全 文 ：E f f e et s o f C er t ai n D r ug s o n t h eE x P r s s ei o n o f A n t i g en s
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清开灵和 6 5 4 一 2 对谷氨酸神经毒性脑水肿的影响△
湖南 医科大学湘雅医 院儿科 (长沙 4 1。。 0 8) 岳少杰 水
虞佩 兰
罗自强
夏令伟
邓世 林 ” `
赞 苍 并
摘 要 采用侧脑室注射 谷氨酸诱发脑水肿 , 观察清开灵 和 6 5 4 一 2 对谷氨酸神经毒性 脑水肿 的影
响 , 结 果发现 :侧脑室 注射谷 氨酸可 引起双侧大 脑弥 漫性脑组织 水和钠含量增加 , 而伊文思 蓝含量
无 明显的 变化 ;大 剂 量清 开灵 可减 轻谷 氨酸所致脑 组 织水 及钠 含 量的增加 , 而 小剂 量清 开灵 和
6 5 4
一
2 无 明显作用 , 提示清开灵具有直接抗谷 氨酸神经毒性 作用 , 其作用与其剂量有关 。
关键词 脑水肿 谷氨酸盐类 6 5 4 一 2 清开 灵注射液
谷氨酸是中枢神经系统 中一种重要 的兴
奋性神经递质 , 但当其细胞外浓度过高时 , 可
产生兴奋性神经毒性 ,造成神经元的损伤 。 近
年来 的研究表明 ,谷氨酸的兴奋性神经毒性
在多种脑损伤中起着重要的作用 .l[ 幻 。 因此 ,
寻找有效的抗谷氨酸神经毒性的中西药物是
目前脑损伤一防治研究的活跃领域 。 我们在谷
氨酸神经毒性脑水肿的模型上 , 观察 了清开
灵和 6 5 4一 2 对谷氨酸神经毒性 的影 响 , 以 探
讨清开灵和 65 4 一 2 的脑保护机制 , 为临床小
J L脑水肿的防治探索新 的途径 。
1 材料
S D 大 鼠由我校实验动物中心 提供 。 清
开灵注射液 (北京中医学院实验药 厂 ,批 号 :
9 1 0 3 1 0 2 ) 主要组 成 : 牛 黄 、 水 牛角 、 黄荃 、 银
花 、 桅子等 。 谷氨酸钠 ( S i g m a 公司 ) 。 6 5 4一 2 注
晰
A d d r e s s
:
Y u e S h a o j i e
,
X i a n g y a H o s P i t a l
,
H u n a n U n i v e r s i t y o f M e d i e a l S e i e n e e s
,
C h a n g s h a
岳少杰 副教授 , 1 9 8 3 年 获医学学 士学位 , 19 9 3 年获 医学博士学位 。 主要 从事新 生儿疾病及小儿 脑水肿防治 的临床 及
实验研究 。 曾主持卫生部青 年基金 及国家自然科学青年基金 课题各 1 项 。 已发表论文 10 余篇 ,并获湖南省科学进 步三等奖 。` 爷本大学生理教研究 ` 荟 ’ 本大学测 试中心
△卫生部青年基金资助项 目 ( 9 3 0 7 3 ) 国家 自然科 学基金资助项 目 ( 3 9 7 0 0 1 9 3)
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 5 期 . 3 5 5 ·
射液 (北京制药厂 , 批号 : 90 0 6 2 2 2 4 ) 。 k g , 以后每 隔 3 0 m in 注射 6 5 4 一 2 1 0 m g / k g ,
) 方法 共 8 次 。 谷氨酸组 iP 等量生理盐水作为对照 。
2
.
1 谷氨酸神经毒性脑水肿动物模型制备 : 2 . 3 脑组织含水量测定 : 取 脑组织 1 0 0 m g
SD 大 鼠 i p 2 0%乌 拉 坦 ( 0 · 5 m I J / 1 0 0 9 ) 麻 置 1 0 5 C 烤箱内 , 4 8 h 至恒重 ,称干重计算脑
醉 ,用立体定位仪固定头部 , 在冠状缝向后旁 水含量 。
开 Z m m , 矢状缝旁开 3 . s m m 处钻一 Z m m 2 . 4 脑组织伊文思蓝含量 测定 : 取左 、 右大
的小孔 , 垂直进针 4 m m , 进人 右侧脑室 内 , 脑半球前半部全层脑组织约 10 o m g ,分别加
注人 谷氨酸 5 0 拌m ol , 诱发 谷氨酸神 经毒性 人 3 m I J 甲酞胺 , 4 5 C 水浴 48 h 后 , 6 32 n m
脑水肿 。 对照组同法注射等体积 N a CI 液 50 比色 ,计算伊文思蓝含量 。
拌币ol 。 各组均于 实验前 iv Z%伊文思蓝生理 2 . 5 脑组织钠 、 钾含量测定 : 取脑组织先后
盐水溶液 0 . 2 m I J / k g ,作 为血脑屏 障通透性 加入浓硝酸和高氯酸 , 加热消化至清亮 , 用原
指示剂 , 4 h 后断头取脑 , 观察脑组织的蓝染 子吸收分光光度计测定钠 、 钾含量 。
范围和程度 ,并取左 、 右大脑半球备用 。 2 . 6 统计处理 : 实验结果用 ( 二士 : ) 表示 ,组
2
.
2 动物分组 : S D 大鼠 4 8 只 , 雌雄不拘 , 体 间 比较采用 t 检验 ; 组 内 比较采用 配对 t 检
重 2 0 0 ~ 2 6 0 9 , 随机分 为 5 组 : 对 照组 ( n = 验 。
1 4 )
、 谷氨酸组 ( n = 1 1 ) 、 清开灵 I 组 ( n = 6 ) 、 3 结果
清开灵 I 组 (n 一 n ) 、 6 5 4一 2 组 (n 一 6) 。 清开灵 3 . 1 谷氨酸对脑组织的含水量 、 钠 、 钾及伊
I 组 , 取清开灵 7 m l丫k g 分 3 次分别于 侧脑 文思蓝含量的影响 : 见表 1 。 显示右侧脑室内
室注谷氨酸前 30 m in 、 注谷氨酸后 l 和 Z h 注人谷氨酸可致双侧脑皮质的含水量及钠含
iP
。 清开灵 l 组 , 取清开灵 7 m I J / k g , 于侧脑室 量均明显 高于对照组 ( P < .0 01 ) , 且左右半
注射谷氨酸前 30 m in l 次 i p , 并于注谷氨酸 球无差异 ( p > 0 . 0 5) 。 两组大脑半球均未见
后 Z h 追加半量 , 总量为 10 . 5 m l了 k g 。 6 5 4一 2 蓝染 , 脑组织钾 、 钙及伊文思蓝含量无明显差
组 于注射谷氨酸前 3 0 m i n i p 6 5 4一 2 2 0 m g / 异 ( p > 0 . 0 5 ) 。
表 1 谷氨酸对脑组织水 、 钠 、钾及伊文思蓝含 , 的影响 x( 士 s)
对照组 14 79. 75士 0. 45 79. 98士 0 33 4. 24士 0. 45 4. 48士 0. 33 ! 6. 49士 0. 83 16. 28士 1. 29 0. 450士 0. 041 0. 492士 0. 062 0. 077士0. 014 0. 073士 0. 015
谷氨酸组 11 81· 46士 9: l夕色一 ) ):旦9.士。·旦l▲ 5 4`士。· 91▲ 5· 99士 0· 62▲ 16· 63生 1 07一 匹巡圭呸匹 i日 i丝丝些卫 些垫鲤里堕丝卫些竺些全四上
和对照组比: ` P <0. 01
3
.
2 清开灵和 6 5 4一 2对谷 氨酸神经毒性所 明显 的差异 ( P > 0 . 0 5 ) , 明显高于对照组 ( P
致脑水肿 的影响 : 清开灵 l 组脑含水量及钠 < 0 . 0 1 ) 。清开灵两组的脑组织钾含量均高于
含量明显低 于谷氨酸 组 ( P < 0 . 0 1 ) , 且与对 对照组 ( P < 0 . 0 1 ) 。 各组钙含量无 明显的差
照组无 明显差异 (尸 > 0 . 0 5 ) ; 而 清开灵 I 和 异 (见表 2 ) 。
6 5 4
一
2 组的脑 水及钠含量与谷氨酸组相 比无 4 讨论
表 2 清开 灵和 6 5 4一 2 对谷氮酸神经毒性脑水肿的影响 x( 士 s)
组 别 , 含水量 (% ) 钠 ( m g /g 千重 ) 钾 ( m g / g 干重 ) 钙 ( m g / g 干重 )
一 对煦组一 1 4 7 9 . 7 5士 0 . 4 5 4 . 24士 0 . 4 5 16 . 4 9士 0 . 8 3 0 . 45 0士 0 . 0 4 1谷氨酸组 1 1 8 1 . 4 6士 0 . 7 9` ▲ 5 . 46士 0 . 9 1鑫 ▲ 16 . 6 3士 1 . 0 7 0 . 45 2士 0 . 095
清开灵 I 组 6 8 1 . 2 6士 0 . 92▲ ` 5 . 64士 0 . 9 8“ 1 7 . 4 8士 0 . 82▲ 0 . 4 51士 0 . 048清开灵 I 组 11 80 . 1 2士 0 . 92△△ * * 4 . 2 9士 0 . 3 6△ △ * * 1 7 . 29士 0 . 68` 0 . 4 26士 0 . 04 5
6 54
一
2组 6 8 1 . 7 8士 0 . 67` ▲ 5 . 0 7士 0 , 80 ▲ 16 . 9 9士 2 . 7 4 0 . 45 5士 0 . 0 87
和对照组比 : ▲ P < 。 . 05 ▲ ` 尸< 。 . 01 ; 和谷氨酸组比 : △△ P < 。 . 01 ; 和清开灵 I 组 比 : * ★ 尸< 0 . 01
谷氨酸的兴奋性神经毒性在多种脑损伤 中起着重要作用 .[] 幻 。本研究结果也显示侧脑
.
3 5 6
.
室注射谷氨酸可引起脑组织 中水 、 钠含量的
增加 , 表明侧脑室注射谷氨酸可引起弥漫性
脑水肿 , 证实谷氨酸神经的毒性在脑水肿 的
产生中起着重要作用 。 但作为血脑屏障通透
性指示剂的伊文思蓝含量在谷氨酸组和对 照
组之 间并无明显的差异 , 提示谷氨酸 引起脑
水肿时并无明显的血脑屏障损伤 。 本研究并
未发现谷氨酸组脑组织钙含量 的增加 , 可 能
与本实验观察时间较短有关 。
6 5 4
一
2 为人工合成的阿托品类抗胆碱 能
受体阻断剂 ,对感染性休克有显著疗效 。 对实
验性大肠杆菌脑膜炎的脑损伤及百 日咳菌液
脑水肿也有保护作用比 `〕 ,并能抑制百 日咳菌
液脑水肿时脑组织谷氨酸含量的降低闭 。 提
示 6 5 4一 2 可通过抑制谷氨酸的大量释放而发
挥其抗脑水肿作用 。 6 5 4 一 2 具有细胞保护作
用川 , 本实验结果发 现 6 5 4 一 2 并不能减轻 对
谷氨酸神经毒性所致脑组织水 、 钠含量的增
加 , 表明 6 5 4一 2 对谷 氨酸 的神经毒性脑水 肿
无保护作用 , 不能直接拮抗谷氨酸的兴奋性
神经毒性 。
清开灵注射液系安宫牛黄丸衍化的一种
纯 中药复方针剂 , 具有清热解毒 、 镇静安神 、
化痰祛痕 、 醒脑开窍之功效 。 自 1 9 7 5 年研制
成功以来已广泛地应用于小儿病毒性脑炎等
颅内外感染时高热惊厥 、 昏迷及成人急性脑
血管疾病 、 肝昏迷等多种疾病的临床治疗闭 。
动物实验也证实 , 清开灵 对缺 血性闭及感 染
性川脑损伤均有保护作用 , 但其抗脑损伤的
具体机制 尚未完全清楚 。 有动物实验显示清
开灵可影响脑 内乙酞胆碱醋酶活性和谷氨酸
含量比 9〕 , 提示清开灵的作用机制可能与脑 内
中枢神经递质有关 。 为此 ,本研究观察了清开
灵对谷氨酸兴奋性神经毒性的影响 , 以探讨
其镇静安神 、 醒脑开窍的脑保护机制 。结果显
示 i p 大剂量清开灵 ,可 以明显地减轻谷氨酸
神经毒性所致脑水及钠含量的增加 , 首次显
示清开灵具有直接抗谷氨酸神经毒性作用 ,
这为临床应用清开灵防治多种 中枢神经系统
损伤提供了新的线索 。 小剂量清开灵对谷氨
酸神经毒性脑水肿无明显疗效 , 表 明清开灵
的脑保护作用与其所用剂量有关 , 这提示临
床应用清开灵防治脑损伤时剂量不宜太小 。
结果还提示清开灵可 促进脑细胞对 K 十 的重
摄取 , 提高脑组织钾含量 ,但其机制尚有待进
一步研究 。
参 考 文 献
1 岳 少杰 . 国 外医 学 一神 经病 学神 经 外科 分册 , 19 94 , 12
( 4 )
: 2 0 5
2 岳少杰 ,等 . 湖南 医科大学学报 , 1 9 95 , 2 0 ( 3 ) : 2 47
3 刘 一心 ,等 . 中华 医学杂志 , 1 9 9 3 , 7 3 ( 5 ) : 2 8 9
4 Y u e s h a o j ie
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.
C h i n e s e J l
n t e g r a t e d T r a d i t io n a l
五n d W e s t e r n M e d i e i n e , 1 9 9 7 , 3 ( l ) : 5 1
5 孙秉庸 , 等 主编 . 病理生理 学进展 (五 ) . 北京 : 科学技 术
文献出版社 , 19 9 3 : 1
6 杨建华 . 中成药 , 1 9 9 4 , 1 6 ( 1 2 ) : 2 0
7 蒋 玉凤 ,等 . 北京 中医药大学学报 , 19 96 , 1 9 (3 :) 3
8 刘 涛 ,等 . 江苏中医杂志 , 1 9 8 7 , 6 : 3 3
9 朱培纯 ,等 . 北 京中医学 院学报 , 1 9 8 0 , 3 : 24
( 1 9 9 8
一
0 7
一
14 收稿 )
E f f e c t o f Q i n g k a i l i n g a n d 6 5 4
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《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 5 期 . 3 5 7 .