全 文 ：2. 3. 1　标准曲线的制定: 吸取藁本内酯对照品约
5, 10, 15, 20, 25μL于 1 mL容量瓶 ,分别加入内标
物邻苯二甲酸二乙酯 15μL,精密称定 ,加乙醇稀释
至刻度 ,摇匀。分取 1μL进样 ,以藁木内酯峰面积×
内标浓度 /内标物峰面积为横坐标 ,以藁木内酯对照
品的浓度 ( mg /mL)为纵坐标 ,其标准曲线为 Y=
0. 830 0X+ 0. 789 3, r= 0. 999 9。
2. 3. 2　校正因子的测定:取藁本内酯对照品 15μL
于 1 m L容量瓶 ,精密称定 ,加入内标物邻苯二甲酸
二乙酯 15μL,精密称定 ,加乙醇稀释至刻度 ,摇匀。
取 1μL进样 ,计算校正因子 ,结果为 0. 88, RSD=
1. 62% (n= 3)。
2. 3. 3　当归挥发油中藁本内酯含量的测定:取当归
油样品 30μL于 1 mL容量瓶中 ,精密称定 ,加入内
标物邻苯二甲酸二乙酯 15μL,精密称定 ,加乙醇稀
释至刻度 ,摇匀。 取 1μL进样 ,计算。结果见表 3。
表 3　当归挥发油中藁本内酯含量 (% )
提取方法 藁本内酯的含量
水蒸气蒸馏 57. 61
超临界 CO2萃取 59. 43
3　讨论
3. 1　通过比较 ,用超临界 CO2流体萃取法所得的
当归挥发油与水蒸气蒸馏法所得的当归挥发油组分
及其主要组分 ( Z ) -藁木内酯的含量基本一致 ,因而
两种方法所得当归油的物质基础是一致的。 本文超
临界 CO2流体萃取法所得的当归挥发油的成分及
相对百分含量与相关报道有较大差异 [3 ] ,可能是由
于药材产地、药材提取条件、提取物的后处理等不同
引起。
3. 2　超临界 CO2流体萃取所得当归油的收率比水
蒸气蒸馏法所得当归油的收率提高近 2倍 ,其主要
原因可能为当归油主要组分藁本内酯的异构化所
致。藁本内酯为一热不稳定易氧化物质 [4 ]。水蒸气蒸
馏法提取过程温度高 ,为一开放系统 ,其过程易造成
对热不稳定及易氧化成分的破坏。超临界 CO2流体
萃取过程温度低 ,系统密闭 ,可避免对热不稳定及易
氧化成分的破坏。因而超临界 CO2流体萃取法为提
取当归挥发油理想的方法。
参考文献:
[ 1]　陶静仪 ,阮于平 ,陈耀祖 .当归成分藁本内酯平喘作用的研究
[ J ]. 药学学报 , 1984, 19( 8): 561-565.
[2 ]　 WS3-B-3191-98,妇痛宁滴丸 [S ].
[ 3 ]　李　菁 ,葛发欢 ,黄晓芬 ,等 . 超临界 CO2萃取当归挥发油的
研究 [ J] .中药材 , 1996, 19( 4): 187-189.
[4 ]　李桂生 ,马成俊 ,李香玉 ,等 . 藁本内酯的稳定性研究及异构化
产物的 GC-M S分析 [ J ]. 中草药 , 2000, 31( 6) 405-407.
补阳还五汤中异黄酮和紫檀烷类化合物的分离和结构鉴定
吴　军 ,屠鹏飞 ,赵玉英
(北京医科大学药学院 天然药物化学研究室 ,北京　 100083)
摘　要: 目的　研究补阳还五汤的抗血栓有效部位及其活性成分。 方法　用多种色谱和光谱方法对补阳还五汤水
煎液乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行分离和结构鉴定。结果　分离鉴定了 4个异黄酮化合物和 1个紫檀烷类化
合物 ,分别为芒柄花素 (Ⅰ )、毛蕊异黄酮 (Ⅱ )、芒柄花素 -7-O-β -D-葡萄吡喃糖苷 (Ⅲ )、毛蕊异黄酮-7-O-β -D-葡萄吡
喃糖苷 (Ⅳ )及 ( 6aR , 11aR ) 9, 10-二甲氧基紫檀烷 -3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷 (Ⅴ )。 结论　以上化合物均为首次从补阳
还五汤中分离得到。
关键词: 补阳还五汤 ;异黄酮 ;紫檀烷
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 07 0583 03
Isolation and identif ication of four isoflavones and one pterocarpan from
BUYANGHUANWUTANG
WU Jun, TU Peng-fei, ZHAO Yu-ying
　　 ( Depar tment of Na tural Chemistry , Co lleg e of Pha rmacy , Beijing Univ e rsity of Medica l Sciences, Beijing 100083,
China)
Abstract: Object　 To study the anti thombo tic po rtion and bioactiv e fraction of BUY ANGHUANWU-
·583·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2001年第 32卷第 7期
收稿日期: 2000-06-27基金项目:本课题为国家“九· 五”攀登项目“补阳还五汤治疗缺血性脑中风作用机理研究”的部分工作。作者简介:吴　军 ( 1968-) ,男 ,安徽歙县人 ,北京大学药学院在读生药学博士生。 1991年毕业于安徽中医学院中医系 ,获医学学士学位 ;
1998年于中科院南海海洋所获海洋生物学硕士学位。 研究方向:天然药物活性成分研究。
Tel: ( 010) 62091702　　 Fax: ( 010)62092750
T ANG ( BHT) , a decoction of ast rag alus in combination wi th peony and several other ing redients. Meth-
ods　 The EtO Ac po rtion o f BHT ex tract w as repea tedly sepa ra ted by chroma tog raphy and identi fied by
means of spect ral analysis. Results　 One pteroca rpan, ( 6aR , 11aR ) 9, 10-dimethoxypteroca rpan-3-O-β-
D-glucopyano side (Ⅴ ) and four iso flav ones, fo rmononetin (Ⅰ ) , calyco sin (Ⅱ ) , fo rmononetin-7-O-β-D-
g lucopyanoside (Ⅲ ) , and caly cosin-7-O-β -D-g lucopyranoside (Ⅳ ) w ere identified. Conclusion　 All fiv e
compounds w ere isola ted fo r the first time from BHT.
Key words: BUYANGHUANWU T ANG ( BHT) ; isof lav one; pterocarpan
　　补阳还五汤为清代名医王清任《医林改错》中的
名方。 此方剂由黄芪、当归、赤芍、地龙、川芎、桃仁、
红花组成 ,具有补气、活血、通络的功效。主治中风后
半身不遂、口眼歪斜诸证。现代临床主要用于治疗缺
血性脑血管病。为阐明其活性成分 ,我们对补阳还五
汤水煎液的化学成分进行了系统的研究 ,从其乙酸
乙酯萃取部位分离得到的 4个异黄酮化合物和 1个
紫檀烷类化合物 ,分别为芒柄花素 ( fo rmononetin,
Ⅰ )、毛蕊异黄酮 ( calycosin,Ⅱ )、芒柄花素 -7-O-β -
D-葡萄吡喃糖苷 ( fo rmononetin-7-O-β-D-g lucopy-
anoside,Ⅲ )、毛蕊异黄酮 -7-O-β -D-葡萄吡喃糖苷
( ca lyco sin-7-O-β-D-g lucopyanoside,Ⅳ )及 ( 6aR ,
11aR ) 9, 10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β -D-葡萄吡喃糖
苷 [ ( 6aR , 11aR ) 9, 10-dimethoxypteroca rpan-3-O-
β -D-glucopyanoside,Ⅴ ]。
1　仪器和材料
X T4A型显微溶点仪 (未校正 ) , Perkin-Elmer
983型红外分光光度仪 , AEI M S-50质谱仪 , AL-
300核磁共振仪。 Sephadex LH-20葡聚糖凝胶为
Pha rmacia公司产品 ,薄层层析及柱层析硅胶为青
岛海洋化工厂产品。补阳还五汤中各单味药均选用
地道药材 ,黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus
membranaceus ( Fisch. ) Bge. va r. monghol icus
( Bge. ) Hsiao的干燥根 ,购于山西省浑源县医药公
司 ;当归为伞形科植物当归 Angel ia sinensis ( Oliv. )
Diels. 的干燥根 ,购于甘肃省岷县医药公司 ;赤芍为
毛茛科植物芍药 Paeonia lactif lora Pall. 的干燥
根 ,购于内蒙古自治区多伦医药公司 ;地龙为巨蚓科
动物参环毛蚓 Pheret ima aspergil lum ( E. Perrier)
的干燥体 ,购于广东省药材公司 ;川芎为伞形科植物
川芎 Ligusticum chuanx iong Hort. 的干燥根茎 ,购
于成都荷花池药材市场 ;桃仁为蔷薇科植物桃
Prunus persica ( L. ) Batsch的干燥成熟种子 ,购于
安国药材市场 ;红花为菊科植物 Carthamus tincto-
rius L. 的干燥花 ,购于新疆药材公司。 以上药材均
由北京医科大学药学院生药教研室蔡少青教授鉴定
和提供 ,生药标本保存在该教研室。
2　提取和分离
补阳还五汤各单味药材按原方配伍共 47. 5
kg ,粉碎后分别用 8, 6, 6倍量水提取 3次 ,共得干膏
7 kg。取其中 1 kg悬浮于水中 ,然后依次用石油醚、
乙酸乙酯、正丁醇萃取。 其乙酸乙酯萃取部位浓缩、
干燥得干膏 25 g。采用硅胶柱色谱进行分离。 以
CHCl3-CH3OH( 100∶ 1～ 1∶ 1)梯度洗脱 ,继而进一
步用硅胶柱层析和 Sephadex LH-20凝胶过滤纯
化 ,得到化合物Ⅰ ( 30 mg ) ,Ⅱ ( 50 mg ) ,Ⅲ ( 50 mg ) ,
Ⅳ ( 60 mg ) ,Ⅴ ( 100 mg )。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ :白色针状结晶 (甲醇 ) , mp 257℃～
258℃ ,易溶于甲醇。分子式 C16H12O4。 EI-M S m /z
(% ): 268 ( M
+
, 100) , 253( 18) , 225( 8) , 132 ( 84) ,
117( 18) , 89( 19) , 32( 16)。 1 HNM R( DM SO-d6 )δ:
3. 77( 3H, s, OM e) , 6. 87( 1H, s, H-8) , 6. 94( 1H, d, J
= 8. 7 Hz, H-6) , 6. 99( 2H, d, J= 8. 1 Hz, H-3′, H-
5′) , 7. 51( 2H, d, J= 8. 1 Hz, H-2′, H-6′) , 7. 98( 1H,
d, J= 8. 7 Hz, H-5) , 8. 34( 1H, s, H-2) , 10. 82( 1H,
s, C7 -OH)。 13 CNMR数据及其归属见表 1。 对照文
献 [1 ]化合物Ⅰ鉴定为芒柄花素。
化合物Ⅱ :白色针状结晶 (甲醇 ) , mp 230℃～
232℃ ,易溶于甲醇。分子式 C16H12O5。 EI-M S m /z
(% ): 284 ( M+ , 100) , 269( 27) , 241( 30) , 213( 30) ,
137( 25) , 133( 16) , 112( 28)。 1HNMR( DM SO-d6 )δ:
3. 78( 3H, s, OMe ) , 6. 85( 1H, d, J= 1. 8 Hz, H-8) ,
6. 90( 1H, dd, J= 8. 7, 1. 8 Hz, H-6) , 6. 94( 2H, brs,
H-5′, H-6′) , 7. 03( 1H, brs, H-2′) , 7. 97( 1H, d, J=
8. 7 Hz, H-5) , 8. 28( 1H, s, H-2) , 9. 02( 1H, s, C3′-
OH) , 10. 79( 1H, s, C7-OH)。13CNMR数据及其归属
见表 1。 对照文献 [1 ]化合物Ⅱ鉴定为毛蕊异黄酮。
化合物Ⅲ :白色针状结晶 (甲醇 ) , mp 217℃～
219℃ (分解 ) ,易溶于甲醇。 分子式 C22 H22O9。 P-
FAB-M S m /z : 431 ( M
+
+ 1) , 269( M
+
+ 1- g lu-
cose uni t )。 1HNMR ( DM SO-d6 )δ: 3. 15～ 3. 70
·584· 中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2001年第 32卷第 7期
( 6H) , 3. 78( 3H, s, OM e) , 5. 05 ( 1H, J= 7. 2 Hz,
anomeric) , 7. 00 ( 2H, d, J= 8. 4 Hz, H-3′, H-5′) ,
7. 15( 1H, dd, J= 8. 8, 2. 2 Hz, H-6) , 7. 24( 1H, d, J
= 2. 2 Hz, H-8) , 7. 54( 2H, d, J= 8. 4 Hz, H-2′, H-
6′) , 8. 06( 1H, d, J= 8. 8 Hz, H-5) , 8. 42( 1H, s, H-
2)。 13 CNMR数据及其归属见表 1。 波谱数据与文
献 [3 ]的芒柄花素 -7-O-β -D-葡萄吡喃糖苷基本一致。
化合物Ⅳ: 白色针状结晶 (甲醇 ) , mp 221℃～
222℃ (分解 ) ,易溶于甲醇。 分子式 C22 H22O10。 P-
FAB-M S m /z : 447 ( M
+
+ 1) , 285 ( M
+
+ 1- glu-
cose uni t )。 1 HNMR ( DM SO-d6 )δ: 3. 17～ 3. 73
( 6H) , 3. 78( 3H, s, OMe) , 5. 11( 1H, d, J= 7. 2 Hz,
anomeric) , 6. 96( 2H, brs, H-5′, H-6′) , 7. 05( 1H, s,
H-2′) , 7. 14( 1H, dd, J= 8. 7, 2. 1 Hz, H-6) , 7. 23
( 1H, d, J= 2. 1 Hz, H-8) , 8. 05( 1H, d, J= 8. 7 Hz,
H-5) , 8. 39( 1H, s, H-2) 9. 04( 1H, s, C3′-OH)。 13 CN-
M R数据及其归属见表 1。对照文献 [ 1 ]化合物Ⅳ鉴定
为毛蕊异黄酮 -7-O-β -D-葡萄吡喃糖苷。
化合物Ⅴ : 白色针状结晶 (甲醇 ) , mp 205℃～
208℃ (分解 ) ,易溶于甲醇。 分子式 C23 H26O10。 P-
FAB-M S m /z : 463 ( M
+ + 1) , 301 ( M
+ + 1- glu-
cose uni t )。 1 HNMR ( DM SO-d6 )δ: 3. 00～ 3. 70
( 6H) , 3. 41( 1H, m , H-6) , 3. 68( 1H, m, H-6a) , 3. 69
( 3H, s, OMe ) , 3. 72( 3H, s, OMe) , 4. 28( 1H, d, J=
6. 3 Hz, H-6) , 4. 84( 1H, d, J= 7. 21 Hz, anomeric) ,
5. 63( 1H, d, J= 6. 9 Hz, H-11a) , 6. 52( 1H, d, J= 8. 4
Hz, H-8) , 6. 54( 1H, d, J= 2. 1 Hz, H-4) , 6. 72( 1H,
dd, J= 8. 4, 2. 1 Hz, H-2) , 7. 01( 1H, d, J= 8. 4 Hz,
H-7) , 7. 42( 1H, d, J= 8. 4 Hz, H-1) , 13 CNM R( DM-
SO-d6 )δ: 131. 99( C-1) , 110. 46( C-2) , 158. 52( C-3) ,
103. 98 ( C-4) , 156. 15( C-4a ) , 65. 73 ( C-6) , 39. 95
( C-6a ) , 121. 57( C-6b) , 118. 74( C-7) , 105. 10( C-
8) , 152. 70 ( C-9) , 133. 36 ( C-10) , 150. 99 ( C-11) ,
78. 19 ( C-11a ) , 114. 03 ( C-11b ) , 100. 28 ( C-1′) ,
73. 16( C-2′) , 76. 51( C-3′) , 69. 65( C-4′) , 77. 04( C-
5′) , 60. 65( C-6′) , 59. 87( OMe) , 56. 07( OMe)。对照
文献 [2 ]化合物Ⅴ鉴定为 ( 6aR , 11aR ) 9, 10-二甲氧基
紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷。
表 1　化合物Ⅰ ～ Ⅳ的 13CNMR( DMSO-d6 )波谱数据 δ
C位 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
C2 153. 21 153. 05 153. 65 153. 56
C3 123. 16 123. 34 123. 35 123. 55
C4 174. 63 174. 56 174. 64 174. 61
C5 127. 33 127. 30 126. 94 126. 95
C6 115. 21 115. 13 115. 62 116. 38
C7 162. 58 162. 51 161. 43 161. 40
C8 102. 15 102. 09 103. 38 103. 37
C9 157. 46 157. 36 157. 03 156. 97
C10 116. 62 116. 63 118. 43 118. 46
C1′ 124. 23 124. 67 123. 99 124. 42
C2′ 130. 10 116. 42 130. 07 115. 59
C3′ 113. 60 146. 01 113. 62 146. 03
C4′ 158. 96 147. 48 159. 01 147. 56
C5′ 113. 60 111. 94 113. 62 111. 92
C6′ 130. 10 119. 68 130. 07 119. 70
C4′-OMe 55. 16 55. 65 55. 16 55. 65
C1″ 99. 94 99. 97
C2″ 73. 10 73. 11
C3″ 76. 46 76. 46
C4″ 69. 60 69. 61
C5″ 77. 19 77. 20
C6″ 60. 62 60. 62
　　致谢: 核磁共振波谱测定由校医药分析中心乔
良老师完成 ;质谱测定由中科院化学所质谱室完成。
参考文献:
[1 ]　宋纯清 ,郑志仁 ,刘　涤 ,等 . 膜荚黄芪中的异黄酮化合物 [ J ].
植物学报 , 1997, 39( 8): 764-768.
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Astragal i semen [ J ] . Chem Pharm Bull , 1993, 41 ( 1): 178-
182.
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·585·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2001年第 32卷第 7期