全 文 ：· 药材 ·
铁皮石解人工种子制作流程及发芽研究
中国医学科学院药用植物研究所 (北京 1 0 0 0 9 )4 郭顺星 每 曹文琴 张 集慧 徐锦堂
摘 要 以原球茎为材料 , 建立了铁皮石解 D翻d or b iu m ,a n dl d “ m 人工种子的初步制作流程 。 以
改良 12/ M S培养基各种成分附加蔗糖为人工胚乳的 人工种子存活率 、 发芽率 、 成苗最好 , 其发芽
率可达 80 % 以上 。
关键词 铁皮石解 人工种子 发芽
近年来利用植物体细胞胚制作人工种子
的研究 , 已成为植物繁殖研究的一个重要领
域 。 植物人工种子作为一项新兴的生物工程
技术 ,在植物培养材料的快速繁殖 、 保藏 、 运
输等方面 ,展示了广阔的应用前景 。我国在植
物 人工 种 子 的 研 究方 面 也 取得 了较大 进
展 〔`一 3〕 , 已在粮食 、 蔬菜及药用植物方面进行
了研究和应用 。 铁皮石斜是兰科中名贵药用
植物 , 自然条件下生长缓慢 ,试管无菌移栽成
活率低 。本试验以原球茎为材料 , 初步研究了
经包埋制成人工种子流程及在半 自然条件下
的萌发特点 ,为铁皮石解的快速繁殖 、 扩大生
产提供参考 。
1 材料和方法
铁皮石解 刀` n d or bl u m : an dl d u切 系体细
胞培养过程中形成的原球茎 ,选未形成苗 、 健
壮 、 个体大小基本一致的原球茎为实验材料 。
人工种子的种皮成分 为 3 %海藻酸钠和
2% C a CI
, ; 人工胚乳的组成为改 良的 1 2/ M S
培养基各种成分加其它物质 , 根据要求具体
设置以下处理 : a) 仅用 3%海藻酸钠包埋 (对
照 ) ; b )改 良的 1 2/ M S 培养基为基本培养基 ;
c ) 基本培养基 + Zm g / L G A 3 ; d) 基本培 养基
+ 3%蔗糖 ; e )基本培养基十 3% 麦芽糖 。
分别取实验各处理按 3% 比例加入海藻
酸钠粉末 ,混 合加热使成溶胶状态即包埋剂 。
灭菌冷却 后 ,将生长一致 的铁皮石解原球茎
与包埋剂分别混合。 然后用予制好的吸管分
别取带原球茎的液滴 (每滴 1 粒原球茎 ) , 滴
入 2% C a C I: 溶液中 ,放置 1 5一 Z om i n 即可形
成白色半透明的包埋丸 。 将包埋力取出放入
无菌水中浸洗 3一 4 次 (约 1 5 m i n ) 。
将人工种子分 别置于两种器皿 中培养 :
一是铺有海绵的培养皿中 ,加适量无菌水 , 然
后将适量包埋丸放 入皿 中海绵上 , 每处理重
复 3 皿 ;二是将包埋丸 适量 置于含 1%的琼
脂胶三角瓶中 , 每处理重复 2 瓶 。操作完后将
上述 4 瓶置 25 C , 1 2h d/ 光照下进行萌发试
验 。
2 结果
2
.
1 不同处理对人工种子成活率的影响 : 在
同一水平上 , 即原球茎大小 、 健壮基本一致的
情况下 , 铁皮石解人工种子胚乳 附加不同物
质对种子存活率有较大影响 。 从表 1 可以看
出 ,培 养 3 d4 时存活率 以基本培养基 + 蔗糖
处理为最好 ,顺序为基本培养基 + 蔗糖 (存活
率 95 . 5% ) > 基本培养基 + 麦芽糖 ( 64 % ) >
对照 ( 42 % ) > 基本培养基 ( 2 % ) 。 除个别培
养皿或瓶污染杂菌外 , 采用转养皿 、 瓶培养人
工种子其成活率差异不大 (表 1 ) 。
2
.
2 不同处理对人工种子发芽率的影响 :从
表 2 可以看出 ,不加任何营养仅用海藻酸钠
包埋 的原球茎也可发芽 , 只要给予适当环境
条件 ,铁皮石解原球茎容易萌发 , 但进一步生
`
A d d
r e s s : G u o S h
u n x i n g
,
I n s t l t u t e o f M e d l e l n a l P la n t D e v e lo p m e n t
,
C h i
n e s e A e a d
e m y o f M
e d一e a l S e i -
e n e e s , B e ij in g
《中草药 》 19 9 6 年第 27 卷第 2 期 · 1 0 5 .
表 1不同处理对铁皮石解人工种子存活率的影响
播 种 培养 0 1 d培养 1 6d培养 7 2d培养 3 4 d
处理
数 (粒 )成 活数
(粒 )
成活率
(% )
成活数
(粒 )
成活率
(% )
成 活数
(粒 )
成活率
(% )
成活数
(粒 )
成活率
(% )
对照 1 8 3 4 1 60 3皿
3 540 5 7
.
3 54 64
.
21 8 3 4
.
0 I R凡 0 . 2
84 24
产卜」 9 4 2
ǎ了 7.一了眨」
; :
.
;; :
,妇J任厂LJQ9一Q乙0é,土n乃ù卜é连`O八
.…,臼亡J月改`八j只éǎ了月了4243917n门八J特
勺J工JQú1`7OJQén入ù
基本培养
基十 蔗糖
基本培养
基 + 麦芽糖
基本培养
基 + G A 3
):
.
;
Q曰1.ǎhC
.…勺ù1.`任厂」ē洲OéO曰7J
叹UQó
;:
`
: ;;
.
: ::
.
;
4 2
.
1
9 5
.
5
7 5
.
9
5 3
.
3
6 4
.
1
3 7
.
5
2 2
.
2
2 2
.
0
1 8
.
2
住`二八j月让乃n斗ō了ūó口勺」1油斗q曰八jCl月l孟浩咔Q划庄孟1八乃八ho口R夕亡门,1月4q一斗八jCjl,.`1Q口`江n冲rQJ八乃叮了,ll角任9白连
`八舀q曰4皿瓶
瓶 2 2 72 . 7 5 9 5 0 . 0
注 : 人工 种子 以原球茎变黑褐色为死亡统计
表 2 不同处理对人工种子发芽率的影响
播 种 培养 10 d 培 养 1 6d 培养 2 7 d 培养 3 4 d
处理 数 (粒 ) 发芽数
(粒 )
发芽率
( % )
发芽数
(粒 )
发芽率
( % )
发芽数
(粒 )
发芽率
( % )
发芽数
(粒 )
发芽率
(% )
皿 5 3 1 1 20 . 8 16 3 0 . 2 1 6 30 . 2 16 30 . 2对照
二口一ó以亡J日站10
.
5
2
.
4 誓’了0曰1n冲1盆Q口4OJ亡O“6IJ斗,éQ月盈J4瓶皿基本培养基 :::;
.136ù336
门曰6940201846
3肠19814632715146
ù匀八匕0X
.可
;
口任亡Jgé0ēj
11
.
9目
1160774
基本培养
基 + 蔗糖
拭 ;: . :
基本培养基 + 麦芽糖
基本培养
基 + G A 3
;;
.
;
瓶 2 7 14 . 8
5 8
.
6
3 3
.
3
2 8
.
2
2 9 2
2 2
.
2
2 6 3
9
.
8
13
.
6
79 5
6 5
.
6
4 0
.
0
2 8
.
2
2 9
.
2
2 2
.
2 2 2
.
2
长受到限制 。 随着培养时间的延长 ,基本培养
基 + 蔗糖的人工种子发芽率逐渐 增高 , 3 d4
时可达 80 %以上 。 以基本培养基制成的人工
种子发芽率最低在 13 %左右 。 从不同培养器
皿对发芽率 的影响分析 , 铺有海绵的培养皿
有利于铁皮石解人工种子 的发芽 , 可能是水
分和人工种子直接接触及空气充足的缘故 。
从 G A 。 对人工冲子萌发的作用看 ,激素对种
子萌发无促进作用 , 因为该处理的人工种子
发芽率 比无任何营养的对照种 子发芽率还
低 。
2
.
3 不同处理的人工种子萌发形成苗的观
察 : 铁皮石解人工种子较易萌发 ,但不同处理
对萌发后形成苗的影响较大 。 以叶片数和叶
片长度为指标 (表 3 ) , 基本培养基 + 蔗糖 处
理的人工种子 ,不但萌发率高 ,而且成苗整齐
一致 。 培养 1 d0 左右 ,萌发的原球茎可形成 1
一 2 片叶 ; 培养 16 d 时 , 叶片数在 3 片以上 ,
34 d 时叶片最长可达 6m m 以上 。 除上述处理
以及基本培养基 + 麦芽糖制成的人工种子有
1一 2 片叶形成 外 , 其余处理均形 成幼苗数
少 、 叶片生长缓慢 。
表 3 培养 3d4 时不同处理的人工种子
萌发后叶长观察
观察
项 [J
叶长 ( m m )
又寸旦食
2
.
0
基本培 基本培养
养基 基 + 蔗糖
1
.
5 5 3
基本培养 基本培养
基 + 麦芽糖 基 + G A 3
3
.
5 2 3
注 : 叶长取各叶 片长度的平均度
3 讨论
从实验结果分析 , 铁皮石解人工种子制
做简单 、 且较 易萌发 。但人工胚乳成分的差异
·
1 0 6
·
仍对其存活 、 萌发及幼苗生长有较大影响 。从
实验结果可以看出 , 蔗糖对铁皮石解 人工种
子的发芽和成苗有利 ,这为较大规模培养及
深入研究铁皮石解人工种了打下了基础 。 如
前所述本试验仅是对该种药用植物人工种子
的初步探索 , 仍有许多问题需要深入研究 , 如
获得同步生长的原球茎 ; 防止含糖等营养物
质的人工胚乳所引起人工种子污染杂菌 ;控
制人工种子 内营养物质的流失 ;培养条件及
发芽后的管理等 。
参 考 文 献
l 郭仲深 , 等 . 植物学通报 , 1 9 5 5 , s ( 1 ) : 5
2 李修庆 . 植物学报 , 1 9 8 9 , 3 1 ( 9 ) : 6 7 3
3 柯善强 , 等 . 植物学通报 , 1 9 8 9 , 6 ( 1 ) : 16
4 郭顺星 , 等 . 中草药 , 2 9 9 0 , 2 1 ( 8 ) : 2 9
5 郭顺星 , 等 . 中国医学科学院学报 , 19 1 , 1 3 ( 1 ) : 46
( 1 9 9 4
一
0 8一 1 5 收稿 )
S t u d i e s o n t h e P r e P a r a t i o n P r o e e s s a n d G e r m i n a t i o n o f W h i t
e D e n d r o b i u m
( D ` n d r o从 u m c a n d i d u m ) A r t i f i e i a l S e e d s
G
u o
Sh
u n x i n g
,
C
a o
W
e n q in
,
X
u Ji n t a n g
P r o e e s s f o r t h e p r e p a r a t io n o f
a r t if ie i a l s e e d s o f D e n d or b i
u m c a n d i d
u m w a s e s t a b l i
s
h
e d b y
u s i n g t h
e 5 0 -
m a t ie e m b r y o s o f t h i , p l a n t
.
E x p e r im e n t a l r e s u lt s h o w e d t h a t l / ZM S m
e
d i
u m s u p p le m e n t e d w i t h s u e r o s e w a s
s u i t a b l
e t o in d
u e e g e r m i n a t i o n a n d s e e d l in g o f D
.
c a n d i d u m a r t i f i
e ia l
s e e
d
s
.
T h
e g e r m i n a t i o n r a t e w a s o v e r
8 0%
.
川 有 间 种 作 物 试 验
四川中医药研究院药物种植研究所 (南川 6 4 8 4 0 8) 孟 中贵 带 谢德明 张兴单
黄正方 韦会平
摘 要 介绍了川夸与大蒜 、 窝笋 、 小麦等作物进行间作的试验情况 ,认为川苟与大蒜间作效果最
好 , 可使土地利用率提高 26 % 一 28 % ;川芍与窝笋 间作也可使土地利用率提高 20 % 一 2 . 5% )jI I
芍与小麦间作效果不理想 。
关键词 川芍 间作 试验
川芍 L i g u s t i c u m c h u a n 二 i o n g H o r t . 为伞
形花科多年生草本植物 , 以地下块茎入药 ,能
活血行气 , 祛风止痛 、 治头痛 、 胸肋痛 、 经闭腹
痛 、 风湿痛 、 跌打损伤诸症 ,为川产道地药材 ,
享誉国内外 。 它主产于四川都江堰市 、 崇庆
县 、 新都县等地 , 常年栽 培 面 积 .2 0 01 只
l o s h m
Z 以上 ,是平坝地区栽培面积最大的药
材之一 。 但传统的栽培方法 (净作 )土地利用
率低 、 生产产值不高 , 限制 了川芍生产发展 。
为解决这些问题 。 我们在 1 9 90 一 1 9 9 2 年按照
间作栽培的原理和技术原则 ,开展了川芍间
作试验 ,结果如下 。
l 试验设计
1
·
1 间种作物的选择 :按照间作栽培的原理
和要求我们先后选择 的间种作物有秋黄豆
(成豆 4 号 ) 、 大蒜 (地方种 ) 、 窝笋 (地方种 ) 、
小麦 (绵阳系 )等 。
.1 2 田间种植方式 : 按传统厢式栽培 , 厢面
上按 .2 5 , 1 和 3 , 1模式分宽窄行 ,窄行 内
种川芍 ,宽行内间种作物 。川芍种植密度按净
作 2 . 5 : 1 和 3 : 1 模式种植密度不变 , 间种
作 物 在 宽 行 中 单 行 窝 播 , 株 距 为 大 蒜
A d d
r e s s :
M
e n g Z h
o n g g u i
,
I n s t i t u t e o f M
e
d i
e in :
d i t i
o n a
l C h l
n e s e
M
e d ie a l
a n d M
a t e r ia M e d ie a
,
N a n e h
u a n
《中草药 》 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 2 期 · 1 0 7 ·