全 文 ：真空干燥得无色油状液体 1 . 8 9 , 气相色谱法
测定纯度为 9 . 89 % 。
4 鉴定
a 一亚麻 酸 乙酷 经‘H N M R 、 ‘3C N M R 测
定数据与标准图谱对照基本一致 。
致谢 : 中国科 学院 长春 应 用化 学研究所
代测核磁共振语 。
参 考 文 献
中华人民 共和国约典 (1 9 9 5 年 版一部 ) . 广州 : 广东科技
出版社 , 北京 : 化学工业 出版社 , 19 95 : 3 01
王永奇 , 等 . 中草药 , 19 95 , 2 6 (5 ) : 23 b
郭 英 , 等 . 营养学报 , 19 9 6 , 1 8 (3 ) : 2 6 8
Shim o k a w a
,
T
.
e t a l
.
L ife S e ie n e e s
, 19 8 8
,
4 3 、乙。 夕: 20 6 7
H ir a n o J
, e t a l
.
Y u k a g a k u
,
1 9 9 1
, 4 0 (1 0 )
: 9 4 2
H a shin o to A
, e t a l
.
P r o s ta g la n d in s
,
19 8 8
, 36 (1 )
: 3
H ir o s e M
,
et a l
·
C a r e in o g e n e s is
, 19 90
,
1 1 (5 )
: 7 3 1
(1 9 9 8
一
1 0
一
2 5 收稿 )
宁†几J4一急Žht了
H PL C 法测定感冒退热颗粒 (冲剂 ) 中
连翘酉旨昔 A 的含量
第二军 医大学药学院 ( 上海 2 0 0 4 33) 张 炜 ‘ 张汉明 郭美丽
上海市 中药 三厂 杨继斌 朱美玲
摘 要 以 R P一H PL C 测定 了感 冒退 热冲剂 中连翘醋 昔 A 的含 量 ;连翘酷昔 A 以冷浸超声法直 接
用 甲醇提取 ;色谱条件为 : O D S 色谱柱 ( 2 5 0 m m X 4 . 6 m m , 5 拌m ) ; 甲醇 (含 1 % 的四 氢吠喃 ) 一水 (含
0
.
01 m ol / L 磷酸二氢 钾 , p H 3 . 2) 为 流动相 进行梯度洗脱 ; 柱温室温 ; 检 测波长 332 n m ; 实验表 明
本法 简便 、特 异 、准 确 , 可用于本制剂的质量控制 。
关健词 感 冒退热 冲剂 连翘酷昔 A H PL C
感 冒退热冲剂为 1 9 9 7一 1 9 9 5 版药典收
载 的中药成方制剂 , 具有清热 、解毒等 功效 ,
临床用量很大 。 其组方为大青叶 、板蓝根 、连
翘 、拳参 ;药典除规定用薄层层析法定性鉴别
板蓝根 中的靛 玉红 成分外 , 尚未有合适 的定
量指标 。由于靛玉红的极性较小 , 从感 冒退热
颗粒的生产工艺看 , 它已大部分被除去 , 不宜
作为定量指标 。 考虑到连翘酷昔 A 为连翘的
特 征成分 , 且具 有很强的抗菌川和抗病毒阁
活性 , 为此 我们用 R P一H P L C 测定 了感 冒退
热冲剂 中连翘酷昔 A 的含量 , 获得了满意 的
分析结果 , 可为其质量控制提供参考 。
l 仪器与试药
1
.
1 仪 器 W a t e r s 公 司 M 5 1 0 和 M 5 9 O
泵 , 4 9 0 型 U V / V is 检测器 , 7 4 0 型色谱 数据
站 , U 6K 进样阀 , 超声振荡器 , p H 计 。
1
.
2 试剂与试药 : 甲醇 、磷酸二氢钾 、磷酸及
四氢吠喃等均为分析纯 , 水为重蒸水 。连翘醋
昔 A 对照品由中国 医学科 学研究院提供 , 经
光谱和 H P LC 法检测 , 纯度在 95 % 以上 。 感
冒退热冲剂由上海市中药三厂提供 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 : 色谱柱 O D S 柱 ( 2 5 0 m m X
4
.
6 m m
,
5 拌m ) ;流动相 : 甲醇 (含 1% 四氢吠
喃卜水 (含 0 . 01 m ol / L 磷 酸二 氢钾 , 用磷酸
调 p H 至 3 . 2 )〔3〕; 流速 1 m L / m in ; 检测波长
3 3 2 n m ;灵敏度 0 . I A U F S ; 衰减 3 2 ; 进样量
1 0 拌L , 柱温室温 , 梯度洗脱条件见表 1 。
2
.
2 标准曲线的绘制 : 精密称取连翘酷昔 A
标准品 5. O m g , 置 I O m L 容量瓶 中 , 加 甲醇
至刻度 , 配成浓度为 0 . 5 m g / m L 的储备液 ,
置冰箱保存 。
取连翘醋昔 A 储备液适量 , 用甲醇稀释
成 5 0 、 1 0 0 、 1 5 0 、 2 0 0 、 2 5 0 、 3 0 0 、 3 5 0 、 4 0 0 拌g /
A d d r e s s
:
Z ha n g W
e i
,
C o lle g e o f Pha r m a e y , T h e S e e o n d M ilit a r y U n iv e r s it y
,
Sha n g ha i
·
2 6 8
.
m L 的浓度 , 分别进样 10 拌L , 将 所测峰面积
(X )与浓度 (C )进行 线性 回归 , 得 回归方 程
为 : C 一 0 . 0 3 7 6 + 3 . 4 2 8 X 1 0 一6 X , n = 8 , r =
0
.
9 9 9 6 ;标准品与样 品色谱 图见 图 1 。
表 1 流动 相的梯度洗脱条件
时间 (m in ) 甲醇 (% ) 水 (写)
0 3 2 6 8
表 2 样 品中连翘醋普 A 的含t 测定结果
含量
样品批号
m g / g 毫克 / 包
9 6 1 1 0 4 0
。
9 2 5 4
.
1 6 4
9 6 1 0 1 4 0
.
7 7 0 3
.
4 6 7
无糖型 9 7 0 1 0 3
9 6 0 1 0 7
5
.
1 3 3
1
.
0 8 1 4
.
8 6 5
9 7 0 9 0 1 0
.
5 7 9 7
.
1 0 4
95 1 10 2
含糖型 9 6 10 0 2
0
.
58 7 10
.
5 7 3
0
.
30 3 5
.
4 6 0
9 7 0 40 1 0
.
4 6 7 8
.
4 1 2
bo三0OCƒh”b一a4tiJ住‘nlaC†9ŽOd.任注占内匕八」0OC†”ag曰1Q幻nJO月马
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时同 宕《‘如 )
A
一连翘醋昔 A (峰 a) B 一样 品 C 一缺 连翘的样品
图 1 样品色谱图
2
.
3 稳定性试验 : 取 同一样 品试液 , 分别于
2
、
4
、
6
、
8
、
1 2 h 进样测定 , 得 R S D = 0 . 7 % 。取
同一样品 , 均分成 4 份 , 分别于 O 、 1 、 3 、 5 、 7 h
进样测定 , 得 R S D 一 4 . 4 % 。
2
.
4 精密度试验 : 取同一样 品液 , 连续进样
5 次 , 测得 R S D 一 0 . 6 % 。
2
.
5 重复性试 验 : 取 同一批 样品 , 均分成 6
份 , 按样 品项下处 理并测定含量 , 得 R S D -
9 7
.
8 8 %
。
2
.
6 回收率试验 : 取已知含量 的样 品 , 研细 ,
均分成 5 份 , 每份 1 . 5 9 , 分别加人含 2 m g 标
准品溶液 , 按样 品项下处理并测定含量 , 计算
回 收率 , 分 别 为 9 9 . 4 2 % 、 9 7 . 6 2 、 9 9 . 3 8 % 、
9 8
.
9 6 %
、
9 8
.
8 %
。
2
.
7 中成药样品的处理及含量测定 : 取样品
一包 , 研细 , 精 密称取 3. 5 9 (含糖 制剂 6 . 0
g )
, 用 30 m L 甲醇冷 浸过 夜 , 超 声振 荡 40
m in
, 用 0. 4 5 拌m 的微孔滤膜过滤 , 滤液浓缩
至 25 m L , 即成供试液 , 备用 。取 10 拜L 进样 ,
测定连翘醋昔 A 的含量 , 结果见表 2 , 样品色
谱图见图 1 。
《中草药 》1 9 9 9 年 第 30 卷第 4 期
9 7 0 9 0 1 0
.
4 4 1 7
.
9 3 8
3 讨论
3
.
1 感 冒退热 冲剂组方 中的大青叶和板蓝
根分别为十字花科植物落蓝的叶和根 , 其主
要化学成分为靛蓝和靛玉红 ; 连翘为木犀科
植物连翘的干燥果实 , 主要成分有苯 乙醇昔
类 、木脂素及其 昔类 、 五环三枯类和 黄酮 类
等 ;拳参为寥科植物拳参的干燥根茎 , 主含鞭
质 。 药典规定以 检测靛玉红为其质量控制指
标 , 但在生产工艺的浓缩过程 中其损 失率可
高达 9 6 . 7 % 川 , 故不宜作为质控指标 。 根据
近年来对连翘属植物的研究 , 发现其 中的苯
乙 醇昔类成分连翘 醋昔 A 具 有很强 的抗 菌
和抗病毒作用及广泛的生物学活性 , 极性较
大且为连翘属植物的特征成分 , 故在进行连
翘药材及 其制剂感 冒退 热冲剂的质量 控制
时 , 以连翘醋昔 A 作为主要指标是适 宜的 ,
也是可行的 。
3
.
2 连翘醋昔 A 遇酸 、碱 或高温等不稳定 ,
易引起分解 ; 因此在提取过程中应尽量避免
酸 、碱或高温 。 实验表明 , 索 氏提取法与冷浸
超声法 的提取效率相 近 , 考虑到后者不但节
约 时间而且节省溶剂 , 故选用冷浸超声法提
取 。
3
.
3 由于制剂中有些成分化学性质相近 , 用
恒 比流动相无法分开 , 经摸索选用了梯度洗
脱的方法 。 在本实验中 , 流动相的 pH 对连翘
醋昔 A 分 离效果影 响很大 , pH 一 3 . 0 ~ 3. 5
.
2 6 9
.
时可使连翘醋昔 A 得 到 良好峰形 , 如 pH <
2
.
5
, 尽管峰形变化不大 , 但柱效损失极快 , 故
PH 宜控制在 3 . 0 一 3 . 5 之间 。
3
.
4 实验表 明 , 含糖制剂 的连翘 醋昔 A 含
量较无糖制剂 的要高 , 可能 与制备工艺不 同
有关 ; 不同批号的样品之间含连翘醋昔 A 的
量差 别较大 , 究竟是 原料来 源不 同还是生产
操作 中不够稳定所致 , 这些均有待进一步研
究 。
参 考 文 献
1 匡海学 , 等 . 中药通报 , 1 9 8 8 , 13 (7 ) : 3 2
2 于起福 , 等 . 吉林 中医药 , 19 9 5 , (l ) : 3 5
3 崔燕岩 , 等 . 药学学报 . 1 9 9 2 , 2 7 (8 ) : 6 0 3
4 李 影 , 等 . 中成药 , 19 9 0 , 12 (9 、: 8 10
(1 9 9 8
一
0 7
一
0 1 收稿 )
不 同产地益母草总生物碱含量的比较
上海 中医药大学 (2 0 0 0 3 2 )
上海 农学院
可 燕 欢
车生泉
摘 要 采用药典方法并加 以改进 , 测定 了全 国 19 个省市药材 益母草 的总生物碱 含量 , 结 果表明
各地 区 益母草 中总生物 碱含量 有很大 差别 , 其中以 北京 、新疆 、 辽宁产 益母草 品质最优 , 可 见产地
对药材质量影响很大 。
关键词 益母草 生物碱 药材质 量
益母 草 L eo n u ru : a rt em is l’a 为唇形科 益
母草属植物 , 为我国传统的妇科 良药 , 全草入
药 。益母草的药用有效成分是生物碱 , 现已知
有水苏碱 、益母草碱等多种生物碱 。
益母草属植物全球分布 , 约 20 种 , 我 国
12 种 和两个变种 , 广泛分布于全 国各 地 , 其
中益母 草为中药用药 的主要植物 , 同时涉及
药用的还有细叶益母草 、 白花益母草 (变种 ) 。
据 了解 , 因益母 草 为全 国广 布种 , 各 地均 就
近收购本地产益母草人药 , 而对于药 材是 否
因产地不同而具品质差异尚未有报道 。 测定
了全国 19 个省市药材益母草 的总生物碱含
量 , 讨论了产地对药材质量的影响 。笔者同时
探讨 了总碱含量的检测方法 。
1 试验部分
1
.
1 仪器 , 试剂与生 药来源 : 53 W b 微机数
显紫外分光光度计 (上海 ) , 盐酸水苏碱标准
品 (由中国药 品生物制 品检定所提供 ) , 试剂
均为分析纯 。
生药样品来源 : 商品益母草购 自各省 , 确
保为原产地生药 , 品种 由上海 中医 药大 学周
秀佳教授鉴定 。
1
. 佗 总生物碱的提取分离和含量测定
1
.
2
.
1 样 品提取实验 : 文献报道测定益母草
总生物碱方法有比色法仁’」、滴定法图 、离子交
换法 仁3 一 6〕、薄层层析法 [7j , 其 中药典所采用的
比色法 即简便又 具精确性 , 是药材鉴定的首
选方法 。在比色法中 , 最易干扰测定结果的是
植物叶绿素 , 所以脱色在比色法中很重要 。药
典中采用活性炭脱色 , 经反复试验发现活性
炭脱 色引起 总碱含量测定值偏低 , 改用乙酸
乙 醋回 流脱色效果很好 , 但 回流时间需 10 h
才能脱色完全 , 最后确定乙酸乙醋超声法 : 用
适量 乙 酸 乙 酷 浸 泡样 品 。 超声 ( 3 0 0 W 35
k H z ) 5 m in
, 滤掉乙酸 乙醋 , 再加适量 乙酸乙
醋重复超声一次 , 最后过滤并挥干溶剂 。 3 种
A d d r e s s
:
K e Y a n
,
S ha n g ha i U n iv e r s it y o f T r a d it io n a l Chin e s e M e d ic in
e a n d M a te r
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M
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d 犯a , sh a n g h a i
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燕 女 , 1 9 9 1 年毕业于 内蒙古师 范大学 生物系 , 1 9 9 4 年在东北师 范大 学生命科学 院获得理学硕士学位 。 现在上海中医药大学攻读博士学位 。研究方 向为生药资源 与质量 。 曾在《中国中药杂志 》、《中药材 》、《广西 植物》等杂志发表论文数篇 。
.
2 7 0
.