全 文 ：·
9 4 6
.中草药 C hi e ns e T ra di tio na la n d He r ba l Du rg S2 0 0 0年第 1 3卷第 1 2期
的比 “ 〕 ,但用 同一种引物对二者扩增 出的位 点有差
异 ,并且遗传距离不为零 , 说明二者长期受不同地区
的气候 、 土壤等多种生态环境的影响 , 已经产生 了遗
传变异 ,在栽培或组织培养选苗种时 , 可优先选广西
金线莲 , 以提高产量 。 台湾金线莲与福建金线莲 的遗
传距离为 0 . 45 , 而与广西金线莲则为 0 . 95 , 表明遗
传关系的远近与地理距离的远近有密切关系 。 引物
O P H 1 5
、
O P H 1 7
、
O P H 1 9 可作为这 3 个品种 的高特
异性引物 ,用这几种鉴别 引物对样 品的 D N A 进行
P C R 反应 , 经琼脂糖凝胶 电泳 , 与标准指纹 图谱对
照 ,就可准确鉴别样品的品种及真伪 。
参 考 文 献
1 陈 裕 ,林 坤瑞 , 管其宽 , 等 . 亚热带植物通讯 , 19 94 , 2 3 ( 1 ) : 46
2 江海燕 , 王 建 . 中医药研究 , 1 9 9 7 , 1 3 ( 2 ) : 5 1
3 赖应辉 ,昊锦忠 . 中药材 , 1 99 7 , 2 0 ( 2 ) : 84
4 郑 纯 , 黄以 忠 ,潘 馨 , 等 . 中药材 1 9 9 7 , 2 0 ( 1 1 ) : 5 5 2
5 王振登 . 福建中医学 院学报 , 1 9 9 3 , 3 ( 2 ) : 1 0 0
6 C h e n g K T
,
F u L C
.
P l a n t a M e d
, 1 9 98 , 64 : 4 6
7 Z h a n g Y B
,
N g a n F G
.
P l a n t a M e d
.
1 9 9 9 , 6 5
:
1 5 7
8 曹 辉 ,刘玉 萍 . 中国药学杂志 , 1 9 9 8 , 3 3 ( 5 ) : 2 6 9
( 2 0 0 0
一
0 3
一
1 2 收稿 )
广金钱草栽培品与野生品的质量比较
湛江市药品检验所 ( 5 2 4 0 3 7)
湛江吉民药业股份有限公司
王其新 ’
林振 洪 林海青
摘 要 比较广金线草栽培品与野生品的质量 。 用 薄层色谱法和紫外分光光度法对其主要质量指标进行定性与定
量的研究 ,结果两者无明显差异 。
关键词 广金钱草 栽培品 野生 品 质量 比较
C o m P a r i s o n o f Q u a l i t y B e t w e e n C u l t i v a t e d a n d W i l d S P e c i e s o f
D ` s m o d i u m s yt r a c ifo l i u m
Z h
a n
ji
a n g I n s t i t u t e f
o r D r u g C
o n t r o l ( Z h a n ji
a n g 5 2 4 0 3 7 ) W
a n g Q ix in
Z h
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ii
a n g J im i n P h a r m a e e u t i e a l l
, t d
.
L in Z h
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o n g a n d L i n H
a iq in g
A b s t r a e t T o e o m p a r e t h e q u a l i t y o f e u l t iv a t e d s p e e i e s w i t h w i ld s p e e ie s o f eD
sm o d i u m s yt ar c ifo
l i
-
u m ( O s b e e k ) M e r r
.
T L C a n d U V w e r e u s e d t o s t u d y t h e i r q u a l i t ie s
.
R e s u l t s s h o w e d t h a t t h e r e w a s n o o b
-
v i o u s d i f f e r e n e e b e t w e e n t h e m
.
K e y w o r d s eD
s m o d i u m s yt
r a c i f b l i u m ( O s b e e k ) M e r r
.
e u l t i v a t e d s p e e i e s w i l d s p e e i e s q u a l i t y
c o m P a r 1 S O fl
广金钱草 eD s m o d i u m : yt r a c ifo l i u m ( O s b e e k
.
)
M e r r
. 是传统的常用 中药之一 ,具有清热除湿 ,利尿
通淋的功效 。过去使用的广金钱草都是野生品 ,随着
用药量的不断增大 ,药源 日趋贫缺 , 自 70 年代起 已
广泛开始人工栽培 ,现以雷州半岛的产量最大 ,成为
商品药材的主要来源 。 至于栽培品与野生 品的质量
有无差异 , 目前 尚无报道 。 为此 ,我们通过薄层色谱
法和紫外分光光度法对其主要质量指标进行定性与
定量的研究 ,为临床使用和质量标准 的制订提供 了
依据 。
1 实验材料
1
.
1 样品来源 : 广金钱草栽培品和野生品药材分别
由徐闻 、 海康 、 遂溪 、 廉江等市县药检所提供 ,有的样
品采 自湛江市郊 , 经作者鉴定为豆科植物广金钱草
eD
sm od i
u m s yt ar c l’fo l i u m ( O s b e e k . ) M e r r . 的干燥
全草 。
1
.
2 仪 器 、 试 剂 : 紫外分光光度计为 日本 岛津 产
U V 2 65 型 ;硅胶 G 是青岛海洋化工厂生产 ; 芦丁对
照品购于中国药品生物制 品检定所 ;其他所用试剂
均为分析纯 。
2 方法与结果
2
.
1 薄层色谱 :称取样品粗粉 2 9 ,加 50 % 乙醇 50
m L
, 加热 回流 3 0 m i n , 放冷 , 滤过 , 滤液蒸 至约 2 0
m L
, 放冷 , 用水饱和正 丁醇 振摇 提取 2 次 (2 。 , 20
A d d r e s
s :
W a n g Q i x i n
,
Z h
a n ii a n王其新 男 , 19 7 3 年毕业于 中山大
9 In s t i t u t e f o r D r u g C o n t r o l
,
Z h a n j i a n g
学药用植物学专业 。 现任湛江市药 品检验所中药室主任 ,主任 中药 师 。 擅长生药学 、 中药鉴定学和植物
化学
采用
。 连续参加三版 中国药典部分药 品标准 的起草和修订工作 ,对草 豆范 的薄层 色谱鉴别进行了 系统 的研究 。 所建立 的薄层色谱法被 中国药典。 编著著作 1 本 , 获广东药学院科技进步二等奖 1 项 , 发表科学论文 28 篇 ,取得 “ 壮骨 口服液 ” 发明专利 1 项 。
中草药 h C in e s eT r ad it in o al an dH r eb al Dr u g s2 0 0 0年第 32 卷第 12 期 . 94 7·
m I
J
)
,合并正丁醇液 ,加 1% 氢氧化钠溶液振摇提取
2 次 (2 。 , 10 m L ) , 合 并碱液 , 用 10 % 盐 酸溶 液调
p H 值至呈酸性 ,再用水 饱和的正丁醇振摇 提取 2
次 ( 20 , 20 m I J ) ,合并正丁醇液 ,蒸干 , 残渣加 甲醇 2
m L 使溶解 , 作为供试 品溶液 。 照
薄层色谱法 (中华人 民共和国药
典 1 9 9 5 年版一 部附录 35 页 )试
验 ,吸取供试品溶液各 3一 5 拜L,
分别点于同一硅胶 G 薄层板上 ,
以 醋酸 乙 醋 一甲醇 一 1% N a O H (9
: 1 : 0
.
5 ) 为展开剂 , 展开 约 1 0
c m
, 取出 ,晾干 , 喷以 1 % 三氯化
铝 乙醇溶液 , 于 10 5 ℃ 中烘约 5
m i n
, 置紫外荧 光灯 ( 2 5 4 n m )下
观察 。 结果栽培品与野生 品的色
谱相同 ,见 图 1 。
` 山 二
0 . 0 .二 口 .0 0 口 O
0 0 0 0
1 , 2一栽培 品
3 , 4一野生 品
图 1 广 金 钱 草
T L C 图谱
l
...L叨02jO侧奋毅
2
.
2 紫外 吸收光谱 : 称取样
品 粗 粉 0 . 20 9 , 加 甲 醇 50
m L
, 加热 回流 3 0 m i n , 放冷 ,
滤 过 , 滤 液 加 甲醇 制成 每 1
毫升含原生药 0 . 16 m g 的溶
液 , 作为供试品溶液 。 照紫外
分光光度法 (中华人 民共和国
药 典 1 9 9 5 年 版一 部 附录 31
页 )试验 , 取供试液 , 以 甲醇作
空 白 , 在 2 0 0 ~ 4 0 0 n m 波 长
间扫描图谱 。 结果栽培品与野
生 品在 ( 2 7 2 士 1 ) , ( 3 3 1 士 l )
波 长入 伍m )
l
一栽培 品 2一野生品
, . , , 一 . _ ~ , , _ , ` _ 图 2处均有 相 l可 的吸收峰 , 见 广金钱草萦外吸收光谱门乙l
1
.
g`dn口以侣9自
2
.
3
.
1
总黄酮的含量测定
对照溶液的制备 : 精密称取在 12 o C 减压
干燥至恒重的芦丁对照品 20 0 m g , 置 1 0 m L 量瓶
中 , 加甲醇 70 m L ,置水浴上微热使溶解 , 放冷 ,加 甲
醇稀释至刻度 ,摇匀 。 精密吸取 10 m L , 置 10 o m L
量瓶中 , 加水稀释至刻度 , 摇匀 , 即得 (每 1 毫升中
含无水芦丁 .0 2 m g ) 。
2
.
3
.
2 标 准 曲线 的 制备 : 精 密 量取 对 照 品 溶 液
0
.
0
,
1
.
0
,
2
.
0
,
3
.
0
,
4
.
0
,
5
.
0 与 6 . 0 m L , 分别 置 2 5
m L 量瓶 中 ,各加水 至 6 m L ,加 5% 亚硝酸钠溶液
1 m L
,摇匀 ,放置 6 m i n , 加 1 0% 硝酸铝溶液 1 m I J ,
摇匀 , 放置 6 m in , 加氢氧化钠试液 10 m L ,再加水
至刻度 , 摇匀 , 放置 sI m in , 照紫外分光光度法 ,在
5 0 0 n m 波长处测定吸光度 , 以吸光度为纵坐标 ,浓
度 为横 坐标 , 绘制 标准 曲线 。 结果 芦 丁的浓度 在
0
.
2一 1 , 2 m g /m L 间 呈 良 好 的 线 性 关 系 , Y -
2
.
3 4 2 SX + 0
.
0 0 2 9
, r 一 0 . 9 9 9 7 。
.2 .3 3 样品测定 : 取样品粗粉约 2 9 , 精密称定 (同
时 测定 水分 含 量 ) , 置 索 氏提取 器 中 , 加 乙 醚 10 0
m L
,加热回流至提取液无色 ,弃去乙醚液 。 再加甲醇
90 m I
J ,加热回流至提取液无色 ,放冷 , 移置 1 0 m L
量瓶 中 , 用 甲醇少许洗涤容器 ,洗液并人量瓶中 , 加
甲醇稀释至刻度 , 摇匀 。 精密量取 10 m I J ,置 25 m L
量瓶 中 , 照标准 曲线制备项下的方法 , 自“ 加 5% 亚
硝酸钠溶液 ” 起依法测定吸光度 ,从标准曲线上读取
供试品溶液 中芦丁的重量 ( m g ) , 按干燥品计算 , 即
得本品含总黄酮的百分含量 , 结果栽培品与野生 品
无显著性差异 ( P > 0 . 0 5 ) ,见表 1 。
2
.
4 浸出物测定 : 称取样品粗粉 .2 50 9 , 照 中华人
民共和国药典 1 9 9 5 年版一部附录 61 页热浸法 ,分
别测定水溶性 浸出物和醇溶性浸 出物 , 结果栽培品
与野生品无显著性差异 ( P > 0 . 05 ) ,见表 1 。
表 1 广金钱草总黄酮及浸出物测定结 果
样 品来源 总 黄酮 (% ) 水浸 出物 (% ) 乙 醇浸出物 (% )
徐 闻栽培品 9 . 5 1 2 7 1 1 · 59
海康栽培品 12 . 2 2 3 0 1 1 · 66
遂 溪栽培 品 9 , 7 8 2 5 8 1 · 5 8
廉江栽培品 , 1 0 . 3 2 2 . 4 3 1 · 6 0
湛江野生品 * 8 . 10 2 . 5 2 1 · 5 9
徐 闻野生 品 1 1 . 2 5 2 . 7 4 1 . 6 2
海康野生 品 9 . 8 3 2 4 6 1 5 5
廉 江野生品 10 . 5 1 2 . 6 0 1 · 5 7
` 样 品为花期前采收
3 小结与讨论
3
.
1 实验结果表明 ,广金钱草栽培品与野生品的薄
层色谱和紫外吸收光谱完全相 同 ,水浸出物 、 乙醇浸
出物及总黄酮的含量无显著性差异 ,说 明两者的质
量相近 。
.3 2 关于广金钱草的薄层色谱鉴别 ,按文献操作 l[, 2〕 ,
斑点难以分开 。 本文所建立的色谱条件 ,展开剂采用弱
碱性 ,分离效果较理想 ,可作为本品的鉴别方法 。
3
.
3 据文献记载 , 广金钱草的主要有效成分是黄酮类
化合物s[, ` 〕 。 根据我们测定 , 花期前采收的样品总黄酮
含量明显偏低 ,提示本品应在花期荃果期间采收为宜 。
参 考 文 献
1 刘训红 ,王 玉玺 , 房克慧 , 等 . 中药材薄层色谱鉴 别 . 天津 ; 天津
科学技术出版社 , 1 9 9。 : 49 7
2 杨 颖 , 苏 健 ,王宝某 ,等 . 中药新 药与临床 , 19 94 , 5 ( 1 ) : 45
3 许实波 , 钟如芸 , 冼顺英 . 中草药 , 1 9 5 0 , 1 1 ( 6 ) : 2 6 5
4 苏 亚伦 , 王玉兰 , 杨峻 tlJ . 中草药 , 1 9 9 3 , 2 4 ( 7 ) : 3 盛3
( 1 9 9 9
一
1 1
一
0 8 收稿 )