全 文 ：·药剂与工艺·
高效液相色谱法测定天麻中 L-焦谷氨酸的含量△
贵阳医学院药学系 ( 550004)　　　　　　　　　　　郝小燕
中国科学院昆明植物研究所植化开放研究实验室　　谭宁华
摘　要　应用 HPLC法对不同来源和加工方法不同的天麻 Gastrodia elata Bl. 中 L -焦谷氨酸成分进行了定
量分析。结果显示 L-焦谷氨酸在天麻中的含量因产地、栽培方法和加工方法的不同而有差异。野生比家种、鲜
品比干品的 L -焦谷氨酸含量高。
关键词　天麻　L-焦谷氨酸　 HPLC法　含量测定
Quantitative Analysis of L-Pyroglutamic Acid of Tall Gastrodia
(Gastrodia elata ) by HPLC
Depar tment of Pha rmacy , Guiyang Medica l College ( Guiy ang 550004)　 Hao X iaoyan
Labor ato ry of Phy tochemist ry , Kunming Institute o f Bo tany , Chinese Academy o f Sciences　 Tan Ninghua
Abstract　　 Quanti ta tiv e analysis of L -py roglutamic acid in Gastrodia elata Bl. collected f rom
di fferent o rigins and prepa red th rough di fferent procedures w ere ca rried out by HPLC. The resul ts
indica ted that the contents of L-pyrog lutamic acid in dif ferent G. elata varied di fferent ly as to thei r
habi tats, cul tiv ation and prepa ra tiv e processes. As an overall resul t , it is clear that the concentrations of
L-pyrog lutamic acid in w ild and fresh G. elata a re higher than tha t of the cultiv ated and dried va rieties.
Key words　　Gastrodia elata Bl.　 L-pyrog lutamic acid　 HPLC　 quanti ta tiv e analysis
　　天麻 Gastrodia elata Bl.是我国著名的中药 ,目
前已普遍种植。有关天麻的药理实验表明具有镇惊、
抗癫痫、镇静、安眠、镇痛等作用 [1, 2 ]。关于其化学成
分研究的报道 ,多集中于酚类化合物和有机酸类化
合物 [3～ 8 ]。在试图从中寻找环肽化合物的过程中 ,我
们从天麻中分离得到 L -焦谷氨酸。据文献 [ 9]报道 L-
焦谷氨酸具有抗惊厥等作用 ,因此推测 L-焦谷氨酸
可能是天麻的活性成分之一。
另有文献 [10 ]报道 ,天然鲜人参中焦谷氨酸的含
量远高于加工品人参 ,不同的品种人参中 L-焦谷氨
酸的含量有显著差异。 因此 ,我们对不同产地、不同
栽培方法、不同加工方法的天麻样品中 L-焦谷氨酸
的含量进行了定量分析 ,测定了不同品种天麻中 L-
焦谷氨酸的含量 ,并探讨了不同加工方法对 L -焦谷
氨酸含量变化的影响。
1　仪器和试剂
仪器: Hew let Packa rd HP1100高效液相色谱
仪。 HP工作站数据处理机 ; HP自动进样器。
试剂:无水乙醇 (优级纯 ) ,超纯水 ,无水醋酸钠
(分析纯 )。
2　样品的制备
不同来源的天麻样品 1～ 7号 (见表 1)经粉碎
后 ,精确称取 10 g粉末 ,分别用 10倍量的无水乙醇
浸泡过夜后 ,用超声波震荡 35 min,过滤。重复提取
3次 ,合并提取液。 提取液减压浓缩至一定的体积
后 ,用无水乙醇定容到 10 mL容量瓶中 ,供定量分
析用。样品 8～ 10号为云南昭通家种新鲜天麻 , 8号
是用鲜品 (含水量为 70. 74% )直接提取 , 9号是用
晒干品 (含水量为 47. 47% )提取 , 10号是用烘干品
( 80℃烘至恒重 )提取 ,提取方法同上。
3　分离条件和测定方法
3. 1　分离条件:经反复试验和比较不同类型的流动
相 ,确定天麻中 L -焦谷氨酸的分离条件如下: 色谱
柱: Selecto sil C18 , 5μ, 250 mm× 4. 60 mm;流动相
5 mmo l /L NaAc水溶液 ;流速 1 mL /min;紫外检测
波长 210 nm;柱温 35℃ ;进样量 5μL;分离效果见
图 1。
3. 2　标准曲线的制备: 精密称取 L-焦谷氨酸对照
·94· 中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2000年第 31卷第 2期
Address: Hao Xiaoyan, Departmen t of Pharmacy, Guiyang Medical College, Guiyang郝小燕　贵州大学化学系毕业。 现在贵阳医学院药学系分析化学教研究室工作 ,副教授。 主要从事分析化学教学和植物化学科研工作。△贵州省自然科学研究基金资助项目
品 (作者从天麻中分离得到 ,纯度为 98%以上 ) 2. 0
mg置于 10 mL容量瓶中 ,用无水乙醇溶解定容 ,取
此溶液分别进样 2. 5, 5. 0, 10. 0μL。 在上述色谱条
件下测定 ,记录峰面积与进样量。 L -焦谷氨酸在
0. 5～ 2. 0μg范围内峰面积 Y与浓度 X的线性关系
良好 , r= 0. 999 98。
3. 3　精密度、回收试验、重复性实验: 称取 10. 00 g 1
号样品各 4份 ,平行测定 L -焦谷氨酸的含量分别为:
0. 009 28% , 0. 009 33% , 0. 009 59% , 0. 009 90% ,
平均为 0. 009 52% ,RSD为 2. 99% 。
重现性实验: 重复进样 1号样品 4份 ,测定 L-
焦谷氨酸的含量分别为: 0. 009 33% 、 0. 009 26% 、
0. 009 53%、 0. 009 64% ,平均为 0. 009 44% ,RSD
为 1. 86% 。
回收率实验:准确称取 102. 0μg对照品 3份 ,
分别加到 5. 0 g的 1号样品中 ,并按上述方法提取 ,
测定。回收率为 100. 93% ,RSD为 3. 52% 。
3. 4　样品的测定:将上述样品 1～ 10号 ,分别进样
5μL,与对照品的相对保留时间比较 ,并用加入法定
量 ,用外标法由数据处理机计算 L -焦谷氨酸的含
量 ,分析结果见表 1。
4　结果与讨论
A-天麻样品 1号　* L -焦谷氨酸　 B-L焦谷氨酸对照品
图 1　样品 HPLC图
表 1　不同品种天麻中 L-焦谷氨酸的含量 (% )
样品编号 样品名称 L-焦谷氨酸含量
(% )
样品编号 样品名称 L-焦谷氨酸含量
(% )
1 贵州大方野生天麻 0. 009 44 6 云南昭通野生天麻 0. 008 66
2 贵州毕节家种天麻 0. 002 15 7 云南昭通家种天麻 0. 003 58
3 贵州毕节野生天麻 0. 006 13 8 云南昭通家种天麻 (鲜品 ) 0. 018 76
4 贵州毕节野生幼天麻 0. 007 28 9 云南昭通家种天麻 (晒干品 ) 0. 012 51
5 贵州毕节家种幼天麻 0. 001 14 10 云南昭通家种天麻 (烘干品 ) 0. 002 53
　　用高效液相色谱仪 ,以 L-焦谷氨酸为对照品用
外标法定量分析了不同来源和加工方法不同的天麻
样品中 L-焦谷氨酸的含量 ,结果 (见表 1)表明: ( 1)
来自不同产地的天麻中 L-焦谷氨酸的含量不同。
( 2)野生天麻中 L -焦谷氨酸的含量高于家种天麻 ,
这一现象表明 L-焦谷氨的含量与天麻的品质有关。
( 3)不同加工方法对 L -焦谷氨酸的含量有显著影
响 ,鲜品比干品的含量高。 对于同一新鲜样品 , 8号
样品是不经任何处理 ,直接用无水乙醇提取 , L-焦
谷氨酸的含量最高 ; 10号样品是将天麻烘干 ,用同
样方法提取 ,其含量最低 ; 9号样品是晒干后提取 ,
其含量居中。 对于市售天麻通常加工方法是将鲜品
清蒸 ,然后烘干或晒干 ,其含量均低于 8号、 9号样
品。对加工过程影响 L-焦谷氨酸含量变化的机制 ,
有待于进一步深入研究。
致谢:本工作得到中科院昆明植物所李炳钧副
研究员、丁靖凯研究员、李顺林副研究员及植化开放
实验室的大力支持 ;中科院昆明植物所周铉副研究
员鉴定天麻药材。
参 考 文 献
1　陆　伟 .中草药 , 1985, 16( 9): 40
2　江苏新医学院编 . 中药大辞典 . 上册 . 上海:上海科学技术出
版社 , 1995: 315
3　周　俊 ,等 .化学学报 , 1979, 37( 3): 183
4　周　俊 ,等 .云南植物研究 , 1980, 2( 3): 370
5　周　俊 ,等 .科学通报 , 1981, 26( 18): 1118
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( 1998-12-25收稿 )
·95·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2000年第 31卷第 2期