全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Aug．２０１５,３５(４):５７４－５７９　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．１１９３１/guihaia．gxzw２０１４０９０５９
陈艳梅,杨银河,赵沛基,等．蛇足石杉内生真菌Neofusicoccumsp．F４８３的化学成份研究[J]．广西植物,２０１５,３５(４):５７４－５７９
ChenYM,YangYH,ZhaoPJ,etal．ChemicalconstituentsofendophyteNeofusicoccumsp．F４８３fromHuperziaserrata[J]．Guihaia,２０１５,３５(４):
５７４－５７９
蛇足石杉内生真菌Neofusicoccumsp．
F４８３的化学成份研究
陈艳梅１,２,杨银河２,赵沛基２,邹　澄１∗
(１．昆明医科大学 药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明６５０５００;２．中国科学院
昆明植物研究所 植物化学和西部资源可持续利用国家重点实验室,昆明６５０２０１)
摘　要:植物内生真菌是重要的生物资源,来自植物不同组织的内生菌还有一大部分未被人们所认识,该研
究通过查阅国内外相关文献,发现内生菌产生的化合物大多具有生物学活性.在此基础上以蛇足石杉(HuＧ
perziaserrata)为材料,从其茎部分离纯化得到１株内生真菌,提取这株真菌的总DNA,用PCR扩增ITS片
段,将测序结果在GenBank数据库中进行比对,最终鉴定为葡萄座腔菌属 (Neofusicoccumsp．).具体方法:
(１)对内生真菌Neofusicoccumsp．F４８３进行固体培养基发酵,并用混合有机溶剂提取得代谢产物;(２)采用
硅胶、SephadexLHＧ２０凝胶色谱柱层析、半制备 HPLC等方法对代谢产物的化学成分进行分离;(３)利用理化
性质及１HＧNMR、１３CＧNMR、ESIＧMS等波谱数据鉴定化合物结构.结果表明:共分离得到８个化合物,经过波
谱数据分析并结合文献对照鉴定结构为fusaproliferin(１)、过氧麦角甾醇(２)、麦角甾醇(３)、１Ｇ(furanＧ２Ｇyl)Ｇ２Ｇ
hydroxyethanone(４)、脑苷脂C(５)、腺嘌呤核苷(６)、versicolactoneB(７)、versicolactoneA(８).该研究结果
可为进一步从植物内生菌中挖掘有价值的天然活性产物奠定基础,为新的药用植物内生菌资源的开发利用提
供理论依据.
关键词:蛇足石杉;内生真菌;固体发酵;化学成分;生物活性
中图分类号:Q９４６．９１　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１５)０４Ｇ０５７４Ｇ０６
ChemicalconstituentsofendophyteNeofusicoccumsp．
F４８３fromHuperziaserrata
CHENYanＧMei１,２,YANGYinＧHe２,ZHAOPeiＧJi２,ZOUCheng１∗
(１．SchoolofPharmaceuticalSciences,KunmingMedicalUniversity,Kunming６５０５００,China;２．StateKeyLaboratoryofPhytochemistry
andPlantResoursesinWestChina,KunmingInstituteofBotany,ChineseAcademyofSciences,Kunming６５０２０１,China)
Abstract:Asweknow,theplantendophyticfungiaresomeimportantbiologicalresources,anduptonow,alarge
partoftheplantendophyteswhichcamefromavarietyofplantorganizationshadnotyetbeenrecognizedbythepeoＧ
ple,andonthebasisofcheckingoutrelativetechnicalliteraturereportedinbothathomeandabroad,thegreatmaＧ
joritychemicalconstituentsproducedbytheendophyteswerefoundtopossesscertainbiologicalactivity．Thisthesis
wasthefurthersearchfornewactivenaturalproductsfrompteridophyteHuperziaserrateendophytes．H．serrate
(Thunb．)Trev．wascolectedfromXichouCounty,WenshanPrefecture,YunnanProvince．Aendophyticfungus
wasisolatedandpurifiedfromthestemofH．serrate．AfterextractingtotalDNAofthisstrain,internaltranscribed
收稿日期:２０１５Ｇ０１Ｇ１３　　修回日期:２０１５Ｇ０３Ｇ２５
基金项目:国家自然科学基金 (８１１６０３８８)
作者简介:陈艳梅(１９８８Ｇ),女,云南玉溪人,硕士研究生,研究方向为内生菌次级代谢产物研究,(EＧmail)１１５６３８８０８３＠qq．com.
∗通讯作者:邹澄,教授,研究方向为天然药物结构改造研究,EＧmail:zouchengkm＠１２６．com.
spacer(ITS)wasamplifiedbypolymerasechainreaction(PCR),thentheamplifiedproductwassequenced．FragＧ
mentsequencingresultswerecomparedtotheGenBanksequencedatabase,andeventualy,thisstrainwasidentified
asNeofusicoccumandwasnamedasNeofusicoccumsp．F４８３．Inthisstudy,weadoptedthefolowingthreemethＧ
ods:(１)TheendophyticfungusNeofusicoccumsp．F４８３wasfermentedwithsolidmedium,andthen,fungiwith
mediumwereextractedwithmixedorganicsolvent,andthesecondarymetaboliteswereobtained;(２)Thechemical
compositionofthefermentedmetaboliteswereisolatedbycolumnchromatographymethodsincludingnormalＧphase
silicagel,SephadexLHＧ２０,andreversedＧphasesemiＧpreparativeHPLC;(３)Theisolatedchemicalcomponents
wereidentifiedbytheirphysicalandchemicalproperties,andacombinationofspectroscopictechniquesincluding
electrosprayionizationmassspectrum(ESIＧMS)andoneＧdimentionalnuclearmagneticresonance(１HＧNMR,１３CＧ
NMR)spectroscopicanalysis．Theresultswereasfolows:eightcompoundswereseparatedandidentifiedfromNeoＧ
fusicoccumsp．F４８３,andtheirstructureswereelucidatedbyanalyzingtheirspectraldataandcomparingwiththerelＧ
evantreportedliterature．Theywereidentifiedasfolows:fusaproliferin(１),５α,８αＧepidioryＧ(２２E,２４R)ergostaＧ６,
２２ＧdienＧ３βＧol(２),ergosterol(３),１Ｇ(furanＧ２Ｇyl)Ｇ２Ｇhydroxyethanone(４),cerebrosideC(５),adenosine(６),versiＧ
colactoneB(７)andversicolactoneA(８)．Itwillayafoundationforfurtherminingthevaluablenaturalproducts
fromplantendophytes,andwilprovideatheoreticalbasisforthedevelopmentandutilizationofthenewmedicinal
plantendophytesresources．
Keywords:Huperziaserrata;endophytefungus;solidfermentation;chemicalconstituents;biologicalactivity
　　蛇足石杉 (Huperziaserrata)属石杉科 (HuＧ
periaceae)石杉属 (HuperziaBemh．)蕨类植物,
有救命王、金不换、千层塔等之称.它分布于全国各
地,也广布于亚洲、大洋洲、以及中美洲等其他地区
(余红英等,２００１).其全草对于治疗跌打损伤、瘀血
肿痛、精神分裂等疾病有一定的疗效 (张君诚等,
２００８).近年来,传统药用植物以及特殊生境中植物
的内生真菌研究是一个新兴的研究热点 (Tanet
al．,２００１),对蛇足石衫内生菌有了研究报道:龚玉
霞等 (２００７)采用内生菌常规分离法对健康的蛇足
石杉植株内生真菌进行了分离和筛选得到１８０株内
生菌,分属于Alternaria、Cephalosporium、GuigＧ
nardia等１３个属;俞超等 (２００９)从药用植物蛇足
石杉中分离出内生真菌进行初步的研究;汪涯等
(２０１１)采用平板分离法分离蛇足石杉内生真菌共
分离到１２７株内生真菌,分属于Penicillium、AsＧ
pergillus、Podospora等１９个属,并对其中乙酰胆
碱酯酶抑制活性成分进行了研究.
本文从蛇足石杉茎部分离得到１株内生真菌
Neofusicoccumsp．F４８３,为了进一步寻找新型的
活性化合物,对其发酵产物进行了研究.从此株内
生真菌的次级代谢产物中得到８个化合物,通过波
谱分析,结构鉴定为fusaproliferin(１)、过氧麦角甾
醇 (２)、麦 角 甾 醇 (３)、１Ｇ(furanＧ２Ｇyl)Ｇ２Ｇ
hydroxyethanone(４)﹑脑苷脂C(５)﹑腺嘌呤核苷
(６)﹑versicolactoneB(７)、versicolactoneA(８).
１　材料与仪器
１．１菌种来源和发酵
蛇足石杉的植株于２０１３年８月采集于云南文
山州西畴县.内生真菌分离自蛇足石杉的茎部,菌
种保存于中国科学院昆明植物研究所植物化学与西
部植物资源持续利用国家重点实验室.
F４８３的总 DNA 提取根据文献 (吴发红等,
２００９)采用改进的CTAB法.实验中F４８３的鉴定
选用真菌ITS鉴定所使用的通用引物ITS４和
ITS５,引物序列分别为ITS４(５′＞TCCTCCGCTＧ
TATTGATATGC＜３′)和ITS５(５′＞GGAAGTAＧ
AAAGTCGTAACAAGG＜３′).按以下步骤进行
PCR操作:加rＧtaq酶预变性１５min(９５℃);变性
４０s(９５℃);退火４０s(５５℃);延伸９０s(７２℃),
３０个循环;延伸１０min(７２℃).PCR后回收到
５００~７００bp的核酸片段,将测序结果在 GenBank
数据库中进行比对,结果显示该序列与葡萄座腔菌
属 (Neofusicoccum)的同源性高达９９％,故鉴定为
葡萄座腔菌属真菌 (Neofusicoccum),同时命名为
F４８３.
将F４８３活化２代后接种在PDA培养基 (配方
为马铃薯净重２００g,煮沸３０min后过滤取汁;葡萄
糖２０g;琼脂１５g;自来水１L,pH自然)上,固体
平板发酵３０L,于２８℃温室中培养１６d.
５７５４期　　　　　陈艳梅等:蛇足石杉内生真菌Neofusicoccumsp．F４８３的化学成份研究
图１　化合物１~８的结构
Fig．１　Structuresofcompounds１－８
１．２仪器与试剂
TMS作为内标,化学位移值δ单位为ppm,耦
合常数J 单位为 Hz;核磁共振波谱仪 (Bruker
AMＧ４００型,AvanceIII６００型);SephadexLHＧ２０
葡聚糖凝胶 (AmershamPharmacia公司);质谱仪
(FinniganLCQＧAdvantage型);柱色谱层析用硅胶
G,２００~３００目,GFＧ２５４,薄层层析用GFＧ２５４硅胶
板 (青岛海洋化工厂),柱色谱层析硅胶 H (Merck
公司);LC３０００型Ｇ高效液相色谱仪:RPＧC１８７μm
１０×２５０mm (北京创新通恒科技有限公司);TLC
显色剂:５％浓硫酸乙醇溶液;HPLC分析用色谱纯
(甲醇)溶剂.
２　提取与分离
用配比溶剂 (乙酸乙酯Ｇ甲醇Ｇ冰醋酸８０∶１５∶
５,v/v/v)将F４８３固体发酵物浸泡提取３次,依次
间隔３、２、１d,得到发酵粗提物,用乙酸乙酯萃取,减
压浓缩得到总浸膏２７g.浸膏采取柱层析 (２００~
３００目)分离后,依次以石油醚Ｇ乙酸乙酯 (１００∶
４~６∶４)及氯仿Ｇ甲醇 (９∶１~０∶１００)梯度洗脱
得到１２个组分 (Fr．１~Fr．１２).Fr．３(４g)经
SephadexLHＧ２０(氯仿/甲醇１∶１)洗脱,再经硅胶
柱色谱 (氯仿/甲醇１００∶３)洗脱得到化合物２
(４．１mg)和化合物３(３．７mg);Fr．４(６００mg)经
SephadexLHＧ２０(氯仿/甲醇１∶１)洗脱,再经硅胶
柱色谱 (石油醚/丙酮１００∶５)洗脱得到化合物４
(３．５mg);Fr．５(７０５mg)经SephadexLHＧ２０(氯
仿/甲醇１∶１)洗脱,再经反向半制备柱RPＧC１８以
甲醇Ｇ水 (８０∶２０~１００∶０)梯度洗脱３０min得化
合物１(４．５mg);Fr．１０(１g)经SephadexLHＧ２０
(甲醇)洗脱,再经硅胶柱色谱 (氯仿/甲醇１００∶５)
洗脱得化合物５(５．３mg);Fr．１１(１．１g)通过
SephadexLHＧ２０ (氯仿/甲醇１∶１)洗脱,再经
SephadexLHＧ２０(甲醇)洗脱,得到化合物６(３．３
mg);Fr．９(１．５g)通过SephadexLHＧ２０(氯仿/甲
醇１∶１)洗脱,再经反向半制备柱RPＧC１８以甲醇Ｇ水
(５∶９５~７０∶３０)梯度洗脱３０min得化合物７(３．８
mg)和化合物８(３．５mg).
３　结构鉴定
化合物１　C２７H４０O５,无定型固体,ESIＧMS
m/z:４４５ [M ＋ H]＋; １HＧNMR (CDCl３,
６００MHz)δH:２．６８(１H,d,J ＝１０．３Hz,HＧ２３),
５．２５(１H,m,HＧ３),５．１２(１H,brs,HＧ７),４．０６
(１H,d,J ＝７．９Hz,HＧ１１),５．３８(１H,brs,HＧ
１３),２．８１(１H,m,HＧ１５),２．８０(１H,dd,J ＝
７．０,１４．３Hz),０．９９(３H,s,HＧ１９),１．６４(６H,s,
HＧ２０/HＧ２１),１．５６(３H,s,HＧ２２),４．３０(２H,m,
HＧ２４),１．３１(３H,d,J ＝７．２Hz,HＧ２５),２．０２
(１H,s,ＧOCCH３);１３CＧNMR(CDCl３,１５０MHz)
δC:２０７．９(s,CＧ１８),１７０．９(s,ＧOCCH３),１４７．３
(s,CＧ１７),１４６．７(s,CＧ１６),１３８．１(CＧ４),１３６．５
(s,CＧ１２),１３２．８(s,CＧ８),１２８．９(d,CＧ１３),１２４．３
(d,CＧ７),１２１．３(d,CＧ３),７６．５(d,CＧ１１),６６．４
６７５ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３５卷
(t,CＧ２４),４９．５(d,CＧ１５),４９．０(s,CＧ１),４０．３
(t,CＧ５),３９．１(t,CＧ２),３４．９(t,CＧ９),３３．７(d,
CＧ２３),２９．６(t,CＧ１０),２８．７(t,CＧ１４),２３．８(t,CＧ
１０),２０．９(q,ＧOCCH３),１６．２(q,CＧ１９),１５．５(q,
CＧ２０),１５．３(q,CＧ２１),１４．５(q,CＧ２５),１０．４(q,
CＧ２２).上述数据与 Nihashietal．(２００２)报道一
致,故鉴定该化合物为fusaproliferin.
化合物２　C２８H４４O３,无色针晶;ESIＧMSm/z:
４２９[M ＋ H]＋;１HＧNMR (CDCl３,４００ MHz)
δH:６．５０(１H,d,J ＝１０．５Hz,HＧ７),６．２４(１H,
d,J ＝１０．５Hz,HＧ６),５．２３(１H,dd,J ＝１９．０,
９．３Hz,HＧ２２),５．１５(１H,dd,J ＝１９,１０．１Hz,
HＧ２３),３．９９(１H,m,HＧ３),０．９８(３H,m,HＧ
２１),０．９０ (３H,d,J ＝ ８．６Hz,HＧ２８),０．８６
(３H,s,HＧ１９),０．８２(３H,m,HＧ２７),０．８０(３H,
m,HＧ２６);１３CＧNMR (CDCl３,１００ MHz)δC:
１３５．４(d,CＧ６),１３５．２(d,CＧ２２),１３２．２(d,CＧ
２３),１３０．７(d,CＧ７),８２．１(s,CＧ５),７９．４(s,CＧ
８),６６．４(d,CＧ３),５６．１(d,CＧ１７),５１．６(d,CＧ
１４),５１．０(d,CＧ９),４４．５(s,CＧ１３),４２．７(d,CＧ
２４),３９．７(d,CＧ２０),３９．３(t,CＧ１２),３７．０(t,CＧ
４),３６．９(s,CＧ１０),３４．６(t,CＧ１),３３．０(d,CＧ
２５),３０．１(t,CＧ２),２８．６(t,CＧ１５),２３．３(t,CＧ
１１),２０．８(q,CＧ２１),２０．６(t,CＧ１６),１９．９(q,CＧ
２７),１９．６(q,CＧ２６),１８．１(q,CＧ１９),１７．５(q,CＧ
２８),１２．８(q,CＧ１８).上述数据与陆云德等(２０１３)
报道一致,故鉴定该化合物为过氧麦角甾醇.
化合物３　C２８H４４O,无色针状结晶;ESIＧMS
m/z:３９７ [M ＋ H]＋;１HＧNMR (CDCl３,４００
MHz)δH:５．５８(１H,dd,J ＝５．５,２．４Hz,HＧ
６),５．３９(１H,m,HＧ７),５．２１(２H,m,HＧ２２,
２３),３．６７(１H,m,HＧ３),１．０４(３H,d,J ＝６．７
Hz,HＧ２１),０．９４(３H,s,HＧ１９),０．９２(３H,d,J
＝７．０,HＧ２８),０．８４(３H,d,J ＝６．４Hz,HＧ２６
或HＧ２７),０．８３(３H,d,J ＝ ６．４Hz,HＧ２６或
２７),０．６３(３H,s,HＧ１８);１３CＧNMR(CDCl３,１００
MHz)δC:１４１．３(s,CＧ８),１３９．７(s,CＧ５),１３５．５
(d,CＧ２２),１３１．９ (d,CＧ２３),１１９．５ (d,CＧ６),
１１６．２(d,CＧ７),７０．４(d,CＧ３),５５．６(d,CＧ１７),
５４．５(d,CＧ１４),４６．２(d,CＧ９),４２．８(d,CＧ２４),
４０．７(t,CＧ４),４０．４(d,CＧ２０),３９．０(t,CＧ１２),
３８．３(t,CＧ１),３７(s,CＧ１０),３３．０(d,CＧ２５),３１．９
(t,CＧ２),２８．３(t,CＧ１６),２２．９(t,CＧ１５),２１．１(t,
CＧ１１),１９．９(q,CＧ２７),１９．６(q,CＧ２６),１７．６(q,
CＧ２８),１６．２(q,CＧ１９),１２．０(q,CＧ１８).上述数据
与樊晓飞等(２０１３)报道一致,故鉴定该化合物为麦
角甾醇.
化合物４　C６H６O３,无色针状结晶;ESIＧMS
m/z:１２７ [M ＋ H]＋; １HＧNMR (CDCl３,
６００MHz)δH:７．６３(d,J ＝１．０Hz,HＧ５),７．３１
(d,J ＝３．４Hz,HＧ３),６．６１(dd,J ＝１．７,３．６
Hz,HＧ４),４．７４(２H,brs,H２Ｇ２′),３．２６(s,OHＧ
２′);１３CＧNMR(CDCl３,１５０MHz)δC:１８７．７(s,
CＧ１′),１４７．１(d,CＧ５),１１７．９(d,CＧ３),１１２．６(d,
CＧ４),６５．１ (t,CＧ２′).上述数据与 Fujimotoet
al．(１９９６)报道一致,故鉴定该化合物为１Ｇ(furanＧ２Ｇ
yl)Ｇ２Ｇhydroxyethanone.
化合物５　C４３H７９NO９,无色针状结晶;ESIＧMS
m/z:７５４[M ＋ H]＋;１３HＧNMR (CD３OD,６００
MHz)δH:５．８５(１H,dtd,J＝１５．４,６．７,１．１
Hz,HＧ４′),５．７３(１H,brdt,J ＝１５．２,６．４Hz,
HＧ５),５．５０(１H,ddt,J ＝１５．４,６．２,１．３Hz,HＧ
３′),５．４６(１H,dd,J ＝１３．５,５．６Hz,HＧ４),５．１５
(１H,brt,J ＝５．７Hz,HＧ８),４．４３(１H,d,J ＝
６．１Hz,HＧ２′),４．２７(１H,d,J ＝７．９Hz,HＧ１″),
４．１５(１H,m,HaＧ１),４．１２(１H,m,HＧ３),４．００Ｇ
３．９５(１H,m,HＧ２),３．８７(１H,m,HaＧ６″),３．７１
(１H,dd,J ＝１０．４,３．５Hz,HbＧ１),３．６７(１H,
m,HbＧ６″),３．３６(１H,t,J ＝８．９Hz,HbＧ３″),
３．３０~３．２７(２H,m,HＧ４″,HＧ５″),３．２０(１H,dd,
J ＝９．１,７．８Hz,HＧ２″),２．０７~２．０１(６H,m,HＧ
６,HＧ７,H２Ｇ５′),１．９８(２H,t,J ＝７．２Hz,HＧ
１０),１．５９(３H,brs,HＧ１９),１．４１~１．２７(３８H,m,
HＧ１１~１７,HＧ６′~１７′),０．９１(６H,t,J ＝６．８Hz,
HＧ１８,HＧ１８′);１３CＧNMR(CD３OD,１５０MHz)δC:
１７５．４(s,CＧ１′),１３６．７(s,CＧ９),１３４．７(d,CＧ４′),
１３４．５(d,CＧ５),１３１．０(d,CＧ４),１２９．０(d,CＧ３′),
１２４．９(d,CＧ８),１０４．７(d,CＧ１″),７８．０(d,CＧ５″),
７７．９(d,CＧ３″),７５．０(d,CＧ２″),７４．１(d,CＧ２′),
７２．９(d,CＧ３),７１．５(d,CＧ４″),６９．７(t,CＧ１),６２．６
(t,CＧ６″),５４．６(d,CＧ２),４０．８(t,CＧ１０),３３．８(t,
CＧ６),３３．５ (t,CＧ５′),３３．１ (t,CＧ１６,CＧ１６′),
３０．９~３０．３(１４C,CＧ１２~１５,CＧ６′~１５′),２９．２(s,
CＧ１１),２８．８(s,CＧ７),２３．８(t,２C,CＧ１７,CＧ１７′),
１６．１(q,CＧ１９),１４．５(q,２C,CＧ１８,CＧ１８′).上述
数据与崔香等(２０１３)报道一致,故鉴定该化合物为
７７５４期　　　　　陈艳梅等:蛇足石杉内生真菌Neofusicoccumsp．F４８３的化学成份研究
脑苷脂C.
化合物６　C１０H１３N５O４,白色粉末;ESIＧMS
m/z:２６８[M ＋ H]＋;１HＧNMR (CD３OD,６００
MHz)δH:８．３１(１H,s,HＧ８),８．１８(１H,s,HＧ
２),５．９６(１H,d,J ＝６．３Hz,HＧ１′),４．７４(１H,
d,J ＝５．６Hz,HＧ２′),４．３２(１H,dd,J ＝２．４,
４．８Hz,HＧ３′),４．１６(１H,d,J ＝２．２Hz,HＧ３′),
３．８９(１H,dd,J ＝１２．７,２．４Hz,HＧ５a′),３．７５
(１H,dd,J ＝１２．５,２．４Hz,HＧ５b′);１３CＧNMR
(CD３OD,１５０MHz)δC:１５７．６(s,CＧ６),１５３．５
(d,CＧ２),１５０．１(s,CＧ４),１４２．１(d,CＧ８),１２１．２
(s,CＧ５),９１．３(d,CＧ１′),８８．２(d,CＧ４′),７５．５(d,
CＧ２′),７２．７(d,CＧ３′),６３．５(t,CＧ５′).上述数据
与吴笛等(２００８)报道一致,故鉴定该化合物为腺嘌
呤核苷.
化合物７　C８H１０O４,白色蜡状物;ESIＧMS
m/z:１７１[M ＋ H]＋;１HＧNMR (CD３OD,６００
MHz)δH:８．０３(１H,d,J ＝５．６Hz,HＧ３),６．３２
(１H,dd,J ＝１．７,５．７Hz,HＧ２),５．８２(１H,dd,
J ＝１．２,８．７Hz,HＧ５),４．２９(１H,dd,J ＝１．７,
５．７Hz,HＧ６),３．７７(１H,dq,J＝６．３,１８．２Hz,
HＧ７),１．１８(１H,d,J ＝６．３Hz,HＧ８);１３CＧNMR
(CD３OD,１５０MHz)δC∶１７１．６(s,CＧ１),１５１．９
(s,CＧ４),１４２．９(d,CＧ３),１２１．６(d,CＧ２),１１６．３
(d,CＧ５),７２．８(d,CＧ６),７１．５(d,CＧ７),１９．２(q,
CＧ８).上述数据与Zhuangetal．(２０１１)报道一致,
故鉴定该化合物为versicolactoneB.
化合物８　C８H１０O４,白色蜡状物;ESIＧMS
m/z:１７１[M ＋ H]＋;１HＧNMR (CD３OD,６００
MHz)δH:７．６７(１H,d,J ＝５．５Hz,HＧ３),６．３０
(１H,d,J ＝５．２０Hz,HＧ２),５．４６(１H,d,J ＝
９．２Hz,HＧ５),４．５３(１H,dd,J ＝４．７,９．２Hz,
HＧ６),３．８２(１H,m,HＧ７),１．１５(３H,d,J ＝
６．４,HＧ８);１３CＧNMR (CD３OD,１５０ MHz)δC:
１７１．５(s,CＧ１),１５１．９(s,CＧ４),１４５．９(d,CＧ３),
１２１．１(d,CＧ２),１１６．３(d,CＧ５),７１．６(d,CＧ６),
７１．４(d,CＧ７),１８．８(q,CＧ８).上述数据与Zhuang
etal．(２０１１)报道一致,故鉴定该化合物为versicoＧ
lactoneA.
４　讨论
传统药用植物以及特殊生境中植物的内生真菌
可能是重要生物资源 (Tanetal．,２００１).目前来
自植物不同组织的多数内生菌还未被人们认识,但
相关文献报道过的内生菌产生的化合物多数具有生
物学活性.本文从蛇足石衫内生真菌NeofusicocＧ
cumsp．F４８３的次级代谢产物中分离鉴定了８个化
合物,分别是fusaproliferin (１)、过氧麦角甾醇
(２)、麦角甾醇 (３)﹑１Ｇ(furanＧ２Ｇyl)Ｇ２ＧhydroxyethＧ
anone(４)﹑脑苷脂C(５)﹑腺嘌呤核苷 (６)﹑verＧ
sicolactoneB(７)﹑versicolactoneA (８).据文献
报道,这些化合物具有一定的活性.苏日古格等
(２０１２)通过研究发现麦角甾醇和麦角甾醇过氧化
物对肝癌细胞 (HepG２)的早期凋亡率分别是
４１．２％和４２．３３％.冯建 (２０１４)研究发现麦角甾醇
和过氧麦角甾醇具有较好的抗氧化活性,麦角甾醇
EC５０值为１．４mg􀅰mLＧ１,过氧麦角甾醇EC５０值为
０．９２mg􀅰mLＧ１,同时麦角甾醇对BGC胃癌细胞增
殖的抑制率 (％)IC５０值在１００~１４２μg􀅰mLＧ１范围
内.魏丹丹等 (２００９)用 MTT法检测过氧麦角甾
醇的抗结核活性,发现当浓度超过２０μg􀅰mLＧ１时
有抗结核活性.高虹等 (２００６)选用了对小鼠体内
S１８０肉瘤的抑制作为筛选抗肿瘤活性的模型,发现
麦角甾醇据有较强的抑瘤活性.此外,据文献报道,
麦角甾醇过氧化物具有抗癌活性、免疫抑制活性
(Fujimotoetal．,１９９４)、抗炎 (Yasukawaetal．,
１９９４)和促进血小板凝聚 (Luetal．,１９９４)等作
用.Kogaetal．(１９９８)发现脑苷脂C在水稻中对
稻瘟病菌的识别和抵御稻瘟病菌的侵染发挥着关键
的作用.Dongetal．(２００５)研究发现脑苷脂C对
松材线虫的 LC５０是１１０μg􀅰mLＧ１.Cheunget
al．(２０００)证实腺嘌呤核苷有很强的抑制血小板凝
集的作用和镇静、抗缺氧及促进心肌组织摄取８６
Rb的作用.
蛇足石杉内的活性成分主要为石松生物碱,本
研究中尚未分离到与蛇足石杉化学成分相关的化合
物.到目前为止研究蛇足石杉内生菌次级代谢产物
的研究报道不多,本研究将为进一步发掘蛇足石杉
内生菌中有用成分奠定基础.
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