全 文 :q 中国医 学 科学 院药 物研 究 听 , 等 . 中药志 (第 一 册 ) . 北
京 : 人 民卫生 出版社 , 1 9 9 3 : 4饰
1 。 钟纪育 , 等 . 热带植 物研 究 , 1 9 9 6 (3 卿 : 3 4
n 中国医 学科学院药 物研究所 , 等 . 中药志 (第 三册 ) . 北
京 : 人民卫生 出版社 , 」9 9 3 朽
1 2 《广东 中药志 》编 辑委 员会 , 广东 中药 志 (第 一卷 ) . 广
州 : 广东 科技 出版社 . 1 9 9 4 : 6 0 5
1 3 《广东 中药 志》编 辑委 员会 . 广东 中药 志 (第 二 卷 ) . 广
州 : 广东科技 出版社 . 1 9 9 6 : 3动
赖茂祥 , 等 . 中国中药杂志 , ] 9 8 9 ; 14 (5 ) : 1 1
万 鼎 . 等 . 广西 药 用植 物名 录 . 南宁 : 广西 人 民 出 版
社 , 1 9 8 6 : 5 2 5
江苏省植物 研究 所 , 等 . 新 华本草纲要 (第 一册 ) . 上海 :
卜海科学技术 出版社 , 1 9 8 8 : 53 7
(1 9 9 7
一
1 1
一
0 4 收稿 )
.
4户31
1.
A Su r ve y o f G a la n g a l (A IPin ia R o x b
.
) R e so u r ee s o f C hin a
Z h a o Z h il,
‘ ,
1 1 B in
,
D o n g Ilu i
, 亡t a l
.
(
‘
C h ln a P h a rm a e e u t le a l U n iv e r 、ily
,
N a n ii
n g 2 1 0 0 3 8 )
A b , t :
·
a c t G a la n g a l(A IPin , “ R o x b
.
) r e 、o u r e e s o fC I、In a w a s s u r v e y e d
,
A t o t a l o f 3 0 s p e e ie s a n d Z v : r l
e tie s w e r e id e n tifie d a n d c la 、 , ifie d
.
A t a x o n ( )m ie 11、 t w a 、 e () m lolie d fo r r e fe r e n e e
.
K e y w o r d s 魂IP: n ; a R ()x b . pla n t r e s o u r e e 、
人参 R A P D 产物的限制性 内切酶消化八
幸霎霉霖芝霖览学 药用”“研 “所〔北” ‘。0 0 9 4 , 马 , j、军 ‘ 汪 刁‘全“ “培根
摘 要 为 了鉴定 随机扩一增 产物 的 同源性以 及更有 效地利 用 D N A 分子标记研 究人参 种质 资源 ,
我们 首次将毛细管 P C R 扩增的 R A I, ) 反应 产物进行 限制性 内切酶消 化并有效 的进行 了酶 切位点
分析 , 结果 证 明 P C R 一R F I_ P 是 筛选 人参特异 D N A 分子标记的一种简 单易 行的新 方法 , 可为 药用
植物种质资源研究 提供另 一有用 的工具
关键词 人参 种 质资源 PC R 一R F L P
近年来随着分 子生物学技术的发展 , 寻
找 和筛选植 物 D N A 特异 分子标记 的 方法 ,
已从 80 年代初期经典的 R F L P 分析 〔, 〕 , 发展
到今 天的 R A P I) 〔2 , “〕、 A F L P 〔生方、 SS R 〔S J 、 PC R -
R F L P
〔翩等各种各样 D N A 指纹的比较研究 。
大量新发现的分子标记被用于作物的遗传多
样 性研究 、 品种鉴别 、 良种选育 、遗传 图谱 构
建 和基因定位等领域 , 有力地推动 一了这些 领
域 的发展 。
有 关利用药材分子标记 (D N A 指纹 )进
行药材品种鉴别的研究近年来时有报道 ‘7 ·“ ,
我们也开展 了人 参种 内变异类 型 的 R A P D
指纹研究 〔9〕 , 并取得 了初步结果 。 为了获得更
多 的人参 D N A 遗传信息 , 鉴定 随机扩增产
物的同源性 以及更有效地 利用 D N A 分子标
记研究人参种质资源 , 我们又尝试将结合 了
R FL P 和 PC R 二者之长 的 P CR 一R FL P 方法
用于人参 的 R A P D 产物的酶切位点分析 , 获
得初步成功 , 现将该实验报道如下 。
1 材料与方法
A d d
r e s s : M a X ia o z u
工1 , In s ti飞Lz te o f M e d ie ix la l P la n t l)e v elo p m e n t
.
Chin e s e A e a d e m y o f M e d ie aI S e ie一le e s
,
C }1
一n 〔·s e X ie h七
M e d le a ! U n i
、「〔 r s it y , I古e 一飞一n g
马小军 男 , 博士 . 1 9 9 4 年在 中川医学科学 院药 用植 物研 究所晋升 为副研究 员 。 19 8 4 年以 来一 直从事药用植物研究 , 研
究领域包括药用植 物栽培和生理 , 种质资源 , 分子 生物 学等 。 参加 国家级和部级研究课题多 项 , 如国家攻关课题 “人参农 田栽
培的研究 ”等 , 获 国家和部级成果奖多项 。 在 国内外学术 刊物发表论文 4 0 余篇 , 参加 专著编写多部 。
“ 中国科学院植物研 究所系统 与进化植物学开放实 验室
乙本课题 得到中 国科学 院植物研究 所系统 与进化植物学开 放实验室资助
《中草药 》1 9 9 8 年第 2 9 卷第 9 期 . 6 2 5 ·
做 PC R 产物 的限制性片断长度多态性
分析 (PC R 一R FL P ) , 应注意以下 2 点 : 1) 选适
宜的引物 : 为 了便于酶切位点的分析 , 最好选
择扩增条带少 、信号强 、分子量大 、 稳定性好
的引物 。 2) 选合适的限制性 内切酶 : 首先 , 应
从内切酶 的不 同类 型缓 冲 液 (pH 值 和 K 、
N a
、
M g
、
C l 离子强 度不 同) 中 , 挑选 与 PC R
反应所用缓冲液相匹配的缓冲液及其适合这
种缓冲液 的酶 。其次 , 应选择识别序列较短的
酶做工具 , 以便获得较多的切点 , 例 如 , 按概
率计算识别 4 碱基的限制性内切酶在 2 5 6 bp
的 D N A 片段有 1 个切点 , 1 k b 的 D N A 片段
概率上有 3 个一 4 个切点 。
参 考 文 献
1 P a lm e r J D
, e t a l
.
T he o r A PPI G e n e t
,
1 9 8 3 ; 6 5
:
18 1
3 W illi
am s J G
, e t a l
.
N u el A eid s R e s
,
1 9 9 0 ; 1 8
:
6 5 3 1
3 W
e lsh J
, e t a l
.
N u e l A c id s R e s
,
1 9 9 0 , 1 8
:
7 2 13
4 Pie te r V o s
, e t al
.
N u el A e id s R e s
,
1 9 9 5 ; 2 3
:
4 4 0 7
5 G u s t a v o C a e t a n o
一
A n o lle s
, e t a l
.
B io T e e h n o lo g y
, 1 9 9 1 ; 9
(6 )
:
5 5 3
6 汪小全 , 等 . 银杉 的遗传多 样性及 系统位置 的研 究—兼论松科 的系统分子 学 : 〔博士学位论文〕. 北京 : 中国科
学院植物研究所 , 1 9 9 7 : 2 ,
7 S ha w PC
, e t a l
.
Plan ta M ed
,
1 9 9 5 ; 6 1
:
4 6 6
8 O z e ki Y
, e t a l
.
N a t u r alM ed
,
1 9 9 6 ; 5 0
:
2 4
9 马小军 , 等 . 中草药 , 1 9 9 8 , (3 ) : 1 9 1
10 P a u l W
.
Sk r o e h
, e t a l
.
T he R a p id Cy elis t
,
1 98 5 ; 1 (1 )
:
9
(1 9 9 7
一
1 2
一 0 8 收稿 )
PC R
一
R F LP M e tho d o n G in se n g (Pa
n a x g in se n g )
,
M
a X ia o j
u n , ZW
a n g X ia o q u a n a n d ‘X ia o P e ig e n (‘In s t itu te o f M
e d ie in a l Pla n t D e v e lo pm e n t
,
Ch in e se A
-
e a d e m y o f M
e d ie a l S e ie n e e s
,
B e ijin g 1 0 0 0 9 4
, ‘In s titu t e o f Bo
ta n y
,
C h in e s e A e a d e m y o f S e ie n e e s
,
B e isin g
1 0 0 0 9 3 )
A bs tr ac t In o
r d e r to id e n t ify ho m o g e n e ity o f R A PD (r a n d o m a m plifie d p o lym o r p}, ie D N A ) p r o d u c t s
a n d to m a k e fu ll u s e o f R A PD m a rk e r s fo r th e s t u d y o f g in s e n g g e r m p la sm
,
it w a s tr ie d fo r th e fir s t tim e
, to
d ig e s t PCR p r o d u e ts p r o d u e e d b y e a p illa ry PC R a n d th e ir re s tr ie tio n s ite s d e te r m in e d e ffe e tiv e ly
.
R e s u lt s
sh o w e d t ha t PC R
一
R FL P w a s a s im p le a n d u s e fu l m e th o d fo r s e r e e n in g d is tin et iv e m o le e u la r m a r ke r s o n
P a n a x g in se n g C
.
A
.
M
e y
,
w h ie h p r o v id e d a i、e w to o l fo r th e s t u d y o f g e rm p la s m o f m e d ie in a l p la n ts
.
K e y w o r d s P a n a x g in s en g C
.
A
.
M
e y g e r m pla s m PC R
一
R FL P
柿叶鉴别的实验研究
广西中医学院 (南宁 530 0 0 1) 甄汉深 ‘ 张三平“ 唐 维宏 “ “
摘 要 为更好地利用柿 叶这一资源 和评价其质量 提供科学依据 , 采 用性状 、显微 、化学 、 可见紫
外分光光度法 、 薄层色谱法对柿 叶进行鉴别研究 。 结果表 明 : 这些方法可 用于柿叶的质量控 制 。
关健词 柿叶 鉴别 显微 理化
柿叶为柿科植物柿 及口sp , ro : ka ki L . f.
的干燥 叶 。 中医传统认为其味苦 、酸 、涩 , 性
凉 , 具有清肺止咳 , 凉血止血 , 活血化疲 , 降血
压之功效 , 主要用于咳喘 , 肺 气肿 , 各种 内出
血 , 高血压等症 ‘1〕。 柿叶的生药学鉴定 , 未见
有显 微 、理化 方面 的报道 , 我 们就此进行研
究 , 报道如下 。
1 仪器与材料
,
A d d r e s s
:
Z he n H a n s he n
,
G u a n g x i C o lle g e o f T r a d it io n al C hin e s e M ed ie in e
,
N a n n in g
~ 广西柳州市人 民医院(5 4 5 0 0 1 )⋯ 广西北海市中医院(5 3 6 0 0 0 )
《中草药》1 9 9 8 年第 29 卷第 9 期 · 6 2 7 -