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Analyses of genetic diversity among 65 wild Camellia oleifera based on ISSR and RAPD

65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR和RAPD标记分析



全 文 :广 西 植 物 Guihaia May2014,34(3):419-425           http://journal.gxzw.gxib.cn 
DOI:10.3969/j.issn.1000G3142.2014.03.025
考安都,王述贵,王艳芹,等.65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR和RAPD标记分析[J].广西植物,2014,34(3):419-425
KaoAD,WangSG,WangYQ,etal.Analysesofgeneticdiversityamong65wildCamelliaoleiferabasedonISSRandRAPD[J].Guihaia,2014,34(3):
419-425
65份野生油茶种质遗传多样性的
ISSR和RAPD标记分析
考安都1,王述贵1,王艳芹1,徐 洲1,周永红2,丁春邦1∗
(1.四川农业大学 生命科学与理学院,四川 雅安625014;2.四川农业大学
作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室,成都611130)
摘 要:利用ISSR和RAPD标记,对名邛台地野生油茶种质进行遗传多样性分析.从60条简单重复序列引
物中筛选出16条引物,在65份样品中共扩增出213条带,其中多态位点为203个,多态位点百分率为
95􀆰31%;从30条寡居核苷酸引物中筛选出8条引物,共扩增出105条带,其中多态性位点94个,多态位点百
分率为89.52%.结果表明:名邛台地野生油茶种质具有较丰富的遗传多样性,ISSR和RAPD标记可以应用
于油茶种质遗传多样性分析.
关键词:油茶;遗传多样性;ISSR;RAPD;聚类分析
中图分类号:Q949.93  文献标识码:A  文章编号:1000G3142(2014)03G0419G07
Analysesofgeneticdiversityamong65wildCamelia
oleiferabasedonISSRandRAPD
KAOAnGDu1,WANGShuGGui1,WANGYanGQin1,XUZhou1,
ZHOUYongGHong2,DINGChunGBang1∗
(1.CollegeofBiologyandScience,SichuanAgriculturalUniversity,Ya’an625014,China;2.Key
LaboratoryofCropGermplasmResourcesandGeneImprovement,MinistryofEducation,
SichuanAgriculturalUniversity,Chengdu611130,China)
Abstract:Thegeneticdiversityamong65wildCamelliaoleiferafromMingqiongplatformwerediscussed.213loci
wereidentifiedwith16simplesequencerepeatprimersscreenedfrom60primers,outofwhich203lociwerepolyG
morphicandthepercentageofpolymorphicbandswas96.31%;105lociwereidentifiedwith8oligonucleotideprimers
screenedfrom30primers,outofwhich94lociwerepolymorphicandthepercentageofpolymorphicbandswas
89.52%.TheresultsshowedthatISSRandRAPDmarkerscouldbeusedingeneticdiversityanalysis,C.oleifera
hadahighlevelofgeneticdiversity.
Keywords:Camelliaoleifera;geneticdiversity;ISSR;RAPD;clusteranalysis
  油茶(Camelliaoleifera)属山茶科(Theaceae)
山茶属(Camellia)常绿灌木或小乔木,是我国南方
重要的木本油料树种,也是世界四大木本油料作物
之一(庄瑞林,2008).茶油是从油茶籽中提取的一
种高级食用油,主要由棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸
组成,其中不饱和脂肪酸以油酸、亚油酸为主,含量
收稿日期:2013G09G29  修回日期:2013G11G10
基金项目:四川省科技厅科技支撑计划项目(2011SZ0283)
作者简介:考安都(1986G),女,山东烟台人,硕士,研究方向为植物资源学,(EGmail)kaolalaG156369@163.com.
∗通讯作者:丁春邦,博士,教授,主要研究方向为植物资源评价与利用,(EGmail)dcb@sicau.edu.cn.
高达85%,有“东方橄榄油”的美誉(李克瑞等,
1984).茶油除可食用外,还可作为原料应用于肥
皂、凡士林、生发油、机械润滑油以及医药上制作青、
链霉素油剂(马力等,2009).我国油茶资源主要分
布于湖南、江西、广西、浙江、福建、四川等17个省
(区),其中,湖南、江西、广西三省分布面积最大(胡
芳名等,2006).
分子标记能够直接从DNA水平来揭示物种的
差异,更为准确、直观的描述物种的遗传多样性,而
且不受季节、环境的限制,稳定性高.ISSR 和
RAPD标记技术不需要预先获知序列信息,操作简
便,重复性高,稳定性好,多态性丰富,作为常用的分
子标记技术(Johnetal.,1990a,b),已广泛应用于
植物种质资源的遗传多样性评价(潘文等,2012;马
朝芝等,2003;汪琼等,2013).目前我国对油茶的研
究大多在栽培与常规育种以及茶油加工等方面,对
遗传多样性评价的研究较少,而且主要集中于油茶
无性系遗传多样性的分析.王保明等(2008)采用
ISSR分子标记技术对23个油茶无性系进行遗传标
记分析,结果显示油茶无性系多态性比率为68.6%,
相似系数分布较广;黄永芳等(2006)通过18 条
RAPD引物对90份油茶优良无性系种质进行鉴别,
DNA多态位点数为95.11%,得出油茶无性系研究
材料遗传背景复杂;温强等(2008)采用ISSR标记
方法对25个油茶无性系进行分子鉴别,多态性比率
达87.96%.
名邛台地(四川省境内的蒲江、邛崃、名山、雅安
一带)有较为丰富的野生油茶资源,但由于长期处于
原始状态,野生资源没有得到合理的开发利用与保
护.本文利用ISSR和RAPD分子标记技术分析名
邛台地野生油茶种质遗传多样性,为开展油茶良种
选育与栽培提供一定的理论依据.
1 材料与方法
1.1样品采集
实验材料采自四川名邛台地(表1).采摘当年
生的嫩叶,放入冰盒带回实验室洗净、晾干,保存于
G80℃超低温冰箱待用.
1.2实验方法
1.2.1总DNA的提取 本文采用改良后的CTAB
法提取基因组DNA,通过0.8%琼脂糖凝胶电泳和
紫外分光光度计检测DNA浓度和纯度,用1×TE
稀释至100ng/μL,放入G20℃冰箱中保存备用.
1.2.2PCR的扩增与检测 (1)ISSR的PCR扩增与
检测:C1000PCR仪上进行PCR扩增,25μL的反
应体系包括2×PCRMix12.5μL,DNA模板溶液
1.25μL,引物1.25μL(10pmol/L),ddH2O补足至
25μL.PCR程序:94℃预变性3min,94℃变性
35s,58℃退火45s,72℃延伸90s,35个循环,72
℃保温7min,4℃保存.PCR产物在1.5%的琼脂
糖凝胶中电泳,GoldView(GV)染色,凝胶成像系
统拍照.(2)RAPD 的 PCR 扩增与检测:C1000
PCR仪上进行PCR扩增,25μL的反应体系包括
2×PCRMix12.5μL,DNA模板溶液1μL,引物
1μL(10pmol/L),ddH2O补足至25μL.PCR程
序:94℃预变性3min,94℃变性50s,36.4℃退火
45s,72℃延伸90s,40个循环,72℃保温7min,4
℃保存.PCR产物在1.5%的琼脂糖凝胶中电泳,
GoldView(GV)染色,凝胶成像系统拍照.
1.2.3引物筛选 筛选北京华大基因测序公司设计
生产的ISSR引物60个,上海英潍捷基贸易有限公
司设计生产的RAPD引物30个,选取其中扩增条
带丰富,重复性好的16个简单重复序列引物(表2)
和8个寡聚核苷酸引物(表3)进行扩增.
1.3数据分析
电泳图谱中,强带和弱带均记为“1”,无带记为
“0”,将ISSR和RAPD扩增结果转化为二元数据,
计算多态性.应用 NTSYSGpc(Version2.10e)计算
样品间的遗传相似系数和遗传距离,按照 UPGMA
进行聚类分析.
2 结果与分析
2.1ISSRGPCR扩增结果
16条ISSR引物共扩增出213个位点,平均每
条引物扩增出13.3个位点,其中多态性位点203
个,多态位点百分率(Percentageofpolymorphic
sites,PPS)为95.31%(表2).扩增条带大小集中在
250~2000bp之间,其中引物UBC881扩增出的多
态性位点最多为18个.图1显示了引物 UBC835
的扩增结果.
2.2RAPDGPCR扩增结果
8条RAPD引物共扩增出105个位点,平均每
条引物扩增出13.1个位点,其中多态性位点94个,
多态位点百分率为89.52%(表3).扩增条带大小
024 广 西 植 物                  34卷
表1 实验材料
Table1 ListofmaterialsusedforISSRandRAPDanalysis
编号
No.
采集地 Locality 叶型 Leaftype
编号
No.
采集地 Locality 叶型 Leaftype
1 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
倒卵形
Obovate
34 天全县紫石乡
Zishitownship,Tianquancounty
长椭圆形,广椭圆形
Longoval,Wideoval
2 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
椭圆形
Eliptical
35 天全县紫石乡
Zishitownship,Tianquancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
3 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
椭圆形
Eliptical
36 天全县紫石乡
Zishitownship,Tianquancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
4 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
广椭圆形
Wideoval
37 天全县紫石乡
Zishitownship,Tianquancounty
椭圆形,长椭圆形
Eliptical,Longoval
5 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
倒卵形,长椭圆形
Obovate,Longoval
38 天全县紫石乡
Zishitownship,Tianquancounty
椭圆形
Eliptical
6 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
倒卵形,椭圆形
Obovate,Eliptical
39 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
椭圆形,卵形
Eliptical,Ovate
7 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
广椭圆形
Wideoval
40 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
卵圆形
Ovoid
8 蒲江县成佳镇
Chengjiatown,Pujiangcounty
狭椭圆形
Narrowoval
41 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
长椭圆形,卵形,倒卵形
Longoval,Ovate,Obovate
9 名山县联江乡
Lianjiangtown,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
42 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
10 名山县联江乡
Lianjiangtown,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
43 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
11 名山县联江乡
Lianjiangtown,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
44 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
12 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
45 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
13 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
46 名山县中峰乡
Zhongfengtownship,Mingshancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
14 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
椭圆形,狭椭圆形,倒卵形
Eliptical,narrowoval,obovate
47 雨城区凤鸣乡
Fengmingtownship,Yuchengcounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
15 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
48 雨城区凤鸣乡
Fengmingtownship,Yuchengcounty
椭圆形,卵形,倒卵形
Eliptical,Ovate,Obovate
16 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
倒卵形
Obovate
49 雨城区凤鸣乡
Fengmingtownship,Yuchengcounty
广椭圆形
Wideoval
17 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
50 雨城区凤鸣乡
Fengmingtownship,Yuchengcounty
椭圆形
Eliptical
18 名山县茅河乡
Maohetownship,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
51 名山县车岭镇
Chelingtown,Mingshancounty
长椭圆形,椭圆形
Longoval,Eliptical
19 名山县黑竹镇
Heizhutown,Mingshancounty
广椭圆形,倒卵形
Wideoval,Obovate
52 名山县车岭镇
Chelingtown,Mingshancounty
长椭圆形,椭圆形
Longoval,Eliptical
20 名山县黑竹镇
Heizhutown,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
53 名山县车岭镇
Chelingtown,Mingshancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
21 名山县黑竹镇
Heizhutown,Mingshancounty
广椭圆形
Wideoval
54 名山县车岭镇
Chelingtown,Mingshancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
22 名山县黑竹镇
Heizhutown,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
55 名山县车岭镇
Chelingtown,Mingshancounty
椭圆形,狭椭圆形,倒卵形
Eliptical,Narrowoval,Obovate
23 名山县黑竹镇
Heizhutown,Mingshancounty
椭圆形,倒卵形
Eliptical,Obovate
56 名山县解放乡
Jiefangtownship,Mingshancounty
长椭圆形,椭圆形
Longoval,Eliptical
24 蒲江县甘溪乡
Ganxitownship,Pujiangcounty
椭圆形
Eliptical
57 名山县解放乡
Jiefangtownship,Mingshancounty
长椭圆形,椭圆形
Longoval,Eliptical
25 蒲江县甘溪乡
Ganxitownship,Pujiangcounty
狭椭圆形,倒卵形
Narrowoval,Obovate
58 名山县解放乡
Jiefangtownship,Mingshancounty
椭圆形
Eliptical
26 蒲江县大塘镇
Datangtown,Pujiangcounty
狭椭圆形,卵圆形
Narrowoval,Ovoid
59 名山县双河乡
Shuanghetownship,Mingshancounty
椭圆形,倒卵形
Eliptical,Obovate
27 蒲江县大塘镇
Datangtown,Pujiangcounty
广椭圆形,卵圆形
Wideoval,Ovoid
60 雨城区沙坪镇
Shapingtown,Yuchengdistrict
广椭圆形,椭圆形,倒卵形
Wideoval,Eliptical,Obovate
28 邛崃市临邛镇
Linqiongtown,Qionglaicity
椭圆形,长椭圆形
Eliptical,Longoval
61 雨城区沙坪镇
Shapingtown,Yuchengdistrict
广椭圆形,广倒卵形
Wideoval,WideObovate
29 邛崃市临邛镇
Linqiongtown,Qionglaicity
广椭圆形,倒卵形
Wideoval,Obovate
62 雨城区沙坪镇
Shapingtown,Yuchengdistrict
广椭圆形,倒卵形
Wideoval,Obovate
30 邛崃市临邛镇
Linqiongtown,Qionglaicity
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
63 雨城区大兴镇
Daxingtown,Yuchengdistrict
广椭圆形,椭圆形,倒卵形
Wideoval,Eliptical,Obovate
31 名山县百丈镇
Baizhangtown,Mingshancounty
长椭圆形,卵圆形
Longoval,Ovoid
64 雨城区大兴镇
Daxingtown,Yuchengdistrict
广椭圆形,倒卵形
Wideoval,Obovate
32 名山县百丈镇
Baizhangtown,Mingshancounty
长椭圆形,倒卵形
Longoval,Obovate
65 雨城区大兴镇
Daxingtown,Yuchengdistrict
长椭圆形
Longoval
33 名山县百丈镇
Baizhangtown,Mingshancounty
倒卵形,椭圆形
Obovate,Eliptical
1243期       考安都等:65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR和RAPD标记分析
图1 引物UBC835扩增的ISSR图谱
Fig.1 ISSRamplifiedbyprimerUBC835
集中在500~2000bp之间,其中引物S39和S256
扩增出的多态性位点最多,为17个.图1显示了引
物S285的扩增结果.
2.3野生油茶种质聚类分析
2.3.1ISSR标记聚类分析 对16个引物的扩增结
果进行聚类分析,绘制聚类图(图3).65份材料间
遗传相似系数在0.63~0.92,表明这些材料之间存
在一定的遗传差异.材料6和7之间的相似系数最
大为0.92,说明两者遗传差异最小.材料14和60
之间的相似系数最小为0.59,说明两者遗传差异最
大.在遗传相似系数为0.651时将65份样品材料
划分为5个类群,结果显示采自邛崃市临邛镇的
28、29、30样品没有完全聚在一起,表明油茶遗传变
异与地理分布未呈现明显的相关性.
2.3.2RAPD标记聚类分析 由聚类图可知(图4),
65份野生油茶种质之间的遗传相似系数分布在
0.59~0.98,说明这些材料之间存在一定的遗传差
异.材料6和7之间的相似系数最大为0.92,说明
图2 引物S285扩增的RAPD图谱
Fig.2 RAPDamplifiedbyprimerS285
两者遗传差异最小.材料1和12之间的相似系数
最小为0.63,说明两者遗传差异最大.在遗传相似
系数为0.708时,将65份材料分为5个类群.结果
显示,材料1、2、9、15、21、29、50、10、51、65聚在一
起,叶型椭圆形4个、倒卵形2个、广椭圆形3个、长
椭圆形1个,表明油茶种质的遗传变异与表型和地
理分布没有明显的相关性.
2.3.3ISSR和RAPD标记的综合分析 基于ISSR
和RAPD两种分子标记扩增65份名邛台地野生油
茶种质,通过样品的综合数据计算遗传距离和遗传
相似系数,遗传相似系数为0.62~0.93,表明这些材
料之间存在一定的遗传差异.在相似系数为0.668
时,将65份供试样品划分为5个类群(图5).来自
名山县的35份材料聚在第一类群19份,第二和第
三类群各7份,第四和第五类群各1份;蒲江县的
12份材料全部聚在第一类群;雨城区的10份材料
聚在第一类群3份,第二类群6份,第三类群1份;
天全县的5份材料聚在第一类群3份,第三和第四
224 广 西 植 物                  34卷
表2 ISSR扩增结果
Table2 ResultsofISSRamplification
引物
Primer
序列(5′→3′)
Sequence(5′→3′)
退火温度 (℃)
Annealing
temperature(%)
总条带数
No.ofbands
recorded
多态性条带数
No.of
polymorphicbands
多态位点百分比
PPS
(%)
UBC823 TCTCTCTCTCTCTCTCC 55.5 14 13 92.86
UBC824 TCTCTCTCTCTCTCTCG 50.8 17 17 100
UBC825 ACACACACACACACACT 56.0 11 10 90.9
UBC826 ACACACACACACACACC 55.5 13 13 100
UBC827 ACACACACACACACACG 55.5 11 10 90.9
UBC829 TGTGTGTGTGTGTGTGC 56.0 12 12 100
UBC835 AGAGAGAGAGAGAGAGYC 58.0 16 15 93.75
UBC836 AGAGAGAGAGAGAGAGYA 56.3 10 9 90
UBC855 ACACACACACACACACYT 54.0 14 13 92.86
UBC856 ACACACACACACACACYA 52.0 12 12 100
UBC864 ATGATGATGATGATGATG 50.3 7 5 71.43
UBC873 CACAGACAGACAGACA 52.0 13 13 100
UBC880 GGAGAGGAGAGGAGA 50.0 13 12 92.31
UBC881 GGGTGGGGTGGGGTG 52.0 18 18 100
UBC889 DBDACACACACACACAC 50.0 8 8 100
UBC895 AGAGTTGGTAGCTCTTGATC 54.0 11 10 90.9
 Y=(C,T),B=(C,G,T),D=(A,G,T).
图3 ISSR聚类分析图
Fig.3 ISSRclusteringanalysismaps
图4 RAPD聚类分析图
Fig.4 RAPDclusteringanalysismaps
3243期       考安都等:65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR和RAPD标记分析
表3 RAPD扩增结果
Table3 ResultsofRAPDamplification
引物Primer
序列(5′→3′)
Sequence(5′→3′)
退火温度 (℃)
Annealingtemperature
总条带数
No.ofbandsrecorded
多态性条带数
No.ofpolymorphicbands
多态位点百分比
PPS(%)
S8 CCACAGCAGT 36.4 14 14 100
S31 CAATCGCCGT 41.0 14 12 85.71
S39 CAAACGTCGG 40.5 12 12 100
S91 TGCCCGTCGT 40.5 17 17 100
S111 CTTCCGCAGT 37.4 7 7 100
S201 GGGCCACTCA 36.4 11 4 36.36
S256 CTGCGCTGGA 41.0 18 17 94.44
S285 GGCTGCGACA 36.4 12 11 91.67
图5 ISSR和RAPD综合聚类分析图
Fig.5 ISSRandRAPDclusteringanalysismaps
类群各1份;邛崃县的3份材料2份聚在第一类群,
1份聚在第三类群.表明油茶种质遗传变异与地理
分布未呈现明显的相关性.
3 讨论与结论
3.1PCR扩增体系优化
在温强等(2008)和黄永芳等(2006)的PCR程
序基础上,对 PCR扩增程序进行了优化.ISSRG
PCR程序94℃预变性时间从2min改为3min,变
性时间从30s改为35s,根据不同引物的退火温度
不同退火时间从30s升到45s,将38个循环改为
35个循环.实验结果表明减少3个循环的扩增,在
保证了扩增稳定性的基础上缩短了扩增时间,琼脂
电泳图中的条带数量、质量与38个循环一样.
RAPDGPCR程序变性时间从1min改为50s,根据
不同引物的退火温度不同对退火时间从1min降到
45s.变性退火时间减少对产物量影响不大,但缩
短了扩增时间.通过扩增体系的改进,提高了扩增
产物的特异性和可重复性.
3.2名邛台地野生油茶种质资源的遗传多样性
多态位点百分率(PPS)在评价遗传多样性的参
数中能直观反应遗传多样性程度,ISSR和 RAPD
标记以其高度多态性在遗传多样性研究方面得到广
泛应用(汪琼等,2013;潘文等,2012;马朝芝等,
2003).本研究用16条ISSR和8条RAPD引物对
65份采集地和表型不同的野生油茶种质进行PCR
扩增,均可得到清晰、明亮和多态性高的谱带,其多
态性百分率分别为95.31%和73.17%,表明野生油
茶种质材料间有着丰富的遗传多样性,存在较大的
遗传差异.从遗传学角度看,遗传多样性丰富,适应
能力强,进化潜力大,有丰富的育种和遗传改良潜
力.从聚类结果看,名邛台地野生油茶种质遗传变
异与表型和地理分布没有明显的相关性.
本研究结果表明,ISSR和RAPD分子标记技
术能够提供丰富的油茶基因组信息,可以应用于野
生油茶种质的遗传多样性分析,为进一步开展油茶
良种选育与栽培提供一定的理论依据.
参考文献:
HuFM(胡芳名),TanXF(谭晓风),LiuHM(刘惠民).2006.CulG
tureandUtilizationofChineseNonwoodProductForestTress
424 广 西 植 物                  34卷
(中国主要经济树种的栽培与利用)[M].Beijing(北京):China
ForestPublishHouse(中国林业出版社):370-383
GodwmID,AitkenEA,SmithLW.1997.ApplicationofinterG
simplesequencerepeat(ISSR)markerstoplantgenetics[J].
Electrophoresis,18:1524-1528
HuangYF(黄永芳),ChenXM(陈锡沐),ZhuangXY(庄雪影),et
al.2006.AnalysisofgeneticdiversityinCamelliaoleifera
germplasms(油茶种植资源遗传多样性分析)[J].SciSilv
Sin(林业科学),42(4):38-43
JohnGKW,AnneRK,KennethJL,etal.1990a.DNAPolymorG
phismsamplifiedbyarbitraryprintersareusefulagenetic
markers[J].NucleicAcidRes,18:6531-6534
JohnW,MichaelM.1990b.FingerprintinggenomesusingPCRwith
arbitraryprimers[J].NuclAcidRes,18(24):7213-7218
LiKY(李克瑞),QiLL(漆龙霖),ZhaoSD(赵思东),etal.1984.
Astudyofthephysicalandchemicalpropertiesoftheseedoil
anditsfattyacidcompositionsof27speciesofCamellia(山茶
属27种植物油脂理化性质及脂肪酸组成的研究)[J].J
CentrGSouthForColl(中南林学院学报),4(2):101-109
MaCZ(马朝芝),FuYD(傅廷栋).2003.GeneticdiversityofchiG
neseandswedishrapeseed(BrassicanapusL.)analysedbyinG
terGsimplesequencerepeats(用ISSR标记技术分析中国和瑞
典甘蓝型油菜的遗传多样性)[J].SciAgricSin(中国农业
科学),36(11):1403-1408
MaL(马力),ChenYZ(陈永忠).2009.AnalyzedCamelliaoilof
functioncharacteristics(茶油的功能特性分析)[J].ChinAgG
ricSciBull(中国农学通报),25(8):82-84
PanW(潘文),LiYY(李元跃),ChenP(陈攀),etal.2012.Study
ongeneticdiversityofmangroveplantAegicerascorniculatum
populationsinGuangxi(广西红树植物桐花树种群遗传多样
性分析)[J].Guihaia(广西植物),32(2):203-207
WangQ(汪琼),YaoQJ(姚青菊),XuZL(徐增莱),etal.2013.
GeneticdiversityoffourpopulationsofCalycanthuschinensis
basedonISSRandRAPDmarkers(基于ISSR和RAPD标记
的四个夏蜡梅种群的遗传多样性研究)[J].Guihaia(广西植
物),33(1):30-34
WangBM(王保明),ChenYZ(陈永忠),TanXF(谭晓风),etal.
2008.AnalysisofgeneticdiversityofCamelliaoleiferaclones
byISSRmolecularmarker(应用ISSR分析油茶无性系的遗
传多样性)[J].JNortheastForUniv(东北林业大学学报),
36(6):19-23,36
WenQ(温强),LeiXL(雷小林),YeJS(叶金山),etal.2008.IG
dentificationofCamelliaoleiferasuperiorclonesbyISSRmoG
lecularmarkers(油茶高产无性系的ISSR分子鉴别)[J].J
CentralSouthUnivFor& Technol(中南林学科技大学学
报),28(1):39-43
ZhuangRL(庄瑞林).2008.ChinaCamelia(中国油茶)[M].BeiG
jing(北京):ChinaForestPublishingHouse(中国林业出版
社):3-4
ZouF(邹锋),TanXF(谭晓风),YuanDY(袁德义).2009.RAPD
markeranditsapplicationinCamelliaoleiferageneticbreeding
(RAPD分子标记及其在油茶遗传育种研究中的应用)[J].
SubtropPlantSci(亚热带植物科学),38(1):70-73
􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘􀥘
(上接第354页Continuefrompage354)
 ReinbotheS,ReinbotheC,ApelK,etal.1996.Evolutionof
chlorophylbiosynthesis:Thechalengetosurvivephotooxidation
[J].Cell,86:703-705
ShaoL,ShuZ,SunSL,etal.2008.EnhancedsensitivityofArabiG
dopsisanthocyaninmutantstophotooxidation:astudywithfluoG
rescenceimaging[J].FunctPlantBiol,35:714-724
ShenGJ(沈国军),XuZH(徐正浩),YuGS(俞谷松).2005.DisG
tributionanddamageofaligatorweed,AlternantheraphiloxeG
roidesanditscontrol(空心莲子草的分布、危害与防除对策)
[J].PlantProtect(植物保护),31(3):14-18
WangJF(王俊峰),FengYL(冯玉龙),LiZ(李志).2003.AccliG
mationofphotosynthesistogrowthlightintensityinChromolaeG
naodorataL.andGynurasp(飞机草和兰花菊三七光合作用
对生长光强的适应)[J].JPlantPhysiolMolBiol(植物生理
与分子生物学学报),29(6):542-548
WangJF(王俊峰),FengYL(冯玉龙),LiangHZ(梁红柱).
2004.AdaptationofEupatoriumadenophorumphotosynthetG
iccharacteristicstolightintensity(紫茎泽兰光合特性对生长
环境光强的适应)[J].ChinJApplEcol(应用生态学报),
15(8):1373-1377
WangK(王坤),YangJ(杨继),ChenJK(陈家宽).2010.ComparG
isonofmorphologicaltraitsbetweenaligatorweedandtwoconG
genersunderdifferentwaterandnutrientconditions(不同土壤水
分和养分条件下喜旱莲子草与同属种生长状况的比较研究)
[J].BiodiverSci(生物多样性),18(6):615-621
XuKY(许凯扬),YeWH(叶万辉),DuanXW(段学武),etal.
2004.PhysiologicaladaptationofAlternantheraphiloxeroides
underwaterstressconditioninducedbypolyethyleneglycol(PEG
诱导水分胁迫下喜旱莲子草的生理适应性)[J].JZhejiang
Univ:Agric&LifeSci(浙江大学学报􀅰农业与生命科学版),
30(3):271-277
YanSJ(闫淑君),HongW(洪伟),WuCZ(吴承祯).2006.Effects
ofbiologicalinvasiononecologicalsafetyofFujianProvince(生物
入侵对福建生态安全的影响)[J].JFujianCollFor(福建林
学院学报),26(3):275-280
ZhangQ,SuLJ,ChenJW,etal.2012.TheantioxidativeroleofanG
thocyaninsinArabidopsisunderhighGirradiance[J].BiolPlant
56(1):97-104
5243期       考安都等:65份野生油茶种质遗传多样性的ISSR和RAPD标记分析