全 文 ：AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附性能研究
高红宁1 ,金万勤1 ,郭立伟1 ,庄 华2,张征林2
( 1. 南京中医药大学 植物深加工工程中心, 江苏 南京 210029; 2. 东南大学 化学化工系, 江苏 南京
210009)
摘 要: 目的 研究大孔吸附树脂 AB-8 对苦参总黄酮的吸附性能及原液浓度、pH 值、流速、洗脱剂的种类对树脂
吸附性能的影响。方法 采用紫外分光光度法测定苦参中总黄酮的含量。结果 AB-8 树脂对苦参总黄酮的适宜吸
附条件为: 原液浓度为0. 285 mg / mL , pH 值为 4,流速为3 BV / h;洗脱剂用 50%乙醇时, 解吸效果较好。结论 AB-
8 树脂可用作苦参总黄酮的精制方法。
关键词: 吸附树脂;苦参; 总黄酮;中药精制
中国分类号: R284. 2 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2001) 10 0887 03
Adsorption properties of AB-8 resin for purification of
total flavone in Sophora f lavescens
GAO Hong-ning
1, JIN Wan-qin
1, GUO Li-w ei
1 , ZHUANG Hua
2, ZHANG Zheng-lin
2
( 1. Bo tanical Medicine Refining Eng ineer ing Resear ch Center , Nanjing Univ ersity of TCM , Nanjing Jiang su 210029,
China; 2. Depar tment of Chemical Engineer ing , Southeast Univ ersity, Nanjing Jiang su, China)
Abstract: Object T o study the adsorpt ion funct ion of macropor ous resin AB-8 for the purificat ion of
total f lavones in Sophor a f lavescens Ait . and the effects of concentr at ion, pH , f low rate o f the adsorbate
and eluant . Methods UV spect ropho tometr y w as used to analy ze the content o f total f lavone in S .
f lavescens. Results T he appropriate adsor pt ion conditions w ere: concentrat ion o f Sophora ex tr act ,
0. 285 mg / mL; pH= 4; flow rate 3 BV/ h, w hen 50% alcohol was used as eluant , the ef fect of desorption
w as sat isfactory . Conclusion AB-8 r esin can be used to ref ine the total f lavone in S. f lavescens.
Key words : macroporous resin; S op hora f lavescens Ait . ; to tal flav one; purif icat ion of T CM
苦参为豆科植物苦参 Sop hora f lavescens Ait .
的干燥根,是常用的清热燥湿药,主要成分为生物碱
和黄酮类化合物[ 2]。以往中药中有效成分的精制多
为水醇法 [ 3] , 但成分损失严重、乙醇损耗量大、周期
长。大孔吸附树脂近年在天然产物提取分离中广为
运用 [ 4, 5]。本文对于 AB-8树脂精制分离苦参总黄酮
的工艺作了进一步的研究[ 6] ,确定了适宜的吸附、解
吸的工艺条件。
1 仪器与试剂
苦参药材(南京市药材公司) ,经鉴定符合《中国
药典》2000年版规定。
JW-Ⅰ型陶瓷微滤膜装置(南京化工大学膜科
学技术研究所, 膜材料 Al 2O 3孔径0. 2 m, 膜面积
为0. 4 m2 ) ; U V-754型紫外可见分光光度计(上海
分析仪器总厂)。
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所) ; AB-8
大孔吸附树脂(南开大学化工厂)。
2 实验方法
2. 1 树脂的预处理: AB-8树脂用乙醇浸泡24 h, 充
分溶胀, 用适当浓度的乙醇洗至洗出液加适量蒸馏
水无白色浑浊现象, 再用蒸馏水洗至无醇备用。
2. 2 供试样品液的制备: 取苦参药材适量,第一次
加入 12倍水,第二次加入 8 倍水, 每次煎煮1. 5 h,
过滤,合并滤液,滤液以微滤膜进行处理,微滤采用
错流过滤方式, 实验装置及流程见文献[ 7]。
2. 3 树脂对苦参总黄酮吸附实验:精确称取湿树脂
0. 005 g , 置于 250 mL 锥形 瓶中, 加入 浓度 为
0. 285 mg / mL的苦参微滤液50 mL, 置于恒温摇床
中, 24 h后测定树脂的静态吸附效果。按下式计算吸
附率:
Q=
( C0- Ce)×V
W
E% = C0- Ce
C0
×100%
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收稿日期: 2001-03-19基金项目:国家中医管理局基金项目研究内容(批准号: 97-Z023)作者简介:高红宁( 1970-) ,女,浙江杭州市人,硕士研究生。研究方向为中药精制技术集成。T el: ( 025) 6798186
*通讯联系人
式中: C0-吸附前溶液浓度( mg / mL ) C e-吸附后溶液浓
度( mg / mL ) W -树脂干重( g ) V -溶液体积( mL ) Q-吸附
量 E-吸附率
2. 4 苦参总黄酮的测定方法:使用 754分光光度计
在500 nm波长下测定溶液的吸光度[ 8]。
3 结果与讨论
3. 1 AB-8树脂的吸附性能及其影响因素
3. 1. 1 AB-8 树 脂 的 吸 附 容 量: 将 浓 度 为
0. 285 mg / mL、pH = 4 的苦参微滤液通入装有
150 mL AB-8树脂的玻璃柱中,流速为3 BV/ h, 测
定流出液中总黄酮浓度,直至树脂吸附饱和为止,绘
制吸附曲线。150 mL A B-8树脂可处理 6倍树脂床
体积 的物 料液, 树脂床 共吸 附苦 参总 黄酮
256. 5 mg。湿态 AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附量
可达成1. 71 mg / mL,达到饱和时可处理 14 倍树脂
体积量,吸附量可达3. 99 mg/ mL。
图 1 AB-8 树脂对苦参总黄酮( SFGF)的吸附曲线
3. 1. 2 原液 pH 值对吸附的影响:将苦参微滤液调
成不同 pH 值进行吸附实验,结果见图 2。
图 2 pH值与吸附率的关系
苦参微滤液pH 值对吸附有较大影响。pH 值对
物质吸附的影响主要取决于化合物的酸碱度 [ 9] , 酸
性化合物在酸性溶液中易吸附,碱性化合物在碱性
条件下易吸附。苦参总黄酮具有多酚结构和糖苷链,
呈弱酸性,故在酸性条件下吸附为好。根据图 2, 苦
参微滤液的pH 值为 4时为宜。
3. 1. 3 原液浓度对吸附的影响:用浓度不同的苦参
微滤液进行吸附实验。由图 3可知苦参总黄酮浓度
是影响树脂吸附性能的重要因素之一。吸附树脂的
吸附容量不是很大, 一般低浓度下进行比较有利。如
果原液浓度偏高, 则泄漏早,处理量小, 树脂使用周
期短,从而树脂再生次数增多。根据图 3, 苦参微滤
液的初始浓度以0. 28 mg/ mL为宜。
图 3 原液浓度与吸附率的关系
3. 1. 4 流 速 对 吸 附 的 影 响: 将 浓 度 为
0. 285 mg / mL、pH = 4 的苦参微滤液通入装有
150 mL A B-8树脂的玻璃柱中,考察不同流速对树
脂吸附量的影响,结果见图 4。
图 4 流速与吸附量的关系
流速过大, 会使树脂的工作吸附量下降, 提早泄
漏,且树脂层压头损失增加,耗能增多。由图 4可知,
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AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附, 以3 BV/ h的流速
为最佳。
3. 2 AB-8树脂的脱附性能
3. 2. 1 洗脱液的选择:树脂吸附苦参总黄酮以后,
从吸附效率、节能、省时等角度考虑,洗脱液以醇类
较佳 [ 10]。取浓度为0. 285 mg / mL苦参微滤液, 调
pH= 4, 在3 BV / h的流速下吸附后, 比较用不同浓
度的乙醇液洗脱,用紫外检测,结果表明, 用 50%乙
醇做洗脱剂效果较好。
3. 2. 2 解吸曲线: 用 50%乙醇 洗脱, 流速为
3 BV/ h, 解吸曲线见图 5, 可见, 用 4倍树脂床体积
的洗脱液即可将苦参总黄酮基本上解吸下来。
图 5 AB-8 树脂的解吸曲线
解吸操作自下而上(逆向洗脱)为佳, 解吸后的
树脂用水洗后进行下次吸附操作(正向吸附) ,反复
使用。
4 结论与讨论
4. 1 AB-8树脂精制苦参总黄酮是可行的。当原液
浓度0. 285 mg / mL、pH 值为 4、流速为3 BV / h时,
AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附效果良好。用 50%
的乙醇能将所试样品中已吸附的苦参总黄酮基本上
洗脱下来。
4. 2 上柱前, 苦参药液应经滤过,以免污染堵塞树
脂。本文要用陶瓷膜错流过滤法对药液直接进行澄
清处理,有效地去除了提取液中的悬浮物质, 为大孔
吸附树脂提供了可靠的预处理。
致谢:感谢南京中医药大学 97级中药制药专业
单进军同学和 98级海洋药学专业陈爱萍同学在本
文中所做的部分实验工作。
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RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量
沈 岚,朱沪平,宋 崎, 陈 明,范广平
(上海中医药大学,上海 200032)
摘 要: 目的 阐明 ELSD 对于检测菝葜皂苷元等不含发色团的化合物是一种优越的检测器, 为知母药材及含知
母制剂提供了一种可靠的质检手段。方法 采用 RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的
含量。结果 分离完全的色谱峰, 有良好的线性关系, r = 0. 999 0,对药材及制剂测定的回收率分别为 100. 5%、
91. 38%。结论 该方法先进、可靠、简便,可广泛用于知母药材及含知母制剂的质量监控。
关键词: RP-HPLC-ELSD ;知母; 菝葜皂苷元
中国分类号: R927. 2 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2001) 10 0889 03
·889·中草药 Chinese T raditiona l and Herbal D rugs 2001 年第 32 卷第 10期
收稿日期: 2000-12-28作者简介:沈 岚( 1975-) ,女,上海人,助教,药剂学硕士,工作于上海中医药大学中药学院中心实验室,研究方向为中药药剂及质量分析,通讯方法: Te: ( 021) 54231923 E-mai l: alan 7598@onl ine. s h. cn