全 文 ：五灵脂中类S OD活性物质研究△
山西大学生命科学系 ( 太以 03 0 0 0 6 )陈月开 .周纪 沉 衷勤生“
摘要 测定了五灵脂及其内含物的 S O D活性 , 发现五灵脂的类 S O D 活性物为对热稳定的小分子 ,
p H 4
.
5 一 8 . 5稳定 。 起类 S O D 活性的主要物质为半胧氨酸 。
关键词 五灵脂 类 S O D 半脱氨酸
五灵脂具有行血散痴 、 止痛 、 缓解平滑肌痉挛等功效 , 应用历史悠久〔幻 。 小鼠实 验证
明五灵脂有提高体内 SO D 活性的作用〔 2〕 。 本实验探讨五灵脂内起抗氧化作用 , 使体 内 SO D
活性提高的物质 。
1 材料
药物 : 野生五灵脂 , 由山西大学动物学教授王福麟先生提供 ( T or g o tP er su 郑 fn 从 P se
M i l n e 一 E d w a r d s )
, 自山西省介休县棉 -jIJ 黄土湾采集 。
试剂 : 邻苯三酚 , 三经甲基氨基 甲烷 ( T r i s ) , H C I等均为分析纯 。
仪器 : 72 2型光栅分光光度计 , 上海分析仪器厂生产 。
2 方法
2
.
1 五灵脂水煎去渣 , 上清液浓缩 , 透析后浓缩干燥得内渗千粉和外渗干粉 。
2
.
2 五灵脂 内渗干粉和外渗干粉的氨基酸成分用上海生化研究所氨基酸分析仪测定 ,半胧氮
酸用过甲酸化 法〔 3〕测定 。
2
.
3 类 SO D 活性 测定 明邻苯三酚 自氧化法 〔 4〕 。
3 结果与讨论
3
.
1 测定了五灵脂 内渗干粉与外渗干粉的类 SO D 活性 , 见表 l 。 发现两者均具有较高的类 S O D
活性 。 说明五灵脂内类 S O D 活性 物质为能透过膜 的小分子 。 测定了不同温度和不同 p H 条件
下五灵脂 的类 S O D 活性 , 见夫 2 、 3 。 女现在 25 至 10 ℃处理 s i J 2 5 m in , 类 SO D 活力 变 化 不
大 , 而 p H太高戎 太低均使 i污力下 降 , 注p H 4 . 5一 8 . 5时活力较稳走 ,缎适 p H S . O 。 由此 可知 五
灵脂 内类 SO D 金八性 扮 r贡为泊_ p H 注. 5 ~ 8 . 5范围内 , 对热稳定的小分于勿质 。
表 1 五灵脂内外渗干粉及部分内含物
的类 5 0 户活力
表 2 不 同温度对五灵脂类 5 0叮活性的影晌
温度 。 C 保持日寸间 又m i n ) 类 S O D 活力 ( u / g )
ùón“U八比,`ób八卜U0
电 .土,.一
名 称 代 号 水溶液浓度 类S O D 活力
饱和液
i包和液
4
.
3 7 ;百
饱和液
饱不口液
饱 和液
饱和液
饱和液
8 1 5
.
1 o u / g
1 3 3 5
.
5 1 u 广g
3
.
2 6 u / m l
2
.
o 6 u / m l
2
.
1 5 u / m l
3
.
2 5 u / m l
0
.
8 7 u / m l
0
.
14 u / m l
2 5
5
2 5
1 0
2 5
3 2 4
。
70
3 2 4
.
5 5
3 2 3
。
5 0
2 8 9
, 9 8
3 1 2
.
3 8
3
.
2 荀三酮显 色法得知五灵脂内渗干粉与外
渗干粉均含氨基酸 。 氨 万酸成 仆分析 ,两者均
含 ] 6和 ] 7种氨草淤 。 }月二黔旋氨 咬狂赎水解时
波破坏 , 厂州士甲酸 ; ’匕沁一门定 。 {一内种标准氨荃
工且Wn议了
内渗干粉
外渗干粉
邻苯二酚
苯 甲 酸
尿 啥 咙
间经基苯 甲酸
次黄凛吟
尿 囊 素
.
A d d r e s s
:
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·
3 5 4
.
类S O D活性 , 见表 4 。 测定结呆 , 一 ilj 将其分为 3类 : a ) ,认占性氨牡酞 : 精氨酸 , 胧氨 酸 , 脯
表 3 不同 p H对五灵脂类 S O D活性的影晌 表 4 标准氨基酸的类 5 0 0 活力
P H 类 3 0 D 活力 ( u /也 1) P H 类 S O D 活力 ( u /m l ) 名称 类 S O D 活力 ( u / g )
曰日侧曰“”r妇“
0
一
5
1
。
5
2
。
5
3
。
5
4
。
5
5
。
0
6
。
0
1 3 8
。
7 3
1 3 9
。 8 8
1 4 6
。
2 9
1 5 7
。
7 0
2 67
。 6 9
2 7 5
。
6 9
2 77
。
8 8
7
。
0
8
。
0
8
。
5
9
。
0
1 0
。
0
1 1
。
0
1 3
。
0
24 0
。 9 5
2 8 9
。
6 7
2 5 8
。
0 1
1 9 4
。
0 5
1 4 8
。
5 8
17 7
。
7 0
1 5 4
。
7 3
D L
· 丙氨酸
D L
一 精氮酸
L
一赖氨酸
D L
一天冬氨酸
D L
一半胧氨酸
b L
一胧氨酸
L
一谷氨酸
甘氨酸
L
一组氨酸
L
一脯氨酸
L
一亮氨酸
L
一异亮氨酸
L
一蛋氛酸
L
一苯丙氨酸
L
一 丝氨酸
D L
一苏氛酸
L
一色氨酸
D L
一酩氛酸
L
一撷氨酸
英 文缩写
D L
一
A l a
D L
一
A r g
L
·
L y s
D L
一
A
s p
D L
一
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D L
一
C y s s
L
一
G l
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G l y
L
一互诬i 、
L
一
P r o
L
一
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L
一
1 l e
L
一
M e t
L
一
P h 。
L
一
S e r
D L T h r
L
一
T r y
D L
一
T y r
L
一
V e l
9 8
。
8 1
1 2 5
。
5 7
8 6 3
。
4 8
2 6 0 4 7 1
。
6 3
氨酸 。 b ) 高活性氨基酸 : 半胧氨酸 、 酪氨
酸 、 天冬氨酸 、 谷氨酸和组氨酸 。 其中半眺
氨酸的类 SO D 活力最高 , 达 2G 万 u / g 。 c ) 低
活性氨基酸 : 其余氨墓酸的 类 SO D 活 性 在
9 5
.
8 1一 4 0 0 . s s u / g 之间 , 属低括性氨墓酸 。
由标准氨基酸的类 S O D 活性折算五灵脂内氨
基 酸 的 类 S O D 活性 , 见 尹巧 。 可知五灵 脂
中 5 . 53 % 的 1 6矛甘氨 基 胶 的 类 S O D 活 _力 共
3 7
.
4 8 8 5单位 , 而。 . 5治% 的半吮 氨 胶 则 含
1 50 5
.
53 单位 。 因此认为五灵脂 ; i`类 SO D 活
7 1 4
。
0 8
4 0 0
。
8 8
6 0 2
。
2 8
2 2 5
。
8 3
1 7 2
。
4 2
2 2 4
。
3 2
2 3 8
。
8 8
2 2 8
。
3 2
18 8
。
7 2
3 1 5
。
1 6
6 8 0 9
。
1 2
11 6
。
3 6
表 5 五灵脂中各种氨基酸含通与类 5 0 0 活力
氨基酸
A l
a
A r g
L y s
A s P
C y s s
G l
u
G l y
H 1 5
L e u
1 l e
M e t
P h e
S e r
T h r
T y r
V
e l
合计
e y s 〔 3〕
含最 (% ) 类 S O D 活力 ( u )
0
。
6 9 9 0
0
。
2 3 5 4
0
。
3 0 9 4
0
。
6 5 6 0
0
.
0 1 0 0 3
0
。
7 3 0 5
O
。
7 1 8 1
0
。
0 7 4 5
0
。 吐0 4 7
0
.
2 9 5 6
0
。
0 8 4 8
0
。
2 5 9 1
0 . 1 9 1 4
0
。
3 3 5 3
0
。
1 5 7 0
0
.
3 6 9 9
5
.
5 3%
0
.
5 7 8 %
0
。
6 2 8 8
。
3 8 8 5
。
5 9 6 5
5
。
2 1 6 0
8
。
8 7 7 0
0
。
4 4 8 7
0
。
9 1 3 6
0
。
5 0 9 7
0
。
1 9 0 3
0 。 6 18 9
0
。
3 4 6 8
0
。
6 3 2 7
1 0
。
6 9 0 3
0 。 4 3 0 4
3 7
。
4 8 8 5
1 5 0 5
。
5 3
性主要由半肤氨酸引起 。
3
.
3 按文献〔 5 〕测定了部分五灵脂内活性 物
质的关 S O D 活力见表 l 。 结果表明 : 体外具
有明显抑制皿小板聚集活性的邻苯二酚 ( I ) ,
苯甲酸 ( I ) , 尿嘀绽 ( W ) , 间经基苯甲
酸 ( M ) 等均荃干上不具有类 S O D 活性 , 其
中邻苯二酚还具有促进 O盲生成的作用 。
致谢 : 山 西 大学生命科学系王福 麟教授
给予 热情指导与 帮助 。
参 考 文 献
1 高 士贤 , 等 . 动 物学杂志 , 1 9 7 7 , 峨: 2 。
2 陈月开 , 等 . 中国生化药物杂志 , 19 9 4 , 1 5 ( 3 )
4 潘家秀 , 等 . 蛋白质 , 多肤及氨基酸的显色反
应 . 北京 : 科学出版社 , 1 9 6抓 78
4 袁勤生 , 等 . 中国药学会生化药物学会论文集 .
1 9 9 1
5 杨方
1 3
夏J夕` , 等 . 药学与川 {是, z , 87 , 2 2 ( 1 0 ) : 7 6 5
. . . . . . . . . . . . . . . 口 . 曰 . . . ` ` . . . . . . . . . 健 二 ` . . 月` . . . 0 . . . . 翻
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. .
( 1。。 4一。 7一。 7 收稿 )
《 中草药 》 1 0 9盯卜第 2 6卷第了期 . 3 5 5