全 文 ：表 3　地黄苷 A对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症体重及脾脏指数的影响 ( x± s ,n= 10)
组　别 剂量
( /kg)
给药前体重
( g)
给药 7 d体重
( g)
增加值
( g )
脾脏指数
( g /100 g )
空白对照 20 mL 18. 90± 0. 83 25. 40± 1. 91 6. 50± 1. 40 0. 63± 0. 11
模型对照 20 mL 19. 20± 0. 75 22. 10± 1. 14 2. 90± 1. 22△△ 0. 36± 0. 16△△
生白口服液 20 mL 18. 70± 0. 78 22. 80± 1. 60 4. 50± 1. 50* 0. 55± 0. 15*
地黄苷 A 40 mg 18. 80± 0. 75 21. 90± 1. 51 3. 10± 1. 22 0. 24± 0. 12
60 mg 18. 90± 0. 94 22. 50± 1. 28 3. 60± 1. 40 0. 31± 0. 11
80 mg 19. 10± 0. 83 23. 30± 1. 49 4. 20± 1. 17* 0. 35± 0. 10
　　　　与空白对照组比较: △△ P < 0. 01;　与模型对照组比较: * P < 0. 05
中氨基、巯基、羟基等作用 ,发生烷化作用 [ 4] ,造成小
鼠骨髓造血机能抑制和外周血白细胞数减少 ,白细
胞减小症动物模型成功。
地黄苷 A为地黄中有效化学成分 ,研究表明可
以升高模型小鼠的白细胞数和血小板数及红细胞
数 ,增加小鼠体重 ,能够对抗环磷酰胺所致外周白细
胞减少 ;地黄苷 A还可以增加骨髓有核细胞数和骨
髓 DNA含量 ,说明其对环磷酰胺所致的骨髓抑制
造血功能减退有治疗作用 ,能够促进骨髓粒细胞增
殖。以上说明地黄苷 A对骨髓造血功能和外周血白
细胞增殖具有促进作用 ,增强免疫功能 ,从而对白细
胞减少症模型小鼠具有明显治疗作用。 这为以后临
床推广应用提供了实验依据。
本实验仅对地黄苷 A的升白作用作了初步研
究 ,有关其它的药理活性筛选还有待进一步探讨。
参考文献:
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山茱萸提取液抗心律失常有效部位的研究
张兰桐 1 ,任雷鸣 1 ,温进坤 2⒇
( 1. 河北医科大学药学院 ,河北 石家庄　 050017; 2. 河北医科大学基础医学研究所 ,河北 石家庄　 050017)
摘　要: 目的　对山茱萸提取液抗心律失常有效部位进行研究。 方法　山茱萸提取液对氯仿诱发小鼠室颤模型的
作用 ,对豚鼠离体乳头肌电生理效应。结果　山茱萸提取液抗心律失常作用可能与延长心肌动作电位、增大静息电
位绝对值和降低窦房结自律性有关。其抗心律失常的有效部位为总有机酸和一种未知的微量成分。总苷类不具有
抗心律失常活性。 结论　药效学及心肌电生理实验结果表明 ,山茱萸提取液中的总有机酸和一种未知的微量成分
具有明显的抗心律失常作用。
关键词: 山茱萸提取液 ;抗心律失常 ;电生理 ;动作电位 ;乳头肌
中图分类号: R286. 22　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 1004 04
Studies on antiarrhythmic portion inCornus of ficinalis extract
ZHANG Lan-tong
1 , REN Lei-ming
1 , WEN Jin-kun
2
　　 ( 1. Schoo l of Pharmaceutical Sciences, Hebei Univ e rsity o f Medical Sciences, Shijiazhuang Hebei 050017, China; 2. In-
stitute o f Pr eclinical Medicine, Hebei Univ er sity o f Medical Sciences, Shijia zhuang Hebei 050017, China)
Abstract: Object　 To study the ef fective po rtion in Cornus of f icinal is Sieb. et Zucc. ex t ract ( CO E)
fo r the t reatment of arrhythmia. Methods　 Effect of COE on chlo ro fo rm induced ventricular fibrilla tion in
mice and elect rophysiolog y of iso lated guinea pig papi llary muscle w ere studied. Results　 Antiarrhy thmic
ef fect of COE may be rela ted to it s prolongation o f action potential duration, increase o f the abso lute v alue
·1004· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2001-01-17基金项目:河北省科学技术与发展规划 ( No. 99276421 D)资助项目作者简介:张兰桐 ,男 , 45岁 ,教授 , 1992年获硕士学位 ,现为河北医科大学药理学博士研究生 ,研究方向为中药有效成分的药理学及药代动力学研究。
o f resting potentia l and a decrease o f autonomy of sinus node. The ef fectiv e portion in COE may be i ts to tal
o rganic acid and a certain yet unknown trace substance, w hereas i ts to tal g lycosides were devoid o f such
activi ties. Conclusion　 Pharmacodynamic and myoca rdial elect rophysio logic studies show ed tha t the to tal
o rganic acid and a certain unknown trace substance possessed the obv ious antiarrhythmic activi ty.
Key words: ex t ract of Cornus of f icinalis Sieb. et Zucc. ; antiarrhy thmia; elect rophysiology; action po-
tential; papilla ry muscle
　　山茱萸是山茱萸科植物山茱萸 Cornus of f ici-
nals Sieb. et Zucc. 的干燥成熟果肉。据文献 [1～ 4 ]报
道山茱萸含挥发油、脂肪油、熊果酸等脂溶性成分 ,
以及有机酸、环烯醚萜苷类 (马钱素、莫诺苷、山茱萸
新苷等 )、鞣质、氨基酸、糖类等水溶性成分。药理实
验表明 ,山茱萸经水提醇沉法制备的注射液给家兔
静脉注射后 ,有明显的抗失血性休克作用 [5 ]。我们在
预实验中首次发现 ,山茱萸经水提醇沉制备的注射
液具有抗心律失常作用。因此 ,本研究采用了水提醇
沉—系统溶剂萃取法 ,寻找其抗心律失常作用的有
效部位或有效成分。
目前 ,国内外尚未见山茱萸抗心律失常作用的
研究。 本研究采用 4种不同的提取方法 ,制备了山
茱萸总提取液、乙酸乙酯提取液、正丁醇提取液和山
茱萸提取残余液 ,并研究了 4种提取液对氯仿诱发
小鼠室颤模型的影响 ,对豚鼠离体乳头肌电生理活
动的影响 ,确定山茱萸是否具有抗心律失常作用 ,以
寻找抗心律失常的有效部位和有效成分。
1　材料与方法
1. 1　试药:山茱萸药材 ,购于河北省安国中药材市
场并经本院生药学教研室鉴定 ;马钱素 ( loganin)
由河北医科大学药学院天然药物化学教研室提取 ,
精制后经 HPLC归一化法测定含量大于 98. 5% ;
盐酸美西律片 ,石家庄新华制药厂生产 ,批号
990504;氯仿由天津市泰兴试剂厂生产。
1. 2　动物: 昆明种小鼠 , 25～ 30 g ,豚鼠 , 280～ 320
g ,雌雄各半 ,由河北省实验动物中心提供 ,动物合格
证号分别为冀动字Ⅱ级 04056号和 04064号。 实验
期间饲以该中心提供的固体饲料 ,自由饮水。
1. 3　仪器:心电图机 ( XDH-3型 ) ,上海医用电子仪
器厂生产。示波器 ( SS-55702A) ,内蒙古电子仪器厂
生产。 SWF-1高阻抗微电极放大器 ,成都仪器厂。
SEN-3201电刺激器 ,日本光电工业株式会社。
1. 4　山茱萸提取液的制备和质量控制
1. 4. 1　山茱萸总提取液的工艺研究: 以总有机酸、
总苷的含量为质量控制指标 ,经正交试验 ,确定了提
取溶剂、方法、次数和溶剂用量等条件。建立了山茱
萸总提取液的理化性质、薄层鉴别以及含量测定方
法 ,其中用电位滴定法测定总有机酸 ,分光光度法测
定总苷 ,高效液相色谱法测定马钱素和莫诺苷含
量 [6 ]。
1. 4. 2　山茱萸抗心律失常有效部位研究:以山茱萸
水提醇沉法制得总提取液 ( A) , A分别用乙醚、乙酸
乙酯、正丁醇萃取 ,即得乙醚提取液 (弃去 )、乙酸乙
酯提取液 ( B)、正丁醇提取液 ( C)和提取残余液 ( D)。
并从中提取分离出单体成分马钱素、莫诺苷 ( mo r-
roniside)和没食子酸。
1. 5　山茱萸 4种提取液对氯仿诱发小鼠室颤模型
的影响 [7 ]: 仿 Law son法 ,取 1. 5 g 脱脂棉 ,浸含氯
仿 8 mL,放入倒置的 500 m L烧杯中 ,将小鼠放入
其中 ,使吸入氯仿直至呼吸停止。 立即取出小鼠 ,仰
位固定 ,剖开胸腔 ,肉眼观察室颤发生率 ;同时连接
心电图机记录动物心电变化 ,通过示波器辅助判断
室颤发生率。小鼠随机分组 ,每组 20只 ,雌雄各半。
实验组分别给予山茱萸 A, B, C, D,给药浓度为
0. 11 g /mL (以生药量计 ) ,给药量均为 2. 2 g /kg
(以生药量计算 )。 阳性对照组给于美西律 80 mg /
kg;对照组给予水。以上各组均 ig给药 ,给药容量
0. 2 mL /10 g , 1次 /日 ,连续给药 4 d。于末次给药 1
h后 ,将小鼠移至含氯仿的烧杯内吸入氯仿 ,比较给
药组与对照组室颤发生率的差别。
1. 6　山茱萸 4种提取液对豚鼠离体乳头肌动作电
位的影响 [ 8～ 10]: 将豚鼠击昏后迅速打开胸腔 ,取出
心脏 ,浸泡于混合气 ( 95% CO2 , 5% CO2 )饱和的冷
( 0℃～ 4℃ ) Krebs-Henselei t ( K-H)液中。打开右
心室 ,剪下乳头肌 ,用不锈钢针固定于浴槽底部的硅
胶上。 用 ( 35± 0. 5) ℃ 的 K-H液 ( pH 7. 35±
0. 05)恒速灌流 ,流速为 4 mL /min。用双极起博电
极以场刺激驱动标本 ,由刺激器提供方波信号 ,波宽
1 ms,频率 1 Hz,电压强度为阈刺激的 1. 5倍。用微
电极推进器将尖端电阻 10～ 30 mΨ的玻璃微电极
缓慢推入乳头肌细胞内 ,记录细胞内动作电位
( AP)。生物电信号经微电极放大器放大后 ,一路输
入监听器 ,另一路经高速模数转换器输入计算机 ,自
·1005·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
动显示并分析动作电位的各参数 ,包括静息电位
( RP) ,超射值 ( OS) ,动作电位幅值 ( APA) , 0相最大
上升速度 ( Vmax ) ,复极化 50% 和 90% 的时间
( APD50和 APD90 )。
标本在灌流液中平衡 1 h后 ,记录动作电位作
为对照。分别取上述 4种提取液 ,用微量注射器量
取 45μL的药液注射到标本槽内 , A, B, C, D在标
本槽内的终浓度均为 3× 10- 5 g /mL (以生药量计
算 )。分别记录给药后 10, 20, 30 s和 1, 2, 4, 8, 16,
30 min时的动作电位参数变化。
1. 7　统计方法: 山茱萸 4种提取液对氯仿诱发小
鼠室颤模型的研究中 ,实验数据以抑制百分率表示 ,
实验结果经 χ2检验 ,比较各实验组与对照组的差
别。山茱萸提取液对豚鼠离体心肌动作电位影响的
实验中 ,实验数据以实测值表示 (x± s ) ,实验结果
以配对 t检验 ,比较给药前后心肌动作电位的参数
是否有差别。
2　结果
2. 1　山茱萸 4种提取液的制备及含量控制: 测定
结果见表 1。 药效学研究中 ,整体动物实验时 ,各种
提取液均于实验前用生理盐水稀释至 0. 11 g /mL;
离体乳头肌实验时 ,使用原液。
表 1　山茱萸 4种提取液的含量测定
药物名称 制备方法 药物浓度 (以生药量计 , g /m L) 含量 ( mg /m L)
A 水提醇沉 1 总有机酸= 38. 64
总提取液 总　　苷= 18. 40
B 乙酸乙酯提取液 1 总有机酸= 36. 24
C 正丁醇提取液 1 总　　苷= 16. 77
D 提取残余液 1 -
2. 2　对氯仿诱发小鼠室颤模型的影响:对照组小鼠
吸入氯仿后 ,室颤发生率达 85% ,符合方法学要求。
A, B和 D的室颤发生率分别被抑制了 65%、 55%
和 60% ,室颤发生率显著低于对照组 ( P < 0. 05和
0. 01)。 A增加给药量至 4. 4 g /kg ,室颤抑制率未见
明显提高 ( 70% )。 C无效 ,增加剂量至 8. 8 g /kg仍
无显著效果。 实验结果见表 2。
表 2　山茱萸提取液对小鼠室颤模型的影响
组　别 剂量 ( g /kg ) 室颤动物数 /动物数 室颤率 (% )
对照 - 17 /20 85. 0
A 2. 2 7 /20 35. 0* *
B 2. 2 9 /20 45. 0*
C 2. 2 16 /20 80. 0
D 2. 2 8 /20 40. 0* *
美西律 0. 08 2 /20 10. 0* *
　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
2. 3　对豚鼠离体乳头肌动作电位的影响: A、 B、 D
3× 10- 5 g /mL明显增大静息电位的绝对值 ,延长动
作电位时程 ( APD50、 APD90 ) ,其余各参数无显著性
变化 (数据略 ) ;提取液 C无效 ,结果见表 3。 C提取
液进一步增加浓度至 1. 5× 10- 4 g /mL,仍无明显作
用 (数据略 )。
表 3　山茱萸提取液对豚鼠离体乳头肌细胞
动作电位的影响 ( n= 5)
组　别 RP
( mV )
APD50
( ms )
APD90
( ms)
A 给药前 - 76. 7± 5. 1 158. 8± 7. 1 184. 2± 7. 6
给药后 - 86. 0± 5. 1* * 195. 2± 8. 2* * 223. 2± 9. 3* *
B 给药前 - 80. 8± 1. 1 129. 4± 17. 9 171. 6± 11. 9
给药后 - 88. 9± 1. 6* * 136. 4± 17. 7* * 179. 4± 10. 2* *
C 给药前 - 79. 4± 7. 0 135. 6± 12. 1 164. 6± 10. 0
给药后 - 81. 6± 5. 6 135. 2± 9. 6 165. 0± 5. 4
D 给药前 - 81. 0± 6. 0 135. 0± 18. 0 170. 2± 14. 5
给药后 - 90. 9± 6. 7* * 163. 0± 13. 8* * 200. 8± 14. 2* *
　　与药前值比较: * * P < 0. 01
3　讨论
A、 B、 D连续给小鼠 ig 4 d ( 2. 2 g /kg ) ,对氯仿
致室颤模型均具有明显的预防作用。 3种提取液均
以药典中规定的人用剂量 ,按动物体表面积折算成
小鼠的给药剂量 ,所用剂量和给药途径与临床用药
一致。氯仿致小鼠室颤模型是筛选抗心律失常药物
的常用方法 ,方法简便 ,结果可靠 [7 ]。 抗心律失常药
物主要通过改变心脏的心肌电生理性质 ,特别是降
低心肌细胞的自律性 ,延长动作电位的有效不应期
而发挥打断折返的效应。 为了进一步证实山茱萸的
抗心律失常作用 ,我们又分析了 4种提取液对豚鼠
离体乳头肌的作用。 研究结果与整体抗心律失常实
验相同 ,除 C不影响离体乳头肌的电生理参数外 ,
其他 3种提取液均可显著延长乳头肌的动作电位
时程 ,增大静息电位的绝对值 (膜电位处于更负的状
态 )。此外 , A对兔离体窦房结具有降低最大除极电
位 (更负 ) ,延长不应期和降低心率的作用。尽管有不
少关于山茱萸具有抗失血性休克、抑制血小板聚集、
影响心功能及血流动力学、调节免疫系统等作用的
实验报道 [2 ] ,但是 ,迄今为止尚未见到山茱萸具有抗
心律失常的临床或动物实验报道。我们首次发现 ,山
茱萸具有抗心律失常作用 ,其作用机制可能与降低
心肌组织的自律性、兴奋性和延长动作电位时程
有关。
实验中对山茱萸抗心律失常有效成分进行了分
析。将山茱萸 A中的总有机酸和总苷类物质进行了
分离制备 ,其中 B中含水溶性有机酸 ; C中含有总苷
类成分 , 2. 2 g /kg和 4倍临床剂量 ( 8. 8 g /kg ) 均
·1006· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
无抗小鼠心律失常的作用。 在离体豚鼠乳头肌实验
中 ,与 A、 B、 D相比 , C增加至 5倍浓度仍无影响心
肌电生理的作用。因此 ,认为山茱萸中的总苷不具有
抗心律失常活性。B中主要含总有机酸成分 ,经分析
检测总有机酸含量达到母液的 93. 8% ,说明总有机
酸在提取过程中未有明显损失 ,其在离体和整体均
表现为显著的抗心律失常效应。因此 ,可以确定山茱
萸中的总有机酸具有抗心律失常活性。令人意外的
是 D (即残余液 )具有肯定的抗心律失常作用 ,在离
体乳头肌具有延长动作电位时程和增大静息电位绝
对值 (更负 )的作用。说明 D中含有高效的微量抗心
律失常活性物质 ,这种物质可被乙酸乙酯所萃取 ,但
是不能溶于正丁醇。对此种成分还需采用制备分离
和高精度的检测手段 (如液-质联用技术 )等才能进
一步证实。在本文中暂且将这种未知成分定名为 X
成分。
3种提取液抗心律失常的效应强度顺序为 ,总
提取 > X成分 > 总有机酸成分 (抑制率分别为
65%、 60% 和 55% )。延长动作电位时程的强度顺
序与前者相同 ,亦为总提取物> X成分> 总有机酸
成分。一个有趣的现象是 ,在离体心肌实验中 , A延
长 APD50和 APD50的净值 (药后值 -药前值 )为 39
和 36 ms; D为 30和 28 ms;而 B为 8和 7 ms。 D
与 B的相加值几乎与 A相等 ,说明 A的效应是 B
与 D相加之结果。 但是 ,在整体动物的抗心律失常
实验中 ,却没有得到近似的结果。这可能与整体动物
实验中药物的效能有关 ;例如 ,当我们将 A增加剂
量至 4. 4 g /kg ( 2倍 )其抑制室颤率仅由 2. 2 g /kg
剂量的 65% 提高到 70% ,并非提高到 100% 。 因
此 ,在整体实验中 ,无法得到 B与 D相加的结果。
药效学及心肌电生理实验结果表明 ,抗心律失
常作用可能与延长心肌动作电位、减慢自律性和增
大静息电位绝对值有关 ,离体心肌电生理实验结果
支持整体药效学实验结论。研究结果表明 ,山茱萸提
取液具有十分明显的抗心律失常作用。 山茱萸提取
液抗心律失常的有效部位为总有机酸和一种未知的
微量成分 ,总苷类成分不具有抗心律失常活性。但其
有效成分和作用机制的研究还有待于进一步进行。
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消瘀片及其组分对动脉粥样硬化兔 ET-1和 NO影响的比较
谢梅林 ,顾振纶 ,朱路佳 ,陆　群⒇
(苏州中药研究所 ,江苏 苏州　 215007)
摘　要: 目的　探讨消瘀片组方的合理性。方法　采用动脉粥样硬化兔模型 ,观察消瘀片及其组分对体内 ET-1和
NO含量的影响。结果　消瘀片对降低血浆和血管壁组织中 ET-1含量 ,增加血清和血管壁组织中 NO含量均较其
相应组分的丹参水提物或山楂醇提物更明显。 结论　丹参水提物和山楂醇提物合用后 ,对降低粥样硬化兔体内
ET-1和增加 NO含量具有明显的协同作用。
关键词: 消瘀片 ;丹参 ;山楂 ;内皮素 -1;一氧化氮
中图分类号: R286. 26　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 1007 04
·1007·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2001-05-17基金项目:香港保健协会资助项目 ( No. 960086)作者简介: 谢梅林 ( 1958-) ,男 ,江苏无锡市人 ,苏州大学副教授 ,医学博士 ,从事心血管药理学研究。 Tel: 0512-5190599, E-mail: sz zys
@ publicl. s z. js. cn