全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Sept．２０１４,３４(５):７２３－７２６　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１４．０５．０２６
杨子明,刘金磊,颜小捷,等．干花豆抗衰老有效部位的研究[J]．广西植物,２０１４,３４(５):７２３－７２６
YangZM,LiuJL,YanXJ,etal．ProtectiveefectsoffordiacauliflorahemslontheDＧgalactoseinducedseniledementiamodelmice[J]．Guihaia,２０１４,
３４(５):７２３－７２６
干花豆抗衰老有效部位的研究
杨子明,刘金磊∗,颜小捷,李典鹏
(广西植物功能物质研究与利用重点实验室,广西植物研究所,广西 桂林５４１００６)
摘　要:采用小鼠避暗行为学实验测定干花豆对老年痴呆小鼠记忆能力的影响,通过测定血液中的甘油三
酯、总胆固醇及血液和大脑中的抗氧化指标来评价干花豆抗衰老作用.结果表明:干花豆各剂量组均能降低
血脂水平,提高抗氧化能力,其中粗提物和正丁醇组有改善记忆力的作用,说明干花豆抗衰老的有效部位可能
在正丁醇提取部位.
关键词:老年性痴呆症小鼠;学习记忆能力;潜伏时间;超氧化物歧化酶;丙二醛
中图分类号:Q９４６;R２８５．５　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１４)０５Ｇ０７２３Ｇ０４
Protectiveeffectsoffordiacauliflorahemslonthe
DＧgalactoseinducedseniledementiamodelmice
YANGZiＧMing,LIUJinＧLei∗,YANXiaoＧJie,LIDianＧPeng
(GuangxiKeyLaboratoryofFunctionalPhytochemicalsResearchandUtilization,GuangxiInstituteofBotany,Guilin５４１００６,China)
Abstract:KMAlzheimier’sdiseasemicemodelscausedbyDＧgalactose,theabilitiesoflearningandmemoryofmice
wereinvestigatedbyavoiddarkexperimentinalanimals,andantioxidantwereusedtostudyprotectiveefectsofforＧ
diacauliflorahemslontheDＧgalactoseinducedseniledementiamodelmice．Fordiacauliflorahemslcouldincreased
antioxidantanddecreasedlipids,buttheresultssuggestedthatfordiacauliflorahemslandfordiacauliflorahemslbuＧ
tanolextractmightbebeneficialtoinprovingthelearningandmemorybehaviorsinmicewithAlzhemiers’diseaseinＧ
ducedbyDＧgalactose．TheresultsofpharmacologicalexperimentresultsconfirmedthattheactivepartoffordiacauliＧ
florahemslbutanolextract．
Keywords:agingmice;abilityoflearningandmemory;latency;SOD;MDA
　　干花豆(Fordiacauliflora)为豆科蝶形花亚科
干花豆属植物,又名野京豆、水罗伞、土甘草、虾须
草、玉郎伞等,广西壮语称“仁推”,瑶语称“凡台”.
干花豆性辛、平,味甘、微酸,无毒,具有散淤消肿、止
痛宁神、润肺化痰等功效.在广西壮、瑶族用于风湿
骨痛、跌打损伤、骨折、小儿痴呆、小儿疳积、肌痿症、
体虚及产妇身体复元等症(梁志远,２００５).现代药
理学研究表明,干花豆具有抗炎(汤祖青等,２００３)、
抗氧化(吴植强等,２００４)、抗衰老(韦奇志等,２００３)、
提高记忆力(顾正余等,１９９３)等作用,但提高记忆力
和延缓衰老的有效部位并不清楚.本研究为了探讨
干花豆抗衰老的有效部位,对干花豆粗提物及其分
离得到的各个部位进行研究,以确定干花豆提取物
的有效部位,阐明干花豆抗衰老的药理作用机制,为
收稿日期:２０１３Ｇ１２Ｇ１７　　修回日期:２０１４Ｇ０３Ｇ１０
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻１１４０００１Ｇ３６);桂林市科技开发项目(２０１１０１０７Ｇ２);广西植物研究所基本业务费项目(桂植业０９０３４);广西
植物功能物质研究与利用重点实验室主任基金(ZRJJ２０１３Ｇ６).
作者简介:杨子明(１９８２Ｇ),男,广西兴安县人,硕士研究生,助理研究员,从事植物活性物开发与利用研究,(EＧmail)yangziming１９８３１０＠１２６．com.
∗通讯作者:刘金磊,副研究员,从事植物活性物开发与利用研究,(EＧmail)liujinlei＠１２６．com.
进一步开发利用干花豆,促进发展我国的珍稀中草
药资源,特别是广西少数民族地区的资源打下一定
的基础.
１　材料与方法
１．１药品和试剂
干花豆,购自广西贺州八步区;超氧化物歧化酶
(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TＧAOC)测
定试剂盒,南京建成生物工程研究所;总胆固醇
(TC)、甘油三酯(TG)测定试剂盒,四川迈克;吡拉
西坦片,宜昌人福药业有限责任公司;DＧ半乳糖,
bioshapr公司;其它试剂是国产分析纯.
１．２仪器
RTＧ９１００型半自动生化分析仪(深圳雷杜生命
科学股份有限公司);TGLＧ１６R型高速冷冻离心机
(珠海黑马公司);BAＧ２００小鼠避暗仪(成都泰盟);
METTLERAT２００电子天平(梅特乐Ｇ托利多仪器
上海有限公司).
１．３实验动物
SPF级昆明种小鼠,体重１８~２２g,湖南斯莱
克景达实验动物有限公司.生产许可证号:SCXK
(湘)２００９Ｇ０００４.
１．４干花豆的制备方法
取干花豆根、枝共２８．６kg,阴干,粉碎,用９５％
乙醇冷浸提取２次,合并提取液减压浓缩,得乙醇浸
膏约４７０g,取４１０g乙醇浸膏用去离子水溶解,用
乙酸乙酯２．５L萃取后处理得乙酸乙酯浸膏１４８g,
正丁醇２．５L萃取后处理得正丁醇浸膏５９g,取后
水溶液浓缩得水部分浸膏２００g.
１．５老年痴呆模型小鼠的建立
取昆明系小鼠８４只,随机分成７组:对照组、模
型组、吡拉西坦片组(阳性组)、干花豆粗提物组和干
花豆乙酸乙酯组、干花豆正丁醇组、干花豆水洗组,
每组１２只.除对照组注射生理盐水外,其余各组每
天按１２００mg􀅰kgＧ１腹腔注射DＧ半乳糖,连续注射
６周.干花豆各组小鼠按生药量６０g􀅰kgＧ１灌胃,对
照组和模型组小鼠灌胃等量的蒸馏水,每天１次,连
续６周.
１．６避暗行为学实验检查
实验第４３天,将小鼠放入明室,记录首次小鼠进
入暗室次数(错误次数),作为学习能力成绩.２４h后
再次测验,记录潜伏期(将小鼠放入明室的时候,开始
计时,到小鼠进入暗室被电击的时间)和１０min内小
鼠被电击次数(错误次数),作为记忆保持成绩.
１．７胸腺指数、脾脏指数、血脂及抗氧化能力的测定
第４５天,小鼠禁食不禁水,称重,眼球取血,７
℃保存备用.处死小鼠后,取胸腺、脾脏和大脑,称
重,计算胸腺指数、脾脏指数.取出的大脑,用冰冷
的０．９％的生理盐水制成的匀浆液,离心,取上清液,
Ｇ２０℃保存备用.血脂指标及血浆、大脑抗氧化能
力指标的测定按试剂盒说明进行操作.
１．８统计学方法
实验数据采用SPSS１３．０统计软件进行统计分
析,以x－±s表示,多个样本之间的两两比较采用单
因素方差分析,P＜０．０５为具有统计学意义.
２　结果与分析
２．１干花豆对小鼠记忆力的影响
从表１可以看出,连续给药４２d后,与正常组
比较,模型组首次错误数增加,潜伏期缩短,２４h后
错误次数增加,但没有统计学意义;与模型组比较,
干花豆正丁醇组首次错误数减少,潜伏期延长,２４h
后错误次数减少,有统计学意义.
表１　干花豆对小鼠记忆力的影响 (x－±s,n＝１２)
Table１　Efectoffordiacauliflorahemslonmemoryinmice
组别
Group
首次错误
次数 (n)
No．of
firsterrors
潜伏期 (s)
Incubation
period
２４h后
错误次数 (n)
No．of
２４herrors
正常对照组
Solventcontrol
１．１±０．３ ４８６．５±２０８．１ ０．３±０．５
模型组
Modelcontrol
２．２±０．４ ３８０．０±０．０ ０．９±０．５
吡拉西坦片组
Piracetam
１．２±０．４ ５２１．３±１８６．５ ０．２±０．４
干花豆粗提物组
Totalextract
１．０±０．０＃ ６００．０±０．０＃ ０．０±０．０＃
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract
１．０±０．０ ５３４．８±１１２．８ ０．３±０．５
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract
１．０±０．０＃ ６００．０±０．０＃ ０．０±０．０＃
干花豆水洗组
Waterextract
１．３±０．５ ４８３．０±２０６．０ ０．４±０．５
　注:与正常对照组比较,∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１;与模型组比较,＃P＜
０．０５,＃＃P＜０．０１.下同.
　Note:Comparedwithcontrolgroup,∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１;Comparedwith
modelgroup,＃P＜０．０５,＃＃P＜０．０１．Thesamebelow．
２．２干花豆对小鼠体重的影响
从表２可以看出,连续给药４２d后,与正常组
比较,模型组小鼠体重没有显著性影响;与模型组比
较,干花豆各组小鼠体重没有显著性影响.
４２７ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
表２　干花豆对小鼠体重的影响
Table２　Effectoffordiacauliflorahemslonbody
weightlevelsinmice(x－±s,n＝１２)
组别 Group
第一天 (g)
Thefirstday
第四十二天 (g)
The４２day
正常对照组
Solventcontrol
３５．２±３．１ ４０．６±４．３
模型组
Modelcontrol
３４．４±１．５ ４１．７±２．９
吡拉西坦片组
Piracetam
３５．２±２．２ ４１．７±４．９
干花豆粗提物组
Totalextract
３４．２±２．３ ４１．７±３．２
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract
３５．９±２．７ ４１．１±３．４
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract
３４．７±２．７ ４２．４±３．２
干花豆水洗组
Waterextract
３４．６±２．０ ４３．５±３．６
２．３干花豆对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响
从表３看出,连续给药４２d后,与正常组比较,
模型组胸腺指数降低,有统计学意义;与模型组比
较,干花豆粗提取组胸腺指数升高,有统计学意义.
表３　干花豆对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响
Tab．３　Effectoffordiacauliflorahemslonimmune
organindexesinmice(x－±s,n＝１２)
组别 Group
胸腺指数 (mg/g)
Thymusindex
脾脏指数 (mg/g)
Spleenindex
正常对照组
Solventcontrol ２．０９±０．４８ ２．０９±０．２８
模型组
Modelcontrol １．７８±０．４３∗ ２．１８±０．７８
吡拉西坦片组
Piracetam １．７８±０．２６ ２．０６±０．５０
干花豆粗提物组
Totalextract ２．０８±０．２２
＃ ２．２８±０．４３
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract １．７８±０．４４ ２．３０±０．５８
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract １．７６±０．２６ ２．４６±０．７１
干花豆水洗组
Waterextract ２．００±０．５１ ２．２８±０．４７
２．４干花豆对小鼠血脂的影响
从表４可以看出,连续给药４２d后,与正常组
比较,模型组对甘油三酯和总胆固醇没有影响;与模
型组比较,干花豆各剂量组均可降低甘油三酯和胆
固醇浓度,有统计学意义.
２．５干花豆对小鼠血液抗氧化能力的影响
从表５可以看出,连续给药４２d后,与正常对照
组比较,模型组SOD活性降低、MDA含量升高,有统
计学意义;与模型组比较,干花豆各剂量组均能升高
SOD活性,降低MDA含量,有统计学意义;与模型组
比较,阳性组能够降低MDA含量;有统计学意义.
表４　干花豆对小鼠血脂的影响
Table４　Effectoffordiacauliflorahemsl
onlipidsinmice(x－±s,n＝１２)
组别 Group
甘油三酯 TG
(mmol/L)
总胆固醇 TC
(mmol/L)
正常对照组
Solventcontrol ２．１４±０．１７ ５．０２±０．５５
模型组
Modelcontrol ２．１３±０．１４ ４．８２±０．２９
吡拉西坦片组
Piracetam ２．２２±０．２１ ４．７０±０．２３
干花豆粗提物组
Totalextract １．９７±０．１９
＃ ４．４９±０．１７＃
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract １．８８±０．１０
＃＃ ４．３６±０．３７＃＃
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract １．９８±０．２２
＃＃ ４．４２±０．４１＃＃
干花豆水洗组
Waterextract １．９６±０．０８
＃＃ ４．４２±０．２１＃＃
表５　干花豆对小鼠血液抗氧化能力的影响
Table５　Efectoffordiacauliflorahemslontheantioxidant
capacityinplasmaofmice(x－±s,n＝１２)
组别 Group
超氧化物歧化酶SOD
(U/mL)
丙二醛 MDA
(nmol/mL)
正常对照组
Solventcontrol ６３．１８±２２．９４ １１．２１±６．３５
模型组
Modelcontrol ４３．９０±２５．７８∗∗ １９．１８±６．８９∗∗
吡拉西坦片组
Piracetam ４２．７２±２７．３２ ５．７９±１．９０＃＃
干花豆粗提物组
Totalextract ８８．５４±９．２７＃＃ １０．２±２．４＃＃
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract ９８．１４±１２．６９＃＃ ４．５４±０．９４＃＃
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract １０６．３５±１０．３４＃＃ ６．７８±５．６８＃＃
干花豆水洗组
Waterextract １０７．７０±１８．０２＃＃ ５．５８±５．１３＃＃
２．６干花豆对小鼠大脑抗氧化能力的影响
从表６可以看出,连续给药４２d后,与正常对
照组比较,模型组TＧAOC、SOD、MDA没有显著性
影响;与模型组比较,干花豆各剂量组均能升高大脑
SOD、MDA活性,有统计学意义;干花豆粗提物组、
干花豆正丁醇组、干花豆水洗组均能提高大脑总抗
氧化能力,有同统计学意义;阳性组能降低 MDA含
量,有统计学意义.
３　讨论与结论
随着人类物质文明和生活水平的不断提高,人
的寿命普遍延长,但脑的学习记忆功能却逐渐衰退.
因此研究提高记忆力和抗衰老的药物有着重要的社
会意义.DＧ半乳糖诱导衰老模型最早是徐敝本(１９８５)
５２７５期　　　　　　　　　杨子明等:干花豆抗衰老有效部位的研究
表６　干花豆对小鼠脑抗氧化能力的影响
Table６　Effectoffordiacauliflorahemslonthe
antioxidantcapacityinbrainofmice(x－±s,n＝１２)
组别
Group
总抗氧化能力
(单位/g)
TＧAOC
超氧化物
歧化酶 (U/g)
SOD
丙二醛
MDA
(nmol/g)
正常对照组
Solventcontrol １２．３２±１．４９ ４３５．５±１２８．１ ０．８４９±０．１５１
模型组
Modelcontrol １３．２５±１．３１ ４８４．２±１９８．５ ０．７４８±０．１９１
吡拉西坦片组
Piracetam １２．９８±１．４２ ４９９．９±９９．７ ０．６８０±０．１１６
＃
干花豆粗提物组
Totalextract １５．２９±１．５５
＃＃ ５６５．２±１２４．２＃ ０．２８０±０．０８４＃＃
干花豆乙酸乙酯组
Ethylacetateextract １３．９８±０．６４ ５５５．５±１０７．７
＃ ０．４０１±０．２１７＃＃
干花豆正丁醇组
Butylalcoholextract １５．５８±１．８０
＃＃ ５６７．３±２０８．５＃ ０．２２６±０．１０３＃＃
干花豆水洗组
Waterextract １６．０８±２．１１
＃＃ ５９９．２±１４６．９＃＃０．３２０±０．２１７＃＃
提出使用DＧ半乳糖诱导啮齿动物衰老模型进行延
缓衰老药物研究.DＧ半乳糖特殊诱导动物衰老的机
制与氧化应激损伤(Bosch,２００６)、钙稳态失调、线粒
体老化(Wiesneretal．,２００４)、非酶糖基化反应、端
粒短缩及端粒酶的活性下降 (Serranoaetal．,
２００４),以及免疫功能减退(Chidgeyetal．,２００６)有
关.自由基理论在老年痴呆症中占有非常重要地
位,实验研究已证实自由基具有致衰老的作用,DＧ半
乳糖导致衰老模型也得到了自由基学说的验证(陈
嘉等,２０１３).大脑组织中含有高浓度的不饱和脂肪
酸,它们的氧化代谢十分旺盛,是自由基最容易攻击
的靶器官,也是最容易发生病变及衰老的组织
(Sheydinaetal．,２０１１).使用DＧ半乳糖导致的亚
急性衰老小鼠模型非常接近自然衰老小鼠,当连续
注射一定剂量的DＧ半乳糖后,小鼠会出现行动迟
缓、学习记忆能力下降等一系列衰老行为,同时使小
鼠抗氧化能力降低(Kumaretal．,２０１０).衰老小
鼠的血脂也有一定的升高,因此降血脂作用也可以
作为抗衰老的指标之一.
避暗实验测量小鼠学习记忆能力是生理学、药
理学及病理生理学实验中的一种经典方法.我们的
实验研究发现只有干花豆粗提物组、干花豆正丁醇
组能够提高DＧ半乳糖诱导的老年痴呆小鼠学习记
忆能力,但各组都能够提高抗氧化能力,降低血脂水
平,这说明干花豆具有抗衰老作用,其有效部位可能
在正丁醇部位.我们的研究还发现DＧ半乳糖并不
引起昆明小鼠大脑抗氧化能力的减弱,这与许扬等
(２００９)研究不同,其原因有待进一步研究.
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