全 文 ：一阶导数光谱法测定大青叶中邻氨基苯甲酸含量△
第二军医大学药学院(上海 200433)　　王　寅X　乔传卓
摘　要　应用一阶导数光谱法测定大青叶 I satidis indigotica For t. 药材中邻氨基苯甲酸含量,平均加样回收率为
96. 66% , RSD 为 1. 09%。测定结果与高效毛细管电泳法比较,无显著性差异。方法简便、快速、准确。
关键词　一阶导数光谱法　大青叶　邻氨基苯甲酸　邻氨基苯甲酸含量测定
Determination of Anthranilic Acid in the leaves of Isatidis indigotica by
First Order Derivative UV Sperctrophotometry
　　Colleg e of Pharmacy , Second M ilita ry Medica l Univ ersity ( Shanghai 200433)　Wang Y in and Qiao Chuanzhuo
Abstract　　Anthr anilic acid in the leaves of I satidis indigotica Fo rt . w as determined by f irst o rder
derivat ive U V spect rophotometry . T he aver age recovery w as 96. 66% and the coef f icient o f deviat ion w as
1. 09% . The method show ed no signif icant difference as compar ed w ith high performance capil lar y
elect rophor esis at 95% conf idence level. The method is simple, rapid and accur ate.
Key words　　f irst o rder derivat iv e UV spect rophotometry　I satidis ind igotica Fort . 　anthranilic
acid　assay o f anthranilic acid
　　大青叶是常用中药材, 我国药典 1995年版(一
部 ) 规定其植物来 源为十字花 科菘蓝 Isat is
indigotica Fo rt . 的干燥叶,但仅收载了性状、鉴别
等定性项目, 没有定量评价指标[ 1]。文献报道从菘蓝
中分离得到的有机酸类成分具有体外抗内毒素作
用,能较好地反映大青叶药材清热解毒功效 [ 2] , 我们
采用高效毛细管电泳法对大青叶药材中几种有机酸
成分进行测定,结果表明邻氨基苯甲酸含量最高,占
总酸量的 70%以上,可以用单一指标对药材进行评
价[ 3]。
考虑到实际应用, 本文建立了一阶导数光谱法
测定大青叶药材中邻氨基苯甲酸含量的方法,取得
满意结果。
1　仪器和药品
UV -265FW 型分光光度计(日本岛津制作所) ,
邻氨基苯甲酸(东京化成工业株氏会社) , 大青叶药
材采自安徽亳州, 经作者鉴定为 I satis indigotica
Fo rt . ,所用试剂均为分析纯。
2　方法和结果
2. 1　样品液制备:取大青叶粉碎成粗粉, 于60 ℃烘
干,取约 5 g , 精密称定, 加 10%NaOH-乙醇液 100
mL,浸润过夜。回流 2 h,过滤, 残渣用 NaOH-乙醇
液洗涤 2～3次,过滤, 合并滤液,加少许蒸馏水。水
浴挥散溶剂至无醇味, 以石油醚萃取色素多次, 弃去
石油醚; 在水液中加 0. 1 mol/ L HC1, 调 pH 值为 1
～2, 以乙醚萃取多次,合并乙醚液,置水浴上挥干溶
剂, 残留物以乙醇溶解, 定容至 100 mL, 置于避光
处,作为样品液。
2. 2　阴性液制备:取样品液少许, 水浴挥干溶剂, 残
渣用过量 0. 1 mol/ L NaOH液溶解,过滤,不溶物用
蒸馏水洗涤多次后, 以乙醇溶解,作为阴性液。
2. 3　对照品液制备: 精密称取邻氨基苯甲酸 100. 1
mg, 以乙醇溶解, 配成 1 mg / mL 的对照品溶液, 置
于避光处。
2. 4　紫外光谱图考察: 取样品液、阴性液、对照品
液,以乙醇为空白,考察零阶紫外吸收光谱(K: 200～
400 nm, ABS: 0～4)和一阶导数光谱( $K= 2 nm , K:
200～400 nm , $A/ $K: - 0. 5～0. 5) ,见图 1、图 2。
从零阶紫外吸收光谱图中可以看出,阴性液在
紫外光谱中有背景吸收, 不能直接用分光光度法测
定; 在一阶导数光谱图中, 对照品溶液在( 353. 2±
0. 2) nm 波长处有一振幅值,供试品液在 352 nm 处
附近有振幅,而此处阴性液的振幅值基本为零,因此
在( 353. 2±0. 2) nm 处的振幅值可作为定量依据。
2. 5　标准曲线绘制: 精密吸取对照品液 1, 2, 3, 4, 5
mL,分别置于 100 mL 容量瓶中, 用乙醇稀释至刻
度, 摇匀, 测定一阶导数光谱值。以( 353. 2±0. 2)
nm 处测得振幅值 Y ( $A/ $K)为纵坐标, 浓度 C 为
·664· 中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2000 年第 31卷第 9期
X Address : Wan gYin, Col leg e of Pharmacy, S econd M ilit ary M edical Un iversi ty, Sh angh ai
△国家自然科学基金资助项目( NSFC39670878)
1-阴性液　2-样品液　3-对照品液
图 1　零阶紫外吸收光谱
1-阴性液　2-样品液　3-对照品液
图 2　一阶导数光谱
横坐标, 回归方程为 Y = 6. 74C - 0. 004 8, ( r =
0. 999 9) , 表明在 10～50 Lg/ mL 范围内, 一阶导数
光谱振幅值和邻氨基苯甲酸浓度有良好的线性关
系。
2. 6　加样回收率和稳定性考察:精密量取对照品溶
液, 加入已知含量的样品液中,依上法测定,平均加
样回收率为 96. 66% , RSD= 1. 09%。将样品液避光
冷藏,分别在不同时间进样, 3 d 内测定结果无明显
变化, RSD = 2. 31%。
2. 7　样品测定:取样品液 1 mL 置于 10 mL 容量瓶
中, 以乙醇定容, 依上法测定 351～354 nm 振幅谷
处的( $A/ $K)值, 用标准曲线法计算大青叶样品中
邻氨基苯甲酸含量, 为( 375. 88±0. 89) Lg/ mL。
2. 8　方法比较:采用高效毛细管电泳法对大青叶中
邻氨基苯甲酸含量进行测定, 结果为 ( 382. 62±
1. 15) Lg / mL。将两种方法测定结果进行统计学处
理,表明两者没有显著性差别( P> 0. 05, n= 5)。
3　讨论
导数光谱法具有简便、快速的优点,在中药材及
其制剂化学成分的含量测定方面的应用已有报
道[ 4～6]。本文以一阶导数光谱法对大青叶中邻氨基
苯甲酸的含量进行了测定,通过线性关系、加样回收
率和稳定性考察,以及与高效毛细管电泳法比较, 表
明该法能简便准确地测定大青叶药材中的邻氨基苯
甲酸含量,为该类药材的质量控制提供了简便、准确
的方法。
参 考 文 献
1　中华人民共和国药典 . 一部 . 广东:广东科技出版社,北京:化学
工业出版社, 1995: 15
2　Wu Xiaoyun, L iu Yunhai, S heng Wangun, et al . Plant Med,
1997, 63: 55
3　王　寅,尹　茶,乔传卓 . 第二军医大学学报, 1999, 20( 6) : 370
4　龙沛霞,王玉珍 . 中草药, 1996, 27( 9) : 531
5　陈　鸣 . 中国中药杂志, 1996, 21( 5) : 282
6　刘克仲 . 华西药学杂志, 1994, 9( 1) : 67
( 1999-11-24收稿)
正交法优选醋炙三棱最佳炮制工艺
南京中医药大学( 210029)　　陆兔林X 　毛春芹　叶定江
摘　要　以三棱总黄酮、扭体镇痛法及抗凝血作用为指标, 选择炒制温度、炒制时间、醋用量 3 个因素, 用 L9 ( 3) 4正
交设计表, 采用综合评分和方差分析的数学分析方法, 对三棱进行醋制工艺优选。结果表明, 每100 kg 三棱用醋 25
kg, 温度 130 ℃,炒 10 min 为最佳工艺。
关键词　三棱　正交设计　总黄酮　镇痛　抗凝血
·665·中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2000 年第 31卷第 9期
X Address : Lu T ulin , Nanjing University of T CM, Nanj ing陆兔林　男,讲师,博士。毕业于南京中医药大学中药系。主要从事《中药炮制学》教学和中药饮片质量标准及新药开发研制工作。主持或承担多项科研课题;在《中草药》、《中成药》、《中药材》等刊物发表科研论文 10余篇。