全 文 ：人参五灵脂水煎液配伍对免疫低下
、 鼠免疫功能的影响△
湖南中医学院 ( 长沙 41 0 0 07 ) 郭 国华
. 晋耀邦 蒋茂恒 唐忠林
姜玉 芳 武幽 兰 陈建国
摘要 采用腹腔注射环磷酞胺 ( C Y ) 造成小鼠免疫功能低下模型 , 以免疫器官 重 量 , 溶血素抗
体 ( gI M ) 形成 , 腹腔巨噬细胞的吞噬功能为观察指标 。 在分别以人参煎液 , 五灵脂煎液 , 人参
五灵脂混合煎液灌胃给药后发现 , 人参配五灵脂与单用人参或五灵脂均能明显增加小鼠胸腺重量
( 尸 < 0 . 0 1 ) ; 促进溶血素抗体形成 ; 提高腹腔巨噬细胞的吞噬率 和吞噬指数 。 表明人参五灵脂
配伍对单味药的免疫增强作用无明显影响 。
关键词 人参 五灵脂 配伍 禁忌 负痉
人参与五灵脂配伍为中药传统理论 “ 十九畏 ” 内容之一 , 但 历 代 医家素有争议比 ” 〕,
现代临床也时有应用 3t, 4〕 。 我们通过近年的研究发现 , 两 者 配伍后不会造成实验动物急性
和慢性中毒损害 ,现代药理研究资料表 明 ,人参和五灵脂均有一定程度的免疫增强作用〔 5一 8 〕 ,
为进一步 探讨人参五灵脂的配伍实质 , 观察两者在配伍情况下对小鼠免疫低下模型的影响 。
1 实验材料
1
.
1 药品 : 人参 : 为五加科植物人参尸an a 二 加 sn en g C . A . M ey . 的根 。 产 于吉林省抚松
县 。
五灵脂 : 为庸鼠利动 物 橙 足黯 鼠 T r o g o夕r e r u s 二 a n t h i P e s M i l n e 一 E d w a r d s . 的干燥粪
便 , 产于内蒙古赤峰县 。 上述药材均购自湖南省药材公司 , 并由我院鉴定教研室周天达副教
授鉴定 。
环磷酸胺 ( C Y ) : 上海第十二制药厂生产 。 规格 : 2 0 m g /支 , 批号 : 9 2 1 0 0 8 。 左旋咪
哇 : 广东省击,!药工业公司华南制药厂生产 。 规格 : x o o m g /片 , 批号 : 。 1 0 2 0 5 。
1
.
2 制剂 : 人参煎液 : 取人参蒸软切 片 , 用水浸泡 60 m in , 然后用回流 一方法水浴加热煮沸 2
次 , 第 l 次 1 . 5 h , 第 2次 l h 。 纱布过滤 , 合并 2 次滤液 , 水 浴 恒 温浓缩 etJ 10 % ( w / V ) 溶
液 , 置冰箱保存备用 。 使用时以蒸馏水稀释至所需浓度 。
五灵脂煎液 : 取五灵脂 以布包裹 , 浸泡 30 m i n , 加热煮 沸 2次 , 第 1次 l h , 第 2次40 m i n ,
纱布过滤 , 合并滤液 , 恒温水浴蒸发浓缩成 10 % ( W / V ) 溶液 , 置冰 箱备用 。 用时以蒸馏
水稀释至所需浓度 。
人参五灵月剐民合煎液 : 取 10 %人参煎液和 10 %五灵 脂 煎液 按 1 : ]混合 , 加蒸 馏水配
制成所需浓度 。
环磷酞胺 ( C Y ) 溶液 : 取 C Y , 以生理盐水配制成 0 . 2 % ( W / V ) 的溶液 。
左旋咪哩混 悬液 : 取左旋咪哩碾粉 , 用蒸馏水配制成 0 . 5 % ( W / V ) 的混悬 液 。
1
.
3 试剂 : 瑞氏色素 : 广州化 J学试剂厂 , 批号 : 8 3 1 2 0 2 一 5 。
吉氏染色素 : 上海试剂三厂 ,批号 : 8 8 0 6 2 5 , 可溶性淀粉 : J一东台山化工厂 ,批号 : 8 40 7 0 1。
·
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r e s s :
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u o
G
u o h u a
,
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u n a n C o l l e g e o f T C M
,
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△ 国家自然科学基金资助项目
《 中草药 》 1 9 9 4年第 25 卷第 5期 · 2 5 3 ·
5 %鸡红细胞 ( C R B C ) 、 10 %豚鼠血清 , 自制 , 其他试剂 : 均为 A R级 。
1
.
4 动物 : B A L B / C纯系小鼠 、 豚 鼠: 购 自湖南医科大学 。 公鸡 : 市售。
2 方法与结果
2
.
1 对免疫器官重量的影响 : 取 18 ~ 2 4 9/ 卜鼠 70 只 , 雌雄 各 半 , 随机分为 7组 , 每组 10 只 。
①组为正常对照组 ( 下称 N S组 ) ; ②组为免疫低下模型组 ( 下称 C Y 组 ) , ③④⑤⑥组分别
按 o . Zm l/ , 0 9灌服 25 %五灵脂煎液 ( 相 当于 59 / k g生药 , 简称 五 组 ) , 25 %人参煎液 ( 相当
于 5 9 / k g , 简称人组 ) , 25 %人参五灵脂混 合煎液 ( 相 当 于 2 . 5 9k/ g 十 2 . 5 9 / k g , 简 称人五 1
组 ) , 50 %人参五灵脂混合煎液 ( 相当于 g5 / k g + g5 / k g , 简称人五 2组 ) ; ⑦组按 o . Zm l/ 1 g0
灌服 。 . 5 %左旋咪陛混悬液 ( 相当于 。 . 19 / k g , 简称左组 ) , ①②组则代 以等量的N s 。 每 天
x次 , 连续 7 d至给药第 3天起 , ② ~ ⑦组腹腔注射 C Y 液 o . Z m l / 10 9 ( 相当 于 4 Om g / k g ) , ①
腹腔注射等量 N S 。 每天 1 次 , 共 3次 。 于末次给药后 l h , 颈椎脱臼处 死 小 鼠 , 称重 ( g ) 。
剖取胸腺和脾脏 , 以分析天平称湿重 ( m g ) , 按下式计算胸腺 ( 脾 ) 指数 。 用方差分析法进
胸腺 ( 脾 ) 指数 = 胸胸 ( 脾 ) 重 ( m g ) /体重 ( g )
行统计 , 结 果 见 表 l 。 C Y 可 使 小 鼠 胸 腺、 脾 脏重量明显减轻 ( 尸 < 0 . 01 ) , 而人参配五
灵脂低剂组与五灵脂组 、人参组和左旋咪哩组均能明显增加小 鼠胸腺重量 ( 尸 < 0 . 0 1 ) , 人参
五灵脂配伍高 klJ 组还可 明显增加脾脏重量 ( 尸 < 0 . 05 ) , 而单用人参 、 五灵脂作用不明显 ( 尸
> 0
.
05 )
。 在对 胸 腺增重的作用上 , 人参五灵脂配伍与单用人参 、 五灵脂相比无显著 性 差
异 ( 尸 > 0 . 0 5 ) 。
表 1 人参五灵脂配伍对免疫低下小鼠
免疫器官重量的影吻
表 2 人参五灵脂配伍对免疫低下小鼠
溶血素抗体形成的影响
组别 n 胸腺士旨数 ( m g / g ) 组别 浓血素
N S
C Y
五
人
人五 :
人五 :
左
::
::
{:
`
6 3 6 7 士 0 。 3 6 8 0
.
9 87 2 士 0 2 7 2 9入众
.
6 0 7 5 七 0 . 5 9 6 6 * ’
5了2 8 士 0 . 2 1 9 5牵 ”
.
7 2 3 2 丝二 0 . 魂9 2 2如 宁
.
2 9 18 士 0 3 9 9 9
.
6 5 3 2 士 0 . 4 6了 1 ` ,
脾指 数 ( m g / g )
5
。
2 0 2 9 士 0 。 3 8 7 3
3 0 3 9 1 4 士 0 . 2 5 1 6八八
4
.
5 7 0 1 士 1 . 3 9 9 2
魂 . 5 吕4 6 士 0 . 三1 3 9
j
.
3 8 0 1 士 1 . 9 0 1 8
3
.
1 7 8 8 上 1 . 8 3 6 4 创
5 8 2 8 0 丝二 1 . 透5 6 8 申 .
N S
C Y
五
人
人五 1
人五 :
左
::
::
{:
0
. 心2 1 8 士 0 。 1 2 0 4
0
.
0 2 2 4 士 0 . 0 0 9 7 立八
0
.
2 3 0 1 士 0 . 1 13 1 , ,
0
. 泣9 2 6 士 0 . 10 9 4 * ,
0
.
1 9 0 2 上 0 . 0 7 1 3申 .
0
。
2 2 18 士 0 . 0 3 6 8 . 申
0
.
1 3
`
15士 0 . 0 9 0 4 . *
与N S 组 比较 △△P < 0 . 0 1 , 与 C Y组 比较 , P ( 0 . 0 5
二尸 < 0 . 0 1 , 其余各组 间比较均 尸> 0 . 05
与 N S组比较 △`尸 < 0 . 0 1 , 与 C Y组比 较
. 巾尸 < 0 . 0 1
2
.
2 对溶血素抗体形成的影响 : 小 鼠的选取 , 分组 、 给药途径及时间均同实验 2 . 1 。 于给药
第 2天 , 每鼠按 0 . 2 m l腹注 5 % C R B C I次 , 于末 次给药 h1 后 , 摘取眼球取血 . , 按文献方法〔的
测定溶血素 O D值 , 以方差 分析进行统计 , 结果见表 2 。 C Y 可使溶血 素抗体形成 明 显 减 少
( 尸 < 0 . 0 1 ) , 人参五灵脂配伍与五灵脂 、 人参 、 左旋咪 哇均能明显促进溶 血素抗体的形成
( 尸 < 0 . 0 1 ) 。 人参五灵脂配伍和单用人参 、 五灵脂作用相似 (尸 > 0 . 0 5 ) 。
2
.
3 对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影 响 : 18 一 2 4 9小鼠 70 只 , 分组 、 给药方法 和 时 间 同上 ,
于给药第 4天 , 各鼠腹腔注射 0 . 5 %可 溶 性 淀 粉 混 悬 液 o . s m l 、 至 第 8天 , 腹 注 5 % C R B C
o
.
s m l/ 鼠 90 m i n后 , 颈椎脱臼处死 小鼠 , 按文献方法 〔 1。〕涂片 、 染色 、 镜检 , 计算吞 噬百分
率和吞噬指数 。 经方差分析 、 结果见表 3 。 环磷酞胺呈明显降低腹腔巨噬细胞的吞 噬 作 用 。
其吞噬 C R B C的吞噬百分率和吞噬指数与 N S相比均有显著差异 ( 尸 < 0 . 01 ) 。 采用人参五灵
一
2 5 4
-
袅 3 人 , 五员幽吮伍对免皮低下小限旅胜巨曦细脸着性劝挂形晌 ( 王士 50 )
组别 吞噬率 吞噬指数
N S
C Y
五
人
人五 :
人五 :
左
1 0
1 0
1 0
1 0
1 0
1 0
1 0
0
。
5 3 3 0士 0。 0 3 9 4
0
。
3 3 10士 0。 0 3 66八△
0
。
5 1 0 0土 0。 0 17 6二
0
。
5 5 5 0士 0。 0 2 3 7二
0
.
5 18 0士 0。 0 2 9 0二
0
。
5 3 8 0士 0。 0 5 6 9* *
0
。
5 1 40土 0。 0 3 4 7二
1
。
0 48 0士 0。 1 1 2 9
0
。
6 26 0士 0。 0 9 7 1 A△
1
。
1 4 50士 0。 17 9 8二
1
。
14 1 0士 0。 1 8 1 8二
1
。
0 5 8 0士 0 . 10 6 4二
1
。
1 0 0 0士 0。 19 2 4二
1
。
0 7 9 0土 0。 10 7 4二
与 N S组比较 △△尸 <。 。 01 , 与 C Y组比较 . 今尸 < O。 01
脂配伍 , 与单用五灵脂 、 人参或左旋咪哇后 , 均能明显提高免疫低下小鼠吞噬百分率和吞噬
指数 ( 尸 < 0 . 0 1 ) 。 人参五灵脂配伍 , 与单用人参 、 五灵脂相比无显著性差异 ( 尸> 。 . 05 ) 。
3 讨论
在进行免疫实验的研究中 , 细胞免疫中的腹腔巨噬细胞的吞噬功能 , `体液免疫中的溶血
素抗体 ( gl M ) 的形成 , 以及非特异性免疫中的免疫器官重量均为常用的观察指标 。 进行上
述儿项指标观察 , 可以基本反应机体细胞免疫 、 体液免疫和非特异性免疫水平 。 从而体现了
整个机体免疫系统的功能水平〔 5 〕。
本文从免疫学的角度探讨 了人参和五灵脂配伍对两者免疫增强作用的影响 。 实验结果表
明 , 两者按不同剂量配伍 , 均有程度不 同的增加免疫器官重量的作用 。 胸腺增重以人五低组
为优 , 对脾脏则以人五高组尤为明显 , 且超过单用人参或五灵脂的作用 , 它如对溶血素抗体
形成和对腹腔巨噬细胞吞噬功能影响方面 , 两者配伍均有显著促进溶血素抗体形成和增强腹
腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数作用 , 对溶血素抗体形成人五高组尚呈协同作 用 。 上 述 结果
说明 , 人参五灵脂配伍后对 C Y造成的免疫功能低下小鼠的免疫功能 仍 呈明显增强作用 。 实
验结果还表明 , 两者配伍后 , 在对免疫器官 ( 包括胸腺和脾脏 ) 重量 , 溶血素抗体形成 、 腹
腔巨噬细胞的吞噬功能等方面 , 和单用人参 、 五灵脂相比均无明显差别 。 说明两者配伍后 ,
在增强免疫低下小鼠的免疫功能方面不会产生拮抗作用 。 两者配伍后 , 不影响人参或五灵脂
的免疫增强作 用 。
参 考 文 献
何 梦瑶 . 医石扁。 上海 . 上海科技出版社 , 1 9 8 2 . 3 3 9
李时珍 。 本草纲 目校点本 。 北京 : 人民卫生出版
社 , 1 9 8 5 。 7 0 1
高浇山 . 中医杂 志 , x g a 6 ( 5 ) : 6 1
吴仲池 。 河南中医 , 1 0 5 6 ( 3 ) : ` s
刘爱晶 , 等 . 吉林医药 , 1 9 , 2 ( s ) : 5 6
袁文学 . 沈 阳药学院学报 , 1 9 5 6 , 3 ( 3 ) : 1 6 2
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李仪奎 。 中药药理实验方法学 。 上海 : 上海科学
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徐叙云 . 药理实验方法学 . 北京 : 人民卫生出版
社 , 1 9 8 5 。 9 3 7
( 19 9 3
一 0 7一 0 7稿稿 )
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《 中草药 》 1 9 9 魂年第 25 卷第 5期
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( o
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( 上接 第2 5 2页 )
8
4
5
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C a n e e r R
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3 ( 2 )
:
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。
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,
1 9 8 7
,
6 2 1 5 6 3
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7
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·