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Chemical constituents and biological activity of volatile oil from the tubers of Polygonatum filipes

长梗黄精挥发油的化学成分及其生物活性



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 29(3):417— 419 2009年 5月
长梗黄精挥发油的化学成分及其生物活性
叶红翠1一,张小平 ,高贵宾 ,蒋继宏2
(1.安徽师范大学 生命科学学院 生物环境与生态安全安徽省高校重点实验室,安徽 芜湖 241000;
2.徐州师范大学 江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏 徐州 221116)
摘 要:利用气相色谱一质谱联用仪对长梗黄精水溶性挥发物成分进行分析,共分离出3o个组分,经检索鉴
定出17个化合物,占总挥发油的85.297 ,其主要成分为:1,2-邻苯二甲酸二异辛酯(41.047 );并采用杯碟
法和Alamar blue法检测该挥发油的抑菌和抗肿瘤生物活性,测得其对金黄色葡萄球菌、红酵母有较强的抑制
能力;对人非小细胞肺癌(NCI—H460)并无明显的抑制作用。
关键词 :长梗黄精 ;挥发油;GC—MS;生物活性
中图分类号:Q946.8 文献标识码:A 文章编号:1000—3142(2009)03—0417-03
Chemical constituents and biological activity of
volatile oil from the tubers of Polygonatum filipes
YE Hong-Cui 一,ZHANG Xiao-PingH ,GAO Gui-Bin ,JIANG Ji-Hong
(1.Anhui Provincial Key Laboratory of Biotic Environment and Ecological Security,Colege of Life Sciences,
Anhui Normal University,Wuhu 241000,China;2.Key Laboratory of Biotechnology for Medical
Plant of Jiangsu Province,Xu~ou Normal University.Xuzhou 221116,China)
Abstract:The constituents of volatile oil from the tubers of Polygonaturn filipeswere analyzed by GC-MS.About 30
components were separated and 17 compounds were identified,showing that 85.297 of the total contents and its
main chemical constituent was 1,2-Benzenedicarboxylic acid,disoocty[ester l biological activity of the volatile oil was
screened with microbiological method and Alamar Blue method.The results showed that S.aureus and R.glutinis
were sensitive to the volatile oil which couldn’t obviously inhibit the growth of cultured tumor cels.
Key words:Polygonatum filipes;volatile oil;GC-MS;biological activity
铃兰科(Convalariaceae)黄精属(Polygona—
turn)植物分布于北温带和北亚热带,全世界有6O余
种,我国约 31种(中国科学院中国植物志编辑委员
会,2006),主产于西南地区,其融药用、食用、观赏为
一 体,是一类具有很高经济价值的植物(傅沛云,
1998)。近代研究表明,黄精根状茎含有黄精多糖、
甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、强心苷、木脂素、
维生素、粘液质、淀粉等多种化学成分,其药理作用
包括:①抗菌作用,其煎剂对结核菌有显著的抑制效
果,且能改善肌体健康状态,对伤寒杆菌、金葡萄菌
等也有抑制作用;②抗真菌作用,可抑制癣菌生长;
③降压作用,适用于高血压合并冠心心肌缺血症患
者(《全国中草药汇编》编写组,1975);④调节免疫功
能、延缓衰老作用;⑤抗肿瘤作用等。长期以来对黄
精属植物的化学成分及其作用研究较多,但对于其
所含的挥发油成分及其生物活性却未见报道。虽然
在《中华人民共和国药典 2000》一书中规定:以百合
科(现归为铃兰科)植物黄精、多花黄精、滇黄精的干
收稿日期:2008—04—02 修回日期:2008—11—24
基金项目:高等学校博士学科点专项科研基金(20060370001);安徽省自然科学基金(050430501)[Supported by Special Scientific Research Foundation
for Doctor Subject of High Schools(20060370001);Natural Science Foundation of Anhui Pro~nce(050430501)]
作者简介:叶红翠(1 977一),女,安徽合肥人 ,硕士研究生,主要从事药用植物学研究。
。通讯作者(Author for corespondence,E—mail:pinghengxu@sina.corn)
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燥根茎人药,但是在民间由于长梗黄精的分布广、量
多,且与多花黄精的块状茎外形相似,所以常和多花
黄精混在一起使用,因此本文选择黄精属植物中的
1种(长梗黄精 P.filipes)来研究,以期为长梗黄精
块茎的开发利用提供科学依据。
1 材料和方法
1.1仪器与材料
仪器:6890型气相色谱仪及 5973N质谱仪(美
国安捷伦公司Agilent)。
材料:供试菌株金黄色葡萄球菌(S.auleus)、大
肠杆菌(E.coli)和红酵母(R.glutinis)由江苏省药
用植物生物技术重点实验室提供。肿瘤细胞株
NCI—H460(人肺癌)购于美国 ATCC公 司。
所用块茎采自安徽天堂寨,由安徽师范大学植
物研究室张小平教授鉴定为铃兰科黄精属的长梗黄
精(P.filipes)。所采集材料为野生种。 喾
1.2挥发油成分的提取
取新鲜块茎 155 g,用刀切碎后置于挥发油提取
器中,立即进行水蒸气常压蒸馏 8 h。馏出物移至
分液漏 斗中,用无水 乙醚萃取,乙醚层 经无水
Na:SO 干燥,过滤,常压浓缩得到具淡淡香味的淡
黄绿色油状物0.9 g(收率为0.58 )。
1.3化学成分分析方法
色谱条件 :HP一5MS弹性石英毛细管柱 (30 m
×0.25 mm×0.25 m),载气为高纯氦气,柱流量
6O mL/min,气化室温度:280℃,毛细管柱程序升
温从7O℃开始,保持2 min,以10℃/min的速度升
到255℃并保持 25 rain,再以 1O℃/min的速度升
到270℃并保持 5 min。
质谱条件:EI离子源(电子轰击源),电离电压
为70 eV,离子源温度为 230℃,相对分子质量扫描
范围30~550AMU,进样量 1.0 L,分流比50:1,
扫描周期 1 S。
定性分析:取样品0.1 L,用气相色谱一质谱计
算机联用仪进行分析鉴定。通过化学工作站数据处
理系统,检索 NIS98图谱库,与 EPA/NIH质谱图
集的标准谱图进行对照,再结合有关文献进行人工
谱图解析,按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对,查
看有关质谱资料对基峰、质荷比等(从蒲珠,1987;
Masada,1976;赵树年,1999;Adams,1989)方面进行直
观比较确认出长梗黄精块茎挥发油的化学成分。
定量分析 :通过 G1701BA化学工作站数据处
理系统,按面积归一化法进行定量分析,求得各化学
成分在挥发性组分中的相对百分含量。
1.4生物测定方法
1.4.1抗 茵活性测定 采用杯碟法(刘冬梅等,
2006),检测挥发油对黄色葡萄球菌、大肠杆菌、红酵
母的抑制作用,每组 3个重复 ,DMSO为对照组。
1.4.2抗肿瘤活性测定 抗肿瘤活性测定采用
Alamarblue方法(Pag6等,1993)。细胞存活率计算
公式:细胞存活率=(空白对照荧光值一样品孔荧光
值)/(空白对照荧光值 一无细胞空 白荧光值)×
100 。
。0l
7 O0 9 o0 11 O0 13 O0 15.O0 1 7.O0 19 O0
t /m ;n
图 1 长梗黄精块茎挥发油总离子流色谱图
Fig.1 TIC of volatile oil in tubers of P.filipes
2 结果和分析
2.1长梗黄精挥发油的化学成分
长梗黄精块茎挥发油的总离子流图示见图 1。
由表 1可知,所检测出挥发油的 17种成分,占水提
物总量的85.297 。其中主要成分为酯类化合物,
分别为戊二酸二丁酯(5.355 )、邻苯二甲酸二丁酯
(6.220 )、l,2一邻苯二甲酸二异辛酯(41.047 ),
占挥发油总量的 54.875 9/5,含量最高,其中仅 2种
含苯环的酯类邻苯二甲酸二丁酯和 1,2一邻苯二甲
酸二异辛酯就占总量的 52.622 。烷烃有 9种,含
量次之,占总量 22.522 ,以饱和烷烃为主。萜类
化合物 4种,占总量的 8.299 ,其中 3种为倍半
萜,占6.146 。
2.2长梗黄精挥发油抗菌及抗肿瘤生物活性
对长梗黄精块茎的挥发油(浓度为 i0/~g/mL)
进行金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、红酵母抑菌实验,
抑菌数据如表 2。
表2抑菌实验结果表明,长梗黄精块茎挥发油
3期 叶红翠等:长梗黄精挥发油的化学成分及其生物活性 419
表 2 长梗黄精块茎挥发油抑菌活性
Table 2 Antibacterial activities of volatile oil
from the tubers of P.filipes
抑菌圈直径(ram)
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 红酵母
S.aureus E.coli R.glutinis
在浓度为 10/~g/mL的时候,对大肠杆菌无抑制效
果,但对金黄色葡萄球菌和单细胞真核生物红酵母
均有一定的抑制作用。因此,初步推测该植物挥发
油具有抗革兰氏阳性和真核微生物的抗菌谱。很显
然,长梗黄精块茎挥发油对金黄色葡萄球菌和单细
胞真核生物红酵母的生物活性是与其化学成分相关
的,进一步的研究将分离挥发油中的有效成分,全面
评价各个成分的生物活性及各成分之间的相互作用
效应。
但在体外抗肿瘤实验中,当长梗黄精块茎挥发
油浓度 为 100 pg/mL时,其 肿瘤 抑制 率仅 为
32.21 (相对偏差为 1.57%),因而其对人非小 细
胞肺癌并无明显的抑制作用。
参考文献:
从蒲珠.1987.质谱学在天然有机化学中的应用EM].北京:科
学出版社
傅沛云.1998.东北草本植物志(第 12卷)EM3.北京:科学出
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《全国中草药汇编》编写组.1975.全国中草药汇编(上册)EM3.
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赵树年.1999.帖类化合物大全[M3.昆明:云南科技出版社
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