全 文 ：复方桔梗止咳滴丸的制备和质量标准研究
天津市第六中药厂〔3 0 0 4 01 )
天津市儿童医院
石 林平
姚立娟
摘 要 采用大孔 吸附树脂提取桔梗 、远志 、款冬花 、甘草等的有 效成分 , 制成滴丸 , 以 薄层 层析法
对桔 梗 、 远志进行 鉴别 , 并 采用 H P LC 法对甘草酸进行含 量测定 , 结果表 明该制剂工 艺稳定 , 质量
可靠 。
关键词 大孔 吸附树脂 薄层层析 甘草酸 H P LC 法
复方桔梗片收载于卫生部药品标准中药
成方制剂第四册 , 原方 由桔梗 、远志 、款冬花 、
甘草等组成 , 具有 良好 的止咳祛痰功效 。但由
于 片剂的崩解 时间长 , 起效慢 , 生物利用度
低 , 本文依新药研制办法将其改制为滴丸制
剂 , 并经相应的提取试验及质量标准研究 , 表
明新剂型提取工艺稳定 , 质量可靠 , 具有剂量
小 、起效快 、服用方便等特点 。
1 仪器与试药
日本岛津公司 LC 一 g A 高效液相色谱仪 ,
S PD
一
6 A V 紫外检测器 , C R 一 4 A 数据处理机 ,
岛津 D G U 一4A 脱气机 , 超声波清洗机 , P一C 1 8
预 处理小柱 : 河北津杨 滤材厂 , 大 孔吸附树
脂 : 南开大学化工厂 , 甘草酸单胺盐 : 购 自中
国药品生物制品检定所 , 纯度为 9 8 . 8 6 % ; 甲
醇 、 乙 睛均为色谱纯 , 水为重蒸馏水 , 冰乙酸
为分析纯 ;桔梗 、 远志 、款冬花 、甘草均 购自天
津市药材公司 , 经鉴定符合中国药典 1 9 9 5 年
版一部各项下有关规定 。
2 制备工艺
取桔梗 、远志 、款冬花 、甘草等 4 味 , 加人
5 倍量水 , 煎煮 2 . s h , 滤过 ; 药渣 同法分别加
入 4 倍 、 3 倍量水 , 煎煮 Z h , l h , 合并 3 次水
提液 , 浓缩 至相对体积质量 1 . 巧 , 放冷后加
人 3 倍量 95 % 乙 醇 , 充分搅拌后 , 静置 24 h ,
滤过 , 滤液浓缩至相对体积质量 1 . 1 0 , 加人 3
倍量水于浓缩膏中 , 搅拌溶解完全后 , 通过预
先处理过的大孔吸附树脂柱 , 并以水洗脱至
流出液无色后 , 以 80 % 乙醇洗脱 , 收集洗脱
液至无色后 , 浓缩得膏 。将所得膏加人适量熔
融的 P E G 一 6 0 0 0 中 , 分散均后 , 滴入 10 C ~
1 5 C 的液体石蜡中 , 取出滴丸 , 擦干石蜡即
得 。
3 鉴别
3
.
1 桔梗的鉴别 : 取本品 1 9 , 研成粉末 , 加
乙 醚 3 0 m L , 加热回流 9 0 m in , 分取乙醚液 ,
浓缩至 Z m L , 作为供试 品溶液 ; 另取桔梗对
照药材 1 9 , 同法制成对照药材溶液 , 照薄层
色谱法 (中华人民共和国药典 1 9 9 5 年版附录
35 页 )试验 。吸取上述两种溶液 5 一 1 0 拼L , 分
别点于 同一硅胶 G 薄层板上 , 以 己烷 一乙 酸
乙 醋 (4 , 1 )为展开剂 , 展 开 , 取出 , 晾干 , 喷
1 0 %的硫酸 溶液 , 1 2 0 ‘C 烘 5 m in , 日光 (或
3 6 5 n m 紫外灯 )下检视 , 供试品色谱中 , 在与
对照药材色谱相应的位置上显相同的黄绿色
荧光斑点 。 如图 1一A 。
3. 2 远志 的鉴别 : 取本品 1 9 , 研成粉末后 ,
加人 s m L 甲醇溶解 , 作为供试品溶液 ; 另取
远志对照药材 1 9 , 同法制成对照药材溶液 ,
照薄层色谱法 (中华人民共和国药典 1 9 9 5 版
附录 35 页 )试验 , 吸取上述 2 种溶液 5 ~ 10
拜L , 分别点于同一硅胶 G 板上 , 以正丁醇 一醋
酸 一水 (5 , 1 , 4) 为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 ,
喷 1 % 香草醛硫酸溶液 , n o C烘 5 m in , 日
A d d r e
s s :
Shi L 一p in g , T ia n jin N o
.
6 F
a e t o r y o f C hin e s e M a te r ia M e d ie a
,
T ia n jin
《中草药 》1 9 9 9 年第 3 。卷第 12 期 · 9 0 7 .
g 三 菩二 营 荟
口 口
1 2 3
R
口 o
口 O
口 o
口 O
O 口
O O
口 O
1 2 3
A
一枯梗 卜远志
l
一空 白 2一药材 3 一样品
图 1 样品薄层 图
光下检视 , 供试 品色谱中 , 在与对照药材色谱
相应的位置上显相 同的 3 个紫色斑点 。 如图
1
一
B
。
4 含 t 测定
4
.
1 色 谱条 件 : 色谱 柱 : C 18 柱 (7 . 8 m m X
1 5 0 m m
,
5 拼) ; 流动相 : 乙睛 (1 ~ 1 5 卜冰 乙酸
液 (3 0 : 7 0 ) ; 检测 波 长 : 2 4 8 n m ; 流量 : 1 . 5
m L / m in ; 衰减 : 2 ; 纸 速 : 2 m m / m in ; A U F S
0
.
0 8
。
4
.
2 对照品溶液的制备 : 精密称取甘草酸单
胺盐对照品适量加人 甲醇溶 解 , 制成 0 . 1 47
m g / m L 的溶液 , 作为对照品溶液 。
空白对照溶液的制备 : 精密称取缺甘草
的样 品 45 0 m g , 按供试 品溶液制备方 法制
备 ,作为空白对照溶液 。
4
.
3 供试品溶液的制备 : 取样品约 4 50 m g ,
精密称定 , 置 1 0 m L 量瓶 中 , 50 % 甲醇超声
波振 荡溶解 , 冷却 , 定容 至刻度 。 取此液 5
m L
, 用 1 %冰乙 酸冲洗 , 上述样 品 上预处理
小柱 , 先用 1 5 m L 一 2 0 m L 甲醇 (l一 1 5 ) 冰
乙酸液 (3 0 : 7 0) 洗去干扰物 , 然后用 s m L
甲醇洗掉被测定甘草酸于 s m L 量瓶 中 , 得
供试品溶液 。
4
.
4 标准 曲线 : 精 密称取 17 . 2 m g 甘草酸
单钱盐对照 品于 1 0 0 m L 量瓶 中 , 甲醇溶解
定容 , 分别取 1 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 m L 于 1 0 m L 量
瓶中 , 甲醇定容 , 分别进样 5 拌L , 得 回归方程
为 Y - 一 1 6 4 2 . 3 8 + 9 0 2 4 3 8 . 6 8X , r = 0 . 9 9 9
(X 为浓度 , Y 为峰面积 ) , 甘草 酸在 0 . 0 1 7 2
一 0 . 1 72 m g / m L 具有 良好的线性关系 。
4
,
5 精 密度实验 : 精密吸取同一浓度对照品
溶液 , 重复进样 5 次 , R S D 一 0 . 31 % 。
4
.
6 空 白实验及样 品 、对照 品谱图 : 取不 同
甘草酸样品约 4 50 m g , 按样品处理项下处理
进样 , 得 图 2 。
A
一甘草酸单胺盐 B 一样 品 C 一阴性 对照
图 2 样品 H PL C 图
4
.
7 重现性实验 : 取 同一批号样 品 6 份 , 按 9 9 . 7 % , R S D ~ 0 . 28 % (n 一 5) 。
样 品 测 试 条 件 测 定 , 甘 草 酸 含 量 的 R S D 2) 样品 回收率 : 取样品约 4 0 m g , 精密
0
.
36 %
。 称定 10 份 , 每份加人一定浓度对照品 (浓度
4. 8 回收率实验 : 1) 预处理柱 回收率 : 取对 为 0 . 0 9 m g / m L ) , 50 % 甲醇液超声波振荡
照品 1 7 . 2 m g , 于 1 0 0 m L 量瓶 中 , 超声波溶 溶解 , 定容 , 取液 2 m L , 稀释 5 倍 , 上预柱 ,
解 , 以 甲醇定容至刻度 , 分别取 2 , 4 , 6 , 8 , 10 得待测液 ; 另取约 4 0 m g 样 品 , 处理 同样品
m L 于 1 0 m L 量瓶中 , 取 5 m L 用 1 %冰乙酸 处 理 项 下 , 作 为 空 白 , 测 回 收 率 , 结 果 为
稀释 5 倍 , 同样品处理项下方法处理 , 得待测 97 . 87 % , R S D 一 1 . 7 % (n 一 10 ) 。
液 , 分别进样 3 次 5 拼L , 得峰面积 , 此峰面积 4 . 9 样品的测定及初步稳定性测定 : 3 批样
与未经上柱 液的峰 面积相 比 即得 柱 回 收率 品测定结果见表 1 。
.
9 0 8
-
时间
表 1 样 品测定结果 (含 t m g / g )
批 号
原 测
19 9 8
一 0 6一 2 9
19 98
一 0 9
一
3 0
19 9 9
一 0 2
一
1 4
9 8 0 5 0 9
2
.
2 5 2
2
.
2 4 4
2
.
2 5 5
2
.
2 3 8
9 8 0 5 1 8
2
.
5 0 8
2
。
5 2 3
2
.
4 9 1
2
.
4 9 6
9 8 0 5 2 8
2
.
4 1 2
2
.
4 3 1
2
.
4 1 7
2
.
4 2 2
5 讨论
5
.
1 试验 中采用大孔吸附树脂对方 中四味
药材分别作了提 取试验 , 并作了不 同型号 的
大孔吸附树脂吸附率的对 比试验 , 结果表明 ,
A B
一
8 型大孔吸附树脂对方 中的皂昔类有效
成分吸附效果最佳 。
5
.
2 由于款冬花 成分不 明确 , 无特 征性斑
点 , 故文中未对其作鉴别 。
5
.
3 用大孔吸附树脂提取桔梗 、远志 、款冬
花 、甘 草的有效成分 , 经制备成具有高效 、速
效特点滴丸制剂 , 获得满意效果 , 并制定出相
应 的定性鉴别及含量测定指标 , 可作为该制
剂的质量标准 。
参 考 文 献
1 日本 药局方 . 第 十二改正
2 杨胜 华 . 药物分 析杂志 , 19 9 3 , 2 3 (2 ) : 1 3 6
3 廖 工铁 , 等 . 药物分 析杂志 . 19 9 2 , 1 2 (4 ) : 2 3 7
4 李 俊 , 等 . 中成 药 , 19 9 4 . 16 (6 ) : 1 3
6 李 国峰 . 现代应用药学 , 19 9 6 , 1 3 (2 ) : 3 3
(1 9 9 9
一
0 5
一
2 4 收稿 )
不同树龄的银杏叶在不同生长季节中
银杏总黄酮和总内醋的含量变化
山 东省 医学科学院药物研究 所 (济南 2 5 0 0 6 2) 仲 英 . 唐文照 丁杏苞 左春旭
银 杏叶 为银 杏科植 物银杏 Go nk g o 沉lo ba L . 的
干燥绿 叶 。 银 杏叶主要含黄酮和 内醋类 有效成分 。前
人研 究 仁‘一 ‘。」结 果表 明 , 银杏 叶有效 成分 的含 量与 不
同生长 季节 的树龄 紧密 相关 。 为 了弄 清本地产银 杏
叶有 效成分含 量与 季节 变化 的关 系 , 我 们用 高效 液
相色谱法做 了不同树龄 的银杏 叶在 不同月份 的总黄
酮和 总 内酷的 含量 测定 , 结果 4 月分总 黄酮 含量 最
高 , 9 月份后总 黄酮含量 有所降低 , 1 月 份黄酮 含量
最低 。 总 内脂 含量 以 5 月份为最高 , 8 月份 开始含量
显著下 降 , n 月 份含量最低 。此结果为适时采收银杏
叶合理开发利用 , 提供依据 。
1 仪器与材料
1
.
1 仪 器 : 美国 W a t e r s A llia n e e 高效液相 色谱仪 ;
PD A 9 9 b 检 测 器 ; 4 1 0 示 差 检 测 器 ; M illip o r e
M IL L IQ
一
2 超 纯水制备仪 ; R e so lv e C , 。 (8 m m 义 1 0 0
m m )径向加压 色谱柱 。
1
.
2 材料 : 榭皮素 、 山奈 素 、 异 鼠李素 、银 杏 内酷 C
标准品由 中国药品生物 制品检定所 提供 ; 白果 内酷 、
银杏 内酪 A , B 由 Si g m a 公司提供 。
1
.
3 银 杏样品 : 于 1 9 9 7 年 4 一 n 月 的 15 日采 自济
南山 东 医科 大学校园 内 30 余年生 与 10 余年生银 杏
树上的银杏 叶 。
2 方法与结 果
2
.
1 色谱条 件 : 流动相 (测定黄 酮 ) : 甲醇 一 50 %磷 酸
溶液 (4 8 , 5 2 ) ; 流速 : l m IJ / m in ; 检测波长 3 6 8 n m ;
进样量 10 川, , 外标法计算含量 。
流动 相 (测定 内酷 ) : 甲醉 一水 (2 5 : 7 5 ) ; 流速 : 1
m L / m in ;示 差检测 ; 柱温 35 C ; 进样 量 10 拜L ; 外标
法计算含量 。
2. 2 样 品制备
2
.
2
.
1 银杏总黄酮样品制备 : 取银杏叶 1 9 , 精密称
定 , 加 7 0 % 甲醉溶液 10 0 m L , 称重 。加热回 流 3 h , 放
冷加 7 0 % 甲醇至原 重量 , 过 滤 。 精密量取续滤液 4 0
m L
, 加 浓盐酸 s m L , 加热 回流 3 0 m in , 迅速冷却 , 用
甲醇定 量转人 50 m L 容 量瓶并 稀释至 刻度 , 用 0 . 4
拌m 的滤膜过 滤 , 作 为黄酮供试 品溶 液 。
2
.
2
.
2 银杏总 内醋样 品制备 : 取银杏 叶 3 9 , 精密称
定 , 加 7 0 % 甲醇溶 液 3 0 0 m l碑 , 称重 。加热 回流 3 h , 冷
仲 英 副研究员 , 1 9 8 2 年毕业于 山 东中医 药大学药学 系 , 学士 学位 。多年来主要从事天 然药物化学及分析方面的研究和新 药研 制工 作 。 主要研究的药物有葛根 、叶下珠 、银杏 叶 、瓦松 、怪柳 、 芦笋 、 山植叶等 , 其中叶下珠 、葛根 、芦 笋等 方面 的
研究均 获省部级 科技进步奖 。
《中草药》1 9 9 9 年第 3 。卷第 12 期 . 9 0 9 ,