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Studies on effects of 15 Chinese herbs for regulating Qi on in vitro aggregation of human platelet

15种理气中药体外对人血小板聚集的影响



全 文 :15种理气中药体外对人血小板聚集的影响
吉中强 ,宋鲁卿 ,牛其昌
(青岛市人民医院 ,山东 青岛  266001)
摘 要:目的 观察 15种理气中药对体外肾上腺素诱导的人血小板聚集的影响。方法 试管内人血小板加中药孵
育前后 ,比浊法测定血小板聚集。 结果  11种理气药具有抗血小板聚集作用 (P < 0. 05~ 0. 001) ,其中枳实的抑制
作用较阳性对照阿司匹林明显 (P < 0. 01) ,青皮、陈皮与阿司匹林无差异 (P < 0. 05)。 柿蒂、甘松、檀香、沉香对血小
板聚集无明显作用 (P> 0. 05)。 结论 多数理气药 ( 11 /15)在体外具有抗人血小板聚集作用 ,枳实、青皮、陈皮 3种
作用强于或与阿司匹林相当。
关键词: 理气中药 ;血小板聚集 ;肾上腺素
中图分类号: R285. 5   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 05 0428 03
Studies on effects of 15 Chinese herbs for regulating Qi on in vitro
aggregation of human platelet
JI Zhong-qiang , SON G Lu-qing , N IU QI-chang
   ( Qingdao People s Hospital, Qingdao Shandong 266001, China)
Abstract: Object  To study the effect of Chinese herbal drug s for regulating Qi. ( CHQ) on the in vit-
ro agg rega tion o f human platelet agg regation induced by adrenalin. Methods  Human platelet agg regation
induced by adrenalin w as observ ed by turbidimetry before and af ter human platelets w ere incubated w ith
CHQ. Aspirin was used as a control. Results  11 of the 15 CHQ showed ef fectiv e anti-pla telet agg regation
activi ties ( P < 0. 05~ 0. 001) . The ef fect o f Fructus Aurant ii Immaturus was more significant than As-
pirin ( P < 0. 01) . There were no dif ference betw een Pericarpium Citri Reticuatae Viride , Pericarpium
Citri Ret iculatae and Aspirin (P > 0. 05) . Calyx Kak i Radix et Rhizoma N ardostachyos , Lignum Santali
Albi and Lignum Aquilariae Resinatum show ed no obv ious effect on platelet ag g regation ( P > 0. 05) .
Conclusion  Most of the CHQ tested ( 11 /15) show ed in vit ro antipla telet ag g rega tion activ ities on human
platelet. Among them the ef fect of Fructus Aurantii Immaturus , Pericarpium Citri Reticuatae Viride and
Pericarpium Citri Reticulatae were superio r o r equal to Aspirin.
Key words: Chinese herbs fo r regula ting Qi ( CHQ); pla telet agg regation; adrena lin
  中草药抗血小板聚集作用的报道较多 ,但未见
理气药抗血小板聚集的系统报道。我们曾发现理气
药枳实和陈皮有明显的抗血小板聚集作用 [1 ]。 在此
基础上选择 15种理气中药 ,在体外观察其对肾上腺
素诱导的人血小板聚集的影响。
1 材料与方法
1. 1 材料:常用理气药 15种 [2 ] ,经山东中医药大学
石俊英教授鉴定:佛手为芸香科植物佛手的干燥果
实 ,青木香为马兜铃科植物马兜铃的干燥根 ,云木香
为菊科植物木香的干燥根 ,甘松为败酱科植物甘松
的干燥根及根茎 ,荔枝核为无患子科植物荔枝的干
燥成熟种子 ,香橼为芸香科植物枸橼的干燥成熟果
实 ,陈皮为芸香料植物橘的干燥成熟果皮 ,檀香为檀
香科植物檀香树干的心材 ,薤白为百合科植物小根
蒜的干燥鳞茎 ,香附为莎草科植物莎草的干燥根茎 ,
柿蒂为柿树科植物柿的干燥宿萼 ,川楝子为楝科植
物川楝的干燥成熟果实 ,青皮为芸香科植物橘的干
燥幼果 ,沉香为瑞香科植物白木香含有树脂的木材 ,
枳实为芸香科植物酸橙的干燥幼果。每种中药经水
煎、过滤、浓缩、加工成每毫升含生药 1. 5 g的水溶
液 , pH值调整为 7. 2~ 7. 4。阿司匹林水溶液于使用
当日制备 ,浓度为 30μmol /L , pH值调整为 7. 35。诱
导剂盐酸肾上腺素 (天津人民制药厂出品 ,批号
990427) ,用 1 /15 mo l磷酸缓冲液稀释 ,终浓度为 5
·428· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 5期
收稿日期: 2000-11-20基金项目:山东省卫生厅中医药科技资助项目 ( 99-40)作者简介:吉中强 ( 1954-) ,男 ,江苏丹阳人 ,主任医师 ,学士学位。 1982年 12月毕业于山东中医学院 ,从事中西医结合内科临床工作。
1990~ 1992年留学于日本广岛大学医学部。曾在国内外医学期刊、学会发表专业论文 20余篇 ,获数项山东省、青岛市科技进步奖。 研究方向:中医血栓病防治。 E-mai l: qdxzh zhl@ public. qd. sd. cn
μmo l /L。血小板标本取自 50例血小板高聚集病人 ,
其血小板最大聚集率为 ( 79. 65± 5. 47)% ,各组间比
较无显著性差异 ( P> 0. 05)。
1. 2 仪器:上海医科大学研制的 PAM-2型 PPP自
动平衡血小板聚集仪。
1. 3 方法:常规制备富血小板血浆 ( PRP)和贫血小
板血浆 ( PPP)。取同一人 PRP标本 5份 ,每份 200
μL, 1份为空白对照 , 1份加入阿司匹林 10μL, 3份
各加入 3种不同中药 10μL,均匀混合 ,于 37℃恒
温孵育 15min。为保持透光度的一致性 ,在 PPP 200
μL内亦加入相应药物 10μL,均匀混合 ,作为对照 ,
然后将搅拌磁棒放入孵育好的 PRP内 ,打开搅拌 ,
迅速注入肾上腺素 12μL,记录 5 min聚集曲线 ,取
最大聚集率 ( Amax ) ,并计算聚集抑制率 ,聚集抑制
率= [ (加药前 ( Amax-加药后 Amax ) /加药前 Amax ]×
100%。每种药物试验 10次 ,取最大聚集率和聚集抑
制率的平均值。
2 结果
  血小板聚集自身前后对照:见表 1。加阿司匹林
后 ,最大聚集率降至 ( 26. 40± 6. 67)% ,下降极显著
( P < 0. 001)。加枳实、青皮等 9种中药后 ,经自身对
照下降极显著 ( P < 0. 001) ;加香附、云木香 2种中
药后 ,经自身对照下降明显 ( P < 0. 05~ 0. 01) ;加柿
蒂、甘松、檀香、沉香 4种中药后最大聚集率与加药
前比较无明显变化 ( P> 0. 05)。
  将自身对照作用明显的枳实、青皮等 11种中药
的聚集抑制率与阿司匹林进行比较 ,枳实的抑制作
用明显高于阿司匹林 (P < 0. 01) ;青皮、陈皮 2种中
药与阿司匹林比较无明显差异 ( P> 0. 05) ;其余具
有抑制作用的青木香、荔枝核等 8种中药 ,抑制血小
板聚集的作用明显低于阿司匹林 ( P < 0. 05~
0. 01)。
表 1  15种理气药体外对人血小板聚集的影响 (x± s, n= 10)
药  物 最大聚集率 (% )加药前 加药后 聚集抑制率 (% )
阿司匹林 79. 80± 5. 65 26. 40± 6. 67△△△ 70. 20± 4. 35
枳实 Citrus aurant ium L. 78. 90± 3. 14 15. 90± 4. 28△△△ 79. 60± 6. 07▲
青皮 Citrus reticulata Blanco 80. 70± 4. 58 23. 30± 7. 88△△△ 71. 50± 8. 59*
陈皮 Citrus reticulata Blanco 78. 90± 3. 14 27. 90± 4. 82△△△ 64. 70± 5. 66*
青木香 Ar istoloch ia debil is Sieb. et Zucc 80. 10± 2. 81 33. 80± 9. 38△△△ 57. 70± 11. 14
荔枝核 Litch i chinensis Sonn 78. 90± 3. 14 35. 00± 6. 13△△△ 55. 50± 8. 24
香橼 Citrus med ica L. 78. 70± 6. 64 39. 60± 12. 10△△△ 50. 00± 13. 82
薤白 Al lium macrostemon Bge. 80. 70± 4. 58 47. 00± 5. 12△△△ 44. 70± 7. 44
佛手 Citrus med ica L. Var Sarcodacty lis Swing le 80. 10± 2. 81 48. 40± 10. 60△△△ 39. 40± 12. 91
川楝子 Melia toosendan. et Zucc 78. 70± 6. 64 52. 60± 7. 25△△△ 32. 90± 8. 32
香附 Cyperus rotun dus L. 79. 90± 5. 14 57. 60± 11. 02△△ 27. 10± 16. 28
云木香 Aucklandia lappa Decne 79. 90± 5. 14 65. 60± 10. 04△ 17. 50± 13. 46
柿蒂 Diospyros Kaki Thunb 78. 70± 6. 64 68. 70± 11. 29 13. 00± 10. 37
甘松 Nardostachys chinensis Batal 80. 70± 4. 58 71. 70± 12. 49 10. 60± 9. 72
檀香 Santalun album 79. 90± 5. 14 72. 10± 9. 45 9. 20± 8. 63
沉香 Aquilaria sinensis ( Lou r) Gilg 79. 80± 5. 65 73. 30± 8. 08 8. 20± 6. 93
    与加药前比较: △ P < 0. 05 △△ P < 0. 01 △△△ P < 0. 001; 与阿司匹林比较: ▲ P < 0. 01 * P < 0. 05
3 讨论
  理气药是一类具有疏通气机 ,调整脏腑功能 ,治
疗气滞和气逆等症的药物。现代药理研究认为 [3 ] ,理
气药主要具有调节胃肠运动 ,调整消化液分泌 ,松弛
支气管平滑肌 ,调节子宫平滑肌等作用 ,但对血小板
功能影响的报道甚少。我们将 15种理气药与阿司匹
林对照 ,逐一进行了体外筛选。 据文献报道 ,薤白 [ 4]
能对抗血小板聚集 ,与本文结果一致 ;枳实、陈皮抗
血小板聚集作用进一步得到重复和肯定 [ 1]。枳实、青
皮等 14种中药 ,未见到有对血小板影响的报道。我
们发现青木香、荔枝核、青皮、香橼、佛手、川楝子、香
附、云木香 8种中药能不同程度地对抗血小板聚集 ,
而柿蒂、甘松、檀香、沉香 4种则无此作用。特别应注
意枳实、青皮、陈皮 3种 ,自身对照作用明显 ,抑制作
用又强于或与阿司匹林相当 ,值得进一步研究。
祖国医学认为气血之间存在着密切的关系 ,在
生理上相互依存 ,气为血之帅 ,气为血之母 ;在病理
上相互影响 ,气滞则血瘀。传统的行气活血法 ,在活
血药中加入理气药 ,强调理气药的动力作用 ,认为行
气能够加强活血作用。活血药抗血小板聚集作用已
得到肯定 [5 ] ,血小板聚集可以作为血瘀证的一个客
观指标 ,本研究发现多数理气药 ( 11 /15)同活血药一
样 ,具有抗血小板聚集作用。我们曾将自身对照作用
明显的活血药桃仁、理气药木香与桃仁木香合剂进
·429·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 5期
行抗血小板聚集比较 ,发现桃仁木香合剂作用更显
著 ,优于单味药桃仁和木香 ,与祖国医学行气活血的
理论相吻合 ,从实验角度说明理气药行气加强活血
作用 ,其机制或许在于其抗血小板聚集作用。
参考文献:
[1 ] 吉中强 ,高晓昕 ,宋鲁卿 ,等 .调脂中药抗血小板聚集和对红细
胞流变性影响的实验研究 [ J] . 中医药研究 , 1999, 15 ( 5): 47-
49.
[2 ] 凌一揆 .中药学 [M ] .上海:上海科学技术出版社 , 1984.
[ 3 ] 陈 奇 . 中药药理研究方法学 [M ]. 北京: 人民卫生出版社 ,
1993.
[ 4 ] 陈光荣 . 中国植物药薤白对人血小板聚集的影响 [ J ] . 中草
药 , 1987, 18( 10): 12.
[5 ] 陈可冀 . 活血化瘀研究与临床 [M ] . 北京:北京医科大学中国
协和医科大学联合出版社 , 1993.
绞股蓝总苷对全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回的保护作用
齐 刚 ,张 莉 ,宋月英 ,汪 超 ,陈小义 ,李积胜
(武警医学院 中心实验室 ,天津  300162)
摘 要: 目的 观察绞股蓝总皂苷 ( GP)对全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回 DN A和 RN A的保护作用。方法 采
用 4-血管阻断 ( 4-VO )方法建立大鼠急性全脑缺血模型 ,用吖啶橙染色法进行 GP对全脑缺血再灌注大鼠海马及齿
状回的 DN A和 RN A保护作用的研究。 结果 与正常对照组比较 ,全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回 DN A和
RN A吖啶橙染色后的荧光强度 (反映 DN A和 RN A含量 )明显减弱 , GP 100 mg /kg ig给药组海马及齿状回 DNA
和 RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于全脑缺血再灌注模型组 ,与正常对照组相似。 结论  GP可明显减轻缺血再
灌注对大鼠海马及齿状回 DNA和 RN A损伤。
关键词: 绞股蓝总皂苷 ;脑缺血再灌注 ;海马 ;齿状回
中图分类号: R285. 5   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 05 0430 02
Protective effect of gypenos ides on cerebral ischemia-reperfusion injury of
hippocampus and dentate gyrus of rat
QI Gang , ZHANG Li, SONG Yue-ying , W ANG Chao, CHEN Xiao-yi, L I Ji-sheng
   ( Depa rtment o f Pharmaco log y, Medica l Co llege o f Chinese People s Arm ed Po lice Fo rces, Tianjin 300162, China )
Abstract: Object  To observ e the ef fect o f gypeno sides ( GP) on DN A and RN A in hippocampus and
dentate gy rus of cerebral ischemia-reperfusion injured ra t. Methods  Modified 4-vessel occlusion ( 4-VO )
method w as used to establish the models of acute g lobal ischemia. Acridine orange ( AO) method was ca r-
ried out to study the pro tectiv e effect of GP on cerebral ischemia-reperfusion injury in hippocampus and
dentate g y rus of rat. Results  The fluo rescent intensity o f the DN A and RN A in hippocampus and dentate
g yrus o f cerebral i schemia-reperfusion injury of ra t is abated as compared w ith the no rmal control w hi le the
g roup wi th ig GP ( 100 mg /kg ) is enhanced when compared wi th the ischemia-reperfusion injury model,
and show ed the same deg ree of intensi ty w ith the no rmal control g roup. Conclusion  It i s show n that the
injury on DN A and RN A in hippocampus and dentate g y rus o f ischemia-reperfusion of ra t could be allev iat-
ed by GP.
Key words: g ypenosides ( GP) ; cerebral ischemia-reperfusion; hippocampus; dentate gy rus
  绞股蓝 Gynistemma pentaphyllum ( Thunb. )
Mak. 为葫芦科绞股蓝属植物 ,其主要有效成分为
绞股蓝皂苷 ( gypeno sides, GP)。目前已分离鉴定出
80余种皂苷 ,其中皂苷Ⅲ ,Ⅳ ,Ⅷ ,Ⅶ 的化学结构与
人参皂苷 Rb1 , Rb3 , Rd, F2结构相同 [1 ]。 已有报道 ,
GP对大鼠全脑缺血再灌注损伤及家兔急性不完全
性脑缺血具有保护作用 [2, 3 ] ,对老龄大鼠学习记忆有
改善作用 [4 ] ,认为 GP对缺血脑组织的保护作用不
仅与其抑制自由基的产生、清除氧自由基和脂质过
氧化有关 ,而且与其对缺血脑组织的神经细胞膜及
·430· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 5期
收稿日期: 2000-08-10作者简介:齐 刚 ( 1962-) ,男 , 1996年毕业于北京医科大学 ,医学硕士 ,副教授。现任武警医学院中心实验室负责人。主要从事心脑血管药理学研究。 Tel: ( 022) 24372788-78496   E-mai l: qgang @ eyou. com.