全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 31(5)：699— 701 2011年 9月
DOI：10．3969／j．issn．1000—3142．2011．05．025
云南红豆杉 内生真菌 Talaromyces
sp．T1BF的化学成分研究
李良群 2，杨艳光3，曾 英 ，邹 澄2，赵沛基¨
(1．中国科学院 昆明植物研究所 植物化学和西部资源可持续利用国家重点实验室，昆明 650204；2．昆明医学院
药学院 暨云南省天然药物药理重点实验室，昆明 650500；3．贵阳医学院 ，贵阳 550004)
摘 要：采用色谱技术从云南红豆杉 内生真菌 Talaromyces sp．TIBF的 PDA平板发酵物中分离得到 4个化
合物 。经波谱数据分析及与文献对照 ，分别鉴定为 5a，6a一环氧一24(R)一甲基胆甾一7，22一二烯一3p一醇(1)、醌茜素
(2)、苔色酸(3)和间甲基苯酚(4)。化合物 1为首次从该属真菌中分离获得 。
关键词：云南红豆杉；内生真菌 ；平板发酵
中图分类号：Q936 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—3142(2011)05—0699—03
Chemical constituents of endophyte Talaromyces
sp．TI BF from Taxus yunnanensis
LI Liang-Qun ，YANG Yan-Guang。，ZENG Ying ，
ZOU Cheng2．ZHA0 Pei-JiI
(1．State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resourses in West China，Kunming Institute of Botany，Chinese
Academy of Sciences，Kunming 650204，China；2．School of Pharmaceutical Sciences，Kunming Medical
University，Kunming 650500，China；3．C-uiyang Medical University，Guiyang 550004，China)
Abstract：Four compounds were isolated from PDA plate cultures of Talaromyces sp．TIBF。an endophyte from Tax—
US yunnanensis by chromatography techniques．They were identified as 5a，6mepoxy-24(R)一methylcholesta-7，22一
dien-3~ol(1)，skyrin(2)，orsellinic acid(3)and m-cresol(4)on the basis of spectroscopic data analyses and comparison
with literature values．Compound 1 was obtained from the genus of Talaromyces for the first time．
Key words：Taxus yunnanensis；endophyte；solid cultures ．
云南红豆杉(Ta．TCUS yunnanensis)又名紫杉 、赤
柏松 ，属红豆杉科乔木，产于云南西北部及西部、四
川西南部与西藏东部，生长于海拔 2 000～3 500 m
高山地带，在不丹、缅甸北部也有分布(中国科学院
中国植物会编辑委员会 ，2004)，由于其具有独特抗
肿瘤活性化合物紫杉醇，一直处于研究的热点(李丽
琴等，2008；余龙江等，2002)。
近年来，传统药用植物以及特殊生境中植物的
内生真菌研究是一个新兴的研究热点(Tan& Zou，
2001)。内生真菌长期与药用植物共同相互共生，有
可能产生与宿主相 同或相似 生理活性 的化学成 分
(Gunatilaka，2006)。云南红豆杉是 含有抗癌药 物
紫杉醇的频临灭绝的珍稀药用植物 。在进一步寻找
新型的天然产物及活性物质的过程 中，我们从具 较
好活性的植物中分离纯化 内生微生物 ，并分离鉴定
这些内生微生物的化学成分(袁琳等，2009；Zhao
收稿 日期 ：2010—12 24 修回日期：2011 04—29
基金项目：云南省应用基础研究计划面上项 目(2007C096M)；云南省后备人才培养项 目(2009C1071)[Supported by the Natural Science Foundation of
Yunnan Province(2007C096M)；Grants from the Young Academic and Technical Leader Raising Foundation of Yunnan Province(2OO9cIO71)]
作者简介 ：李良群(1985一)，男，江西余干人，硕士研究生，药物化学专业 ，(E—mail)Liliangqun@mail．kib．ac．cn。
通讯作者(Author for corresp0ndence，E-mail：zhaopeiji@mail．kib．ac．on)
700 广 西 植 物 31卷
OH O OH
1 2
H。
0 OH
。H
OH
图 1 化合物 1～4的结构
Fig．1 Structures of compounds 1-4
等，2005)。本文首次报道云南红豆杉内生真菌 Ta—
laromyces sp．TIBF的化学成分。
1 仪器与材料
1．1仪器与试剂
DRX-500型 核 磁 共 振 仪 ；Finnigan LCQ-Ad-
vantage型质谱仪；薄层层析用硅胶 G板和柱层析
硅胶 200-300目(青岛海洋化工厂)；Sephadex LH一
2O葡聚糖凝胶 (Amersham 生科公司)。
1．2菌种来源和发酵
内生真菌 T1BF分离自云南红豆杉树皮的韧皮
部。云南红豆杉韧皮采自中国科学院昆明植物所的
植物园。经云南农业大学植保系刘云龙教授鉴定为
Talaromyces属，菌种保存于本实验组-78℃冰箱。
将 T1BF在 PDA(马铃薯 200 g，去皮煮沸 0．5
h取滤液；葡萄糖 20 g；琼脂粉 15 g；自来水 1 000
mL，pH 自然)平板上活化培养 3～5代后，用竹签
挑取小块带菌培养基接至新鲜 PDA 固体培养基
上，共发酵培养 1O L，28℃，黑暗条件下培养 14 d。
2 提取 与分离
将发酵物连同琼脂块划成小块 ，用混合提取溶
剂(乙酸 乙酯／甲醇／冰醋酸 8O：15：5，v／v／v)浸泡
提取三次得到浸膏。将粗浸膏水溶，用乙酸乙酯萃
取 ，乙酸乙酯萃取液减压浓缩后得到灰黄色浸膏 39
g。将此浸膏经 200～300目的硅胶柱层析 ，以石油
醚／丙酮(10：1～7：3)和氯仿／甲醇 (100：5～8：
2)梯度洗脱 ，得到 A(136 rag)，B(215 rag)，C(190
rag)三部分洗脱物。洗脱物 A通过硅胶柱色谱(石
3 4
油醚／丙酮 100：3，100：5，100：9)，再 经 Sephadex
LH一2O(丙酮洗脱)分离，得到化合物 4(3 rag)。洗
脱物 B(215 rag)，经 Sephadex LH一20(甲醇洗脱 )，
再经硅胶柱色谱 (石油醚／乙酸乙酯==8：1)洗脱 ，得
到化合物 2(22 mg)。洗脱物 c经反复硅胶柱层析
及 Sephadex LH一20分离 ，得到化合物 1(5 rag)和化
合物 3(2 rag)。
3 结构鉴定
化合物 1 纯 白色 晶体 ，分子式 C H O ，EI-
MS(7O eV) ／ (％)：412(M_。，80)，394(M—H2O，
50)，379(100)。 H—NMR (CD3oD，500 M Hz)：6
4．36(1H ，m ，H一3)，3．95(1H ，brs，H一6)，5．68(1H ，
brs，H一7)，1．00(3H ，S，H一18)，1．42(3H ，S，H-19)，
1．28(3H，d，J=：=6．5，H一21)，5．63(1H，m，H一22)，
5．54(1H，m，H一23)，1．30(3H，d，J一 6．8，H-26)，
1．22(3H，d，J一5．9，H一27)，1．43(3H，d，J一1．3，
H一28)；”C—NMR(CD3oD，125M HZ)： 32．6(t，C一
1)，3O．3(t，C一2)，67．6(d，C_3)，40．8(t，C-4)，76．3
(S，C一5)，73．5(d，C_6)，117．9(d，C一7)，143．5(S，C一
8)，43．5(d，C-9)，55．1(d，C-10)，22．3(t，C一11)，
33．1(t，C一12)，44．1(q，C一13)，55．1(d，C一14)，23．3
(t，C一15)，28．5(t，C_16)，56．4(d，C-17)，12．5(q，C一
18)，18．8(q，C一19)，4O．8(d，C一20)，21．4(q，C一21)，
135．5(d，C一22)，132．4(d，C一23)，43．2(d，C-24)，
33．1(d，C_25)，2O．2(q，C-26)，19．8(q，C一27)，17．8
(q，C-28)。上述数据与 Bok等(1999)的报道一致 ，
故鉴定该化合物为 5a，6a一环氧-24(R)-甲基胆 甾一7，
22一二烯一3B一醇(5a，6a—epoxy一24(R)一methylcholesta一
7，22一dien一3B—o1)。
5期 李良群等：云南红豆杉内生真菌 Talaromyces sp．T1BF的化学成分研究 701
化合物 2 红色 固体 ，分子式 C。H sO ESI—
MS m／z：537[M—H]． H-NMR(DMSO—d。，500
M Hz)： 6．71(s，1H ，H一3)，7．24(s，1H ，H一6)，2．28
(s，3H ，7-CH3)，6．71(s，1H，H一3)，7．09(s，1H ，H一
8)；”C—NMR(DM SO—d6，125 M Hz)：占123．6(s，C一
1)，164．4(s，C一2)，107．2(d，C一3)，164．4(s，C一4)，
109．0(s，C一4a)，161．1(s，C-5)，123．6(d，C一6)，
148．3(s，C一7)，21．5(s，7-CH3)，12O．5(d，C一8)，
133．2(s，C一8a)，182．1(s，C一9)，113．1(s，C一9a)，
189．7(s，C-10)，131．2(s，C一10a)。上述数据与夏雪
奎等(2009)的报道一致 ，故鉴定该化合物为醌茜素
(skyrin)。
化合物 3 白色固体，分子式 c。H。0 ，ESI—MS
m／z：167[-M-H]； H—NMR(CD3OD，500 MHz)：
6．18(1H，d，J一2．4 Hz，H一5)，6．13(1H，d，J一1．9
Hz，H一3)，2．65(3H ，s，6-CH3)；”C—NM R(CD。OD，
125 M Hz)：6 105．6(s，C一1)，163．7(s，C一2)，101．6
(d，C一3)，167．0(s，C一4)，112．2(d，C一5)，145．3(s，C一
6)，175．2(s，C一7)，24．4(q，6-CH3)。上述数据与王
立东等(2009)报道的台色酸的核磁数据一致，故鉴
定该化合物为台色酸(orselinic acid)。
化合 物 4 淡 黄色 油 状物 ，分 子 式 C H。O，
其 C¨—NMR数据与 Robert等 (1977)的报 道一致 ，
故鉴定为间甲基苯酚(m—creso1)。
4 讨论
自 Stierle等(1993)从短 叶红豆杉 (Taxomyces
andreanae)的韧皮部分离到 1株产抗癌药物紫杉醇
内生真菌以来，人们对红豆杉内生真菌的化学成分
进行了广泛的研究并取得了一 系列 的成果 ，国内也
有一些较好的有关这方面的综述(何颖等，2006；赵
凯 等，2008)。Bok 等 (1999)在 活 性 跟 踪 下 从
Cordyceps sinensis分离得到的 5a，6 c【一环氧一24(R)一
甲基胆甾一7，22一二烯一3G一醇具有较好的抗肿瘤活性 。
我们从红豆杉内生真菌中分离到与宿主植物不同的
类型的抗肿瘤成分 ，说 明内生真菌可以产生与宿主
不同的活性成分 。
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