全 文 ：2
.
3 药典和部颁标准规定 , 黄柏含量二妙丸
为 50 % , 三妙丸为 3 % , 四妙丸为 3 % , 知
柏地黄丸为 7% 。 前三者为水泛丸 , 后者为水
蜜丸 (河南产的知柏地黄丸为浓缩丸 ) 。 对 32
种成药的含量测定结果表 明 , 大部分成药中
含有小璧碱 、掌叶防己碱和药根碱 。
2
.
4 试验中还曾使用 0 . 4 m ol / L 硝酸馁一 甲
醇 一四氢吠喃 (7 0 : 2 0 : 1 0 ) 、 0 . 1 m o l/ L 酒石
酸 一甲醇 一十二烷基磺酸钠 (3 。 : 70 , 1 ) 、水 -
乙睛一四氢吠喃 (5 o : 45 : 5) 和 甲醇一水一乙睛
(4 0
: 3 0 : 3 0
,
1 0 0 0 m L 含磷酸二氢钾 3 . 4 9
及十二烷基硫酸钠 1 . 7 9 )等进行洗脱 , 但出
峰或分离情况均不如现在的流动相好 。
参 考 文 献
l 袁蔼芝 . 浙江药学 , 1 9 8 6 , (上l ) : 10
2 邱晓星 , 等 . 药学学报 , 19 8 6 , 2 1 (6 ) : 6 5 8
3 日本药局方. 第十 二改正 , 第二部 : 18 9
4 全国中草药汇编编写组 . 全 国中草药汇编 . 上册 . 人 民卫
生出版社 , 1 98 6 . 7 6 9
(1 9 9 6
一 1 1
一
0 6 收稿 )
D e t e r m in a tio n o f B e r b e r in e
,
Pa lm a tin e a n d Ja t r o r r h iz in e in E r m ia o W
a n
,
b y H PL C
Sa n m ia o W a n
,
S im ia o W
a n a n d Z hib a id ih u a n g W
a n b y H PL C
Pa n Y a n g
,
M
a G u o x ia n g
,
G u o I iw e i
A r e v e r s e
一
Pha se HP L C m e th o d w a s d e s e r ib ed fo r th e d e t e rm in a t io n o f be r be r in e
,
p a lm a t in e
, a n d j
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r h iz in e in E rm ia o W
a n , S a n m ia o W
a n , S im ia o W
a n a n d Z h iba ld iht : a n g W
a n (r e a d y m a d e C h in e s e m e d ie in a l p ills
w ith tw o
, t hr e e a n d fo u r s u b t le in g r e d ie n t s
, a n d p ills eo n ta in in g P h ello d e n d ro
n a m u re n se a n d R eh m a n n ia gl
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-
n o sa e te
.
)
.
T h e th r e e e o n s tit u e n t s w e r e s e p a r a t e d o n a N o v a
一
p a k C , , 3
.
9 (i
.
d ) X 1 5 0 m m e o lu m m
, u s in g a ee
-
to n itr ile
一
w a te r (l
,
l
, e o n ta in in g 3
.
4 9 K H ZPO ; a n d 1
.
7 9 C H 3 (C H
Z
) 11 5 〔)4 N a p e r 1 0 0 0 m L ) a s the m lb ile
p ha s e
,
d e te et e d a t 3 4 5 n m
.
T he a v e r a g e r ee o v e r ie s o f th e th r e e eo n s tit u e n t s w e r e 9 8
.
6 7 士 2 . 3 9 % , 9 8 . 7 5 士 1 .
6 7 %
a n d 9 8
.
3 8士 2 . 3 1 % r e sp e e tiv e ly .
杜仲的炮制及降压成分提取工艺的研究
华中农业大学食科系 (武汉 4 3 0 0 7 0) 戚 向阳 夸 喻晓辉 张声华 程秋凉
摘 要 研究了杜仲中主要降压成分松脂醇二葡萄糖贰的提取条件及不同炮制工艺对其含量的
影响 。 结果表明 : 杜仲粉采用 70 % 乙醇水溶液 , 于 90 ℃温度下以 l : 6 的料液比浸提 3 次 , 每次 30
m in
, 松脂醇二葡萄糖贰的浸出量最高 。 杜仲的炮制中 , 温度及时间对松脂醇二葡萄糖贰含量影响
最为显著 , 随着温度升高 , 时间的延长 , 其含量下降 。 浸盐量对松脂醇二葡萄糖试含量的影响不大 。
关键词 杜仲 炮制 浸提 松脂醇二葡萄糖贰
杜仲 E u c o m m ia u lm o id e : O liv . 具有很
好的降压 作用 , 且 疗效平稳 、无毒 、 无 副作
用 〔‘〕。 美国威斯康星大学研究认为 ,杜仲中主
要的降压成分为松脂醇二葡萄糖贰 〔2〕 。
杜仲临床多经炮制后入药 , 炮制方法有
盐炒 、砂烫 、烘制等 , 多年来国内外对杜仲炮
制工艺虽做了一些探讨〔“ , 4〕 , 但有关炮制工艺
对杜仲中有效成分的影 响尚未见有关报道 。
据 文献报道 〔, , ‘ , 5〕, 经不 同方法炮制的杜仲 ,
以烘制品的质量较好 , 故本文以烘制为炮制
方法 , 研究烘制工艺对杜仲 中主要降压成分
松脂醇二葡萄糖贰的影响及其最佳的提取条
件 , 为最佳炮制工艺的选择及松脂醇二葡萄
糖贰的进一步纯化提供一定的理论依据 。
A dd r e s s
:
Q i X i
a n g ya n g
,
D e p a r tm e n t o f Fo o d S e ie n e e s
,
M id d l
e C h in a A g rie u ltu r e U n iv e r sity
,
W
u h a n
1 4 4
·
1 材料与仪器 、试剂
杜仲皮 : 采 自湖北省郧西县 , 经湖北中医
学院陈绪伦教授鉴定为杜仲的干燥树皮 。
S h im a d z u S C L
一
6A 高效液相色谱仪 。
松脂醇二葡萄糖贰旧 本 T ak e s hi D e ya -
m a Ph
.
D 赠送 。
2 实验方法
2
.
1 松脂醇二葡萄糖贰含量的测定 : 炮制样
品的处理 ‘6〕 : 准确称取一定量的炮制杜仲粉 ,
置于索氏提取器 中 , 加 60 m IJ 氯仿回流提取
6 h
, 以除去杜仲胶等杂质 。 残留物挥去氯仿
后 , 用 60 m L 甲醇浸 泡过夜 , 再置索氏提取
器 中 , 用 甲醇 回流 6 h , 将甲醇提取液浓缩 ,
再用甲醇定容至 25 m L 。 供 H P L C 分析 。
2
.
2 浸提样 品的处理 : 称取适量 的杜仲粉
末 , 用溶剂浸提数次后过滤 , 合并滤液 , 减压
浓缩至干 , 用甲醇溶解 , 定容至一定体积 。
2
.
3 色谱条件 〔7〕 : 色谱柱 : S h im 一P a e k C LC -
SI L 1 50 m m x 6
.
o m m ;流动相 : 氯仿一正己烷
一甲醇一冰 乙 酸 (45 : 30 : 23 : Z v / v) , 流速 :
1
.
0 m L / m in
, 柱温 : 室温 ;紫外检测器 : 0 . 04
拼v , 检测波长 : 2 8 0 n m 。
根据标样的保留时间进行定性 , 按峰面
积计算组分的相对含量 。
3 结果与讨论
3
.
1 杜仲炮制工艺的研究 : 将刮去粗皮 , 洗
净后于 60 ‘C烘干并切成 0 . 5 c m 宽的杜仲丝
片进行 L 。(3 3 )正交试验 , 研究不 同烘制 因素
(温度 、时间及浸盐量 )对杜仲中松脂醇二葡
萄糖贰含量的影响 。 结果见表 1 一表 3 。
由表 1一表 3 的结果可知 : 炮制温度 (因
子 A )和炮制时间 (因子 B )对松脂醇二葡萄
糖贰 的含量影响显著 , 在所试验的水平范 围
内 , 提高炮制温度 , 延长炮制时间 , 松脂醇二
葡萄糖贰的破坏加剧 , 含量下降 。 浸盐量 (因
子 C )的影响很小 , 各水平间的差异不大 。
根据试验结果 , A 、 B 两因子选水平 1 , C
因子选水平 2 , 即 A IB IC如 最佳的炮制条件
为 : 采用 2 %的浸盐量 , 在 1 20 ℃的温度下烘
制 30 m in 。 但在临床中 , 杜仲常高温炒断丝
《巾草药 》1 9 9 7 年第 28 卷第 3 期
入药 , 且炮制品的降压作用优于生杜仲 。 因
此 , 对于杜仲 的炮制意义 , 尚需进一步从成分
间比例变化或是否产生新成分等进行探讨 。
表 1 不同炮制条件对松脂醉二葡萄糖
试含量的影响
因子 A B C
水平 温度(℃ ) 时间(m in) 浸盐量 (% )
1 1 2 0 3 0 1
2 1 5 0 6 0 2
3 1 8 0 9 0 3
表 2 试验计划 、结果及计算分析
列号 A B C D 实验结果
实验号 温度 时间 浸盐量 松脂醇二葡萄糖
试的损失率 (% )
1 1 1 1 1 32 8 2
2 1 2 2 2 15
.
6 4
3 1 3 3 3 3 7
.
9 9
4 2 2 3 1 3 6
.
6 7
5 2 3 1 2 7 5
.
3 8
6 2 1 2 3 3 0
.
2 6
7 3 3 2 1 8 4
.
3 6
8 3 1 3 2 3 4
.
1 4
9 3 2 1 3 8 4
.
3 6
K l 86
.
4 5 97
.
2 2 1 92
.
56 15 3
.
85
K Z 1 42
.
3 1 1 36
.
67 13 0
.
26 12 5
.
16
K 3 2 02
.
8 6 1 97
.
73 10 8
.
8 15 2
.
61
k
, 28
.
8 2 32
.
4 1 64
.
19 5 1
.
28
k o 47
.
4 4 45
.
5 6 4 3
.
42 4 1
.
72
k
3 67
.
6 2 65
.
9 1 36
.
27 5 0
.
87
R 38
.
8 0 3 3
.
5 2 7
.
92 9
.
5 6
注 : 杜仲粉末 4. 0 9
表 3 炮制条件的方差分析
方差分析 偏差平方和 自由度 均方
A 2 2 5 9
.
7 7 2 1 1 2 9
.
8 9
B 1 7 0 9
.
6 5 2 8 5 4
.
8 3
C 1 2 6 1
.
9 5 2 6 3 0
.
9 8
D 1 7 5
.
3 5 2 8 7
.
6 8
F 显著性
1 2
.
8 9
苦
9
.
7 5
甘
7
.
2 0
’ 显著
3 松脂醇二葡萄糖试的提取工艺
3
,
1 浸提溶剂的选择 : 杜仲 中的有效成分常
用 甲醇 、乙醇 、丙酮 、水等溶剂来提取 。我们研
究了不同浓度的甲醇 、 乙醇及沸水对松脂醇
二葡萄糖贰 的浸提效果 , 结果 见图 1 中 A 。
5 0 % 甲醇溶液浸提效果最好 , 随着 甲醇浓度
的升高 ,浸提率下降 。 乙醇的提取效果略低于
·
1 4 5
·
甲醇 , 以 70 %浓度最佳 。 水的提取效果较差 ,
且用水作溶剂 , 会溶出大量多糖类物质 , 增加
溶液粘度 , 使过滤操作困难 , 因此 , 考虑到溶
齐d的安全性 、生产成本及便于操作等因素 , 本
实验选用 70 % 乙醇水溶液作为浸提溶剂 。
翻可 ;{ 户 :)厂 :: /‘ : ; 图 1 不同提取条件对松脂醇二葡萄糖试提出效果的影响
A 一不同溶剂 (卞J二仲粉 3 . 5 0 9 , 室温 , 浸提 s h , 2 次 , 溶剂 2 0 m l ) B 一温度 (杜仲粉 2 . 00 9 , 料液 比 1 : 6 , 2 次 , 时
间 l h ) C 一浸提次数 (杜仲粉 2 . 0 0 9 , 料液 比 1 : 6 , l h , 室温 ) D 一料液 比 (杜仲粉 2 . 00 9 , 2 次 , l h , 室温 )
E
一浸提时间 (杜仲粉 2 . 0 9 , 料液 比 l : 6 , 3 次 , 常温 )
3
.
2 浸提条件的选择
3
.
2
.
1 温度 : 由图 1 中 B 可知 , 随着温度升
高 , 松脂醇二葡萄糖贰的浸出量增加 。
3
.
2
.
2 浸提次数 : 在常温下对杜仲粉浸提 3
次后 , 再增加浸提次数 , 松脂醇二葡萄贰的浸
出量无显著提高 (见图 1 中 C ) 。
3
.
2
.
3 液料 比 : 溶剂量越多 , 二糖贰的提取
效果越好 , 当液料比大于 6 : 1 时 , 再增加溶
剂量 , 松脂醇二葡萄糖贰的浸出量增加不显
著 , 见图 1 中 D 。
3
.
2
.
4 浸提时间 : 随着浸提时 间的延长 , 松
脂醇二葡萄糖贰的浸出量下降 , 见图 1 中 E 。
表 4 不同浸提条件对松脂醇二葡萄糖
贰浸提效果的影响
K 值大小 , A 、 B 、C 三因子都选水平 3 。浸提时
间 (因子 B )对松脂醇二葡萄糖贰浸出率无显
著影响 , 该因子可选水平 1 。
表 5 试验计划 、浸提结果及计算分析
因子
水平
1
溢度 (℃ ) 浸提时间 (m in) 浸提次数 料液 比 (w 八 )
3 O
6 0
9 0
3 0
6 0
9 O
1 1 : 2
2 1 : 4
列号 A B C D 试验结果
试验号 温度 时间 次数 料液 比 峰面积 / 1。“
1 1 1 1 1 4
.
8 3
2 1 2 2 2 6
.
5 0
3 1 3 3 3 8
.
11
4 2 1 2 3 7
.
8 9
5 2 2 3 1 6
。
7 2
6 2 3 1 2
’
5
.
7 8
7 3 1 3 2 9
.
0 2
8 3 2 1 3 7
.
9 7
9 3 3 2 1 7
.
6 1
K
: 1 9
.
4 4 2 1
.
74 18
.
5 6 19
.
16
K : 2 0
.
3 9 2 1
.
1 9 22
.
0 0 2 ]
.
3 0
K
3
2 4
.
6 0 2 1
.
50 2 3
.
8 6 2 3
.
9 7
k
1 6
.
4 8 7
.
2 5 6
.
1 9 6
.
3 9
k
Z 6
.
8 0 7
.
0 6 7
.
3 3 7
.
1 0
k
3
8
.
20 7
.
1 7 7
.
9 5 7
.
9 9
R 1
.
72 0
.
1 9 1
.
7 6 1
.
6 0
在以上单 因子试验 的基础上 , 对影响松
脂醇二葡萄糖贰提取率的因素 : 浸提温度 、浸
提次数 、浸提时间及料液 比进行 L 。 (3 ‘ )正交
试验 , 结果见表 4 一表 6 。
由表 4 一表 6 可知 : 浸提温度 (因子 A ) ,
浸提次数 (因子 C ) , 料液 比 (因子 D )对松脂
醇二葡萄糖贰浸出率 的影响达到显著水平 。
随着温度 的升高 , 次 数的增加 , 液料 比的增
大 , 松脂醇二葡萄糖贰浸出量明显提高 , 根据
·
1 4 6
·
注 : 杜仲粉 4 . 0 9 溶剂 70 % 乙醇
表 6 浸提条件方差分析
方差分析 偏差平方和 自山度 均方 F 显著性
A 5
.
0 5 2 2
.
5 2 5 7 4
.
3 7
苦
B 0
.
0 6 8 2 0
.
0 3 39 5 (误差项 )
C 4
.
94 2 2
.
4 70 7 2
.
7 5
任
D 3
.
8 9 2 1
.
9 8 5 5 8
.
4 7
苦
, 显著
综 上 分 析 , 最 佳 的 浸 提 条 件 为
A
3B , C
3
D
3 , 即杜仲粉用 7 0 % 乙醇于 9 0 ℃以 1
: 6 的料液比浸提 3 次 , 每次 3 0 m in 。
参 考 文 献
1 张康健 . 西 北林学院学报 . 19 9 4 , 9 (4 ) : 5 8
2 C l
l a r l
e s
J S
, e t a l
.
J A m C h
e
m s o
e . 19 7 ‘;
,
9 8 (1 7 )
: 5 4 士2
3 李 川 , 等. 件者药材 , 1 9 8 9 , 1 2 ( 2 ) : 2 9
颜成杰 . ‘!, 药材 , 1 9 9 0 , 13 (6 ) : 2 ]
刘湛文 , 等 . 中药材 , l” 4 , 1 7 (5 ) : 28
沙振方 , 等 . 药学学报 , 1 9 8 6 , 2 1( 9 ) : 7 0 8
(1 9 9 6
一
0 8
一
1 6 收稿 )
S t u d ie s o n th e R o a s tin g o f th e B a r k o f E u e o m m ia (E “co m m ia u lm o id e s )
a n d E x t r a e tio n o f th e M ajo r H yP o t e n siv e C o m Po u n d
Q , X ia n g y a n g
.
y 一I X 一a o h u i
,
Z h a n g S h e n g h、la
, e t a l
E ffe 。
,
t s o f r o a s t in g : * rld e x t r 。。tio n e o n d it io n 〔, n t he c o n te n t o f (+ )一p in o r e s in o l一d i一俘D 一g lu e o sid e in b a r k o f
E u ‘口m m ia u lm o id ‘万 ()liv
.
w e r e s t u d ie d
.
R e s u lt s s ho w e d th a t w h e n t he b a r k w a s e x t r a e t e d fo r 3 X 3 0 m in w ith
6
,
l (s 。) Iv e n t , b a r k )o f 7 0 % e tlly l
一 a le o h() 1 a t g O U g a v e th e b e s t r e s u lt
.
R o a s t in g h a d a g r e a t in flu e n e e o n th e
e o n t e n t o f (斗 ) 一p , n o r e sin o l一d 卜爵I) 一g lu e o sid e , w hie h d e e r e a s e d w ith in e r o a s e o f te m p e r a t tlr e a n d t im e .
超临界 CO Z 流体萃取光菇子中秋水仙碱的研究△
华西医科大学药学院 (6 1 0 0 4 1)
四川省机械研究设计院
姜继祖 架 叶开润 廖周冲 徐小 平
辛复泰 杨儒达
摘 要 建立了一套超临 界 C( _) 2 流体萃取实验装置 , 对光菇子的秋水仙碱 (co lc hi ne )成分进行了
超临界 C( ): 流体萃取研究 , 并用 HPI 一C 法作了含量测定 。 结果表明 , 加夹带剂的超临界 C O : 流体
萃取法的提取率约提高为传统溶剂萃取法的 1 . 25 倍 。
关键词 超临界 C( 〕: 流体萃取 夹带剂 光菇子 秋水仙碱
在超临界 CO , 流体萃取 (C O Z一S FE )中 ,
由于处 于超临 界状态 下 的 C( ) : 流体 (c O Z -
S F )兼顾了气体及液体的传质特 点 , 且 C( ) : -
S F 的特性及极性还 可通过调节萃取压力 、 温
度 、 加不同品种的夹带剂⋯⋯等因素 而方便
地调节 , 从而使 C O , SF E 显示 了快速 、提取
率高 、选择性好等特点 。 近 年来国 内外对
C O
:
一
S FE 的 应 用 开 发 及 基础 研 究相 当 活
跃 〔, ·幻 。 现用自己设计的 C () : 一S F E 实验装置
对光菇子 IP h ige ni a 认di ca 球茎中的秋水仙
碱 (e o le h ie in e , C 2 2 H 2 5 N o 。 . 可用于 治疗痛 风
及肿瘤〔3〕)进行了萃取试验研究 。 由于秋水仙
碱的分子量较大 , 单 独采用 C O Z一S F 难以萃
取 〔4〕 , 本 试 验 参 考溶 剂 萃 取 法 所 用 的 溶
齐」〔5 , 6 〕 , 进行 了以不同浓度 乙 醇为夹带 剂的
C 0
2 一SF E 的试验研究 , 用同批原料作了溶剂
萃取法对 比实验 , 所得萃取液均采用 H P LC
法测定秋水仙碱含量 , 取得 r 显著效果 。
1 仪器与药品
C O
: 一S F E 实验装置系 自行设计 (该装置
于 1 9 9 5 年 12 月经 四川省科委组织 鉴定通
过 ) ;萃取器容积 3 0 m IJ , 操作压 力可达 30
MP a
, 第一 、 二分离器容积均 为 35 0 m l一 , 操作
压力可达 5 M Pa , 萃取器及第一分离器带加
‘
A d d r e s s
:
Jia n g Jiz y
,
C o lle g e o f Ph a r m a e y
,
W
e s t C h in a M
e d ie a l U n iv e r s it y
,
C h e n g d u
△ 四 川省科委应 用基础研究基金资助项 目
《巾草 药》19 9 7 年第 28 卷第 3 期 · 1 4 7 ·