全 文 ：中药丹皮木心药用价值究研一芍药试的
定性鉴别和含量测定
浙江省中医药研究院 (杭州 31。。 07 ) ` 李益 福 . 李 践 章建民
摘要 通过对芍药贰的定性鉴别和含量测定 , 证实木心同丹皮一样含有芍药试活性成分 , 显 色 反
应 相 同 , T L C图谱相似 。 H P L C法测试芍药贰含量 , 丹皮中含芍药 贰 为 1 . 5 7 4 1% , 木 心 中 为
1
.
2 9 0 2 %
, 经统计学处理 , 两者无显著性差异 , t = 2 . 0 0 2 , t ( 4 ) 0 . 0 5 = 2 . 7 7 6 , p > 0 . 0 5 。
关健词 丹皮 丹皮木心 芍药试 含量测定
牡丹皮尸ae on ` a 川 f了ur lt’ o os a A n dr , 载于 《 神农本草经 》列为中品 , 是常用的清热凉
匹 、 活血化密的药物 。 丹皮炮制最早见于我国梁代陶宏景所撰 的 《 集注 》 中 , 认为 ; “ 皆褪
破 、 去心 ” 。 《 雷公炮灸论 》 、 《 本草纲 目 》 等中药专著 中记载 “ 丹皮木心不入 药 , 需 去
之 ” 。 随着对牡丹皮研究不 断深入 ,对木心的有效成分和药用价值开展了研究 。 芍药贰 ( aP -
e o n if lo r in )是牡丹皮中主要活性成分之一 , 具有镇 痛 、 镇痉 、 镇静 、 抗炎等作用 。 通 过 显
色反应和薄层层析以及高效液相色谱法 , 对根皮木心 中芍药贰进行定性分析和含量测定。
1 样品的采集
样品采集于安徽铜陵凤凰山的牡丹鲜根 , 原植物经寿秉荣同志鉴定 , 为毛莫科芍药属植
物牡丹尸 . : uf f邝 it co : a A n d r的根 。 将牡丹鲜根收集后洗净 , 用木褪击破根皮 , 分离根皮和
木心 , 进 行 自然干燥 , 粉碎过 20 目筛 , 粉末置 P Zo 。干燥器中干燥 , 作为测试用的样品 。
2 定性分析
2
.
1 芍药贰显色反应 : 取根皮和木心样品各 lg , 分别加乙醚 20 m l加热 回 流 10 m in , 取 回
流液 10 m l在水浴上蒸干 , 各加 乙酸配 l m l , 滴入浓硫酸 4 ~ 5滴 , 观察结果 , 根皮和木心提取
物都 出现先显黄色后转为红色 , 最后显紫绿色 。 显色的速度和色泽相同 。
2
.
2 薄层层析
之 . 2 . 1 材料 : 试剂均为分析纯 , 硅胶 G ( 青岛海洋化工厂 ) , 芍药贰对照品 (中国药品生物制
品检定所 ) 。
2
.
2
.
2 样品液制备 : 精确称取根皮和木心样品各 2 9 , 分别用 甲醇 15 o m l置于沙氏提 取 器 内
提取 7 h , 取甲醇液置水浴上减压 回收甲醇 , 残液置于 50 m l容量瓶中加甲醇至刻度。
2
.
2
.
3 对照液制备 : 取芍药贰对照 品 s m g置 5 m l容量瓶内 , 用甲醇溶解并加甲 醇 至 刻度 。
2
.
2
.
4 薄层板制备 : 按 0 . 5 % 比例称取 c M c 一 N a 溶于蒸馏水 中 , 待全部溶解 , 取硅胶 G sg 加
0
.
5% C M C 一N a 1 5m l制成均匀的糊状 , 用制板机制成 l o x Z o e m 、 厚 o . 3m m 薄 板 , 晾 干 后
经 1 10 ℃ 活化 l h , 置干燥器中备用 。
2
.
2
.
5 展开剂 : a ) 正丁醇一冰醋酸一水 ( 7 : :1 2 ) 。 b ) 氯仿一甲醇一乙酸乙醋 ( 4 , 1 , 0 . 5 ) 。
显色剂 : a ) 一。%硫酸溶液 。 b ) 茵香醛 o . s m l , 甲醇 s m l , 浓硫酸 1 . s m l 。
2
.
2
.
6 薄层层析 : 用定容毛细管分别取根皮和木心的样品液以及芍药贰对照液各 10时 分 别
点在同一块薄层板上 , 芍药贰为对照 , 在氨蒸气饱和下 , 用 a ) 展开剂 , 上行展开至 1c5 m ,
.
A d d r e s s
:
L i Y i f
u , Z h e j i
a n g P
r o v i n c i a l C o l l e g e o f T
r a d i t i o n a l C h i n e , e M e d i c a l a n d
M a t e r ia M e d i e a
,
H a n g z h o u
一
5 8 0
.
O
口夕00
Op一曰、 ,ù 。;l
取出挥干 , 喷上 a ) 显色剂 , 置 10 5℃ 恒 温
千燥箱中 10 m in , 对照液色谱相应的位 置
上 出现相同颜色的斑点 。 如图 1 。
用 b )展开剂展开 , 取出晾干 , 喷上 b )
显色剂 , 置 90 ℃恒温干燥箱中 s m i n , 根皮
和木心供试液色谱中 , 在与对照液色 谱 相
应的位置 上出现相同颜色的斑点 。 如 图 l 。
3 用 H P L C法测试芍药试的含最
3
.
1 测定条件: 仪器 : 高效液 相 色 谱 仪
R a d i a l一 P a k 、 C l 。 反相 柱 8 X l o o m m 。
4 2 4型可调紫外检测器 , 7 45 B型 数 据 处 理
机 , U V 一 26 5紫外分光光度计 。
一下门
让创图 1 芍药式下L C 图
1
一根皮 2一木心 -3 芍药试 A 一 展开刻 a B 一展开剂 b
色谱条件 : 流动相 A = 20 纬醋酸液 , B = 乙睛 , 由梯度控制器控制 , A 一 B ( 80 , 2 0 )
流速 l m l /爪 i n , 纸速 o . 2 5m m / m i n , 波长 2 5 4 n m 。
3
.
2 标准液制备 : 精确称取芍药贰对照品 10 m g置于 10 m l容量瓶 中 , 用甲醇溶 解 并定容
。
翘多彭
3
.
3 保留时间 确定 : 标样 l m l确定其保留
时 间 。 结果芍药贰为 6 . 90 m in 。
3
.
4 标样曲线的绘制 : 分别进样 1 、 1 . 5 、
3卜g , 浓 度 为 ( X ) 横坐标 , 峰面积 ( Y ) 为
纵坐标 , 用 U V 一 2 56 绘制曲线 。 如图 2 。
3
.
5 重现性试验 : 每次迸标样量 1 . 6 5 0协g
重变 5次 , 结果又 = x . 6 5 7 % , S = 0 . 0 2 6。
C V 二 1
.
5 8 %
。
3
.
6 回收率试验 : 先测 出5个样品浓度 ,然后
每个 样品 加标样 1件g ,再测其浓度 , 计算回收
率 , 结果又 进 9 9 . 9 9 2%, S = 1 . 3 39 , C V = 左% 。
3
.
7 样品液 制 备 : 精 确 称 取 根 皮 样 品
1
.
0 3 7
、
0
.
9 8 1 8
、
0
.
9 8 3 4 9
, 木心样品 1 . 0 0 26 、 圈 2 标准曲线图
0
.
9 8 7 2
、
1
.
0 3 2 4 9
, 分别加甲醇 Z o o m l , 用沙 氏提取器置水浴上 ( 7 5一 5 5℃ ) 提 取 7 h
提取液过滤 , 减压 回收甲醇 , 将残液移入 10 m l容量瓶中 , :` 甲醇定容 。
3
.
8 含量 测定 : 样品液每次进样为 l曰 , 测定结果根皮中 、 木心中含芍药贰量见表 。
表 样品中芍药试的含 t
取
根皮样品 测定值卜g / “ g
1
。
3 8 4 7八 0 3。 0 7
1
。
7 1 3 8 / 9 8
。
1 8
1
.
6 0 6 0 / 9 5
. 3峨
报告值 g / 1 0 0 9 木心样品 测定值协g /卜 g
1
。
4 1 7 0 / 1 0 0
.
1 6
1 。 15 3 0 / 9 8
。
7 2
1 。 3 4 5 / 1 0 3
。 2 4
报告值 g / 1 0 0 9
。
3 4 3 5
。 7 4 5 6
。
6 0 6 0
。
4 1 4 7
。
1 5 3 0
.
3 0 2 8
反 二 1 。 5 7 3 1 = 0 。 2 0 7 5 戈 二 1 。 2 9 0 2
4 小结
根皮和木心中含芍药贰的量 , 经统计学处理两者无显著性 差 异 , t 二 2 。 0 0 2 t (心) 0 . 0 5 =
2
.
7 7 6
,
P > 0
.
0 5
。
《 中草药 》 19 9 4年第 25 卷第 1 期
( 19 9 3一 l x一 15收稿 )
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5 8飞 ·