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葡萄籽提取物的质量评价
邵云东 ,胡光祥 ,於洪建 ,方立军
⒇
(天津市尖峰天然产物研究开发公司 ,天津　 300192)
摘　要: 概述了葡萄籽提取物常规品质的各项指标 ,着重阐述了国内外对葡萄籽提取物中各成分指标的概念及其
相应的含量测定方法。
关键词: 葡萄籽提取物 ;原花青素 ;低聚原花青素 ;质量评价 ;检测方法
中图分类号: R282. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 1044 03
Quality evaluation of grape seed extract
S HAO Yun-dong , HU Guang-x iang , YU Hong-jian, FANG Li-jun
　　 ( Tianjin JIAN FEN G Na tural Produc t R& D CO . , Ltd. , Tianjin 300192, China )
Key words: g rape seed ex tract; proanthocyanidins; OPCs ( oligomeric proanthocyanidins) ; quality e-
valuating; assaying method
·1044· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
收稿日期: 2001-06-04作者简介:邵云东 ,男 ,工程师。 毕业于江西南昌大学 ,研究方向:药用植物化学。 毕业后一直从事植物黄酮及多酚的研究。
Tel: ( 022) 26723305　 E-mai l: t jjf@ public. t juc. com. cn
　　葡萄籽提取物是一多酚 ( po lyph eno l)类黄酮 ,由单体 (儿
茶素、表儿茶素等 )、基于此单体的聚合物 (原花青素 proan-
thocyanidin)和其它酚类组成 ,而这一组成分中生物活性最
强的部分是低聚 (二 ,三 ,四聚体 ) ,原花青素 ,即 OPCs
( o ligomeric pro anthocyanidins ) ,所以 OPCs在葡萄籽提取
物中含量高低就成为产品质量的最关键指标。国际市场产品
中成分比例最佳的 Gold OPCs,其成分组成比约为多酚∶原
花青素∶ OPCs∶单体= 1∶ 0. 82∶ 0. 81∶ 0. 18,很好的产品
比例为 0. 98∶ 0. 70∶ 0. 66∶ 0. 28。现在国内生产厂家都说自
己的产品原花青素含量≥ 95% ,这是一个误区 ;就我公司技
术中心对国内各生产厂家样品检测结果表明 ,国内最好的产
品为 0. 98∶ 0. 84∶ 0. 46∶ 0. 12,而有厂家自称 OPCs≥ 95%
更是十分错误的概念。鉴于目前国内市场对葡萄籽提取物认
识的混乱 ,和各生产厂家产品质量千差万别 ,没有一个统一
的标准 ,笔者多年来一直从事葡萄籽提取物的研究工作 ,现
就此对葡萄籽提取物质量评价方法做一综述。
1　常规品质评价
1. 1　外观:葡萄籽提取物外观应为深玫瑰红至浅棕红色精
制粉末 ,因为低聚原花青素是无色至浅棕色的 ,一般来说 ,颜
色越浅 , OPCs含量越高 ,反之 ,质量越差。
1. 2　溶解性: 低聚原花青素在水、甲醇、乙醇、异丙醇中是完
全溶解的 ,所以高品质的葡萄籽提取物在以上溶剂的 1%溶
液中不溶物之和应该≤ 5% ,这些不溶物都是人体不可利用
的高聚物或杂质 ,含量越低越好。 我公司技术中心对国内及
部分国外葡萄籽提取物产品进行了溶解性的测定 ,优选出了
一些质量比较好的产品 ,其 1%溶液中的不溶物结果见表 1。
表 1　 1%溶液中的不溶物含量 (% )　　
溶剂 国内厂家 1 国内厂家 2 国内厂家 3 尖峰多酚 尖峰原花青素 尖峰 O PC85 德国厂家 美国厂家 法国 O PC85
水 5. 3 1. 2 0. 8 1. 2 0. 4 0　 1. 2 0. 2 0
乙醇 2. 1 5. 5 1. 2 2. 1 0. 5 0　 2. 0 0. 3 0
甲醇 1. 6 2. 1 0. 8 1. 8 0. 3 0　 1. 3 0　 0
异丙醇 9. 1 8. 6 2. 1 5. 6 1. 1 0. 2 6. 2 1. 0 0
　　从表 1中可见 ,国内厂家同一规格产品溶解性各有差
异 ,主要问题为大多数醇溶性较差、少部分为水溶性差 ,在我
公司检测过的有些标榜 OPC95的产品中有些醇不溶物竟达
到 12%。从表 1可见国外产品溶解性要比国内产品好得多。
1. 3　灰分、重金属、砷盐、铁盐: 根据各国对食品及药品管理
的有关法律条款 ,葡萄籽提取物作为一种保健食品原料出
口 ,成品中各项指标质量分数控制如下:重金属≤ 10× 10- 6、
砷盐≤ 2× 10- 6、铁盐≤ 10× 10- 6。
1. 4　农药残留:葡萄籽提取物成品中除了不能有国际上严
禁使用的有机氯农药残留外 ,其它各类有机农残之和应≤
100× 10- 9。
2　质量指标的评价及测定方法
2. 1　多酚含量的测定: 葡萄籽提取物中多酚含量是衡量其
品质的重要指标 ,高品质的葡萄籽提取物要求其多酚含量≥
95% ,这一指标的测定方法主要有 3种:
2. 1. 1　对照品 UV法: 用已知含量的葡萄籽提取物为对照
品 ,进行紫外测定 ,这一方法简便易行 ,但由于葡萄籽提取物
为一类物质 ,故此方法只能作为同一工艺生产的产品的含量
测定 ,从而限制了其通用性。
2. 1. 2　香草醛法:利用香草醛 (v anillin)和多酚类物质的一
对一的特异结合 ,以儿茶素为标准品 ,在 500 nm处测定其吸
光度 ,从而计算出其 T F( to tal flav onal)值 ,即总黄酮含量 (一
个原花青素分子只含有一个 flav ona l-3-o ls基团 ,故而认为
总黄酮含量即为总多酚含量 ) ,这一方法比较科学 ,但操作复
杂 ,对实验条件要求严格。 日本产商多用此方法。
2. 1. 3　 UV经验值法: 这一方法是欧美国家使用较早的方
法 ,是经过长期实验得到的经验值法 ,操作简便 ,且不用对照
品 ,根据特定浓度下的多酚溶液的浓度和吸光度的线性关
系 ,通过一经验公式计算出含量 ,方法简便易行 ,且不用对照
品 ,但缺点是线性范围有限 ,只适合 O PCs含量在 40% ～
50%之间的葡萄籽提取物。我们用这一方法对国内的一些产
品进行检测发现 ,多酚含量能达到 95%的一些产品 , HPLC
检测其 OPCs含量只有 18% ～ 22%。
2. 1. 4　 GAE法: GAE法为 Ga lic Acid Equiv alence的简写、
又称 Fo lin-Ciocalteu法 ,是目前通用的最新检测方法。 此方
法结果最为准确可靠 ,但遗憾的是不能确定产品的组分 ,一
个高含量单体的产品或一个低含量单体但高含量 OPCs的
产品有可能产生相同的结果。
2. 2　原花青素含量测定: 原花青素含量是反映葡萄籽提取
物质量的关键指标 ,主要有两个指标 ,分别为原花青素值和
原花青素含量 ,测定方法如下:
2. 2. 1　 UV法: 此为测定原花青素含量的方法 ,以儿茶素为标
准品参照方法 2. 1. 2测出葡萄籽提取物中单体的含量 ,将方法
2. 1. 2的测量的多酚值减去单体的含量 ,即为原花青素含量。
2. 2. 2　 Ba tes-smith assay: 此为最早评价葡萄籽提取物中原
花青素含量 ( pro cyanidolic index )的方法 ,用已知阈值的原花
青素在相同的反应条件下为对照 ,在 500 nm处测定其吸光
度 ,精确控制实验条件可以较为准确地测出葡萄籽提取物中
原花青素的阈值 ,由于其对实验条件的苛刻性 ,实验的重复
性太差 ,即使是同一个实验室对同一个产品进行测定也不能
得到相同的结果。
2. 2. 3　波特法: 由于 Ba tes-smith的低重复性 ,最终被波特
法所取代 ,此方法为改良型的比色法 ,使用定性分析 ,测试出
原花青素的大概量 ,但测不出是何种类的原花青素 ,波特值
( PV U )过高和过低都不好 ,过低则表示单体过多 ,原花青素
含量低 ;过高可能是高聚物含量过高 ,低聚原花青素含量低。
其值应该在 300～ 450之间较为理想。
2. 3　 OPCs含量测定: 利用反相 HPLC法准确地测出原花
青素中单体和二、三、四聚体的含量 ,这一方法国外研究已较
为成熟 [1] ,不过还需要一高品质的真正 OPCs85作为对照 ,
·1045·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
参照相关研究资料 [2～ 4] ,计算出有效峰面积 ,从而计算出该
产品中 O PCs含量。 这一方法不但解决了葡萄籽提取物中
OPCs含量的测定 ,而且利用其液相指纹图谱可以准确地鉴
定出该产品是葡萄籽提取物的多酚或是其它多酚 ,如松树皮
提取物、绿茶提取物等 ,解决了以上方法都不能解决的缺点。
通过我公司技术中心对国内各厂家产品的检测 ,发现液相图
谱各不相同 (图 1)。
从图 1中可见国内厂家的葡萄籽提取物产品中的功效
成分 O PCs的含量良莠不齐 ,但即便如此所有的生产厂家都
说其产品含原花青素≥ 95% ,更有甚者说其产品含 OPCs≥
95% ,鉴于国内市场上对该产品质量还没有一种有效的质量
控制方法 ,故而可以参考借鉴现在国外对葡萄籽提取物质量
指标的控制方法 ,那就是:一个好的葡萄籽提取物产品 ,除了
常规品质要达到相应的标准要求外 ,最重要的产品含量、组
成、标示成分的量化用如下方式控制: GAE法控制样品的总
多酚含量 , HPLC分析出产品的单体和 OPCs(低聚原花青
素 )含量 ,最后通过波特法分析产品的原花青素含量 ,从而能
够准确量化地检测出一个葡萄籽提取物产品的内在质量。
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1～ 3-国内厂家 1～ 3; 4-天津尖峰公司常规产品 ; 5-天津尖峰公司 OPCs85; 6-国外厂家 OPCs85
图 1　各厂家产品液相谱图比较
《中国药理学报》征订启事
《中国药理学报》 ACT A P HARM ACOLOGICA S INICA是中国药理学会主办 ,中国 科学院上海药物研究所承办 ,科学出版社出版的全英
文 (附中文摘要 )学术性期刊。 1980年创刊。本刊报道药理学及其邻近生活科学领域创新的研究成果 ,刊载原著论文和具有国际领先水平的、基
于作者自己工作为主的综述 ,刊载国际学术会议的论文摘要集和有关会讯 ,对于基础性科研成果和临床应用的研究成果均予报道。是 SC I核心
期刊并且进入 BA, CA, Current Conten ts , Excerp ta Medica, Index Medicus , MEDLINE, Research Alert等十余种著名国际检索系统。2000年度美国《期刊引用报告》 ( JCR)报告《中国药理学报》影响因子为 0. 485。本刊为铜版印刷 , A4开本 ,月刊 ,每期 96页 ,每年 12期 ,国内外发行。国内定价 25. 00元 /本 ,全年 300元。国内邮发代号: 4-295,国内统一刊号: CN31-1347 / R,国际标准刊号: ISSN 0253-9756。国外订购请联系: China
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