全 文 ：·综述与专论·
高效毛细管电泳法在中药化学成分分析中的应用
中国医学科学院
中国协和医科大学药物研究所(北京 100050) 文志明 张金兰 徐礼
摘 要 综述了高效毛细管电泳法用于中药生药和复方化学成分的分析应用近况, 并指出该法的优缺点及
发展方向。
关键词 高效毛细管电泳法 中药 化学成分分析
高效毛细管电泳法( HPCE)为近年来发展最快
的一种分离分析技术, 具有分离效率高、分析速度快
和样品用量少等特点, 尤其适用于药味较多、化学成
分复杂的中药复方化学成分的分析。自 1990 年
Kenndler 等 [ 1]将 HPCE 法首次用于熊果中熊果苷
等化学成分的分离与测定以来, HPCE 法在中药化
学成分分析中的应用得到了迅速开展 [ 2～8]。笔者主
要综述近几年 HPCE 法在中药化学成分分析中的
应用概况,以供参考。
1 中药生药化学成分分析
HPCE法已日益广泛地应用于中药生药化学成
分的分离和含量测定,分析成分主要包括生物碱、黄
酮、苷类、酚类、有机酸、香豆素、木脂素、醌类及其它
成分(表 1)。
表 1 HPCE法在生药化学成分分析中的应用
生 药 分 析 成 分 操作模式 分离 条件
(m mol/ L)
分离柱
( cm×m ID)
操作电压
( kV)
检测波长
( nm )
文献
白屈菜 小檗碱、白屈菜碱等 9 种生物碱 CZE 40柠檬酸-80 Na2HPO 4- 12. 5 -CD, pH 5. 5
70×50 25 205, 270 9
吴茱萸 吴朱萸碱、吴茱萸次碱等 9种生物碱 MEKC 9 Na2B4O 7-20 Na2HPO 4- SDS :乙腈( 3∶2) , pH 7. 31
70×50 25 254 10
去氢吴茱萸碱 CZE 40 Na2HPO4-乙腈( 9∶1) 70×50 25 254 10
麻 黄 麻黄碱、伪麻黄碱等 6 种生物碱 CZE ( NH4) 2SO 4-DAP, pH 10 57×50 20 11
长春花 长春碱、长春新碱 CZE 200 NH4Ac, pH 6. 2 72×75 10 254 12
新木姜 l indcarpine、新木姜子碱等 9种阿朴菲
类生物碱
MEKC 20 Na2B4O 7-30 SDS-5%乙
腈-5 SHS , pH 9. 3
66×50
59×50
30 214 13
三蕊莲桂 aromolin e、小檗胺等 8种双苄基异喹啉
类生物碱
MEKC 90 Na2B4O 7-90 Na2HPO 4- 132 SC∶乙腈( 74. 2∶
25. 8) , pH 7. 58
60×50 18 207 14
巴 豆 小檗碱、异鸟苷 CZE 100柠檬酸钠, pH 2. 7 44×75 12 254 15
罂 粟 吗啡、可待因等 9 种吗啡类生物碱 MEKC 10 Na2B4O 7-10 KH2PO 4- 50 CT AB∶DM F( 90∶
10) , pH 8. 6
70×50 - 25 254 16
吗啡、可待因、罂粟碱 CZE 磷酸盐, pH 7. 0 54. 5×50 25 212 17
刺 檗 小檗碱、巴马汀、非洲防己碱、药根碱 CZE 200 NH4Ac-M eOH( 1∶1) , pH 8. 1
55×50 16 240 18
白毛茛 小檗碱、坎那定、北美黄连碱、北美黄连
次碱
CZE 200 NH4Ac-M eOH( 1∶1) , pH 3. 1
55×50 16 240 18
淫羊藿 16 种黄酮 MEKC 20 Na2B4O 7-48 SDS-1 DAP
pH 8. 5
73×50 20 254 19
11 种黄酮 MEKC 30 Na2B4O 7-12 SDS, pH
10. 45
50×50 22 254 20
唇形科
植物
34 种黄酮 MEKC 200 Na2B4O 7-50 SDS-10% MeOH
87×75 20 280 21
100Na2B4O 7-30SDS-25% MeOH
100Na2B4O 7-50SDS-10% 乙腈
·141·中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2000年第 31卷第 2期
Address : Wen Zhiming, Inst itute of M ater ia M edica, Ch ines e Acad emy of Medical S ciences and Peking U nion Medical Col lege, Beijing.文志明 男, 1988年毕业于兰州大学化学系,获硕士学位;现为中国医学科学院、中国协和医科大学药物研究所博士生,研究方向为中草药有效化学成分的分离与测定。
续表 1
生 药 分 析 成 分 操作模式 分离 条件
(m mol/ L)
分离柱
( cm×m ID)
操作电压
( kV)
检测波长
( nm )
文献
黑茶 子 15 种黄酮及酚性羧酸 CZE 100H3BO 3-50NaH2PO 4,
pH 7
72×50 232 22
芍 药 苯甲酸、没食子酸、羟基芍药苷、丹皮酚、五
没食子葡萄糖芍药苷、羟基芍药苷、苯甲
酰芍药苷、芍药内酯苷、丹皮酚
CZE
MEKC
15Na2B4O7, pH 9. 8
15 Na2B4O 7-50 SC∶MeOH
( 9∶1) , pH 9. 8
90×75
90×75
25
25
230
230
23
23
柠 檬 柠蒙苦素、黄柏酮糖苷、诺米林糖苷 MEKC 12Na2B4O7-20Na2HPO 4-
35SDS
68×50
50×75
25 210, 214 24
甜叶菊 甜叶菊苷、steviolbioside rebaudioside A MEKC 20Na2B4O7-30SDS , pH 8. 3
56×50 20 200 25
甜 菜 甜菜苷、异甜菜苷、总甜菜苷 MEKC 10柠檬酸-10Na2HPO 4, pH 6. 0
67×75 22 477, 538 26
番 泻 番泻苷 A, A 1, B, C, D, D 1 CZE 100Na2B4O7-5%异丙醇,
pH 8. 4
60×50 25 205 27
柳 兰 15 种芳香族羧酸 CZE 20Na3PO 4, pH 7. 0 64. 5×50 25 280 28
边椽桉 21 种酚性羧酸 MEKC 6Na2B4O7-10Na2HPO 4- 100 SDS, pH 8. 5
60×75 18 214 29
大戟属植物没食子酸及 6种衍生物 MEKC 30磷酸盐-30SDS, pH 7. 0 59. 5×50 22 DAD 30
乌 梅 柠檬酸、苹果酸 CIT P 10 HCl-0. 25%HFMC--丙 胺酸( pH 3. 3) ; 10丙酸
23×500
( PT EF 管)
100～150
(电流, A)
电导法 31
杜 仲 绿原酸 CZE Na3PO 4, pH 7. 0 58×50 20 254 32
CZE 25Na2B4O7-25Na2HPO 4- 0. 2CT AB-10%MeOH,
pH 8. 6
47. 3×75 - 20 214 33
藁 本 原儿茶酸、咖啡酸等 9种有机酸 CZE 8Na2B4O7-3NaH2PO 4-9 DTAC∶乙腈( 7∶3) ,
pH 9. 02
75×75 - 25 210 34
天 麻 parishin、paris hin B, C MEKC 20Na2B4O7-20Na2HPO 4-
100 SC, pH 6. 5
67×75 15 222 35
独 活 9 种香豆素 MEKC 15Na2B4O7-15Na2HPO 4-
20 SDS∶乙腈( 24∶1) ,
pH 8. 26
67. 5×50 20 322 36
南茼蒿 7 种香豆素 CZE 200H3BO 3-50Na2B4O 7,
pH 8. 5
58×50 25 280 37
厚 朴 厚朴酚、和厚朴酚 CZE 10 Na2B4O 7-22. 5
Na2HPO 4, pH 9. 1
57×75 15 214 38
CZE 15Na2B4O7-5NaH2PO 4- 20%MeOH, pH 9. 0
60. 5×75 20 214 39
CZE 10Na2B4O7-10NaH2PO 4, pH 11. 6
60×75 20 254
185
40
41
银 杏 白果内酯、银杏内酯 A、B MEKC 25磷酸盐-90SDS 60×75 185 41
树 七叶苷、七叶内酯 CZE 10Na2B4O7-10Na2HPO 4-
30% EtOH, pH 9. 2
60×75 20 254 42
大 黄 大黄素、芦荟大黄素、大黄酸 MEKC 25CAPS-25SDS∶乙腈
( 100∶10) , pH 10. 96
50×50 12 500 43
MEKC 50H3BO 3/ NaOH-25SDC, pH 11
60×75 18 254 44
丹 参 丹参酮ⅡA、隐丹参酮、二氢丹参酮 MEKC 25Na2B4O7-10SDS-10% DMF-0. 2% T EG, pH 9. 5
60×75 10 254 45
CZE:毛细管区带电泳; M EKC:胶束电动色谱, CITP:毛细管等速电泳; SDS :十二烷基硫酸钠; SC:胆酸钠; SDC:脱氧胆酸钠; CT AB:十六
烷基三甲基溴化铵; DTAC :十二烷基三甲基氯化铵; CD:环糊精; DAP: 1, 3-氨基丙烷; SHS: 庚磺酸钠; DMF: N , N -二甲基甲酰胺; HPM C:羟
丙基甲基纤维素; CAPS: 3-环己氨基-1-丙烷磺酸; TEG:四甘醇; DAD:二级管阵列检测器
HPCE 法也可用于中药生药的鉴定。胡平等[ 46]
用 HPCE 法对中药菟丝子进行了生药鉴定, 实验表
明同属不同种菟丝子的碱溶性或酸溶性蛋白在成分
和含量上均存在显著差异,根据其种子植物蛋白的
电泳谱图, 可有效地鉴别菟丝子的来源。张朝晖
等[ 47 ]采用大孔树脂粗分后, 以 HPCE 法鉴别了 12
种海马、海龙类中药,为动物类药材鉴定方法提供了
新的选择。
2 中药复方化学成分分析
2. 1 药对分析:两味药物配伍构成药对是中药复方
最基本的使用方式,与由众多单味药组成的复方相
比,药对的化学组成相对要简单些,从药对出发研究
中药复方的化学成分,也是进行中药现代化研究的
有效途径之一。
黄芩与黄连配伍是许多清热解毒方的基本药
对。黄芩主含黄酮类, 黄连主含生物碱类。Li等[ 48]采
·142· 中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2000年第 31卷第 2期
用 MEKC 法分离子黄芩-黄连药对中的黄芩苷、黄
芩素、汉黄芩素、汉黄芩素-7-O-葡萄苷酸、木蝴蝶素
A 和木蝴蝶素 A-7-O-葡萄苷酸等 6 种黄芩黄酮类,
以及小檗碱、巴马汀、黄连碱和表小檗碱等 4种黄连
生物碱类化合物,并以 7-羟基香豆素为内标进行了
定量测定,方法同样适用于含黄芩、黄连中药复方制
剂的分析。Lee 等[ 49]分别以 CZE 和 MEKC 法测定
了黄连-吴茱萸药对中的 17 种生物碱,其中 MEKC
法用于分析吴茱萸中的 3 种吲哚喹啉类生物碱和 6
种喹诺酮类生物碱, CZE 法用于分析黄连中的 7 种
原小檗碱型生物碱和吴茱萸中的去氢吴茱萸碱。
2. 2 复方制剂分析:目前以我国台湾作者的工作开
展较多。Sheu 等[ 50]测定了大黄及含大黄中药复方
制剂八珍散、茵陈蒿汤、独活承气汤、大黄甘草汤和
补阳活血汤中的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、番泻
苷 A 和 B等 5 种蒽醌类成分。Sheu 等[ 51]还以水杨
酸为内标物,分析了由升麻、柴胡、当归、甘草、黄芩
及大黄 6味中药组成的方剂中 12种指标性成分,包
括 4种蒽醌、5 种黄酮、2种有机酸和 1种皂苷, 并与
相应 HPLC 法测定结果进行了对比, 认为 HPCE 法
更适用于中药复方中众多化学成分的分离测定与质
量控制。
小承气汤由大黄、枳实和厚朴等多味中药组成,
Shen 等 [ 52]分析了小承气汤中的大黄素、番泻苷 A
和 B、柚皮苷、厚朴酚及和厚朴酚等 6 种活性成分。
同样分析条件也可用于由大黄、黄芩、黄连组成的三
黄泻心汤中大黄素、小檗碱、巴马汀、黄芩苷、番泻苷
A 和B等 6种指标性成分的测定[ 53]。张国华等 [ 54]报
道了黄连及含黄连的 6种中成药中黄连碱、小檗碱、
表小檗碱、巴马汀、非洲防己碱、小檗定碱和药根碱
等 7 种原小檗碱型生物碱的分析方法,用均匀设计
法对分离条件进行了优化, 并对其中 3 种生物碱进
行了定量测定。桂枝汤由桂枝、芍药、甘草、干姜和大
枣组成, Huang 等[ 55]测定了桂枝汤中的桂皮醛、桂
皮酸、芍药苷、齐墩果酸、甘草酸和 6-姜醇等有效成
分。Hsieh等 [ 56]分析了柴胡及含柴胡复方制剂小柴
胡汤和柴胡散中的柴胡皂苷 a, b1, b2 , c和 d 等柴胡
皂苷类成分。
Fumihiko 等 [ 57]测定了防己及防己茯苓汤、防己
黄芪汤、木防己汤和疏经活血汤中防己碱的含量。
Wang 等[ 58]分析了葛根及葛根汤中的葛根素、大豆
苷、大豆素、染料木素和鹰嘴豆芽素 A 等成分。Ku
等[ 59 ]测定了沉香天麻汤和半夏白术天麻汤中的
parishin、parishin B和 parishin C 等水溶性、强极性
化合物。Yang 等 [ 60]建立了快速测定粉防己及 7 种
含粉防己甲素和乙素等双苄基异喹啉类生物碱的
HPCE 法。Ku 等 [ 61]分析了玄参及其复方制剂百合
固金汤中的钩果草苷、桂皮酸及 1 种吡喃型糖苷
SN-A。林梅等[ 62, 6 3]选择 CZE 分离模式,以麻黄素为
内标建立了测定阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱和樟柳
碱等莨菪类生物碱的分析方法,并对颠茄酊剂和颠
茄片中相应成分进行了定量测定。
方肇伦等[ 64, 65] 建立了流动注射 ( F I)与 HPCE
联用技术, 并应用于厚朴及其复方制剂中厚朴酚与
和厚朴酚的分离和测定。FI-HPCE 联用技术采用连
续进样方式,提高了进样频率,样品分析时间缩短,
精度提高。
3 结束语
HPCE法以其高效、快速、简便且柱不易受污染
而优于 HPLC 法,但仍存在重现性较差、线性范围
窄和灵敏度较低等不足。重现性差主要是 HPCE 技
术发展初期仪器本身缺陷及操作人员经验不足所
致。目前各商品仪器经不断改进和完善,加上自动进
样器的普遍使用, 该缺点已基本得以克服, 与常规
HPLC法基本接近。灵敏度低主要受在柱检测方式
及进样量少( 1～50 nL)的限制, 往往比 HPLC 法低
十到数十倍,但可通过在柱预浓缩如场放大堆积效
应,或经浓缩预处理如固相萃取等技术加以改善。此
外, HPCE 法与其它进样技术如流动注射联用,不但
可使测定精度提高,而且能完成连续自动进样及在
线分析, 适用于大批量样品的测定。采用 CE-NS、
CE-NMR 及 CE-M S-M S 技术, 充分利用 HPCE 的
高分离效率和 MS或 NMR的高灵敏度与定性鉴定
能力,可快速完成众多复杂成分的分离与结构鉴定,
在中药及其复方制剂化学成分的分析中尤为重要。
近几年发展起来的毛细管电色谱法( CEC )综合了
HPCE 高效和 HPLC 高选择性的优势, 通过柱内填
充固定相的选择、梯度洗脱技术以及 CEC-M S 联用
技术等, 将更适用于中药复杂化学成分的分离与测
定。
参 考 文 献
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( 1999-06-03 收稿)
胡枝子属植物化学成分及药理活性研究进展
吉林省中医中药研究院(长春 130021) 王 威 闫喜英 王永奇
沈阳药科大学 吴立军
卫生部长春生物制品研究所 王玉光
摘 要 报道了胡枝子属植物中生物碱、黄酮、萜类、甾醇和有机酸等化学成分,综述其对肾功能不全、离体子
宫的药理活性以及抗炎、抗早孕和止痛作用的研究进展,为全面评价胡枝子属植物的药用价值提供参考。
关键词 胡枝子属 化学成分 药理活性
豆科胡枝子属 L esp edez a M ichx . 植物约 60 余
种,分布于东亚至澳大利亚东北部及北美。我国产
26 种, 除新疆外,广泛分布于全国各省区[ 1]。对于胡
枝子属植物的药用价值,人们早有认识,在民间广为
应用[ 2]。笔者拟对胡枝子属植物的化学成分和药理
活性方面的研究进展作一综述, 为全面评价胡枝子
属植物的药用价值提供参考。
1 化学成分
从本属植物中已分离鉴定的化学成分包括黄
酮、生物碱、三萜、有机酸及甾醇类等。
1. 1 生物碱类:生物碱是从胡枝子属植物中最早分
离到的一类成分,但到目前为止仅从该属植物中分
离鉴定了 2个生物碱类化合物。1958年,日本学者
Goto 等人从多花胡枝子 L . f loribunda Bunge 中分
离得到尼葛林( N b , N b-dimethyl tr yptamine) , 并通
过化学方法对其进行了鉴定[ 3]。1965年, M or imoto
等人从该植物中分得一个新生物碱,利用 UV、IR、
NMR 和 化 学 方 法 鉴 定 了 其 结 构, 命 名 为
lespedamine ( N a-methoxy-N b , N b-dimethyl trypta-
m ine)
[ 4]。
1. 2 黄酮类: 已分离鉴定的黄酮类包括黄酮、异黄
酮、黄酮醇、双氢黄酮、双氢异黄酮、查尔酮和花青素
等 64 个化合物,见表 1。
1. 3 萜类:日本学者 Shuji等人从多花胡枝子叶中
·144· 中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2000年第 31卷第 2期
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