全 文 ：正交试验法研究三七提取工艺
唐红芳 ,毛丽珍 ,徐世芳
⒇
(浙江省医学科学院 ,浙江 杭州　 310013)
摘　要: 目的　优选三七的最佳提取工艺。方法: 采用正交试验法 ,以提取液中三七总皂苷含量为考察指标 ,对影响
三七提取工艺的因素进行了研究。结果　实验设计三因素中提取方式有显著影响。结论　三七的最佳提取工艺为:
用 75%乙醇浸渍三七 24 h后 ,以每公斤每分钟 1～ 3 m L速度渗漉 ,收集相当于三七 10倍量的渗漉液。
关键词: 正交试验 ;三七 ;三七总皂苷 ;提取工艺
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0026 03
Studies on process for extraction of Panax notoginseng by
orthogonal experiments
TANG Hong-fang , M AO Li-zhen, XU Shi-fang
　　 ( Zh ejiang Academy o f Medical Sciences, Hang zhou Zhejiang 310013, China )
Abstract: Object　 To optimize the condi tions fo r the ex t raction of Panax notoginseng ( Burk. )
F. H. Chen. Methods　 Condi tions for the ex traction were studied by or thogonal experimenta l design as
guided by the content of to tal no tog inseng saponin present in the ex t ract. Results　 Significant effect w as
observ ed in 3 dif ferent experimental condi tions. Conclusion　 The optimum condi tion fo r the ex traction of
P . notoginseng was to soak the drug in 75% alcoho l fo r 24 h and then perco late at a rate of 1～ 3 ml /min to
collect an amount co rresponding to about 10 times of the quanti ty o f P .notoginseng.
Key words: o rthogona l experiment; Panax notoginseng ( Burk. ) F. H. Chen; no toginseng saponin;
ex t raction process
　 　 三 七 为 五 加 科 植 物 Panax notoginseng
( Burk. ) F. H. Chen的根 ,是我国著名的药用植物 ,
具滋补强壮、止血、活血化瘀和消肿止痛的功效 [1 ]。
现代药理研究证明三七总皂苷对中枢神经系统有明
显的抑制作用 [2 ]和镇痛作用 [3 ] ,是三七中的主要有
效成分之一。 在中药制剂中 ,常用三七提取物 (液或
浸膏 )与其它中药配伍制成各种中药制剂 ,为了制定
科学经济的三七提取工艺 ,同时保证成药的质量 ,本
文采用正交试验法对三七常用的渗漉、冷浸及水煎
醇沉提取工艺进行筛选。
1　仪器与药品
UV-210A分光光度计 (日本岛津 ) ;玻璃层析柱
( 8 mm× 90 mm);中性氧化铝 ; D101型大孔吸附树脂
(天津骨胶厂 , 40～ 60目 )。
人参皂苷 Rg1对照品 (中国药品生物制品检定
所 ) ;三七药材 (市售 ) ;高氯酸优级纯 ;香草醛、冰醋
酸均为分析纯。
2　三七总皂苷含量测定方法 [4 ]
2. 1　吸附树脂的制作:将大孔树脂用丙酮浸泡 2 d,
加热回流 12 h ,抽滤 ,用丙酮洗至滤液与水 ( 1∶ 2)
混合不产生混浊 ;用水漂洗除去杂质并洗至无丙酮
味 ,水浸泡备用。
用滴管吸取浸泡膨胀的树脂加入盛水的层析柱
内 ,打开活塞 ,保持水向下流动 ,至装入树脂达 6 cm
高 ,覆以脱脂棉少许 ,加中性氧化铝 0. 2 g ,再覆盖一
层脱脂棉 ,压紧 ,用蒸馏水冲洗后备用。
2. 2　标准曲线的制备:精密称取在 60℃减压干燥
至恒重的人参皂苷 Rg1对照品适量 ,加甲醇制成每
毫升含 1 mg的对照品溶液。 精密量取 10, 20, 40,
60, 80, 100μL分置于 10 mL具塞试管中 ,水浴挥干
溶剂 ,加入新配制的 5%香草醛冰醋酸溶液 0. 2
mL、高氯酸 0. 8 mL,于 60℃水浴中保温 15 min,立
即置于冰水中冷却 5 min,加冰醋酸 5 mL,摇匀 ,放
置 10 min,以试剂空白作参比 ,照分光光度法 (中国
药典 1995年版一部附录 V ) ,在 545 nm波长处立即
测定吸光度 A,各浓度 (C )相应的吸光度 A经统计
处理 ,求得回归方程为: C= 200. 76A+ 2. 022, r=
0. 999 9。
·26· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-03-23作者简介:唐红芳 ,女 ,杭州人 ,副研究员 ,毕业于杭州大学化学系 ,主要从事药物方法学的研究和药品质量标准的制订工作。近年来开展植物药提取工艺的研究。 在《药物分析杂志》等刊物上发表论文数篇。
2. 3　供试品含量测定
2. 3. 1　提取液中三七总皂苷含量测定:精密量取 3
项下提取液 3 mL,于水浴上挥至近干 ,用水溶解并
移入 10 mL量瓶中 ,定容至刻度。精密量取 2 mL溶
液移入处理好的 D101大孔吸附树脂柱中 ,先用 15
m L水洗涤 (流速 0. 4～ 0. 5 mL /min) ,弃水洗液 ,继
以 70%乙醇 25 mL洗脱 ,收集洗脱液于水浴上挥
干 ,残渣用甲醇溶解 ,滤过 ,滤液置 2 mL量瓶中 ,用
甲醇定容至刻度 ,混匀。精密量取该供试品溶液 40
μL置 10 mL具塞试管中 ,于水浴中挥干溶剂 ,照标
准曲线制备项下方法自“加入新配制的 5%香草醛
冰醋酸溶液 0. 2 mL”起 ,依法测定吸光度 ,并用回归
方程计算即得。
2. 3. 2　药材中三七总皂苷含量测定: 取三七适量 ,
碎成细粉。精密称取约 1 g ,置 100 mL具塞锥形瓶
中 ,精密加入甲醇 25 mL,密塞称定重量。室温冷浸
24 h后 ,超声波处理 (功率 110 W ,频率 33 kHz) 10
min,放冷 ,补足甲醇至原称定重量 ,摇匀 ,静置。精
密量取上清液 2 mL,挥去甲醇 ,残渣用 2 mL水定
量移入已处理好的大孔吸附树脂柱中 ,依上法测定。
3　提取方法与结果
3. 1　提取方法: 三七总皂苷可溶于水和乙醇 ,但考
虑三七中含有大量淀粉 ,不宜采用水或低浓度乙醇 ,
以免糊化 ;为此 ,选择 55% ～ 95%乙醇作为提取溶
剂 ,采用以下 3种提取方法:
3. 1. 1　渗漉法:将三七粉碎成粗粉 ( 20～ 40目 ) ,照
流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法 (中国药典 1995年
版一部附录 IO ) ,用溶媒浸渍 24 h后 ,以每公斤每
分钟 1～ 3 mL速度缓缓渗漉 ,收集相当于三七选定
倍量的渗漉液即得。
3. 1. 2　浸渍法:将三七粉碎成粗粉 ( 20～ 40目 ) ,用
选定倍量的溶媒浸渍 24 h ,时时摇动 (室温 25℃ ) ,
滤过 ,收集滤液即得。
3. 1. 3　水煎醇沉法: 将三七粉碎成粗粉 ( 20～ 40
目 ) ,用 10倍量、 5倍量的水煎煮两次 (分别煎煮 60,
30 min,保持微沸 ) ,冷却后 ,离心分离 ,合并上清液 ,
浓缩至 1倍量体积。加入选定倍量的不同浓度乙醇 ,
搅拌 ,静置 ,待沉降完全后 ,离心 ,取上清液 ,并加适
量水至总量为选定倍量。
3. 2　正交试验方法 [ 5]:在对溶媒和提取方法初步选
择后 ,选定乙醇浓度、提取方法和乙醇用量作为考察
的 3个因素 ,每个因素各取三个水平 (见表 1)。采用
L9 ( 3
4
)正交表进行试验 ,以提取液中三七总皂苷的
含量为考察指标 ,结果见表 2。对表 2结果进行统计
学处理 ,得方差分析 (表 3)。
表 1　试验因素水平表
因素
水平
A
乙醇浓度 (% )
B
提取方法
C
乙醇倍量
1 55 渗漉法 8
2 75 浸渍法 10
3 95 水煎醇沉法 12
表 2　正交试验方案和结果
试验
号码 A B C
三七总皂苷
含量 (% )
1 1 1 1 2. 92
2 1 2 2 2. 26
3 1 3 3 1. 42
4 2 1 2 3. 38
5 2 2 3 2. 33
6 2 3 1 1. 48
7 3 1 3 2. 27
8 3 2 1 1. 53
9 3 3 2 1. 39
K1 6. 60 8. 57 5. 93
K2 7. 17 6. 12 7. 03
K3 5. 19 4. 29 6. 02
k1 2. 20 2. 86 1. 98
k2 2. 40 2. 04 2. 34
k3 1. 73 1. 43 2. 01
R 0. 67 1. 43 0. 35
表 3　方差分析表
方差来源 方差平方和 自由度 均方 F值 显著性 ( P )
A 0. 701 2 0. 351 9. 24 < 0. 01
B 3. 071 2 1. 536 40. 42 < 0. 05
C 0. 245 2 0. 123 3. 24
误差 0. 076 2 0. 038
3. 3　结果分析:表 3结果说明各因素对提取效果的
影响程度依次为 B> A> C。 B、 A二项因素均有显著
性差异 ,影响最大的是提取方法 B(P < 0. 05) ;其次
为乙醇浓度 A( P < 0. 01) ;而乙醇用量 C在所考察
的范围内则影响很小。因此 ,各因素的最佳水平组合
为 A2 B1 C2。
4　小结与讨论
4. 1　根据试验结果 ,最终确定三七提取工艺如下:
将三七粉碎成粗粉 ( 20～ 40目 ) ,照流浸膏剂与浸膏
剂项下的渗漉法 (中国药典 1995年版一部附录
IO) ,用 75%乙醇作溶媒浸渍 24 h以后 ,以每公斤
每分钟 1～ 3 m L速度缓缓渗漉 ,收集相当于三七 10
倍量的渗漉液即得。
4. 2　继续收集漉液 ,蒸干 ,依法测定 ,结果未测得三
七总皂苷。另取三七药材经本法测定 ,其三七总皂苷
含量为 5. 87% ,用本文选用的工艺 ( 10倍量 )提取的
渗漉液经测定其三七总皂苷含量为 5. 6 mg /mL,提
取率为 95. 9% ,可认为已基本提尽。说明本文选用
·27·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
的制备工艺是完全可行的 ,并具有简便、实用和经济
科学的特点。
4. 3　将渗漉法、冷浸法及水煎醇沉法所得的提取
液 ,用薄层法鉴别表明 ,人参皂苷 Rg1、三七皂苷 R1
的斑点在 3种提取法中均以渗漉法最浓 ;水煎醇沉
法各斑点最淡 ,经测定其三七总皂苷含量仅为渗漉
法的一半左右 ,与正交试验结果一致。
4. 4　三七药材商品规格繁多 ,不同规格其三七总皂
苷含量差别较大。本文随机抽查 3批市售三七 ,含量
分别为 6. 71% 、 5. 87%和 3. 64% 。故投料时应把握
生药质量关。
参考文献:
[1 ]　江苏新医学院 . 中药大辞典 (上册 ) [M ] . 上海:上海人民出版
社 , 1977.
[2 ]　郝朝庆 ,杨　帆 . 三七总皂苷的抗炎作用 [ J ]. 中国药理学报 ,
1986, 7( 3): 252-255.
[3 ]　雷伟亚 ,史栓桃 ,余恩畅 . 三七有效成分“皂苷 E1”对中枢神经
系统的抑制作用 [ J] .中草药 , 1986, 17( 1): 15-18.
[4 ]　章观德 . 吸附树脂法测定三七及其制剂冠心宁总皂苷 [ J ]. 中
草药 , 1981, 12( 11): 23-25.
[5 ]　邓　勃 . 数理统计方法在分析测试中的应用 [M ]. 北京:化学
工业出版社 , 1984.
正交试验法优选益心酮滴丸制备工艺
张志华 ,赵新华 ,孟庆军
⒇
(天津市第六中药厂 ,天津　 300401)
摘　要:目的　考察影响益心酮滴丸制备因素。方法　正交试验法 L9 ( 34 )优选制备条件。结果　优选出益心酮滴丸
的制备工艺 ,重复试验结果满意。 结论　所选工艺制备的成品各项指标均符合规定。
关键词: 益心酮滴丸 ;制备工艺 ;正交试验
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0028 02
Optimization of processing technology of YIXINTONG DROPLET by
orthogonal experimental design
ZHAN G Zhi-hua, ZHAO Xin-hua , M EN G Qing-jun
　　 ( Tianjin No. 6 TCM Factor y , Tianjin 300401, China)
Key words: YIXIN GTONG DROPLET; processing techno logy; o rthogonal experimental design
　　益心酮系山楂 Crataegus pinnatif ida Bunge树
叶内的总黄酮组分 ,认为对治疗冠心病有较好的疗
效。本方选自我国部颁《药品标准》中药成方制剂的
“益心酮片” ,功能为活血化瘀、宣通心脉、理气疏络 ,
用于胸闷憋气、心悸健忘、眩晕、耳鸣及冠心病、心绞
痛、高血脂症和脑动脉供血不足。为了使其达到治疗
速效的目的 ,我们采用固体分散技术 ,研制了益心酮
滴丸新剂型 ,现介绍如下:
1　材料与设备
1. 1　实验材料:山楂叶总黄酮 (自制 ,过 100目筛 ) ,
聚乙二醇 -6000 (上海市高南化工厂生产 ,批号
980515) ,聚乙二醇-10000(日本进口 ,天津市医药公
司开发区化学试剂分公司分装 ,批号 93530)。
1. 2　设备: 本厂自制滴丸机 ;岛津 LIBROR AEG-
220G电子天平 ; BJ-2崩解仪 (天津第四光学仪器
厂 )。
2　实验与结果
2. 1　正交试验设计:已报道 [1 ]影响滴丸制备的因素
除药物本身外 ,还有基质、冷却剂、滴口内外径、药液
温度、滴距和滴速等。根据我厂生产滴丸多年的经
验 ,着重考察了基质的配比、药液温度、冷却剂温度
及滴速四因素的影响 ,拟定了 L9 ( 34 )试验 ,表头设计
见表 1。
2. 2　方法及结果:据表 1按正交表 L9 ( 34 )安排 9次
实验。将基质置水浴上熔化后加入规定比例的山楂叶
总黄酮提取物混匀 ,以液体石蜡为冷却剂 ,滴制成丸 ,
吸除其表面冷却剂即得实验样品。按照药典方法测定
每次试验样品的溶散时限 ,任取 20粒称重 ,求出变异
·28· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-05-18作者简介:张志华 ( 1968-) ,女 ,河南省人 ,制药工程师、执业中药师。1990年毕业于中国药科大学中药系 ,理学学士学位。现在天津市第六中药厂从事中药新产品的研制与开发。