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Preventive and therapeutic effect of XIAOZHANGSU INJECTION on experimental naphthalene cataract in rabbit eyes

注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用



全 文 :于天然抗体而激活。由于移植物与受体种属之间的
差异 ,导致移植物的补体调节蛋白无法抑制受者补
体系统的激活 ,从而无法防止 HAR的发展 [ 6]。因此 ,
补体系统在 HAR的发生过程中起着关键的作用。
眼睛蛇蛇毒因子 ( CV F) 又称为抗补体因子 ,
是一种来源于眼镜蛇蛇毒的性质稳定的抗补体糖蛋
白 ,它具有 C3 , C5转化酶的作用 ,可在血清其它蛋白
因子 (如 B, D因子 )参与下 ,激活补体旁路途径而不
断激活补体 C3 , C5直至其最终耗竭 ,造成血清补体
水平下降 ,经典及旁路途径均失活 [7 ]。 CCV是从中
华眼镜蛇蛇毒中分离纯化出的 CV F,其在体内较其
它来源的 CV F具有更强的抗补体活性 ,且一次给
药后可在较长时间内维持低补体水平 [8 ]。本研究在
术前 24 h按 0. 5 mg /kg给予受体大鼠 CCV ,术前
检测用药组大鼠血清补体水平较对照组有非常明显
的下降 ,几乎接近于 0,说明 CCV有较强的降补体
作用。由于使用 CCV耗竭补体 ,阻断了 HAR的发
展 , CCV组及 CCV+ 丹参组供心存活时间较对照
组均有明显延长 ,表明补体在 HAR中起着非常重
要的作用。
复方丹参注射液是活血化瘀药物 ,含有丹参和
降香 ,其主要有效成分为丹参素 ,可扩张血管、改善
微循环 ,抗血液凝固、促进纤溶系统激活 ,抑制血小
板功能和血栓形成。而 HAR主要的病理改变就是
广泛微血管内血栓形成、血小板凝集。此外 ,研究表
明复方丹参对 IgM、 IgG抗体有明显的抑制作用 ,可
调节蛋白代谢和免疫功能 [9 ]。 本研究在使用 CCV
抑制补体的同时 ,加用复方丹参注射液可使异种移
植后供心存活时间进一步延长 ,证明复方丹参在调
节机体免疫功能及血凝系统方面有一定作用 ,可延
缓 HAR的发生。而且 ,丹参在缺血状态下可抑制心
肌收缩 ,减少能量消耗保护心肌。苏晓华等研究也发
现丹参素对心肌线粒体呼吸链的功能有保护作用 ,
且可调节能量代谢、防止氧自由基的毒性作
用 [10, 11 ]。因此使用复方丹参注射液作为供心的灌注
液对心肌有良好的保护作用 ,减少供心的冷缺血及
热缺血损伤 , CCV+ 丹参组供心恢复血运后复跳时
间明显短于对照组及单独使用 CCV组。
本研究表明 ,在异种移植中补体系统起着关键
的作用 ,联合使用 CCV和复方丹参注射液可降低
补体水平 ,改善供心微循环、防止血小板凝集 ,减少
心肌损伤 ,延缓 HAR的发生。因此 ,可作为抑制异
种移植免疫排斥反应的一种有效的治疗方法。
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注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用
李宝瑗 1 ,闵红波 2 ,张富赓 1 ,王士贤 1 ,冯文茹 1 ,章 萍 1
( 1. 天津市医药科学研究所 ,天津  300070; 2. 中国人民解放军 455医院 眼科 ,上海  200052)
摘 要: 目的 研究注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用。方法 以 30% 萘混悬液 2. 65 m L /( kg·
d)给家兔 ig ,连续 8 d,制作成萘性白内障模型。 注射用消障素预防治疗起始于造模前 4 d,高、低剂量组为 0. 1及
0. 05 mL原液 /眼 ,隔日球结膜下注射 1次 ,共 6次。每日以裂隙灯显微镜追踪检查家兔晶状体混浊度的变化。于实
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收稿日期: 2001-06-20
验结束之日进行裂隙灯显微镜摄影 ;并对其晶体状 SOD活性及 GSH的含量进行测定。 结果 注射用消障素高剂
量组能显著抑制家兔萘性白内障晶状体混浊度的进展 (P < 0. 05) ;并有增加晶状体 GSH含量 ( 23. 3% ) 及阻止
SOD活性下降的趋势。 低剂量组未见显效。 结论 注射用消障素球结膜下注射 ,对家兔萘性白内障的发生发展有
明显的延缓作用。
关键词: 注射用消障素 ;萘 ;白内障模型 ;药理实验
中图分类号: R287. 81   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1108 04
Preventive and therapeutic effect of XIAOZHANGSU INJECTION on
experimental naphthalene cataract in rabbit eyes
LI Bao-yuan1 , M IN Hong-bo2 , ZHANG Fu-geng2 , W ANG Shi-xian1 ,
FENG Wen-ru
1 , ZHANG Ping
1
   ( 1. Tianjin Institute of Medica l and Pha rmaceutical Sciences, Tianjin 300070, China; 2. Depa rtment of Ophthalmo logy ,
455 Hospita l o f PLA, Shanghai 200052, China)
Key words: ZIAOZHANGSU IN JECTION; naphthalene; ca taract model; pharmacological experi-
ment
  白内障是眼科常见疾病 ,也是我国致盲及低视
力眼病的首要原因 ( 46. 07% )。随着人口的老龄化 ,
2020年我国的白内障盲人将有 500余万人。为了实
现国际组织关于“视觉 2020,享有看见的权利”的奋
斗目标 ,我们面临着巨大的社会需求 [1 ]。目前对病情
严重或后期白内障的治疗 ,以手术植入人工晶状体
为主 ,而对早、中期老年性白内障尚缺乏有效的预防
和治疗手段 [2 ]。因此寻找防治白内障的药物仍是医
药界的重要任务之一。
注射用消障素 [3, 4 ]系中国人民解放军 113医院
原眼科杜玉佩主任医师在古人治验的基础上 ,集数
十年临床经验 ,运用现代科技手段将新鲜乌鸡胆汁
加入人血白蛋白为冻干骨架剂 ,制成的眼用冻干剂。
溶解后直接注射于患眼球结膜下 ,加电离子点送 ,在
早、中期老年性白内障的临床治疗中获得了疗程短、
疗效好的满意结果。本实验观察了注射用消障素对
萘诱发的家兔实验性白内障晶状体混浊度以及晶状
体谷胱甘肽 ( GSH)含量和超氧化物歧化酶 ( SOD)
活性的影响 ,以期为临床应用提供科学实验资料。
1 材料
1. 1 动物: 健康雌性大耳白家兔 30只 ,体重
( 1. 7± 0. 5) kg ,由天津市实验动物中心提供 ,合格
证: W J津实动质 RA96-001号。
1. 2 药品与试剂:注射用消障素由上海复明生物制
品有限公司提供 ,使用前加 0. 6 mL灭菌注射用水
溶解 ; 2% 谷胱甘肽滴眼药 ( 100 mg /5 mL) ,日本国
参天制药株式会社生产 ; 20% 人血白蛋白 ,由四川
省蜀阳企业 (集团 )有限公司成都蜀阳制药厂生产
(用灭菌生理盐水配制成 0. 2% 人血白蛋白稀释
液 , 4℃ 保存 ,备用 ) ; 0. 25% 氯霉素眼药水 ,由天津
友谊制药厂生产 ;萘 (分析纯 ) ,天津石英厂霸州市化
工分厂生产 ; GSH及 SOD测定试剂盒均系南京建
成生物工程研究所提供。
1. 3 仪器: Topcon SL-SD型裂隙灯显微镜 ,日本
制造。 721分光光度计由上海第三分析仪器厂制造。
2 实验方法
2. 1 萘诱发家兔白内障模型的建立及治疗: 参照翁
福海等方法 [5, 6 ]改良复制成萘性家兔白内障模型。称
取萘粉剂 3 g 置乳钵中研磨 ,缓慢加入 10% 吐
温-80溶液 10 mL,制成 30% 混悬剂 ,家兔按 2. 65
mL /kg ig ,每天 1次 ,每日以裂隙灯显微镜追踪晶
状体变化。当模型组家兔晶状体全部出现不同程度
混浊且有部分达到+ + + 级混浊时 ,视为造模成功。
共 ig萘 8 d。
将 30只家兔随机等分为 6组 ,即正常对照组、
模型对照组、阳性药对照组 ( 2% GSH)、注射用消障
素高、低剂量组 ( 0. 1, 0. 05 mL原液 /眼 )及 0. 2%
白蛋白 (支架物 )组。 5只动物 /组 , 10只眼 /组。动物
投入实验前 ,经裂隙灯显微镜逐眼观察 ,无白内障者
供使用。
造模前 4 d,注射用消障素高、低剂量组 (按
1∶ 1稀释原液 ) ; 2% GSH组及 0. 2% 白蛋白组即
开始球结膜下注射给药 ,注射容积均为 0. 1m L /眼 ,
模型对照组注射相当容积的注射用生理盐水。隔日
1次 ,共 6次。注射后每眼均加用 0. 25% 氯霉素眼
药水 2滴 ,预防感染。
2. 2 晶状体形态学观察: 于末次给药翌日 ,以 1%
阿托品滴眼液散瞳 ,用裂隙灯显微镜对各参试组家
兔晶状体混浊度进行观察 ,并进行同步摄影 ,将观察
记录与摄影照片采取单盲法进行综合分析 ,按下列
·1109·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
标准对晶状体混浊度进行分级 [5 ]: “ - ”级:晶状体透
明 ;“+ ”级:晶状体前或后囊出现空泡 ,皮质出现斑
点或楔状混浊 ;“+ + ”级: 晶状体皮质出现云雾状、
条状、薄片状混浊 ;“+ + + ”级: 晶状体皮质出现范
围较大 ,颜色较深的斑块状混浊 ,此时肉眼观察亦可
见明显混浊。
2. 3 晶状体生化指标测定: 实验结束次日 ,气栓法
处死各组家兔 ,从眼球后路取出完整的晶状体 ,表面
用滤级吸干 ,扭力天平称重后 ,立即分别置于盛有 5
m L HEPES缓冲液 ( p H 7. 4)的试管中 ,电动匀浆。
使用 721分光光度计进行晶状体生化指标测定。采
用黄嘌呤氧化酶法测定各个晶状体组织的 SOD活
性 ;利用二硫代二硝基甲酸与巯基化合物反应时产
生一种黄色化合物的原理 ,测定晶状体内还原型
GSH的含量。
2. 4 统计学处理:对晶状体形态学观察结果实行秩
和检验 [ 7] ;对晶状体 GSH和 SOD测定的实验数据
以 x±s表示 ,组间差异用 t检验进行显著性分析。
3 实验结果
3. 1 裂隙灯显微镜对家兔晶状体形态学的观察: 模
型组家兔晶状体均发生了程度不等的混浊 ,与正常
对照组相比有显著性差异 ( P < 0. 05) ,阳性对照药
谷胱甘肽 ( GSH)组、注射用消障素高剂量组均可
明显延缓萘性白内障的形成 ,与模型组比较差异显
著 ( P < 0. 05) ;注射用消障素低剂量组的作用较弱 ;
而白蛋白组则无作用。如图 1及表 1所示。
1-正常对照组: 晶状体完全透明 ( - ) ; 2-萘性白内障模型对照组:晶状体皮质出现大面积混浊及颜色较深的斑状混浊
(+ + + ) ; 3-阳性对照药谷胱甘肽组:晶状体右下轻度混浊 ,有空泡 (+ ) ; 4-注射用消障素高剂量组:晶状体中央轻度混浊
(+ ) ; 5-注射用消障素低剂量组:晶状体前囊出现空泡 ,皮质出现斑点 (+ ) ; 6-冻干骨架人血白蛋白组:晶状体皮质出现云
雾状、条状及薄片状混浊 (+ + )
图 1 注射用消障素对家兔实验性萘性白内障的防治作用
表 1 注射用消障素对家兔实验性萘性白内障
晶状体混浊度的影响 ( x± s ,n= 10)
组别 晶状体混浊度分级
- + + + + + +
正常对照 10 0 0 0
模型对照 0 1 7 2
GSH 0 7 2 1*
注射用消障素高剂量 1 6 1 2*
      低剂量 0 4 4 2
白蛋白 0 1 7 2
  与模型对照组比较: * P < 0. 05
3. 2 注射用消障素对家兔萘性白内障晶状体生化
指标的影响:见表 2。可见注射用消障素高剂量能增
加萘性白内障家兔晶状体 GSH的含量并有阻止晶
状体内 SO D活性下降的趋势 ,其作用大体与阳
性对照药 GSH组相似 ,但与模型组相比较无显著
表 2 注射用消障素对家兔实验性萘性白内障晶状体
GSH含量及 SOD活性的影响 ( x± s,n= 10)
组别 GSH
(μg /mg )
△增减
(% )
SOD
( nU /mg )
△增减
(% )
正常对照 6. 78± 1. 08 0. 663± 0. 148
模型对照 5. 91± 2. 76 0. 487± 0. 149*
GSH 6. 74± 1. 33 + 14. 0 0. 594± 0. 093 + 22. 0
注射用消障素
高剂量 7. 28± 0. 54 + 23. 2 0. 548± 0. 106 + 12. 5
低剂量 5. 67± 2. 83 - 4. 1 0. 492± 0. 107 + 1. 0
白蛋白 5. 95± 2. 91 + 0. 7 0. 472± 0. 136 - 3. 1
  注: △与模型对照组比较增减 ; 与正常对照组比较: * P < 0. 05
性差异 ( P < 0. 05)。低剂量组和白蛋白组对 GSH
和 SOD则无影响。
4 讨论
本实验应用宏观裂隙灯显微镜摄影分级法 ,在
家兔实验性萘性白内障的防治中 ,对注射用消障素
·1110· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
进行药效学评价。结果表明:注射用消障素高剂量组
( 0. 1 mL /眼 ) 及 GSH球结膜下注射 ,对萘性白内
障的发生发展有明显的延缓作用 ( P < 0. 05) ;低剂
量组及支架物白蛋白组则无明显影响。
祖国医学认为: “五十岁 ,肝叶始薄 ,胆汁始减 ,
目始不明”。 肝木不平 ,内挟心火 ,乘热妄行 ,火炎不
制 ,神水受伤 ,上为内障 [8 ]。 《本草纲目》有载: “肝开
窍于目 ,胆汁减则目暗 ,目者 ,肝之外侯 ,肝之精华
也 ,故诸胆皆治目病” ;“胆 ,乌雄鸡者良 ,气味苦 ,微
寒 ,无毒 ,主治目不明” [9 ]。注射用消障素正是根据上
述病机 ,主选乌鸡胆之精 ,以达到清热平肝明目退翳
之功效 ,为老年性白内障患者带来了光明。
现代医学认为: 老年性白内障主要由氧化或游
离基的聚合作用引起晶状体纤维细胞膜脂质过氧化
损伤所致 [ 2, 6]。萘溶液 ig使家兔细胞内活性氧升高 ,
从而氧化损伤晶状体细胞膜脂质造成实验性白内障
模型 [ 6]。晶状体中含有高浓度的 GSH,它可以保护
细胞膜及胞质内的蛋白巯基不被氧化 ,从而维持细
胞膜的完整性及含巯基酶的活性 [10 ]。
为了探讨注射用消障素延缓白内障发生发展可
能的作用机制 ,我们着重观察了与氧化代谢有关的
生化指标 ( GSH含量 , SOD活性 )。结果显示高剂量
组及阳性对照药 GSH组与模型对照组比较晶状体
GSH含量分别增高 23. 2% 和 14. 0% , SOD活性分
别增加 12. 5% 和 22. 0% 。表明注射用消障素对萘
引起的晶状体白内障损伤有一定的保护作用。
致谢:本实验承蒙天津市眼科医院影像室金伯
骥主任的大力协助 ,在此深表谢意。
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百草降糖片降血糖作用的实验研究
茅彩萍 ,徐乃玉 ,顾振纶

(苏州大学医学院 药学系药理教研室 苏州中药研究所 ,江苏 苏州  215007)
中图分类号: R286. 72   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1111 02
  糖尿病是一种严重危害人类健康的疾病 ,患者
有明显的物质代谢和内分泌紊乱 ,继而并发感染及
进行性血管、肾脏、视网膜小血管病变及周围神经病
变。 1996年世界糖尿病患者已达 1. 2亿 ,预测 2010
年将达 2. 4亿 , 2025年则会增加到 2. 99亿 ,该病目
前在国内外尚无根治方法 ,临床对开发中药治疗糖
尿病寄予厚望 [1 ]。 本研究观察了百草降糖片的降血
糖作用 ,及其对四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠模型体
征的改善作用。
1 材料
昆明种小鼠 ,雌雄兼有 ,体重 18~ 22 g,由苏州
大学医学院实验动物中心提供。
百草降糖片是由我室从降糖中药中筛选自行研
制的 ,由黄芪、黄连、魔芋及丹参等组成的复方制
剂 [2, 3 ]。药材购自苏州药材公司 ,制成 1 mL药液含
药材 1 g的水煎液。盐酸肾上腺素注射液为上海天
丰药厂产品 ,批号 960328。 四氧嘧啶为美国 Sigma
公司产品。阳性对照药金芪降糖片为天津市中药制
·1111·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-04-09基金项目:江苏省中医药管理局资助项目 ,编号 9948作者简介:茅彩萍 ( 1968-) ,女 ,江苏苏州人 , 1991年毕业于南京中医药大学获医学学士学位 , 1998年毕业于苏州医学院获医学硕士学位 ,现博士在读 ,讲师。 研究方向:中药药理学及生药学 ,主持省级课题 1项 ,发表科研论文 9篇。 Tel: 0512-5190599