全 文 ：温度: 26℃　空气湿
度: 30%
S1-牛磺胆酸　 S2-牛
磺去氧胆酸　 S3-胆酸
S4-去氧胆酸　 S5-胆
固醇　 6-对照药材
7-供试品
图 1　哈萨克牛牛
黄薄层色谱
4. 2　结果: 哈萨克牛牛黄色谱
中 ,与对照品 ( S1～ 5 )及对照药材
相应的位置上显相同颜色的荧
光斑点 ;在与对照药材相同 ,在
胆固醇斑点的下方显一个红色
的特征斑点 (图 1)。
5　胆红素和胆酸的含量测定
5. 1　胆红素: 对照品溶液、标准
曲线的制备及供试品的测定均
按《中国药典》 [5 ] 2000年版 (一
部 ) p 52牛黄项下的方法依法检
验。
结果以吸光度为纵坐标 ,浓
度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得
回归 方程为 Y = 11. 012X -
0. 026 28, r= 0. 999 7(n= 5)。在
533 nm波长处测得供试品 (哈萨
克牛牛黄 )的吸光度 ,代入回归
方程计算 ,得胆红素的含量为
46. 8% RSD= 0. 51% (n= 5)。
5. 2　胆酸:对照品溶液、标准曲线的制备及供试品
的测定均按《中国药典》 [5 ] 1995年版 (一部 ) p 56牛黄
项下的方法依法检验。
　　结果以吸光度为纵坐标 ,浓度为横坐标 ,绘制标
准曲线 ,得回归方程为: Y= 0. 767X - 0. 012 7, r=
0. 999 9(n= 5)。在 605 nm波长处测得供试品 (哈萨
克牛牛黄 )的吸光度 ,代入回归方程计算 ,得胆酸的
含量为 15. 2% ,RSD= 1. 47% (n= 5)。
6　小结
从以上传统的经验鉴别结合现代的显微、薄层色
谱鉴别及含量测定的结果可得出 ,新疆阿勒泰哈萨克
牛牛黄同样含有胆酸、胆固醇、去氧胆酸、胆红素等有
效成分 ,这与“东牛黄”、“西牛黄”和“京牛黄”无差异 ,
而且胆酸和胆红素的含量均不低于《中国药典》 [ 5]规
定的值。但由于产地、品种及形成年限的不同 ,故在大
小、颜色上可能会有些变化。
参考文献:
[ 1 ]　毛文山 ,严智慧 ,马兴民 ,等 . 中药真伪鉴别 [M ] .西安:陕西
科学技术出版社 , 1986.
[ 2 ]　马合木提· 卡比都拉 . 哈医常用药材 [M ] . (下册 ) . 乌鲁木
齐:新疆科技卫生出版社 , 1999.
[ 3 ]　彭　诚 ,石长魁 ,黄先翎 ,等 . 新疆通志· 畜牧志 [ M ] . (第 34
卷 ) ,乌鲁木齐:新疆人民出版社 , 1996.
[ 4 ]　陈德昌 ,张　断 ,林惠蓉 ,等 . 中国中药材真伪鉴别图典 ( 1)
[M ] . 广州:广东科技出版社 , 1995.
[5 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
羚羊角及伪品的凝胶电泳鉴别
李　峰 1 ,潘丽坤 2 ,纪俊元 1 ,王荣祥 1 ,于　洪 1 ,马柏林 1
( 1. 辽宁中医学院 ,辽宁 沈阳　 110032;　 2. 鞍山市第四医院 ,辽宁 鞍山　 114034)
摘　要: 目的　对羚羊角及伪品山羊角、绵羊角、黄羊角、藏羚羊角进行凝胶电泳鉴别研究。方法　应用连续解离系
统的十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (简称 SDS-PAGE)对羚羊角及伪品进行了电泳图谱的比较。 结果　
电泳图谱 ,各样品间具有不同的蛋白质成分 ,并可依此差异进行鉴别。 结论　本方法具有重现性好、操作简便且经
济的特点 ,可用于羚羊角的鉴别。
关键词: 羚羊角 ;十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ;电泳图谱
中图分类号: R282. 5　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 05 0454 03
Identification of Cornu Saigae Tataricae and its adulterant by gel electrophoresis
L I Feng1 , PAN Li-kun2 , JI Jun-yuan1 , W ANG Rong-x iang1 , YU Hong1 , M A Bai-lin1
　　 ( 1. Liaoning Colleg e of TCM , Shenyang Liaoning 110032, China; 2. Fo rth Hospita l o f Anshan, Anshan Liaoning
114034, China)
Key words: Cornu Saigae Tataricae; SDS-PAGE; elect ropho resis gram
　　羚羊角为常用名贵药材 ,其来源为脊索动物门 哺乳纲牛科动物赛加羚羊 Saiga tatarica Linnaeus.
·454· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 5期
收稿日期: 2000-11-13作者简介:李　峰 ( 1963-) ,女 , 1986年毕业于辽宁中医学院中药系 ,获学士学位。 1989年毕业于长春中医学院中药系 ,获硕士学位。现在辽宁中医学院中药系中药鉴定教研室任副教授。 主要从事动物药的电泳鉴别研究。 Tel: ( 024) 86237412
雄兽的角 [1 ]。因其具有良好的退热作用 ,临床应用广
泛 ,并常有伪品充斥市场。目前对其性状和显微鉴别
已有报道 ,但对其理化鉴别报道较少。为对羚羊角质
量进行标准规范化研究 ,我们对其进行了连续解离
系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别方法的探讨。 将羚
羊角及伪品按不同部位 ,分别在连续系统的 SDS-
PAGE条件下进行比较鉴别 ,取得了较好的效果。
1　实验仪器与材料
1. 1　仪器: DYY-Ⅲ 5型稳压稳流电泳仪 , DYY-Ⅲ
27A型圆盘电泳槽 (均为北京六一仪器厂 ) ; 8000型
离心沉淀器 (上海手术器械十厂 ) ; KQ 2200超声清
洗器 (昆山市检测仪器厂 )。
1. 2　材料:以下药材由纪俊元教授鉴定。
羚羊角: 牛科动物赛加羚羊 Saiga tatarica Lin-
naeus的雄兽角 ,分别取其根部、尖部及骨塞。
山羊角:牛科动物山羊 Capra hircus Linnacus
的雄兽角 ,分别取其根部、尖部及骨塞。
黄羊角: 牛科动物黄羊 Procapra gutturosa Pal-
las的雄兽角 ,分别取其根部、尖部及骨塞。
绵羊角:牛科动物绵羊 Ovis arie Linnaeus的雄
兽角 ,取其中部及骨塞 .
藏羚羊角: 牛科动物藏羚羊 Pantholops hod g-
soni Abel的雄兽角 ,取其根部及骨塞。
2　方法与结果
2. 1　溶液配制:按文献方法 [2 ] ,凝胶浓度为 7%。
2. 2　样品制备: 取上述药材粉末加水 ,在乳钵中研
磨成匀浆 ,制成 0. 2 g /mL的匀浆 ,超声提取 30
min,离心 10 min( 2 000 r /min) ,取上清液适量 ,加
样品水解液稀释 3倍 ,于冰箱内水解过夜 ,备用。
2. 3　加样与电泳: 取供试品 100μL滴加于凝胶表
面 ,再滴加甘油和溴酚蓝指示剂各 1滴 ,打开电源将
电流调至 30 m A,并保持电流不变 ,直至指示剂到
达距底部 0. 5 cm时停止电泳 ,取出凝胶。
2. 4　固定、染色与脱色:将电泳后的凝胶置于固定
液中固定 30 min再浸于染色液中染色过夜 ,最后用
脱色液脱色至背景无色。
2. 5　电泳图谱测绘: 按公式: 泳动率 Rf= (蛋白质
谱带移动距离 /指示剂移动距离 )× (染色前凝胶长
度 /脱色后凝胶长度 ) ,计算出各样品的主要谱带泳
动率 ,由各谱带泳动快慢将电泳图谱分为 A( Rf <
0. 35 )、 B( 0. 35≤ Rf < 0. 65)、 C ( Rf≥ 0. 65) 3个区
间 ,各样品的电泳谱带数目及泳动率值见表 1。
根据各样品谱带的 Rf值、形态和着色程度绘制
电泳图谱 ,以 3种符号分别代表凝胶谱带的Ⅰ ,Ⅱ ,
Ⅲ级 (图 1)。
表 1　羚羊角及伪品凝胶电泳参数表
样品 电泳谱带分布 各级电泳谱带总量 A区 B区 C区 Ⅰ 级 Ⅱ级 Ⅲ级
主要谱带
泳动值
1 3 2 1 2 1 0. 17 0. 33 0. 53
2 3 1 1 1 2 1 0. 17 0. 46 0. 69
3 2 1 1 1 1 0. 24 0. 65
4 2 1 1 1 1 0. 25 0. 68
5 2 1 1 1 1 0. 16 0. 44
6 2 1 1 1 1 0. 21 0. 63
7 3 2 1 1 1 1 0. 18 0. 26 0. 47
8 3 1 2 2 1 0. 25 0. 44 0. 57
1-羚羊角根部　 2-羚羊角尖部　 3-山羊角根部　 4-山羊
角尖部　 5-黄羊角根部　 6-黄羊角尖部　 7-藏羚羊角根
部　 8-绵羊角中部
图 1　羚羊角及伪品凝胶电泳图
2. 6　结果: 由图 1和表 1可以看出 ,各种角类药材
在 Rf= 0. 20左右 ( 0. 17～ 0. 25)均有 1条谱带 ,且除
藏羚羊角外均为Ⅲ级谱带 (藏羚羊角为Ⅱ级谱带 ) ,
具有共性 ,可作为角类药材的特征谱带。各种角类的
骨塞均无明显谱带。
2. 6. 1　羚羊角与山羊角的区别: 从谱带数量上看 ,
羚羊角有 3条谱带 ,山羊角有 2条谱带 ,两者有明显
的区别 ;由谱带分布区域看 , B区羚羊角 1条谱带
(Ⅰ 级 ) ,其根部 Rf= 0. 53,尖部 Rf= 0. 46. 而山羊
角在此区间无明显谱带 ,两者在此区间有明显区别。
2. 6. 2　羚羊角与黄羊角的区别: 在谱带的数量上 ,
羚羊角有 3条谱带 ,黄羊角有两条谱带 ,区别明显 ;
由相同部位谱带 Rf值看 , B区羚羊角根部 Rf=
0. 53,黄羊角根部 Rf= 0. 44,羚羊角尖部 Rf= 0. 46,
黄羊角尖部 Rf= 0. 63,两者有明显区别。
2. 6. 3　羚羊角与藏羚羊角的区别:从谱带的数量上
看 ,两种角谱带均为 3条: A区羚羊角根部有 2条谱
带 ,其 Rf分别为 0. 17, 0. 33,藏羚羊角根也有 2条
谱带 , Rf分别为 0. 18, 0. 26; B区羚羊角根部有 1条
Ⅰ级谱带 , Rf= 0. 53,藏羚羊角根也有 1条谱带为Ⅱ
级谱带 , Rf= 0. 47,由此可以区别。
2. 6. 4　羚羊角与绵羊角的区别: 从谱带的数量上
看 ,两种角电泳谱带均为 3条 , B区羚羊角有 1条谱
带 ,绵羊角有 2条谱带。 C区羚羊角尖部有 1条谱
带 ,而绵羊角中部没有谱带 ,区别明显 ;由 Rf值看 ,
·455·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 5期
B区羚羊角尖根部 Rf= 0. 46,绵羊角中部 Rf分别
为 0. 44和 0. 57;由谱带级别看 ,羚羊角有 2条Ⅰ级
谱带 ,绵羊角均为Ⅲ级谱带 ,可加以区别。
综合上述电泳结果 ,从电泳谱带泳动率、分布区
域和谱带着色程度上看 ,羚羊角与伪品的各种角均
有显著区别。
3　讨论
3. 1　由图 1可见 ,各种角类药材不同部位图谱均有
差异 ,且以尖部的谱带移动较快。 根据 SDS-PAGE
的分子筛原理 ( SDS-PAGE系统中 ,由于 SDS的屏
蔽作用 ,使蛋白质分子的泳动率 R仅与其相对分子
量有关 ) ,其应为分子量较小的蛋白质 ;由药材的特
性分析 ,根部多纤维化明显 ,质量较差 ,由此推断 ,羚
羊角有效成分中极有可能有一些相对分子量较小的
蛋白质。
3. 2　从对本实验的重现性比较来看 ,仅羚羊角尖部
的电泳结果稳定性和可重现性良好 ;而其他角类药
材及骨塞的稳定性和可重现性较差 ,这可能是由于
这些角类药材及其骨塞纤维性较强 ,蛋白质含量较
低或相对分子量较大 ,导致提取的量不稳定而造成
的。
3. 3　比较连续 SDS-PAGE法 (即解离系统 )和不
连续 PAGE (非解离系统 )法 [3 ]的实验结果发现: 因
不连续 PAGE法的分辨率较高 (蛋白质的泳动率不
仅与其相对分子量有关 ,而且与其所带电荷数量有
关 ) ,各种角的谱带的数量较多 (多适用于亲缘关系
较近的物种如同属动、植物的鉴别 ) ,但总体上各种
角在两种方法中其谱带的分布相近。由于不连续
PAGE法电极缓冲溶液一般价格较高 (多为 Tris-
甘氨酸系统 ) ,且需制备浓缩胶 ,操作繁琐 ;而本实验
连续系统的 SDS-PAGE法 ,电极缓冲溶液价格较
低 (为磷酸二氢钠-磷酸氢二钠 ) ,实验中无需制备浓
缩胶 ,使得操作更加简单。因此对于一般药材鉴别 ,
以连续的 SDS-PAGE法较为适宜。
参考文献:
[1 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
[ 2 ]　徐康森 ,郝苏丽 . SDS-PAGE凝胶电泳在药物分析中的应用
[ J ]. 药物分析杂志 , 1982, 2( 4): 193-200.
[3 ]　赵华英 ,许欣荣 ,陈永林 ,等 . 羚羊角及其伪品的蛋白质电泳鉴
别 [ J] . 中国中药杂志 , 1994, 19( 9): 524-525.
水罗伞的生药学研究
戴　斌 ,丘翠嫦 ,陈少锋 ,周丽娜
(广西民族医学研究所 ,广西 南宁　 530001)
摘　要: 目的　查清广西壮、瑶医常用药材水罗伞的植物来源及鉴别特征。方法　植物形态分类学及中药鉴定学常
规方法技术。 结果　水罗伞为干花豆 Fordia cauliflora的根 ,其植物形态及药材性状、显微组织、紫外光谱和薄层
色谱有其特有的鉴别特征。 结论　为水罗伞药材质量标准的制定及开发利用提供了依据。
关键词: 水罗伞 ;干花豆 ;生药鉴定 ;民族医药
中图分类号: R282. 5　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 05 0456 04
Pharmacognostic studies on root ofFordia caul iflora
DAI Bin, QIU Cui-chang , CHEN Shao-feng , ZHOU Li-na
　　 ( Guangxi Institute of National Medicine , Nanning Guangx i 530001, China )
Key words: Fordia caulif lora Hemsl. ; ro ot o f Fordia cauli f lora Hemsl. ; pha rmacognostic identifica-
tion; national medicine
　　水罗伞为豆科植物干花豆 Fordia caul if lora
Hemsl.的干燥根 [1, 2] ,亦称虾须豆、土甘草、玉郎
伞 [3 ] ,广西壮语称“仁推” ,瑶语称“凡台”。用于治疗
肺结核咳嗽、小儿疳积、小儿智力低下、肌痿症、风湿
骨痛、跌打损伤、骨折及病后或产后体虚等症 ,具有
润肺化痰、活血散瘀及宁神止痛作用。近年研究表明
·456· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 5期
收稿日期: 2000-03-21基金项目:国家自然科学基金资助及广西自然科学基金匹配项目 ( 39860082)作者简介:戴　斌 ( 1938-) ,瑶族。 1964年毕业于北京医学院药学系 ,研究室主任 ,主任药师。研究方向是中药及民族医药的发掘整理、分析鉴定、质量标准制定研究和新药研制开发。发表论文 44篇。先后完成“新疆藁本质量研究”获 1990年度新疆科技进步三等奖 ;国家“八· 五”攻关项目“澄清中药材混乱品砂仁等 6个品种研究” (藁本专题负责人 ) ,获 1991年度国家科技进步三等奖 ;国家自然科学基金资助项目“瑶药的品种调查及生药学研究” ( 39260081)于 1997年结题 ,列为优秀成果。 Tel: ( 0771) 3121508