全 文 ：·有效成分·
蒿甲醚合成母液中一个新成分的分离和鉴定
谢笑天 1 ,郑　萍 1 ,张光耀 2 ,杨明惠 3
( 1. 云南师范大学 化学系 ,云南 昆明　 650092;　 2. 昆明制药股份有限公司 ,云南 昆明　 650010;　 3. 大理师范
高等专科学校 ,云南 大理　 671000)
摘　要: 目的　为了弄清蒿甲醚合成母液中的衍生杂质结构及开发新的药源。 方法　用色谱法从合成蒿甲醚的母
液中分离其衍生物成分 ,并用化学波谱法鉴定其结构。　结果　分离得到 5个化合物分别鉴定为α-蒿甲醚 (Ⅰ ) ,二
氢青蒿素 (Ⅱ ) ,青蒿素 (Ⅲ ) ,八氢 -8-甲氧基 -4, 7-二甲基 -呋喃 [ 3, 2-i ]苯并吡喃 -10-乙酸酯 (Ⅳ )和 12-脱氧 -11-烯青
蒿素 (Ⅴ )。 结论　化合物Ⅴ为一新化合物 ,命名为 12-脱氧 -11-烯青蒿素 ,并首次从合成蒿甲醚的母液中得到。
关键词: 蒿甲醚 ;色谱分离 ; 12-脱氧 -11-烯青蒿素
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 05 0388 02
Isolation and identification of new components in mother liquor of
synthetic dihydroartemisinin methyl ether
XIE Xiao-tian1 , ZHENG Ping1 , ZHAN G Guang-yao2 , YANG Ming-hui3
　　 ( 1. Depa rtment o f Chemist ry , Yunnan No rma l Univ ersity, Kunming Yunnan 650092, China; 2. Kunming Pha rmaceu-
tical Co. L td. , Kunming Yunnan 650010, China; 3. Da li No rma l T raining Sch oo l, Dali Yunnan 671000, China)
Abstract: Object　 To iso late and identify the artemisinin-like impurities present in the mo ther liquo r
o f synthetic dihydro-artemisinin methyl ether, fo r the development of new drugs. Methods　 Artemisinin-
like compounds in the synthetic mo ther liquor w ere isolated by chromatog raphy. Results　 5 compounds
w ere iso lated and identi fied. They w ereα-dihydroartemisinin methyl ether (Ⅰ ) ; α, 12-deoxy-a rtemisinin-
12 o l (Ⅱ ) ; artemisinin (Ⅲ ) ; octahydro-8 methoxy-4, 7-dimethy l-furo [3, 2-i ] benzopy ran-10 y l acetate
(Ⅳ ) and 12-deoxy-11-en-artemisinin (Ⅴ ) . Conclusion　 CompoundⅤ was new.
Key words: dihydro artemisinin methyl ether; ch romatog raphic separation; 12-deoxy-11 ena rtemisinin
　　蒿甲醚 ( methyldihydro artemisinine, MDA)是
由植物黄花青蒿中提取青蒿素 ,经半合成后得到的
倍半萜内酯青蒿素的衍生物 ,其差向异构体 β -MDA
是世界卫生组织推荐的首选抗疟药 ,是我国自行研
制并被国际上承认的一类新药。 为该药进入欧盟及
美国市场进行登记审批 ,须提供蒿甲醚合成母液中
的衍生杂质结构以及开发新的药源 ,作者与瑞士
Novarti s(诺华 )公司合作 ,先后从蒿甲醚合成母液
中分离得到 5个化合物 ,经波谱分析及化学合成方
法分别鉴定为 α-蒿甲醚 (Ⅰ ) ,二氢青蒿素 ( dihy-
droartemisinine, Ⅱ ) ,青蒿素 ( artemisinie, Ⅲ ) ,八
氢 -8-甲氧基 -4, 7-二甲基-呋喃 [3, 2-i ]苯并吡喃-10-
乙酸酯 (Ⅳ ) [ 1 ]和新化合物 12-脱氧-11-烯青蒿素
(图 1)。
1　仪器和材料
图 1　化合物Ⅳ ,Ⅴ的化学结构式
5-X国产显微熔点仪 (温度计未校正 ) , IR谱为
Perkin-Elmer 983红外分光光度仪测定 , KBr压片。
MS谱为场解析质谱仪 ( field dezorption) FD-M S
由瑞士诺华公司测定 ,核磁共振谱为 Bruker Am-
400型核磁共振仪测定。柱层析和薄层层析硅胶为
青岛海洋化工厂出品。α-蒿甲醚、β -蒿甲醚、二氢青
蒿素和青蒿素的对照品及蒿甲醚合成母液由昆明制
·388· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 5期
收稿日期: 2000-11-03基金项目:云南省教委自然科学基金项目作者简介:谢笑天 ( 1962-) ,男 ,硕士 ,副教授。
药股份有限公司提供。
2　提取和分离
与蒿甲醚结构相似的化合物无紫外吸收 ,对光、
热不稳定 ,在非极性溶剂中较稳定 ,在水中分解 ,因
而分离工作较困难。其母液中的微量成分 ,从 TLC
定性观察有 8种化合物 ,含量在 0. 1%以下。
将蒿甲醚合成母液用二氯甲烷萃取 ,浓缩为半
固体状浅棕色稠液。再用石油醚溶解 ,微热 ,过滤及
干燥 ,浓缩为浅红棕色半透明稠液。此稠液经 3次硅
胶柱层分离 ,分别以石油醚 -醋酸乙酯 ;石油醚 -乙醚
洗脱 ,薄层层析定性跟踪 ,分段收集 ,多次分离富集
后 ,回收溶剂得到 5种化合物的粗品 ,用石油醚分别
重结晶 ,得到化合物Ⅰ ( 1 g ) ,Ⅱ ( 110 mg ) ,Ⅲ ( 150
mg) ,Ⅳ ( 150 mg ) ,Ⅴ ( 110 mg ) ,供结构鉴定。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ :白色鳞片状晶体。经多组薄层展开系
统定性为 1个斑点。其熔点、 IR, 1 HNMR及质谱碎
片峰等数据与 α-蒿甲醚对照品一致。故该化合物鉴
定为α-蒿甲醚。
化合物Ⅱ :白色细针状晶体。经多组薄层展开系
统定性为 1个斑点。其熔点、 IR,质谱碎片峰等数据
与二氢青蒿素对照品一致 ,与二氢青蒿素对照品混
合 ,熔点不下降 ,故该化合物鉴定为二氢青蒿素。
化合物Ⅲ :白色粗针状晶体。经多组薄层展开系
统定性为 1个斑点。其熔点、 IR及质谱碎片峰等数
据与青蒿素对照品一致 ,化合物Ⅲ与青蒿素对照品
混合 ,熔点不下降 ,故该化合物鉴定为青蒿素。
化合物Ⅳ :无色立方体晶体。经多组薄层展开系
统定性为 1个斑点。 IR( KBr) cm- 1110(环醚 ( C- O
- C) , 1761( C= O) ; FD-M S( m /z): 321( M+ Na)
+ ,
316( M+ N H4 )+ , 288( M+ NH4 - CO )+ , 239( M -
CH3 C= O)+ 。 该结构 [1 ]由瑞士诺华公司的 Werner
W eber博士根据图 1所示结构采用人工合成方法进
行了确证。
化合物Ⅴ :白色粗针状晶体 ,经多组薄层展开系
统定性为一个斑点。 mp 93℃～ 94℃。 1 HNMR
( CDCl3 ) δ: 1. 41, 1. 46, 2. 08, 2. 11, 2. 51, 5. 50,
2. 36, 1. 07, 1. 86, 1. 17, 1. 31, 1. 50, 6. 15, 1. 53,
0. 94, 1. 39。 13 CNMR( CDCl3 )数据见表 1。
FD-M S显示: ( m /z): 289( M+ Na )+ , 284( M+
N H4 )
+
, 267( M+ H)
+
,都再次显示其相对分子量为
266 u。 ( m /z): 249( M+ H- 18)+ 为脱去一分子 H2O
的碎片离子 , 221 ( M+ H- 46)+ 为失去 1分子 H2O
和 1分子 CO的碎片离子 ,可推断该化合物相对分
子量为 266 u。 IR( KBr) cm- 1: 3 082( C= C- H) ,
1 686 ( C= C ) , 1 079 (环醚 C- O - C) , 829, 880,
1 113: 过氧键的特征吸收。 化合物Ⅴ 与青蒿素的
1
HNMR和 13 CNM R[2 ]对照 ,可以看到它们有着相似
的骨架结构 ,其差异在于化合物Ⅴ的碳谱中没有了
位于低场δ: 172的信号 ,而产生了 δ: 108和 134. 9
的季碳和次甲基碳的两个信号 ,说明了羰基碳的消
失和一个不饱和碳碳双键的形成。青蒿素中的 13位
甲基氢 (δ1. 21)的双峰及碳 (δ12. 6)的 q峰的化合
物Ⅴ 的谱图中分别移向低场 ,位于 δ1. 53及 δ
16. 1,且该甲基氢的双峰变为单峰 ,其余两个甲基的
化学位移值和裂分不变 ,表明这个双键位于 11, 12
位。由于这个双键的存在 ,使空间位置上与其相邻的
原子之化学位移值发生相应变化。在 1 HNMR中 , 5-
H向高场移动δ0. 36, 7-H向低场移动 δ0. 52,其中
对 7-H的影响更为明显 ,这主要是由于双键各向异
性的去异屏蔽作用而致 ;同时 ,在 13 CNM R中 5-C向
高场移动 4, 8-C向低场移动 5. 8,除此而外 ,其它原
子的化学位移值与青蒿素的相似 ,例如与过氧链相
连的 C-4和 C-6的化学位移值分别为 104. 5和
78. 9,说明化合物Ⅴ具有与青蒿素相同的倍半萜骨
架结构 ,见表 1。由以上综述 ,推断化合物Ⅴ为 12-脱
氧-11-烯青蒿素。
表 1　化合物Ⅴ的 1H( 400 MHz)和 13CNMR( 100 MHz)的
光谱数据 (δ,CDCl3 )
No. 　 1H 13C
1 1. 41(m ) 51. 4d 9 1. 17, 1. 31 　　 34. 1t
2 1. 46, 2. 08 24. 4t 10 1. 50( m) 37. 4d
3 2. 11, 2. 51 36. 2t 11 108. 0s
4 104. 5s 12 6. 15( d) 134. 9d
5 5. 50(s ) 89. 7d 13 1. 53( s) 16. 1q
6 78. 9s 14 0. 94( d) 20. 2q
7 2. 36( t-d) 44. 4d 15 1. 39( s) 25. 8q
8 1. 07, 1. 86 29. 2t
　　致谢: 瑞士诺华公司的 Werner W eber博士进
行了波谱分析及化学合成方法鉴定工作。
参考文献:
[ 1]　张光耀 ,谢笑天 ,王存志 .蒿甲醚常温下分解产物的分离与鉴
定 [ J ]. 中草药 , 1999, 30(增刊 ): 62-63.
[2 ]　黄庭坚 . 青蒿素的二维核磁共振研究 [ J] . 化学学报 , 1987,
45: 305-307.
·389·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 5期