全 文 ：E f f e e t s o f T o t a l S a p o n i n s o f s a n e h i (Pa
n a x 夕s e u d o 一 g i n s e n g v a r · n o t o g i n s e n g )
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e e t i o n o f e a r r a g e e n a n (C a r
,
2 5 m g /k g )
·
T h e n e u t r o p h il (N e u ) e o u n t a , i d p r o t e in e o n t e n t in e x u d a t e w e r e m e a s u r e d b y t e s t t u b e d il u t i n g
m e t h o d a n d L o w r y m e t h o d
.
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z y m e l in k e d im m u n o s o r b e n t a s s a y a n d R iv a n o l a s s a y w e r e a P P l ie d r e s P e e t iv e ly
t o i n v e s t i g a t e e f f e e t s o f s a p o n in s o f P a n a ￡ P s e u d o 一 g i n s e n g v a r · n o t o g i n s e n g ( B u r k · ) H o o e t T s e n g ( P n S ) o n
t u m o r n e e r o s is f a e t o r ( T N F ) a n d n it r i e o x id e (N O ) e o n t e n t i n t h e p e r f u s a t e
.
F u r a
一
2 f l u o r e s e e n e e t e e h n iq u e
w a s u s e d t
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e t e r m in e t h e in t r a e e ll u la r f r e e e a l e iu m 。 o n e e n t r a t io n i n N e u t r o p h il s (N e u 一〔C a Z+ ] ` ) , T h e r e s u l t s
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o w e d t h a t P n S 6 0
,
1 2 0
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e n t m a n n e r ; l o w e r e d t h e l e v e l o f N e u
一
[ C
a Z+ 〕, w it h in h ib i t o r y r a t e s o f 9 . 2% , 3 4 . 3% , a n d
3 9
.
2%
, r e s P e e t i v e ly
.
I t w a s e o n e l u d e d t h a t P n S h a s a n o b v i o u s a n t i in f l a m m a t o r y e f fe e t a n d i t s m e e h a n i s m s
o
f
a e t i o n a r e r e l a t e d t o t h e r e d u e t o n o f T N F a n d N O c o n t e n t s
, a n d i n h ib i t io n o f N e u
一〔C a Z+ 〕; le v e l .
K e y wo
r d s s a p o n i n s o f P a 九 a x P s e u d o 一 g i n s e n g v a r
.
n o t o g i n s e n g ( B u r k
.
) H o o e t T s e n g T N F N O
f r e e e a le i u m a n t i
一
i n f la m m a t io n N e u
一
[ C
a Z+ 〕i
罗布麻叶浸膏对脑内单胺类递质含量
及细胞膜流动性的影响△
苏州医学院药理学教研室 ( 2 1 5 0 0 7) 潘建新 介 顾振纶 钱曾年 秦正红 许美凤 石 琳
摘 要 罗 布麻叶浸膏可使脑内 5一H T 及 D A 含量升高 ,其水溶性成分可使 5 一H T 、 5 一H I A A 及 D A
含量 升高 , 而 N E 含量降低 ,醇溶性成分上述作用更为明显 。 提示 罗布麻叶浸膏可能含有兴奋中枢
5
一
H T 神经元功能及抑制中枢肾上腺素神经元功能的化学物质 , 这些化学 物质为水溶性及醇溶性 。
脑神经细胞膜脂质流动性 测定结果提示罗布麻 叶浸膏水溶性部分 可使膜流动性增加 。
关健词 罗布麻叶浸膏 单胺类递质 脑神 经细胞膜流动性
罗布麻为夹竹桃科植物 AP o叹y n u m ve ne -
ut m L
. , 广泛 野生于盐 碱沙荒地 区 , 其根有
强心利尿作用 ; 叶具有降血压 , 治哮喘 lj[ 及加
强免疫功能等作用 。 以往我们研究还发现罗
布麻叶浸膏有一定程度 的镇静 ,镇痛作用 。为
此我们进一步测定 了罗布麻叶浸膏 、 水溶性 、
醇溶性或脂溶性部分对脑 内单胺类递质含量
以及对神经细胞膜脂质流动性的影响 , 以探
索其 中枢作用机制及其有效成分所在部位 。
l 实验材料
1
.
1 动物 : 昆明种小 鼠 , 雌雄 兼有 , 体重 18
一 2 2 9 ; W i s t a r 大 鼠 , 雌雄 兼有 , 体 重 1 5 0 ~
2 0 0 9
,均 由苏州医学院实验动物中心提供 。
1
.
2 药物 : 罗布麻叶浸 膏 , 由江苏省东台县
罗布麻厂提供 , 为棕色干浸膏 ,每克相当原生
药 7 . 7 9 , 临 用时用 0 . 5%淡 甲基纤 维素钠
A d d r e
潘建新
S 8
:
P a n J i a n x i男 , 4 4 岁 ,主
沌 p a r t me n t o f p l l a r m a c o lo g y
,
s u z h o u m e d i c a l c o ll e g e
,
uS
z
h ou
_
. _
_
_
~
_ 、 、 ~
_
` 、二 _ _
师 , 1 9 7 8 年毕业于苏州医学 院附一 院卫校药剂专业 , 19 8 9 年毕业于苏州医字皖夜大宇医 宇基础专
业 , 获大专学历 。 主要从事心血管 、 神经药理及新药临床前药理 、药效 、 毒理等研究工作 ,共发表论文 5 篇 。
△江苏省医药总公司资助项目
《中草药 》 19 99 年第 3 0 卷第 7 期 . 5 1 7 .
( C MC
一
N) a配成 0 2%混悬液 。 罗 布麻 叶水溶
性部分 、 醇溶性部分 、 脂溶性部分 , 由本 院化
学教研室提供 ,为干浸膏粉的提取物 , 临用时
水溶性 、 醇溶性部分用生理盐水稀释 , 脂溶性
部分用 3% 吐温 一 8 0 配成混悬液 。
1
.
3 试剂 : 正丁醇 ( A R ,无锡溶剂厂出品 ) ; 正
庚 烷 ( A R , 杭 州炼 油厂 生 产 ) : 邻苯 二 甲醛
( F hi k a A G 出品 ) ; 5一经色胺 (瑞士进 口分装 ) ;
5
一经叫噪醋酸 ( A I击 ic h 出品 ) ; 去 甲肾上腺素
( 注射剂 , 上海第十制药厂生产 ) ; 多 巴胺 ( lF u -
k a A G 出品 ) ; 蔗糖 ( A R , 上海化学试剂厂 ) ;
T r i s ( F l u k a 进 口分装 ) ; 荧光探剂 D P H ( 1 、 6 -
D i p b e n y l
一 l
、
3
、
5
一
h e x a f r i e n e
,
S i g m a 出品 ) 。
1
.
4 仪器 : R F 一 5 10 型荧光分光光度仪 ( 日本
岛津产品 ) 。
2 实验方法
2
.
1 单胺类递质测定 : 取健康小 鼠 80 只 , 随
机分 为 8 组 , 每组 10 只 ,分别 以 罗布麻 叶浸
膏 ,水溶性 、 醇溶性或脂溶性部分及相应对照
液 iP , 30 m in 后将动 物断头处死 , 于冰皿上
快速取出全脑 ,去除小脑及嗅脑 , 称重后加人
10 倍量的酸性正丁醇匀浆 , 然后按我室沿用
方法 [2 ] , 分别 提取 5一轻色胺 ( 5一 H T ) 、 5一经 叫
噪醋酸 ( 5一 H I A A ) 、 去 甲肾上腺 素 ( N E ) 及多
巴 胺 ( D A ) , 并分别用 O P T 法及三经叫噪法
进 行反应 , 用 R F 一 5 10 型荧光分光光 度仪测
定各荧光物质的荧光强度 。
2
.
2 神经 细胞 膜流 动性 测定 : 按 oJ en s 方
法 〔3〕 , 从 大 鼠前 段部 脑 ( F o r e b r a i n ) 匀 浆 液
中 ,分离粗突触体 ( P : 部分 ) 。 然后将 P : 部分
混悬于 s m m o l / L T r is 一H C I ( p H = 8 . 1 )低渗
缓冲液中 ,于 O℃静置 l h 使膜破裂 。 于 4 ℃ 、
g 0 0 0 x g 离心 2 0 m i n , 收集微粒部分 , 即得突
触小体 、线粒体及髓鞘 的混合膜 。 然后按石琳
等方法闭略加改动 , 以测定膜脂质流动性 , 即
用等渗磷 酸缓冲液 ( P B S , p H 一 7 . 2) 稀 释至
全蛋 白量 ( B r a d f o r d 法 )为 3 0 拜g /m L 的混悬
液 。 取上述混悬液 1 . 5 m L 加等 体积的 Z X
1 0 一 6 m o l / L D P H
, 摇匀后于 3 7 aC 温育 l h , 作
荧光 标记 , 然 后 用荧 光分 光 光度 仪 于波 长
.
5 1 8
.
3 6 3 / 4 2 8 n m 狭缝 5 / 5 , 恒温 3 7℃ , 测定加人
药物后各时相 的偏振荧光 , 按以 下公式计算
偏振度 ( P ) :
Iv 一 G l v H
Iw + G l v H
_ I~
( ;乓 中 G 一 于二二
I H H
为避免 P B S 及组织产生非标记荧光 ,采
用组织空 白管 (膜混悬液 + P B S )及探剂空白
管 ( D P H + P B S ) 在波长 3 6 3 / 4 2 8 n m 处测定
共偏振荧光 ,保证样品管的荧 光强度为探剂
空白管及组织空 白管的 4 0一 50 倍 以上 ,然后
进行药物对膜悬液偏振荧光影响的测定 , 同
时设立药物空白管作平行对照 。
3 结果与讨论
3
.
1 对单胺类递质的影 响 : 实验结果显示 ,
以 4 9 / k g 剂量的罗布麻 叶浸膏可使脑 内 5 -
H T 及 D A 含量升 高 , 6 9 k/ g 剂量 的水溶性
部分 (剂 量按 原浸 膏量 计算 , 下 同 ) 可使 5-
H T
、
5
一
H I A A 及 D A 含量升 高 , 而 N E 含量
降低 (如剂量 小至 3 9 / k g , 则作 用不显著 ) ,
用 3 9 / k g 剂量的醇溶性部分 , 则上述作用更
为 明显 , 如用 3 9 / k g 剂量的脂溶性部分 , 除
使 5一 H I A A 含量上升外 , 其它单胺类递质均
未见有 明显影响 (结果见表 1 ) , 即使剂量增
大至 1 0 9 / k g , 也未见 5一 H T 含量有所变化 。
提示用较大剂量 的罗布麻叶浸膏及 其水溶
性 、 醇溶性部 分可 使脑 内单胺 类递 质及 5 -
H I A A 含量有所变化 ,而脂溶性部分对递质
含量的影响不大 。 推测罗布麻叶浸膏可能含
有兴奋 中枢 5一 H T 神经元功能及抑制 中枢 肾
上腺素神经元功能的化学物质 , 这些化学物
质为水溶性及醇溶性 。 而罗布麻的中枢作用
可能是通过这些化学物质而实现的 , 为此进
一步分离提取其有效成分具有一定的意义 。
3
.
2 对脑神经细胞膜脂质流动性的影响 : 近
年来 , 药物对生物膜流动性 的影响 已 日益 引
起人们 的重视困 , C hi n 等用 自旋标记顺磁共
振波谱 ( E S R ) 法研究 了乙醇对小 鼠脑匀浆中
分离的髓鞘膜 , 线粒体膜及 突触体膜流动性
的影响 61[ 。 我们用荧光偏振法初步地观察了
罗布麻叶浸膏水溶性部分对大脑脑匀浆混合
膜 脂 质 流 动 性 的 影 响 , 实 验 结 果 提 示 , 以 的 10 及 20 m in 时两次测定结果无明显差异
1
.
3 m g /m L 浓度 的水溶 性部分 (均按 浸膏 (尸 < 0 . 0 5 ) , 提示罗 布麻 叶浸膏水溶性部分
量计算 , 下同 ) ,在给药后 10 ~ 20 m in 时可使 在给药后 10 至 20 m in 时可使脑神经细胞膜
荧光偏振度下降 31 . 34 % 一 4 1 . 8 0% , 以 2 . “ 流动性增加 , 至于其对那一种膜 (如线粒体膜
m g / m L 浓 度可 下 降 4 3 . 3 5 %一 50 . 24 % , 如 或突触小体膜 )的影响最大 , 尚待进一步深人
浓度增大至 3 · 9 9 m g /m L 时有上升趋势 (结 研究 。 另外 ,水溶性部分中引起膜流动性增加
果见表 2) 。 上述变化与给药前平行比较均有 的有 效成分及其临床意义有 待于进一步研
统计学显 著性 ( P < 0 . 0 1 ) , 但在每 次给药后 究 。
表 1 对小鼠脑内单胺类递质的影响
5
一
H T
单胺类递 质含 量 ` 士 、 ,拌g / g )
5一 H I A A N F
动数物组 别
D A
0
.
9 4 1士 0 . 0 2 9 怪 “
0 7 9 9士 0 . 0 2 8
1 7
.
7 7
1 0 6 8士 0 . 0 1 4 衡 赞
0
.
8 5 4士 0 . 0 2 3
2 5
.
0 6
0
.
9 1 7士 0 . 0 1 6 “ 苍
0
.
8 0 1士 0 . 0 1 7
1 4
.
4 8
0
.
8 0 0士 0 . 0 2 6
0
.
8 24士 0 . 0 2 1
一 2 9 1
0
.
6 7 4士 0 . 0 4 0
0
.
7 5 7士 0 . 0 2 7
一 1 0 . 9 6
0
`
6 8 6士 0 , 02 7 朴
0
.
5 9 3士 0 . 0 2 4
1 5
.
68
0
`
7 3 5 士 0 . 0 1 1 苍 `
0
.
5 6 4士 0 . 0 1 8
3 0
.
3 2
0
.
5 3 4士 0 . 0 3 5 食 苍
0
.
6 9 3士 0 0 3 6
一 2 2 . 9 4
0
.
4 1 3士 0 . 0 3 0
0
.
4 5 5士 0 0 2 0
一 7 . 1 9
0
.
5 6 8士 0 . 0 1 0 件 “
0
.
6 0 9士 0 . 03 0
一 6 . 7 3
0
.
5 4 8士 0 . 01 1 赞 借
0
.
6 2 7士 0 . 0 2 2
一 12 . 6 0
0
.
5 7 1士 0 ` 0 2 5
0
.
5 8 4士 0 . 0 2 6
一 2 . 2 3
1
.
1 0 5士 0 . 0 2 3 任 .
0
.
9 60 士 0 . 0 3 5
1 5
.
1 0
1
.
2 70 士 0 , 0 3 6 “
1
.
1 3 6士 0 . 0 3 3
1 2 0 3
1
.
3 7 4土 0 , 0 3 6 份 苍
1
.
2 0 5士 0 . 0 2 8
1 4
。
0 3
0
.
9 9 6士 0 . 0 3 6
0
.
9 2 1士 0 . 0 4 1
8
.
1 4
10l
l01
l0l
l0功
罗布麻叶浸膏
5 % C M C
一
N a 对照
变化百分率 (% )
水溶性部分
生理盐水对照
变化百分率 (% )
醇溶性部分
生理盐水对照
变化百分率 ( % )
脂 溶性 部分
3 % 吐温一 8 0 对 照
变化百分率 ( % )
与对照组 比较 : ` 尸< 。 , 05 . ` 尸< 0 . 01
表 2 罗布麻叶漫裔水溶性部分对脑神经 细胞膜荧光偏振度的影晌 (n 一 6)
浓度
( m g / m L )
荧 光 偏 振 度 (王士 s)
药前 药后 1 0 m i n 药 后 2 0 m in 药后 3 0 m i n
1
.
3 3
2
。
6 6
3
.
99
0
.
1 8 7 3士 0 . 0 2 2 2
0
.
1 8 7 3士 0 . 0 2 2 2
0
.
1 8 7 3士 0 . 0 2 2 2
0
.
1 2 8 6士 0 . 0 2 0 0 . 任
0
.
1 0 6 1士 0 . 0 2 6 2 赞 补
0
.
0 7 4 6士 0 . 0 2 9 8 “ “
0
.
1 0 9 0士 0 . 0 3 9 1 番 备
0
.
0 9 3 2士 0 . 0 2 1 4 ` “
0
.
1 0 1 2士 0 . 0 2 8 5 粉 香 0 . 1 1 4 8士 0 . 0 3 7 3 , .
任`一ó
与药前 比较 : ` “ 尸 < 。 . 01
参 考 文 献
魏鉴明 . 新医药学杂志 , 19 78 , ( 3) : 47
钱曾年 , 等 . 苏 州医学 院学报 , 1 9 5 2 , 2 ( 1 ) : 1 7
J
o n e s D H
, e t a l
.
iB o e h e m iB o p h y s A e t a
,
1 9 7 4
,
3 5 6
:
2 7 6
石 琳 , 等
黄 芬 , 等
6 C h in J H
,
. 苏州医学沈学报 , 玲83 , 3 ( 3 ) : l
, 国外医 学一分子生物学分册 , 19 82 , 4 ( 4) : 1 69
e t a l
.
S e i e n e e
,
19 7 7
,
1 9 6
:
6 8 4
( 1 9 9 8
一
0 1
一
2 9 收稿 )
E f f e e t s o f I n d i a n H e m P (助o cy n u m v e n e t u m ) L e a f E x t r a c t o n M o n o a m i n e
T r a n s m i t t e r a n d C e l l M e m b r a n e F l “ id i t y i n B r a i n
aP n J i
a n x i n
,
G
u Z h e n l u n
,
Q ia n Z e n n l a n
,
et a l
.
(eD p
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me
n t o f P h a r m a e o lo g y
,
S
u z h o u M
e d i e a l C o l l e罗 ,
S
u z h o u 2 1 5 0 0 7 )
A b s t r a e t E x t
r a e t o f 斗P o ` y n u m v e n e t u m l e a v e s e a n m a r k e d l y i n c r e a s e l e v e l s o f s一H T a n d D A in th e
b r a in
.
I t
s w a t e r
一 s o l u b le p o r t io n e l e v a t e d t h e l e v e l s o f s
一
H T
,
5
一
H IA A a n d D A b u t l o w e r e d t h a t o f N E
.
T h e
e f f e e t s o f i t s a l e o h o lie s o l u b l e P o r t io n w e r e e v e n m o r e e v id e n t
.
T h e s e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t e x t r a e t o f A
.
《中草药 》 19 9 9 年第 3 0 卷第 7 期 · 5 1 9 ·
v en et um l eav esm i g hto en t ai n e hem i e al s ubs t an e es w hi e hean ex ei t esr o eto nr egi en e ur o n b uti n hi bi t a dr en er gi e
n e ur o o n
f
e en tr al n
r evo us sy s t em
.
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s s e e u
b
s t anr s e e a e ei t h
r e
w
at er so l
u
l b
o r e a
l
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h
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eso
l
u
l b
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.
R
es ul tso bt ai n eb dy d etr em i n gt hel ip i dl f ui di ty o f e el l m em br an e、 o nw e dt hat t hew at er so l ubl o e em po -
n en to f A
.
v en et um l s v ea eim pr o v e dt he e ell m em br an e fl ui di ty i n br ai n
.
K ey wo r ds
r e e e
b
r al n er v e
ex tr a eto f A.’ 〕o 卿 n um v en et um l e avs em o no am i n etr ansm i t tr e e ell m em br an el f ui di ty o f
阿胶钙口服液的主要药效学研究
新疆 中药 民族药研究所 (乌鲁木齐 0 8 30 0 2)熊元君
于富生
武嘉林 “
蒋激扬
季新梅 “ 、
刘 发 “ ` 二
摘 要 阿胶 钙对 由维 甲酸造成 的大 鼠骨 质疏松症 有 防治作用 , 可 提高血 清 C a 、 P 含 量 , 降低 己
升高的 A L P ,增加股骨 C a 、 P 含量和骨质密度 。 可增加缺乏 维生素 D 致拘楼病模型大 鼠血清 C a 、 P
含量 ,降低 A L P 活性 , 升高股骨 中 C a 、 P 含量 , X 光片显示 ,使拘楼 症模型 动物骨质改变有 明显改
善 。
关键词 阿胶钙 维 甲酸 骨质疏松 拘楼病模型
阿胶钙是由阿胶 、 黄茂 、 熟地和牡砺等 6
味中药组成 , 临床用于治疗小儿 营养不 良性
询楼病及老年性骨质疏松症等疾病 , 有较好
疗效 , 现将其与功能主治有关 的药效学研究
报告如下 。
1 材料
1
.
] 实验药 品 : 阿胶钙 . 新疆华世丹 药业有
限公司提供 , .0 79 9 生药 /m L 龙牡壮骨 冲
剂 ,批号 9 5 0 5 1 9 ,武汉健 民制药厂生产 。 维甲
酸 , 吉林省梅河 口 市解放军 8 1 8 9 9 皮肤 医 院
提供 , 批号 2 5 9 。
1
.
2 实 验 动物 : W i s t a r 大 鼠 , 体 重 ( 1 8 0 士
2 0 ) g
、 雄性 ; 出生 2 0 d 、 体重 ( 3 5一 5 0 ) g 幼年
大鼠 ; 昆明种小 鼠 , (2 o 士 2) 9 , 雌雄兼用 ; 以
上动物均 由新疆流行病研究所提 供 〔生产证
书 ( 9 4 ) 1 6 0 0 1 号〕 。
1
.
3 实验 仪器 T ec h n ic o n R A 一 X T 全 自动
生化仪 (瑞士产 ) , J Y T O P 电感藕合等离子光
量仪 (法国 J P 公司产品 ) , B H 一 6 0 1 2 型二维扫
描 骨密度仪 (北京核仪器厂 , 湖北 医 学院生
产 ) ,放射源 2 4 1 A m 。
2 方法与结果
2
.
1 对 口 服维甲酸致大 鼠骨质疏松症 的防
治作用川 : w i s t a r 雄性大 鼠 60 只 , 随机分为
6 组 : 生理 盐水 对照 组 , 模 型 组 (维 甲酸 了O
m g / k g )
,灌服 , 每天 1 次 , 共 2 周 ) ,龙牡壮骨
冲 剂 组 ( 5 9 / k g ) , 阿胶 钙组 ( 1 . 0 、 2 . 0 、 3 . 0
m L / 1 0 0 9 3 个剂量组 ,灌组 ) 。 试验组动物除
灌服药物外 , 同时灌服维甲酸 2 周 , 停服维甲
酸后 ,继续给药 4 周 。 末次给药后 0 . s h 尾静
脉取血测定血清 C a 、 P 及碱性磷酸酶 ( A L P )
活性 。取血次 日将大鼠用戊 巴 比妥麻醉后 ,经
X
一
ar y 照像 , 观察各组大 鼠骨 质结构 ( X 一 ar y
条件 为 2 5 n l A , 5 0 kV , 0 . 1 5 ) , 而 后处死大
A d d r e s s
熊元君 女
X io n g Y u a n ju n
,
X in ji a n g In s t i t u t e o f
,
1 9 8 8 年毕业于中国药科 大学药学系 ,
C h in e s e a n d M i n o r i t y N a t i o n a l i t y M a t e r i a M e d i e a
,
W
u lu m u q i
学士 。 现在新祖 中药 民族药研究所工作 ,助理研究员 。 先后参加国家
自然科学基金资助课题 : “ 阿魏资源开发与利用 ” 及新班科委资助课题 : “ 新孤党参化学成 分及 药效学研究 ” ,主要 承担药理研
究工作 , 已发表论文 4 篇 。
“ ` 新孤华世丹药业有限公司 甘 二 新弧兵团医院 ` ” ` 新孤医学院药理教研室
.
5 2 0
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