全国5个省共10个产地的人
鉴銎冒昌：酱蠡!等誉．项目(2003AA223507)；上海市科技发展基金攻关项目(02Dzl。147，03Dzl9503，04Dzl9843—3，04Dzl9856
。通讯作者04：；}要饕7)T。l，(021)25070386E—m。il：啊d小。。gy@hotmil．com
万方数据
杯鞘石斛组培苗接种菌根真菌和细菌肥的研究
作者： 陈瑞蕊， 施亚琴， 林先贵， 张宁， 汤卫国
作者单位： 陈瑞蕊,施亚琴,林先贵(中国科学院南京土壤研究所,江苏,南京,210008)， 张宁,汤卫国(云
南金陵植物药业股份有限公司,云南,思茅,665000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
被引用次数： 2次
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200511048.aspx