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Protective effect of Yunnan folk medicine Rhodobryum roseum on experimental myocardial ischemia of rat

民族药滇产回心草对大鼠实验性心肌缺血的保护作用



全 文 :3 讨论
肠球菌 ( Enterococcus)是医院感染的重要机会
致病菌 ,尤其在重症监护病房 ( inten si rcare Uni t,简
称 ICU )中是最主要的致病菌 ,据报道肠球菌感染
已占医院感染的 5. 63% , 1989- 1993年美国耐万
古霉素肠球菌 ( Vancomycin-resistant Enterococ-
cus,简称 VRE)增长了 26倍 (从 0. 3%上升至
7. 9% ) ,国内 VRE在 1994- 1996年已达 7%~
8%
[7, 8 ]。 VRE感染的并发症多 , 死亡率高达
36. 6% 。对 VRE的治疗尤为困难 ,由于其对多种抗
菌药物具有天然耐药和诱导耐药 ,因而很多常用的
抗菌药物均不能选用 ,只有在药物敏感实验指导下
选择用药 ,目前最有效的药物还是万古霉素和替考
拉宁 ( Teicoplanin)以及链阳性菌素 RP59500,这些
药物可用于严重感染患者的治疗 [9 ]。
由于肠球菌引起的感染难于治疗 ,必须研究与
开发新的治疗药物 ,以应急需。为此我们对临床分离
的 28株肠球菌 ,用新的中药抑菌实验方法筛选抗肠
球菌的中药 ,经过 18种中药筛选 ,五倍子、儿茶等 5
种中药对肠球菌的体外抗菌效果较好 ,尤其是五倍
子和儿茶 ,其水煎剂经 1∶ 640稀释 ,仍可 100%地
抑制肠球菌生长 ,其次黄连与乌梅的抑菌效果亦很
好 ,以此为研究基础 ,可望开发出新的抗肠球菌感染
的新剂型 ,这对于发挥中医药的抗感染作用具有重
要意义。
参考文献:
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民族药滇产回心草对大鼠实验性心肌缺血的保护作用
雷秀玲 1 ,张荣平 2 ,董雪峰 3 ,潘 琦 3 ,严启新 3 ,罗天浩 3 ,何广新 4
( 1. 昆明医学院 药理教研室 ,云南 昆明  650031; 2. 昆明医学院 药学系 ,云南 昆明  650031; 3. 云南中医学院 ,
云南 昆明  650011; 4. 昆明市药检所 ,云南 昆明  650034)
摘 要: 目的 研究滇产回心草的抗急性心肌缺血作用。方法 采用结扎大鼠冠脉造成心肌缺血的模型 ,动态观测
Ⅱ导联心电图 S-T段的变化 ,以 S-T段上抬为指标反映缺血程度 ,同时检测 LDH、 CPK、 SOD和 MDA。结果 回
心草显著减轻 S-T段上抬 ,以 2 g /kg组为显著 (P < 0. 05) ;其 1及 2 g /kg均使心肌梗死范围缩小 (P < 0. 05, P <
0. 01); LDH和 CPK也有所降低 ,以 CPK降低为显著 (P < 0. 05);回心草还使 SOD显著提高 (P < 0. 05) ; MDA
明显降低 (P < 0. 01)。 结论 回心草对大鼠心肌缺血具有一定程度的保护作用 ,此效应与其抗脂质过氧化作用
有关。
关键词: 回心草 ;心肌缺血 ; LDH; CPK; SOD; MDA
中图分类号: R286. 2   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1103 04
Protective effect of Yunnan folk medicine Rhodobryum roseum on
experimental myocardial ischemia of rat
LEI Xiu-ling
1
, ZHANG Rong-ping
2
, DON G Xue-feng
3
, PAN Qi
3
,
Y AN Qi-xin3 , LUO Tian-hao3 , HE Guang-xin4
   ( 1. Depa rtment o f Pharmaco lo g y, Kunming Medical Colleg e, Kunming Yunnan 650031; 2. Faculty o f Pharmacy, Kun-
ming Medica l Colleg e, Kunming Yunnan 650031, China; 3. Yunnan Traditiona l Chinese Medica l Colleg e, Kunming Yunnan
·1103·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-05-08基金项目:云南省科委应用基础青年基金资助项目 ( 96C076Q)作者简介:雷秀玲 ( 1962-) ,女 ,云南人 ,昆明医学院药理学副教授 ,硕士 ,主要从事心血管药理、免疫药理和天然药物药理研究。
650011, China; 4. Kunming Institute fo r Drug Cont rol, Kunming Yunnan 650034, China)
Abstract: Object  To study the protectiv e ef fect of Rodobryum roseum ( Hedw ) Limpr. on acute my-
ocardial ischemia. Methods  Ra t acute myocardial i schemia models w ere prepared by liga ting thei r lef t
coronary arteries. Changes o f thei r S-T segment w as observ ed on lead Ⅱ dynamic ECG. Deg ree of is-
chemia w as a ssessed by the ex tent of S-T segment eleva tion. Lactic dehydro genase ( LDH) , creativ e phos-
phokinase ( CPK) , superoxide dismutase ( SOD) and malondialdehyde ( MDA) w ere determined at the
same time. Results R. roseum can significantly al leviate S-T segment eleva tion, being most evident at the
dose of 2 g /kg (P < 0. 05) ; at do ses o f 1 and 2 g /kg myocardic infarct size w as reduced ( P < 0. 05 and P <
0. 01) . Both LDH and CPK were reduced, being more evident for CPK. The drug also increased SOD ( P
< 0. 05) and low ered MDA ( P < 0. 01) . Conclusion  R. roseum i s effectiv e, to a cer tain deg ree, fo r the
pro tection of myocardial ischemia. Such ef fect may be rela ted to it s anti-lipid-peroxidation activ ity.
Key words: Rhodobryum roseum ( Hedw ) Limpr. ; experimental myocardial ischemia; lactic dehydro-
genase ( LDH); creatine phosphokinase ( CPK) ; superox ide dismutase ( SOD) ; malondialdehyde ( MDA)
  民族药滇产回心草又名太阳草 ,为真藓科植物
大叶藓 Rhodobryum roseum ( Hedw ) Limpr. 的干
燥或新鲜全草。据《森林药物资源学》 [ 1 ]、《云南中药
资源名录》 [ 2]等记载 ,本品性平、味淡微苦 ,入心肝肾
经 ;能清热明目 ,养心安神 ,镇咳祛痰。主治心悸、胸
闷、神经衰弱等症。 据报道单用本品治疗冠心病 33
例 ,临床有效率达 87. 88% ,对心电图改善有效率为
57. 59% [3 ]。 本研究从回心草的主要功效—— 治疗
“冠心病”出发 ,采用结扎大鼠冠状动脉造成心肌缺
血的模型 [4 ] ,观察回心草对大鼠急性心肌缺血的保
护作用 ,探讨回心草的药理作用及机制。为开发和利
用民族药——滇产回心草提供一定的药理学依据。
1 材料和方法
1. 1 药品及试剂:回心草 ,产于保山地区龙陵县 ,经
昆明市药检所鉴定为 Rhodobryum roseum ( Hedw )
Limpr.。 回心草全草水浸液 (以下称回心草 ) ,由本
院药学系张荣平教授提供。复方丹参片 (昆明友谊制
药厂 ,批号: 971016)。乳酸脱氢酶 ( LDH)、肌酸磷酸
激酶 ( CPK)试剂盒 (购自北京中生生物工程高技术
公司 ,批号: 980301) ;超氧化物歧化酶 ( SO D)、丙二
醛 ( MDA)试剂盒 (南京建成生物工程研究所 ,批号:
980401)。
1. 2 仪器: CL-770型临床分光光度计 (德国西门子
公司 )。 6511型心电图机 (日本光电公司 )。
1. 3 方法:健康 SD大鼠 ,雌雄各半 ,体重 ( 269±
47) g ,雌雄兼用 (云南省天然药物药理重点实验室
动物室提供 ,云卫动管第 A102号 )。 将大鼠随机分
为 5组 ,每组 8只 ,分别为:①回心草低剂量组 ( 1 g /
kg ) ;②回心草高剂量组 ( 2 g /kg ) ;③复方丹参组 ( 1
g /kg ) ;④生理盐水组 ;⑤假手术组 (只开胸 ,不结扎
冠状动脉 )。用 25% 乌拉坦 ( 1 g /kg ) ip麻醉大鼠 ,
分别十二指肠给药 ,于给药后 30 min按文献 [4 ]方法
分别结扎大鼠左冠状动脉造成急性心肌缺血 ,立即
关闭胸腔 ,恢复自主呼吸。分别记录结扎前及结扎后
0, 5, 10, 15, 30和 60 min肢体 Ⅱ 导联心电图 ,测量
心率、 S-T段 ( J点 )上移植。
1. 4 指标检测:结扎冠脉 60 min后 ,颈动脉取血 ,
置低温超速离心机 ,以 3 000× g的速度离心 5 min
制备血清 ,取血清 ,用化学比色法分别测定血清中
LDH、 CPK、 SOD、 MDA的含量。
1. 5 梗塞范围:迅速取出大鼠心脏 ,排出心脏内积
血 ,以印度墨汁稀释后按 1. 5 m L /kg ,从主动脉根
部注射入心腔染色后 ,用滤纸吸去水分 ,分别剪取并
称左心室、梗死区心室的湿重 ,计算梗死区占左室
比 (% )。
2 实验结果
2. 1 回心草对心肌缺血大鼠心率的影响: 见表 1。
各组大鼠麻醉后及结扎冠脉后 ,与结扎前相比 ,心率
都有不同程度的减慢 ,且有显著性。 假手术组开胸
前、后相比 ,心率也明显减慢。
2. 2 回心草对心肌缺血心电图 S-T段的影响: 见
表 2。 大鼠结扎冠脉后 ,心电图上 S-T段均明显抬
高 ,其中回心草 2 g /kg组与生理盐水组比较有显著
减少 S-T段上抬的作用 ( P < 0. 05) ,其作用强于 1
g /kg组。丹参组也有减少 S-T段上抬的作用 ,仅在
结扎后 10 min时有显著性 ( P < 0. 05)。假手术组开
胸前、后相比 , S-T段变化不大 ;与生理盐水组比较 ,
后者 S-T段显著上抬 ( P < 0. 001)比较稳定 ,提示
结扎冠脉造成大鼠心肌缺血的模型是成功的。
2. 3 回心草对大鼠心肌缺血范围的影响:见表 3。
·1104· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
表 1 回心草对心肌缺血大鼠心率的影响
组别 剂量
( g /kg)
给药前
(次 /min)
结扎前
(次 /min)
结扎后 (次 /min )
0 min 5 min 10 min 15 min 30 min 60 min
回心草 1 407± 75 389± 43 392± 26 383± 52 365± 52 357± 41* 343± 50* 342± 53*
2 433± 74 382± 53 383± 10 372± 18 366± 19 363± 25 363± 29 349± 36*
复方丹参 1 431± 51 422± 36 376± 13* * 366± 42* 374± 20* * 346± 34* * 341± 35* * 332± 42* * *
生理盐水 - 413± 46 420± 47 366± 18* * 349± 43* 350± 25* * 349± 32* * 331± 32* * 325± 32* *
假手术 - (手术前 ) (开胸前 ) (关胸后 ) (关胸后 ) (关胸后 )
403± 48 393± 27 341± 55* 341± 71* 344± 30* * *
    与结扎前比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * P < 0. 001
表 2 回心草对心肌缺血大鼠心电图 S-T段的影响
组别 剂量
( g /kg )
结扎前
( mV)
结扎后 ( mV )
0 min 5 min 10 min 15 min 30 min 60 min
回心草 1 0. 03± 0. 04 0. 31± 0. 12 0. 31± 0. 09 0. 28± 0. 08 0. 30± 0. 08 0. 28± 0. 09 0. 24± 0. 06
2 0. 01± 0. 01 0. 24± 0. 08 0. 24± 0. 09* 0. 24± 0. 09* 0. 24± 0. 09 0. 22± 0. 09 0. 20± 0. 09
复方丹参 1 0. 04± 0. 06 0. 32± 0. 13 0. 32± 0. 15 0. 26± 0. 10* 0. 26± 0. 11 0. 25± 0. 11 0. 26± 0. 10
生理盐水 - 0. 02± 0. 03 0. 31± 0. 07 0. 37± 0. 10 0. 37± 0. 09 0. 36± 0. 12 0. 33± 0. 11 0. 30± 0. 09
假手术 - (开胸前 ) (关胸后 ) (关胸后 ) (关胸后 )
0. 03± 0. 05 0. 07± 0. 04* * * 0. 06± 0. 03* * * 0. 04± 0. 04* * *
    与生理盐水组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * P < 0. 001
表 3 回心草对大鼠心肌缺血范围和酶学的影响
组别 剂量
( g /kg )
缺血区范围
(% )
LDH
( kU /L)
CPK
(kU /L)
回心草 1 21. 4± 6. 9* 1. 35± 0. 93 8. 97± 3. 92
2 21. 2± 3. 8* * 0. 90± 0. 38 6. 50± 1. 77*
复方丹参 1 22. 9± 5. 9* 0. 81± 0. 26* 8. 71± 1. 75
生理盐水 - 36. 0± 14. 3 1. 10± 0. 33 11. 97± 7. 64
假手术 - 0. 54± 0. 19* * 8. 49± 5. 99*
  与生理盐水组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
回心草高、低剂量组和丹参组大鼠的心肌缺血
范围均显著小于生理盐水组。其中回心草 2 g /kg组
的作用较 1 g /kg组显著。
2. 4 回心草对心肌缺血大鼠心肌酶学的影响: 见表
3。回心草 2 g /kg 组、丹参组与生理盐水组比较 ,
LDH均有一定程度的降低作用。 回心草高、低剂量
组及丹参组与生理盐水组比较 ,均使 CPK有不同
程度的降低 ,其中回心草 2 g /kg组的作用有显著差
异 (P < 0. 05)。
2. 5 回心草对大鼠心肌缺血后脂质过氧化的影响:
见表 4。回心草高、低剂量组均能显著提高大鼠血清
SOD活性 (P < 0. 05) ,丹参也有一定提高 SOD活
表 4 回心草对心肌缺血大鼠 SOD和 MDA的影响
组别 剂量
( g /kg )
SOD
( U /L)
MDA
( U /L)
回心草 1   156. 2± 11. 4* 435. 7± 16. 2* *
2   155. 3± 10. 5* 435. 0± 13. 5* *
复方丹参 1   151. 9± 18. 7 439. 4± 13. 5*
生理盐水 -   140. 9± 24. 8 456. 5± 10. 8
假手术 -   179. 4± 6. 8* * 427. 7± 5. 65* * *
  与生理盐水组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001
性的作用。回心草高、低剂量组及丹参组均能显著降
低血清 MDA的水平。揭示回心草和丹参均具有一
定程度的抗心肌缺血大鼠脂质过氧化的作用。
3 讨论
滇产回心草主要分布于大理、迪庆、思茅、保山
等地 ,为云南省多民族的传统常用药 ,民间广泛用于
治疗“心脏病”。 对其化学元素和氨基酸分析结果与
陕西产回心草成分相似 [5, 6 ]。
本研究结果表明 ,回心草具有抑制结扎大鼠冠
脉后心电图 S-T段的抬高 ,呈剂量依赖性 ,以高剂
量组为显著 ,并能使心肌梗死面积显著缩小 ,同时降
低大鼠血清 LDH、 CPK水平 ,也以高剂量组为显
著 ,提示回心草对实验性心肌缺血、心肌梗死均有一
定程度的保护作用。 离体豚鼠心脏实验结果显示回
心草有增加冠脉流量、减慢心率的作用。这为滇产回
心草用于治疗缺血性心脏病、冠心病提供了一定的
药理学依据。这一结果表明滇产回心草与陕西产回
心草在药效学方面有相似之处 [7~ 9 ]。我们还注意到 ,
结扎冠脉前后心率减慢 ,且假手术组开胸前、后心率
也明显减慢 ,可能是回心草的效应 ,也不能排除麻醉
及手术刺激导致神经调节反射性使心率减慢的
影响。
近年来 ,心肌缺血对自由基的产生与心肌细胞
的损伤之间的关系 ,及自由基清除剂与心肌细胞的
保护作用之间的关系的研究问题备受关注。 大量实
验资料表明氧自由基的产生与心肌缺血损伤的病理
过程有关。心肌缺血时氧自由基的生成增加 ,而氧自
·1105·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
由基清除酶 ( SOD,过氧化氢酶 ,谷胱甘肽过氧化物
酶等 )的活性降低 ,导致氧自由基堆积 ,氧自由基可
转变为羟基自由基 ,后者活性更强 ,使膜脂质过氧
化 ,引起细胞膜的结构和功能损害 ,从而加剧缺血组
织损伤 [10, 11 ]。 本实验结果表明 ,回心草能明显提高
心肌缺血大鼠血清 SOD活性 ,显著降低血清 MDA
的水平 ,提示滇产回心草具有一定程度的抗心肌缺
血时脂质过氧化作用 ,这可能是回心草抗心肌缺血、
保护心肌细胞的机制之一。
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中华眼镜蛇蛇毒及复方丹参抑制异种移植免疫排斥的实验研究
戚 峰 ,王鹏志 ,朱理玮 ,邱宇杰
(天津医科大学总医院 普通外科 ,天津  300052)
摘 要: 目的 研究中华眼睛蛇蛇毒因子 ( CCV )及复方丹参在异种移植中的作用。 方法 采用颈部套袖法建立豚
鼠对大鼠心脏异种移植模型。于术前 24 h按 0. 5 mg /kg ip CCV ,术中以复方丹参注射液灌注供心并 iv复方丹参。
研究对照组、 CCV组和 CCV+ 丹参组供心存活时间、复跳时间及血清补体水平的变化。结果  CCV可明显降低血
清补体水平 ,延长供心存活时间 ,复方丹参注射液可缩短供心复跳时间。二者合用可进一步延长供心存活时间。结
论 在异种移植中补体起着关键的作用 , CCV通过降低血清补体水平抑制超急性排斥反应 ( HAR) 的发生 ,复方
丹参可减少供心缺血损伤 ,并改善微循环 , CCV和复方丹参合用对 HAR有良好的抑制效果。
关键词: 异种移植 ;中华眼镜蛇蛇毒 ( CCV ) ;丹参 ;超急性排斥反应 ( HAR) ;补体
中图分类号: R285. 5   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1106 03
Studies on effects of Chinese Cobra Venom and COMPOSITE SALVIA MILTIORRHIZA
INJECTION on hyperacute rejection of xenotransplantation
QI Feng , WANG Peng-zhi , ZHU Li-w ei , QIU Yu-jie
   ( Depa rtment o f Surg ery , Head Hospita l Affilia ted o f Tianjin Univ ersity of Medical Sciences, Tianjin 300052, China)
Key words: x eno t ransplanta tion; Chinese Cobra Venom ( CCV ) ; Salv ia milt iorrhiza Bge. ; hyperacute
rejection ( HAR) ; complement
  随着同种异体移植技术的成熟及在临床上的广
泛开展 ,供体器官短缺的问题越来越突出 [1 ]。异种移
植从理论上可以提供无限的供体器官来源 ,如果能
够在临床上成功开展 ,则可以使众多终末期器官衰
竭的患者得到救治。但是 ,异种移植面临着比同种异
体移植更为复杂的免疫排斥反应 ,尤其异种抗体和
补体介导的超急性排斥反应 ( HAR)有可能使移植
物在几小时内即被排斥 [2 ] ,目前对其机制的研究尚
不十分深入 ,也无临床异种移植成功的报道。本研究
建立豚鼠对大鼠异种移植模型 ,联合应用补体抑制
·1106· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-05-21作者简介:戚 峰 ( 1970-) ,男 ,河北省人 ,主治医师 ,博士学位 , 1995年毕业于天津医科大学临床医学系 ,并获硕士学位 ,同年 ,分配于天津医科大学总医院普通外科。 1998年考入天津医科大学中西医结合临床 (外科 )专业 , 2001年毕业 ,获博士学位 ,毕业后继续在天津医科大学总医院普通外科工作。 主要从事普通外科临床及有关肿瘤致病机理、器官移植、中西医结合临床应用等方面研究 ,参加了有关肿瘤致癌基因、小肠移植、肝移植、异种心脏移植的基础研究 ,小肠移植、肝移植的临床应用与尝试 ,以及中西医结合治疗临床外科疾病方面的研究探索工作。