全 文 ：· 药材 .
括楼组织培养中植株再生的研究
山西师范大学生物系 ( l庙汾0 40 10 4 )
广西师范大学生物系
陈 惠 .
梁倩华
摘 要 括楼的叶柄切段 、 子叶和叶片小切块在不同培养基上培养 ,诱导愈伤组织和不定根均较
易 ,却不易分化不定芽 。 而括楼的完整小叶和大的叶片切段及不定根尖在 M S + 6 - B A smg /L 培养
基上均可诱导产生不定芽 ,不定芽经继代培养可大量繁殖 。 不定根尖芽在 M S + N A A .0 s m g ZL +
6
一
B A 0
.
s m g / L 培养荃上壮苗培养可产生小苗 ,在 M S + N A A O ~ l m g / L 培养基上可再生出完整
植株 ,经移栽培养植株易葵蔫 ,成活率不高 。 本文还讨论了叶片的取材大小和切割方式与不定芽分
化的关系 .
关位诃 括楼 叶片 不定根尖 组织培养 植株再生
括楼 T 月 c h os a n t h e s k i川蒯11 M a x im . 是
常用中药 ,其种子 、果实 、果皮均可入药 ,能化
痰散结 , 治咳嗽 、胸闷 , 能滑肠通便 , 治便秘 。
枯楼的块根入药称天花粉 ,含皂贰 ,天花粉蛋
白 , 多种氨基酸 、 糖类等 , 可治疗多种疾病 ,如
糖尿病 ,绒毛膜上皮癌等 ,天花粉针剂可使中
期妊娠引产 〔` , 。
括楼是雌雄异株植物 , 用种子繁殖 , 雌雄
难辨 。 用分根法繁殖系数低 ,使发展 良种生产
受到一定限制 。利用组织培养法进行篆殖 ,具
有繁殖系数高 ,速度快和成苗率高等优点 ,可
作为枯楼良种快速繁殖的有效途径 。 以前 , 我
们曾用括楼实生苗的茎段及不定根尖作为外
植体诱导产生丛生芽及不定芽 .c2 3〕 。本次又以
叶器官尤其是叶片为外植体进行培养 , 并对
不定根产生的不定芽进行壮苗 、 生根及再生
植株移栽等研究 , 以寻找括楼试管苗生产的
最佳生产工艺 , 为其工厂化生产提供实验基
础 。
1 材料与方法
括楼为临汾当地市售果实 , 取出种子剥
去硬种皮 ,常规消毒后接种于 1 2/ M (S 只含
大量元素 ) 的固体培养基上 , 约 1 d5 后实生苗
长约 8一 1 cZ m ,供剪取外植体用 。 成年植株为
当年播种于土壤中开花的植株 。
基本培养基全部用 M S ,加蔗糖 3% , 琼
脂 0 . 7% , p H 为 5 . 8 , 附加激素种类 (浓度为
m g / L )
,在实验结果中具体说明 。
2 结果与分析
2
.
1 叶器官 (叶柄 、 叶片 、 子叶 )培养及器官
分化
2
.
1
.
1 叶柄 、 子叶和叶片小切块的培养 : 不
同苗龄 ( 1 2 、 2 0 、 4 o d 龄 )的叶柄均取 0 . s e m 长
切段 ,子叶 、 叶片切块为 0 . 5 x 0 . sc m , 大小 ,
接种在以下 3 种培养基上 , a) 在 MOS 上均可
脱分化产生少量愈伤组织 。 b ) N A A I 对 3 种
外植体有促进生根的作用 , 4 d0 龄 3 种外植
体根分化率分别为 31 . 3% 、 54 . 0% 、 85 · 7% 。
c ) 6
一B A S 可诱导 3 种外植体产生大量愈伤组
织 。
为了探索多种有效的成苗途径 ,本试验
又用 4 种激素 , 每一激素取 4 个浓度 : 6一 B A
( 0
.
5
,
2
.
5
, 5 , 1 0 )
,
N A A ( 0
.
0 1
,
0
.
1
,
1
,
2 )
,
A B A ( 0
.
5 , 5 , 1 0
,
2 0 )
, T A 即三十烷醇 ( 0 . 1 ,
0
.
5 , i , 2 )按 L 1 6 ( 4 ) s 正交法设计了 1 6 种培养
基对来自子叶的愈伤组织 ( 6一 B A 上诱导 , .2
. A d d r e s s : C h e n H u i
,
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a r t m e n t o f B io l o g y
,
S h
a n x i T e a e h e r s
’
U n iv e r s i t y
,
L i n fe n
魂币覃药 ) 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 1 2 期 · 7 3 7 .

2
.
2 不定根尖分化的不定芽的壮苗及生根 养基上培养 2d 0, 结果以 5 号培养基根球上
研究 芽伸长为苗的百分率最高为 82 . 6% ,但按平
2
.
2
.
1 不定根尖分化的不定芽的壮苗培养 : 均每个根芽球伸长的小苗数 , 则以 3 号培养
将在 6一B A S 上培养半个 月至一个月的不定 基为好 ( 图 , 4) 。
根尖芽球切下 , 接种在表 2 中所列的 5 种培
表 2 不同培养墓对不定根尖芽伸长的影响
编号 培 养 基 接种根芽球数
具伸长苗的根球
数及百分率 具伸长苗总数
平均每个根球
具伸长苗数
月了扁b工JJSōb臼101幼
N A A O
.
5+ 6
一
B A O
.
l
N A A O
.
1+ 6
一 B A O
.
5
N A A O
.
5+ 6
一
B A O
.
5
N A A O
.
5+ 6
一
B A I
T A O
.
5+ N A A O
.
5 + 6
一
B A O
.
5
9
9
1 3
1 9
2 3
6 6 6
.
7 % 9
5 55
.
6环 15
8 6 1
.
5% 2 3
9 4 7
.
4 % 2 0
1 9 8 2
.
6% 3 1
2
.
2一 2 不定根尖无根苗的生根研究 :待根芽
苗长到 2一 c3 m 高时 , 从基部截取并转移到
以 下 3种 培养基 上 a ) M S o b ) M S + N A A
0
.
5
。 e ) M S + N A A I 各 2 0 株 , 结果都能
1 0 0%地诱导生根 ,使芽长成完整植株 , 后两
种培养基产生的根生长粗壮 。
2
.
3 试管苗移栽 : 将由叶片和根尖产生的不
定芽生根后的完整植株从试管取出 ; 将根部
培养基用 自来水冲洗干净 , 转移到装有蛙石
的塑料钵 中 ,浇 以 12/ M S 培养液 , 罩以塑料
袋 ,其顶部开 一小 口 , 置于培养室 内日光灯
下 , 一周后将小 口开大 , 两周后将塑料摘除 ,
锻炼一周后 ,置于室外阴棚下 ,然后再移至半
阴半阳条件下约一周 ,其成活率可达 48 %左
右 ,与 自己做过 的菊花 〔们 , 烟草试管苗相 比 ,
其移栽成活率低 ,在低湿条件下易萎蔫 , 其原
因有待进一步研究 。
3 讨论
3
.
1 叶片的取材大小和切割方式与分化不
定芽的关系 : 括楼叶片的取材大小和切割方
式与芽的分化有密切关系 , 同是 0 . 8一 cZ m Z
面积的叶片 , 当截成 0 . 5 x 0 . sc m Z 的小块时 ,
在 6 一B A S 上不能分化出不定芽 , 只是有愈伤
组织的产生 , 而当在叶片中央横切一刀将其
分为上下两段时 , 则在上段的切 口处和下段
的基部可分化出单个或多个丛生的不定芽 。
当叶片面积为 0 . 5 x 0 . sc m Z 或更小时 , 不切
也能在叶缘齿状突上分化出不定芽 。 这些结
( 中草药 ) 2 99 6 年第 2 7 卷第 1 2 期
果说 明 , 除了外源激素的作用外 ,器官的分化
还受 内源激素的制约 。 这在前人工作中还有
很多例子 ,如 V a r d i a n 和 N i t s e h ( 1 9 6 1 ) 在菊
芭根的再生中 ,观察到愈伤组织在形成芽的
部位含有较高水平的内源细胞分裂素 , 而在
形成根的区域生长素占优势 。此外 , 外植体的
大小不同所含内源激素的量也不同 。 大的材
料 内源激素含量多 , 小的材料内源激素含量
少 。 B o n n e t t ( 1 9 6 6 )用田旋花的根切段做实验
不加任何激素 , 当切段长为 1 . sm m 时 , 完全
没有器官的形成 , 当长度为 2 . 6m m 时 ,平均
每段可形成 一个器官 (根或芽 ) 〔5 , 。 W ar m k
( 1 9 5 0) 报道 , 蒲公英 的根切段在直径小 于
.l 25 m 。 , 长度短于 6 一 l o m m 就无 芽 的产
生 。 推测括楼叶片培养的结果具有类似的道
理 , 小切块内源激素含量少 , 不利于芽的产
生 ,大切段内源激素含量高有利于芽的产生 。
.3 2 括楼植株再生的两种培养程序 ;从括楼
组织培养研究可知 ,括楼植株再生有两种培
养程序即 a ) 小叶片不切割或取 3 o d 龄实生
苗植株上 0 . 5一 0 . sc m , 叶片上下分成两段在
M S + 6 B A S 上培养产生出不定芽 ~ 继代于
新鲜培养基上产生大量芽~ 芽长至 2一 c3 m
时在 M S + N A A O~ 0 . 5 上生根一移栽 。 b) 不
同外植体在 M S + N A A I 上生根~ 根尖培养
在 M S + 6一 B A Z一 5 上诱导产生大量不定芽
~ M S 十 N A A o . 5 + 6一 B A o . 5 上壮苗~ 2一
c3 m 长小苗在 M S + N A A o一 1 上生根 ~ 移
·
7 3 9
.
3致谢 :本实验承蒙中科院上海植生所李
、 许智宏教授和 罗士韦老教授的指导 。
参 考 文 献
4
四川医学院主编. 中草药学. 北京 :人 民卫 生 出版社
9 9 1 7二3 1 6
陈 惠 , 等 . 山西师大学报 ( 自然版 ) , 19 9 4 , 8 ( l ) : 5 3
陈 惠 , 等 . 山西师大学报 ( 自然版 ) , 1 9 9 5 , 9 ( l ) : 3 9
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1 2 2 8
( 1 9 9 6
一
0 5
一
2 7 收稿 )
2 陈 惠 ,等 . 植物生理学通讯 , l9 8 7( 6) : 48
S t u d i e s o n P l an t l
e t R e g e n e r at i
o n o f M o n o g o l i a n S n a k e g o u r d
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o sa 心h e s k i li l。 仪元1 w e r e e u lt u r e d o n M S m e d i u m
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.
E f fe e t o f b l a d e s e g m e n t s i z e a n d
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s s l ie in g t e e h n iq u e
, o n t h e d if fe r e n t ia t i o n o f a d v e n t it io u s b u d w a s d i s e u s s e d
.
厚朴新害虫— 横沟象
浙江省松 阳县林业科学研究所 ( 3 2 3 4 0 0)
浙江省龙泉市森林病虫防治站
陈汉林 奋
陈正国
摘 要 横沟象 丈卜s ce ur : sP . 是厚朴 M ` g n ol ia -o fj 王c俪以泛: 和 凹叶厚朴 M . 阮z砧“ 的毁灭性新害虫 ,
在浙江省龙泉 、 景宁 、 松 阳等县市的厚朴产区造成严重损失 。 本文首次报道其对厚朴的危害及其防
治方法 。
关锐词 横沟象 厚朴 凹 叶厚朴
横沟象 石沙` ce ur 、 s p . 隶鞘翅目 C d l e oP 扮-r
a , 象 虫 亚 目 尺入夕cn h oP h~
, 象 虫 科 uC -r
cu il on i d a `
。 成虫和幼虫都为害我国特产的珍
贵木本中药厚朴 材泛g n ol i a 口fj 玄c i n a l i s R e h d .
e t W i l
s
. 和 凹 叶 厚 朴 M . b i lob a ( F e h d . e t
w il s )C he gn
。常造成很大损失 ,严重影响上述
两种药材的生产 。有关此虫尚未见报道 ,现将
作者的观察结果报告如下 。
1 分布与为害
横沟象在浙江省丽水地区的松阳 、遂昌 、
龙泉 、 云和几景宁 、 丽水等县市都有分部 。除为
害厚朴 、 凹叶厚朴外 ,还能为害黄山木兰 .M
卿 l i n d汀 c a W i l s . 、 紫玉 兰 M . 1111刀o ar eD s r .
和 马褂木 L i r i o d e n d orn 。 h i n e n s 。 ( H e m s l
.
)
S a r g一
横沟象成虫取食嫩梢皮 、 芽苞 、 叶片 、 花
A d d
r e s s : C h e n H
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Z h e ji
a n g P r o v i n e ia l oS
n g y a n g oC
u n t y I n s t i t u t e o f F o r e s t r y cS i
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7 4 0
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