全 文 :太子参皂苷提取工艺优选
许 茜 ,王红芳 ,周小羽⒇
(东南大学医学院 ,江苏 南京 210009)
中图分类号: TQ A61 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0799 02
太子参皂苷是从石竹科药材太子参的干燥块根
中提得的活性成分 ,药理研究表明 ,它能增强人体免
疫力 ,提高人体抗疲劳能力。国内对太子参的研究尚
未见对其皂苷提取工艺的报道 ,为了更好地开发利
用太子参这一传统中药材 ,我们对太子参皂苷的提
取工艺进行了研究 ,以期优选出简便有效、安全可行
的提取工艺。
1 材料、仪器和试剂
材料: 太子参药材 ,购于南京医药公司 ;人参皂
苷 Rb1对照品 ,购于与中国药品生物制品检定所。
722型分光光度计 ;试剂均有分析纯。
2 实验与结果
本实验采用 3种方法提取 ,分别为通法、水煎煮
法及超声提取法 ,以皂苷得率为指标 ,比较 3种方法
所得结果 ,并设计正交试验优选水煎煮法和超声提
取法的条件。
2. 1 太子参皂苷的含量测定
2. 1. 1 标准溶液的制备: 取人参皂苷 Rb1对照品 ,
加甲醇溶解配制 1. 0 mg /mL的标准溶液。
2. 1. 2 标准曲线绘制: 精密吸取标准液 10, 20, 40,
80, 160μL,分别置于 10 mL具塞试管中 ,用微热风
吹去溶剂 ,加 5%香草醛冰醋酸溶液 0. 2 mL、高氯
酸 0. 8 mL,混匀 ,密塞。置 60℃水浴中加热 15 min
后立即用流水冷却 ,加冰醋酸 5 mL,摇匀。对试剂空
白于 560 nm波长处测定吸收值 ( A ) ,对相应的浓度
(C )绘制标准曲线 ,得回归方程 C= 0. 426+ 54. 1A ,
r= 0. 998 8。
2. 1. 3 提取物的皂苷含量测定:精密移取所得皂苷
的甲醇溶液 50μL,按 2. 1. 2项下自“置于 10 mL具
塞试管中……”起 ,依法测定吸光值 ,依回归方程求
算 Cx ,得率按下式计算:
得率% = 1. 2×Cx称样量× 1 000× 100%
2. 2 通法:称取太子参药材加工成的细粉 2. 0 g置
于滤纸筒中 ,以索氏提取器在 40℃水浴中用乙醚脱
脂 2 h后取出滤纸筒 ,挥干乙醚后再放入索氏提取
器内 ,在 80℃水浴中用甲醇提取 3~ 4 h,至硫酸醋
酐实验成阴性为止。 甲醇提取液减压蒸干后以 30
mL蒸馏水溶解残渣 ,以 60 mL水饱和的正丁醇分
3次进行萃取 ,萃取液合并后再以 50 mL正丁醇饱
和的蒸馏水洗涤 1次。正丁醇减压蒸干 ,残渣以甲醇
溶解并定容至 10 mL,即得待测的皂苷甲醇溶液。所
测得皂苷得率为 0. 414% (n= 4)。
2. 3 水煎煮法:水煎煮法选用 L9 ( 34 )正交表进行实
验。见表 1。称取太子参药材细粉 2. 0 g,加 10倍量
水 ,按表 1中的条件煎煮提取。提取液浓缩至一定体
积 ,趁热于搅拌下缓缓加入乙醇至一定醇沉浓度 ,静
置过夜 ,抽滤 ,滤液减压蒸干乙醇 ,按 2. 2项下自“以
30 m L蒸馏水溶解……”起如法操作 ,得 10 mL所
提皂苷的甲醇溶液 , 4℃保存待测。每次实验平行做
两次 ,结果见表 2。
根据表 2的极差 R的大小 ,各因素对太子参皂
苷提取影响顺序为 A> B> C,即依提取时间、提取
次数、醇沉浓度的次序减少。 从表中结果得到 ,各因
素的最佳水平为 A3B3C2 ,得率为 0. 669%。由于醇沉
浓度对提取结果影响不大 ,为节省溶剂 ,降低成本 ,
最后确定最佳水煎煮提取工艺为水煎煮 60 min,煎
煮 3次 ,醇沉浓度为 60%。
2. 4 超声提取法:超声提取法选用 L4 ( 23 ) ,见表 3。
表 1 L9 ( 34 )因素分析
因素
水平
提取时间 ( A)
( min )
提取次数 ( B) 醇沉浓度 ( C)
(% )
1 20 1 60
2 30 2 70
3 60 3 80
·799·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2000-12-24作者简介:许 茜 ( 1968-) ,女 ,山东省日照人 ,讲师 ,硕士 ,主要从事药品及保健食品的色谱研究工作。通讯方法:南京市东南大学医学院公共卫生学院 , 210009
表 2 水煎煮正交实验及结果
试验号 A B C 试验结果皂苷得率 (% )
1 1 1 1 0. 170
2 1 2 2 0. 181
3 1 3 3 0. 416
4 2 1 2 0. 302
5 2 2 3 0. 363
6 2 3 1 0. 537
7 3 1 3 0. 452
8 3 2 1 0. 515
9 3 3 2 0. 669
K1 0. 767 0. 924 1. 222
K2 1. 202 1. 059 1. 152
K3 1. 636 1. 622 1. 231
k1 0. 256 0. 308 0. 407
k2 0. 401 0. 353 0. 384
k3 0. 545 0. 541 0. 410
R 0. 289 0. 233 0. 026
表 3 L4 ( 23 )因素水平
因素
水平
提取时间 ( A)
( min)
提取次数 ( B) 醇沉浓度 ( C)
(% )
1 20 1 60
2 30 2 70
称取太子参药材细粉 2. 0 g,加 10倍量水后按
表 3条件进行超声提取 ,余下操作按 2. 3项目下自
“提取液浓缩至一定体积……”起如法进行 ,每次实
验平行做两次 ,结果见表 4。
根据表 4中极差 R的大小 ,各因素对太子参皂
苷得率的影响大小顺序为 A> > B> C,从表中直观
地得出的结论是各因素最佳水平为 A2 B1 C2 ,即超声
提取 30 min提取 1次 ,醇沉浓度为 70% ,皂苷得率
为 0. 731%。
表 4 超声提取法正交实验及结果
试验号 1 2 3
A B C
试验结果
皂苷得率 (% )
1 1 1 1 0. 381
2 1 2 2 0. 385
3 2 1 2 0. 731
4 2 2 1 0. 714
K1 0. 766 1. 112 1. 095
K2 1. 445 1. 099 1. 116
k1 0. 383 0. 556 0. 548
k2 0. 722 0. 550 0. 558
R 0. 339 0. 006 0. 010
3 讨论
3. 1 从实验结果直观可见 ,通法甲醇 1次性提取 3
h所得皂苷低于水煮煎法 (分 3次 )提取 3 h,且通法
生产过程长 ,有机溶剂用量多而危险大 ,操作较为繁
琐 ,故可认为水煎煮法提取太子参皂苷更简便 ,更符
合大生产降低成本、安全有效的要求。
3. 2 从超声提取的正交实验结果可见 ,超声提取的
皂苷得率明显高于水煮煎法 ,且所消耗时间、提取次
数均少于水煮煎法 ,故若生产条件具备 ,提倡使用超
声波方法提取太子参皂苷。
HPLC法测定康强胶囊中人参皂苷 Rg1的含量
刘桂敏 1 ,赵秀梅 1 ,张肖洪 2⒇
( 1. 天津市医药科学研究所 ,天津 300070; 2. 太原康强生化制药厂 ,山西 太原 030031)
中图分类号: R927. 2 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0800 02
康强胶囊是由人参、天花粉、龟板、枸杞子等十
几味中药提取液加生产用培养基 ,经光合菌发酵后
喷雾干燥制成的胶囊剂 ,能防止缺硒综合症。用于肿
瘤、糖尿病、心血管疾病等 ,并有促进代谢、增强免疫
力、清除自由基的作用。为控制产品质量 ,我们采用
HPLC法测定了康强胶囊中人参皂苷 Rg1的含
量 [1, 2 ]。
1 仪器与试药
1. 1 仪器:日本岛津 LC-10AV P高效液相色谱仪 ,
SPD-10AV P紫外检测器 , Class-V P5. 03软件 ,预处
理柱 Waters公司 Sep-pack C18。
1. 2 试药:人参皂苷 Rg1 , Re由中国药品生物制品
检定所提供 ,批号: 0703-20015。 康强胶囊由太原康
强生化制药厂提供。 乙腈为色谱纯 ,甲醇为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件的确定:采用 2000年版中国药典方
法 ,色谱柱: 大连依利特 HYPESIL C18分析柱 ( 250
mm× 4. 6 mm, 5μm) ,流动相:乙腈 -水 ( 0. 025%磷
·800· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-02-27