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重瓣满天星植株再生及其复壮和移栽



全 文 :@ 一
广 西 植 物 Guihaia 2O(2):1 6l一 1 63
文 章编 号 :1000—3142(2000)02—01 6I一03
重瓣满天星植株再生及其复壮和移栽
陈光仪,倪静静 黄学林
_ _ _ - 。 一
- 。 。 。 。 ‘ 一
(中山大学 生 命科 学学 院 ,广束 广 州 5l02791
saa/.#e
摘 要 :重瓣满天星 (Gypsophila pa,m*data)花营在附加有不同激素的 MS培养基上 (E 一j mg【
6一BA,0~ 1 mg/L NAA,O~1 mg儿 2,4一D)均可 长 出再 生植 株 ,其 中 以 Ms+6-BA 】mg 【 枯 果
最佳 。 试管 苗 复壮 以 oM + 6-BA 1 mg/L + 2.4-D 1 mg/L效 果 最 好 。经复 壮 的 试管 苗较 粗 壮 .
但直接移植仍不能成活.必须在加盖旋松的培养瓶中进行溶液培养 2周后 ,小苗根系进一步发育
扩展 ,然后逐步揭盖 ,锻炼幼苗抗干能力 ,移栽成活率可达 80 。
关蕾词: ;垫壁墨圭;弛 毪盏、带 军 f女着{
中围分类号 :Q949.745 703 1 文献标识码 .AI‘
Pl ant regeneration,rejuvenation and trans—
pl antation of Gypsophila paniculata
CHEN Guang—yi,NI Jing—jing,HUANG Xue li“
(工 Sc~ e College,Ztumgshan U~dversuy.Guangzhou 5 0275.China 】
Abstract:Gypsophila coutd be regenerated from f Loret buds cultured OD M S basi s medium with differ
ent phytohormone compositions(0~ 3 mg/L 6-BA
0f 6-BA 1 mg/L on the regeneration Wag.the best.
0~ 1 mg/L NAA .0~ I mg/I 2-4 D) The effec
OM basal m edium whh BA 1 g L and =. I-D
mg/L was optimum medium f0r rejuvenation of seedlings,hut the seedings could not survive without
hardening. The hardening process included that the seed[ings e further cutu red in Ih/tud medium
Hoagland and that cu[tura]containers were covered loosely Survival rate is about80。 .
Key words:Gypsophila;plant regeneration:rejuvenation:transp[antation
满天星花卉作为配搭以玫瑰、康乃馨等为主的背景花卉 ,市场潜力大。通过快速繁殖 以
生产大量试管苗,满足市场需求 国内已有数篇报道。 ,所用外植体是茎尖或带芽的茎节 ,
对试管苗移栽成活的研究很少 。本文用花蕾作外植体,材料易得且数量多 ,并在移栽实验叶]引
进溶液培养而使移栽成括率大为提高
1 材料和 方法
1.1材 料
材料为在广州市花卉市场购买的切花 ,经鉴定为重瓣满天星,取其带梗的花蕾作外植体,
收稿 日期 :l999一O2—02
作者简卉:陈光仪 (1937一).女,剐教授,植物生理专业
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62 广 西 植 物 20卷
l,2培养基
基本培养基为 MS: ,但复壮试验采用 OM。OM 是在 MS的基础上进行了改良的一种培
养基 .增加了Ca+,K ,NO3的浓度 。按不同处理方案添加不同类型及浓度的激素 ,No·1
N KOH和0.1 N HCI调节 pH值为5.8.然后在高压灭菌锅中高温灭菌15 rain
1.3培养方 法
取带1.j cm长花梗的未开放的花蕾作外植体 用自来水将材料漂洗净后 .放jko.1 升汞
溶液消毒12 rain,用无菌水冲洗4~5次。在超净工作台上将外植体接种于培养基上 。待外植体
脱分化长出愈伤组织及不定芽苗后 ,将不定苗移到生根培养基上,以培育出试管苗
培养条件 :温度 25~l。C,每 日光照】1 h,接种后最初3 d光照度500 Ix,后为1 500 Ix
2 结果 与分析
2.1愈伤组 织的诱 导
接 种 2 d后 ,外植 体
颜 色转 绿 .4 d后 花梗 开
始膨大 ,弯曲 ,切 口处有
透明疏松 的愈伤组 织 ,花
蕾逐渐开放,膨大,在花
蕾基部 ,花托背部长出愈
伤组织,出愈率最高可达
100 (表1)。表1表明:外
表1 不同激睾组台对愈伤缎织和不定芽分化的骷响
Tabte I Effect of phytohormone composition on the calus
induction and bud differentlatio
币定芽散是指接种后30 d 每十托蕾外植体所分化不定芽的平均数
每十激素组台接种外植律蛐十 ,
植 体被 接种在各 种培养 基上 ,7~ 8 d后 即能发 生愈伤组 织 。当单独采用 6一BA 1.0 mg/I 时 ,愈
伤组织提前3 d发生。
2.2不定芽的诱导与增殖
满天垦再生出芽较快 ,在愈伤组织发生7 d后,各个培养基上均有不定芽长 出 (图舨 I:
1),但数量 和粗壮程 度都不相 同 (表1)。采用6 BA 1.0 mg/L时 ,不定 芽发生提前 7 d.30 d后
可分化出13个不定芽,芽高2.5~5 cm。当6 BA浓度提高至2.0~3.0 mg/L时 ,芽分化数减少
显然,此时芽分化受到抑制。NAA 0.5 mg/I 不利于芽的分化 6 BA 0.5 mg/I 因浓度过低,也
不利于芽的形成。结果表明,选择 Ms+6-BA 1.0 mg/L作为增殖培养基。选择带芽的愈伤组
织或小苗切段 (3~4 cm)接种在增殖培养基上。15 d后即可繁殖出数量较 多的新芽 (1j~2o
个)。
2.3影响试管苗移栽成活率的因素
移栽成活率是试管苗能否应用于生产的关键。其影响因索主要有3点:(1)试管苗复壮 :
(2)生根 ;(3)炼苗。
2.3.1试管苗复壮 采用 OM 培养基进行复壮实验,效果较好,苗变得矮壮 ,茎粗 ,叶浓绿
(图版 I:2)。OM 是在 MS基 础上进 行改 良的一种 培养基,补加 了500 mg/I,Ca(NO j。,
KH PO 的含量增加至310 mg/I ,不加肌醇。Er培养基。 补加6Oo mg/I Ca 也能达到 OM 培
养基效果 。采用 OM_-6-BA 1 mg/I +2,4 D 1 mg/I,,使苗变得更粗壮,利于其移栽成活。
2.3,2生根 实验表明 :OM + NAA 0.2 mg/I +IBA 0.1 mg/L对生根诱导效果明显(表2),
诱导率高,根粗苗壮 。MS培养基的生根诱导教果不如 OM,根较细。苗在不同激素配比的培养
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2期 陈光仪等:重瓣满天星植株再生及其复壮和移裁 f63
基上均 能生根 (图版 I:3)。高浓度 生长素对 苗的生 长不利 ,苗纤 细 ,移栽 后不易成 活 。为避 免
在将试管苗从生根培养基上取出时对根系造成损伤,在进行生根培养接种时,将单株无根苗
横放或斜靠在培养基上 ,注意使切口 (形态学下端)朝上,不沾到培养基 。1周后 ,生根率为
98 ,试管苗基部无愈伤组织 ,所生根为放射状 ,租短 ,整齐,色洁白,有细小侧根
2.s.3炼苗 炼 苗过 程 分2个 步骤 :
(1)溶液培养 常规溶液培养是在大气 中进行 本文的溶液培养需在培养瓶中进行。将试
管苗放在小培养杯中,使根系浸没在1/2 Hoagland溶液 中 ,每个培养瓶中放3个小培养杯 ,加
盖旋松以利防风保湿 溶液培养过程中采取24 h光照 ,2周后 ,幼苗根系发展较充分 ,地上部分
较 矮 壮 (图 版 I:4),可进 ^下一 步试 验 。
(2)逐 步揭盖处 理及移 栽 去盖后 ,换
上较 细密 的 尼龙 刷 2周后 ,可将苗 转^泥碳
土 与珍珠 岩 (1:1)基 质 中 ,置 于 自然条件
下 生 长 (图版 I:5)。成活 率达8O 。
讨 论
MS是台 适的 愈伤组织诱 导培 养基 .但
不适用于增殖培养及生根培养。本文进行的
复壮试 验 ,提高 了培养 基 中 Ca,K 的 含量 ,
利于小 苗机 械组织 的发 育。2,4 D对苗 的复
表 2 不 同激素 组 台对 试 管 苗 生根 的影 响
Tahle 2 Effect of diHerent phytohormone eomp~
sition oD frequency of root inductiotz
and seed]ing growth
生 根培 养20 d后计 算 根诱 导率
壮也有效 。MS中铵态氮含量较高,不利 于苗长得粗壮 ,OM 培养基中较高浓度的 (’a-一和
NH 一配 台 ,有助于壮 苗 。 ’
溶 液培 养是炼苗 的关键 ,经溶液 培养后 ,苗的根 系充分发育 ,抗逆 能力增强 ,利于 移栽
成活。满天星试管苗耐光照,温度 ,湿度 ,激素配比及培养基成分都表现出很高的敏感度,因
此 ,在试 验 中要 严格控 制 。
阎绍辉,谈风筻参加 了部分实验1作。
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